银杏总黄酮对NAFLD大鼠生化指标及血清脂联素水平的影响

[目的]探讨银杏总黄酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠发病过程中生化指标及血清脂联素(Adipo)水平的影响。[方法]72只SPF级雄性大鼠随机分为3组:正常对照组、NAFLD模型组、银杏总黄酮治疗组。利用高脂饲料喂养法构建NAFLD大鼠模型。观察各组大鼠肝脏组织形态改变。全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清Adipo含量,RT-PCR和Western-blot法分别测定肝组织AdipoR_2mRNA及蛋白表达。[结果]随着时间延长,NAFLD模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC含量逐渐增高,血清Adipo含量逐渐减少,肝组织中AdipoR_2mRNA及蛋白表达水平逐渐下降;银杏总黄酮治疗组大鼠血清ALT、AST、TG、TC含量逐渐降低,血清Adipo含量、肝组织AdipoR_2mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,与NAFLD组比较均差异有统计学意义(P0.05)。[结论]银杏总黄酮对NAFLD大鼠肝脏有防治作用,降低血清ALT、AST、TG、TC含量,可能通过增加AdipoR_2表达所致。     

抵抗素对脂肪变性肝细胞核因子κ B和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的 探讨抵抗素(resistin)对脂肪变性肝细胞脂质代谢及核因子κB (NF-κ B)、肿瘤坏死因子(TNF)α表达的影响. 方法 选用软脂酸诱导L02细胞脂肪变性模拟非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外模型.分C组(正常对照组),P组(模型组:软脂酸20μg/ml)及分别加入重组人抵抗素50μg/L的CR组和PR组.各组给予相应处理72 h后,观察细胞的脂肪变并测定细胞培养上清液中甘油三酯(TG)、ALT、AST及γ谷氨酰转移酶(GGT)的浓度;采用半定量RT-PCR及Western blot法检测细胞胰岛素受体底物2(IRS-2)、NF-κB、TNFα的基因及蛋白表达水平.根据资料不同应用方差分析或t检验进行统计学分析,P＜ 0.05为差异具有统计学意义. 结果 P组、CR组及PR组细胞培养上清液中TG、ALT、AST、GGT的浓度明显高于C组.分别与C组比较,P组、CR组及PR组NF-κ B mRNA相对表达量0.54±0.04、0.60±0.04及1.00±0.06,与C组的0.10±0.01比较,t值分别为17.64,22.03,26.06;TNFαmRNA相对表达量0.58±0.04、0.61±0.06及1.05±0.09,与C组的0.33±0.06比较,t值分别为5.67,5.38,11.64,相对表达量明显升高,而IRS-2 mRNA (t值分别为8.19,9.23,20.93)明显降低,且P值均＜0.05,差异有统计学意义.P组与CR组间比较,t值分别为1.75,0.58,2.14,P值均＞0.05,差异无统计学意义.蛋白质表达变化趋势与mRNA变化趋势相一致.结论 抵抗素可能通过NF-κ B依赖途径对肝细胞脂肪变性胰岛素抵抗发挥促炎作用,从而促进NAFLD的发生与发展.     

丹酚酸B对非酒精性脂肪性肝病细胞模型氧化应激的影响

目的通过体外油酸(OA)诱导HepG2细胞建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型,给予丹酚酸B(Sal B)干预NAFLD细胞,探讨Sal B对NAFLD细胞氧化应激的影响及其机制。方法将Hep G2细胞分为对照组、模型组(OA)及治疗组(OA+丹酚酸B),CCK8法检测细胞标准生长曲线,筛选OA最佳的药物干预浓度及干预时间;油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况;检测ALT、AST、TG、TC含量;荧光显微镜检测细胞内活性氧(ROS)的含量; TBA法检测细胞内丙二醛(MDA)含量; RT-qPCR和Western Blot分别检测SOD2及SIRT3的mRNA及蛋白的表达。运用SIRT3过表达质粒上调SIRT3后给予Sal B干预,通过Western Blot筛选转染试剂和质粒的最合适转染比例,并检测SIRT3与SOD2的相对表达量变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t法。结果 1 mmol/L 24 h为OA最佳造模浓度及时间。细胞培养上清液中ALT、AST模型组较对照组升高,干预组较模型组降低,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为1240. 075、471. 989,P值均0. 05)。细胞内TG、TC模型组较对照组升高,干预组较模型组降低,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为97. 530、39. 824,P值均0. 01)。模型组MDA较对照组升高,干预组较模型组明显降低,3组间比较差异有统计学意义(F=336. 67,P 0. 01)。3组间细胞SIRT3 mRNA及SOD2mRNA表达量比较差异均有统计学意义(F值分别为119. 35、32. 005,P值均0. 01),模型组较正常对照组显著降低,干预组较模型组明显升高(P值均0. 05)。3组细胞SIRT3及SOD2蛋白表达量比较差异均有统计学意义(F值分别67. 093、70. 314,P值均0. 01),模型组较对照组降低,治疗组较模型组升高(P值均0. 01)。Western Blot检测转染和(或)加药后SIRT3、SOD2蛋白的表达,4组细胞SIRT3、SOD2蛋白表达量不同,差异均有统计学意义(F值分别为287. 2、179. 8,P值均0.01),空白质粒+Sal B组以及质粒组较空白质粒组升高,质粒+Sal B组较质粒组升高(P值均0.05)。结论 Sal B可减轻NAFLD细胞脂质蓄积状态和氧化应激反应,对NAFLD细胞发挥保护作用。     

AcSDKP对非酒精性脂肪性肝病细胞模型炎症、凋亡的影响及机制

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline, AcSDKP)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)细胞模型炎症反应、凋亡的影响及机制。方法 选取LO2肝细胞(对照组),以0.5 mmol/L的游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)处理并建立NAFLD细胞模型(模型组),并采用不同浓度AcSDKP处理细胞，分为低剂量组、中剂量组及高剂量组。油红O染色实验检测细胞内脂肪沉积，ELISA检测ALT、AST、TG、TC、MAD、TNF-α及IL-6水平，TUNEL染色、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡，Western blotting检测细胞Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、AMPK、SREBP-1c、FAS的表达水平。结果 与对照组比较，模型组细胞内脂滴沉积增加，ALT、AST、TG、TC及MDA表达水平增加；细胞上清液TNF-α含量升高，IL-10含量降低；细胞凋亡率升高，cleav...     

烟酸对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型脂质代谢的影响

目的研究烟酸对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型脂质代谢的影响。方法 40只SD大鼠随机分成对照组、模型组、干预1组(0.5%烟酸)、干预2组(1%烟酸),采用高脂饮食饲养大鼠8周诱导NAFLD模型,采用试剂盒对各组大鼠血清ALT、AST,血清及肝脏组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、肝组织脂质过氧化产物(MDA)进行测定,显微镜下观察肝组织病理学形态改变。各组间比较使用单因素方差分析,方差齐时用LSD-t检验进行两两比较,方差不齐时用Tamhane’T2检验。结果各干预组与模型组相比,血清ALT、AST、TC、TG、FFA显著降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05);干预2组与模型组相比,肝组织TG、TC、FFA、MDA含量差异均有统计学意义(P值均<0.05);干预1组与模型组比较,PPARαmRNA表达显著增加,差异有统计学意义(P=0.026),DGAT2 mRNA、SREBP1c mRNA表达显著降低,差异有统计意义(P值分别为0.019、0.008),干预2组与干预1组比较,DGAT2 mRNA、SREBP1c mRNA表达降低,差异有统计学意义(P值均<0.05)。与模型组相比,干预组肝细胞脂肪变性程度缓解,中央区炎症细胞浸润程度减轻。结论烟酸调节非酒精性脂肪肝病动物模型的脂肪代谢,减轻脂质氧化应激反应,通过调节PPARα、DGAT2、SREBP1c mRNA的表达,明显改善肝细胞脂肪变性及纤维化,从而对NAFLD有保护作用。     

高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠血清脂肪甘油三酯脂酶的活性变化

目的探讨在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展的过程中脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)mRNA的表达及血清ATGL酶活性、TNF-α水平的变化。方法 28只雄性SD大鼠随机分为对照组13只和NAFLD模型组15只。模型组饲以高脂饲料,对照组给予普通维持饲料。于喂养16周末处死所有动物,提取肝组织,计算肝指数,RT-PCR法半定量测定肝脏ATGL mRNA表达,观察肝脏病理变化;检测大鼠血清TG、TC、空腹血糖(FBG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、ATGL、TNF-α等指标。结果模型组大鼠血清TG、TC、FBG、ALT、AST、TNF-α等较对照组显著升高(P均<0.05),肝脏ATGL mRNA表达和血清ATGL酶水平显著降低(P均<0.01),且肝脏出现严重的脂肪变性伴大量炎性细胞浸润。血清ATGL与TNF-α呈高度负相关(r=-0.983,P<0.01)。结论 ATGL可能在NAFLD的发生发展中发挥重要作用,并与TNF-α密切相关。     

PPARα激活对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病的保护作用

目的探讨PPARα激动剂WY14643对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的保护作用及其机制。方法 4周龄SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为3组:Ⅰ组:标准饲料喂养;Ⅱ组:高脂饲料喂养;Ⅲ组:高脂饲料喂养,同时腹腔内注射WY14643 1 mg·kg-1·d-1。于实验第4周处死大鼠,观察肝组织病理学变化,检测血清生化指标,并采用RT-PCR及Western blotting检测PPARα、Bsep mRNA和蛋白的表达。结果Ⅱ组大鼠血清TBA、TG、TC、AST、ALT较Ⅰ组升高(P0.01),PPARα、Bsep mRNA和蛋白表达较Ⅰ组降低(P0.05);Ⅲ组大鼠血清TBA、TG、TC、AST、ALT较Ⅱ组降低(P0.05),PPARα、Bsep mRNA和蛋白表达较Ⅱ组明显升高(P0.01)。结论 PPARα激动剂WY14643可通过增高Bsep基因表达调节胆汁酸及脂质代谢而保护高脂饮食诱导的大鼠NAFLD。     

NAFLD发病中基因FXR对PPAR-α影响的实验研究

目的观察法尼基衍生物X受体(FXR)在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发病过程中对过氧化物酶体增殖物活化受体-α(PPAR-α)表达的影响。方法将正常小鼠与FXR基因敲除小鼠分成4组,分别喂高脂饲料及普通饲料,检测各组小鼠血清ALT、TC、TG,观察肝脏脂肪变性情况,检测肝脏PPAR-αmRNA及蛋白表达情况。结果模型组血清指标均较实验组显著升高(P0.05),肝脏HE染色见肝脏内有大量脂肪滴,部分可见炎症细胞聚集,PPAR-αmRNA及蛋白表达水平均明显升高(P0.05)。结论 FXR基因功能缺陷可能通过上调PPAR-α的表达并改变其在脂质代谢中的功能而引起NAFLD的发生。     

辛伐他汀抑制肝星状细胞活化及其对腺苷酸活化蛋白激酶活性的影响

目的 研究辛伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝纤维化的作用机制.方法 高脂饲料喂养大鼠复制非酒精性脂肪性肝纤维化模型,辛伐他汀灌胃治疗后,病理学染色观察肝组织病理改变,RT-PCR和Western blot法测定肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α的mRNA和蛋白质表达水平,同时测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、ALT、AST和血清肿瘤坏死因子(TNF)α水平.体外用促进脂肪细胞分化的培养液诱导人肝星状细胞株LX-2获得静止表型,分别用转化生长因子β1(TGFβ1)、辛伐他汀、TGFβ1+辛伐他汀处理静止型LX-2细胞,RT-PCR和Western blot法检测AMPKα的mRNA及蛋白质表达变化.多组间数据比较用单因素方差分析或析因设计方差分析,两组间数据比较用q检验. 结果 高脂饮食24周成功复制大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型.随造模时间的延长,肝组织炎症、脂肪变和纤维化程度加重,血清TC、TG、ALT、AST和TNFα水平逐渐升高(P值均＜0.01),肝组织AMPKα的mRNA相对表达量及活性逐渐降低(P＜0.01或P＜0.05).与模型对照组相比,辛伐他汀治疗组TC、TG、ALT、AST和TNF α[水平明显下降(P值均＜0.05),AMPKα mRNA(0.31±0.05比0.24±0.07)和AMPK α[活性(0.45±0.07比0.27±0.07)明显升高(q值分别为3.22和6.44,P＜0.01或P＜0.05);肝星状细胞的AMPKα活性明显增强(静止型为0.93±0.10比0.72±0.09,活化型为0.72±0.10比0.54±0.10,q值分别为7.00和6.00,P值均＜0.01),α-平滑肌动蛋白的mRNA和蛋白质表达明显减少(分别为0.30±0.02比0.36±0.02和0.30±0.03比0.38±0.02,q值分别为11.245和11.216,P值均＜0.01),I型胶原的mRNA和和蛋白质表达也明显减少(分别为0.30±0.03比0.37±0.03和0.25±0.03比0.33±0.03,q值分别为8.791和11.163,P值均＜0.01).结论 辛伐他汀可以通过提高AMPK活性,抑制肝星状细胞活化,延缓非酒精性脂肪性肝纤维化的发生和发展.     

MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠SREBP-1表达中的作用

目的 探讨MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)表达中的作用. 方法应用高脂饮食复制大鼠非酒精性脂肪性肝病NAFLD模型.32只雄性Wister大鼠随机分成正常对照组(N组)、PD98059 +普通饲料组( P组)、高脂模型组(M组)和PD98059 +高脂组(PM组),每组8只.于分组喂养的第4、6、8周末分别给予P组和PM组大鼠鼠尾静脉注射MEK抑制剂PD98059干预.第10周末结束实验,检测血清丙氨酸转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),肝组织TG、TC;光镜观察大鼠肝脏的病理改变,免疫组化法检测肝脏磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和SREBP-1表达. 结果与N 组比较, M组所有大鼠肝细胞脂肪变性范围均超过30%并伴有不同程度的炎性细胞浸润和坏死,p-ERK1/2和SREBP-1表达增强,ALT、AST、TC、TG、肝组织TG、TC显著升高(P＜0.01 或 0.05).与M组比较,PM组p-ERK1/2和SREBP-1表达减少(P＜0.01), ALT、TC 、TG、肝组织TG、TC显著降低(P＜0.01或0.05),同时大鼠的肝脏病理学得到了改善.结论 MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)表达中起重要作用.     

针灸联合自拟茶方调节肝AMPK、p38 MAPK、PPARγ信号改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的机制

目的探讨针灸联合自拟茶方改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的疗效及机制。方法以高脂饲料建立脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠,将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及治疗组,对照组及模型组不经药物干预,阳性对照组以吡格列酮进行治疗,治疗组以针灸联合自拟茶方进行治疗。检测肝脏组织匀浆三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。对各组大鼠肝脏病理、肝指数、肝酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)]、血脂水平[TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、血清炎症相关因子α肿瘤坏死因子[(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6]及肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)γ蛋白表达进行测定。结果模型组各指标与对照组相比有明显差异,表明造模成功。治疗组肝脏细胞脂肪变性程度明显优于模型组,肝指数明显低于模型组(P<0.05),血清ALT、ALP、TC、TG、LDL-C、IL-1、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),肝组织AMPK及PPARγ表达水平升高(P<0.05),p38MAPK表达水平降低(P<0.05)。治疗组在改善肝指数、降低血清TC、ALT、AST、IL-1、TNF-α水平及降低肝脏TC、TG水平、升高HDL-C、下调肝脏p38MAPK水平方面与阳性对照组无显著差异(P>0.05)。结论针灸联合自拟茶方可明显改善脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠的脂质代谢紊乱及胰岛素抵抗,该作用可能与上调肝脏AMPK及PPARγ表达水平、下调p38MAPK表达水平有关。     

过表达miR-140-5p对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠的作用及机制

目的探究过表达miR-140-5p对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的作用及机制。方法40只大鼠随机分为对照组、模型组、空载体组和过表达组,每组各10只。对照组给予普通饲料饲养,模型组给予高脂饲料饲养构建NAFLD大鼠模型,空载体组在模型组基础上于饲养第13周、第18周尾静脉注射含空载质粒的慢病毒,过表达组在模型组基础上于饲养第13周、第18周尾静脉注射含过表达miR-140-5p质粒的慢病毒。采用酶联免疫吸附法检测各组血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。采用蛋白质免疫印迹法检测各组肝脏组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)的表达水平。采用实时荧光定量PCR法检测miR-140-5p的相对表达量。结果与对照组比较,模型组miR-140-5p的相对表达量降低,而AST、ALT、TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、TLR4和NF-κB水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与模型组和空载体组比较,过表达组miR-140-5p的相对表达量升高,AST、ALT、TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、TLR4和NF-κB水平降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论过表达miR-140-5p可改善NAFLD大鼠的肝功能,纠正脂代谢紊乱,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路有关。     

检测视黄醇结合蛋白4在非酒精性脂肪性肝病中的意义

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)的临床意义。方法选择NAFLD肝患者62例,正常对照60例,采用ELISA方法测定空腹血清RBP4,同时检测其血糖、血脂、肝功能及胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果与正常对照组比较,NAFLD患者的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度酯蛋白(LDL-C)、血清胰岛素(FINS)、HOMA-IR、ALT、AST和RBP4显著增高(P<0.01),而且NAFLD患者治疗后血清RBP4水平显著降低。相关分析显示,血清RBP4与FBG、TC、TG、FINS、HOMA-IR呈正相关。结论在NAFLD的发病过程中,RBP4可能参与其发病,在其早期诊断和评判肝脏损害程度中有一定的临床意义。     

丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病大鼠LKB1/AMPK/ACC通路及肝脂肪变性的影响

目的:探讨丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏激酶B1(LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路及肝脂肪变性的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、水飞蓟宾组(26.25 mg·kg^-1)、丹栀逍遥散高、中、低剂量组(38.0、19.0、9.5 g·kg^-1),每组13只。采用高脂饲料连续喂养8周复制非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型。模型复制成功后水飞蓟宾组和丹栀逍遥散各剂量组大鼠开始灌胃给予相应的药物,连续给药4周,给药结束后进行取材和相关指标的检测。给药期间,观察各组大鼠的精神状况、毛色、饮食、活动等一般状态,记录给药前后大鼠体重变化;取大鼠肝、肾、脾脏并称重,计算脏器指数;生化法检测肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(NEFA)含量;苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠肝组织病理变化;Western blot检测肝组织中LKB1、AMPKα1、AMPKα2、ACC及其磷酸化水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠毛色发黄暗淡,精神萎靡;体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著升高(P<0.05),肝细胞排列紊乱,胞界不清晰,较多的脂肪空泡;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显降低,ACC蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,水飞蓟宾组和丹栀逍遥散高、中剂量组大鼠一般状态有不同程度的改善,体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著降低(P<0.05),病理损伤程度减轻;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显升高,ACC蛋白表达降低(P<0.05)。结论:丹栀逍遥散可能通过LKB1/AMPK/ACC信号通路,降低脂肪的合成,改善肝功能,减轻NAFLD模型大鼠肝脂肪变性。     

Betaine Protects Against High-Fat-Diet-Induced Liver Injury by Inhibition of High-Mobility Group Box 1 and Toll-Like Receptor 4 Expression in Rats

Background and Objectives

Previous studies have shown that betaine prevents alcohol-induced liver injury and improves liver function. The purpose of this study was to investigate the hepatoprotective effects of betaine on nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) and to observe changes of HMGB1/TLR4 signaling.

Methods

Thirty rats were randomly divided into control, model, and betaine groups. The rats in the model and betaine groups were fed a high-fat diet for 12 weeks to induce an animal model of NAFLD. The rats in the betaine group were then intragastrically administered betaine solution at a dose of 400 mg/kg per day for four weeks. Liver histology was examined. Serum levels of ALT, AST, TC, TG, HDL-C, LDL-C, FFA, HMGB1, NF-κB, TLR4, and tHcy were determined and intrahepatic TC, TG, and Hcy levels were assayed. mRNA expression and protein levels of HMGB1, NF-κB, and TLR4 in liver tissue were also determined.

Results

Compared with the control group, rats in the model group developed severe liver injury, accompanied by significant increases in serum levels of ALT, AST, TC, TG, LDL-C, FFA, HMGB1, NF-κB, and TLR4, intrahepatic TC, TG, and Hcy content, histological scores for steatosis, inflammation, and necrosis, and mRNA expression and protein levels of HMGB1, NF-κB, and TLR4, and a significant decrease in serum HDL-C (P < 0.05). Compared with the model group, all these indicators were significantly improved by administration of betaine (P < 0.05).

Conclusions

Betaine effectively protects against high-fat-diet-induced NAFLD and improves liver function; the mechanism is probably related to inhibition of HMGB1/TLR4 signaling pathways.     

对氧磷酶-1参与调控非酒精性脂肪肝脂质代谢与胰岛素抵抗作用及机制

目的探究对氧磷酶-1(Paraoxonase 1,PON1)与非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)脂质代谢与胰岛素抵抗关系及机制。方法选取129例NAFLD患者和130非NAFLD患者为研究对象,收集患者年龄、身高、体重、腰围,血压等信息,检测血脂、空腹血糖(Fast Glucose)、胰高血糖素(Glucagon)、胰岛素(Fast Insulin)、评估胰岛素抵抗的稳态指数(homeostatic index of insulin resistance,HOMA-IR)、肝肾功能、脂肪因子等,LO2细胞接种12孔板培养24 h后分别加入0~1.2 mmol OA溶液处理24 h或10 ng/mL TNF-α处理6 h,以PEI转染空载质粒和PON1质粒1μg 24 h。使用尼罗红染料测定细胞内脂质含量。ELISA法检测PON1活性,蛋白质印迹检测PON1、p-IRS1、T-IRS1、p-AKT T-AKT、FAS、HMGCR、SREBP2和SREBP1C蛋白表达。结果NAFLD患者腰围、BMI、外周血ALT、AST、FFA、TG、TC、LDL-C、VLDL-C、空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、抵抗素、瘦素、IL-6和TNF-α显著高于非NAFLD,PON1活性、含量、HDL-C、胰高血糖素和脂联素显著降低;血PON1活性和含量与FFAs、TG、TC、LDL-C、VLDL-C、空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、抵抗素、瘦素、IL-6和TNF-α显著负相关,与HDL-C、胰高血糖素和脂联素显著正相关;OA组LO2细胞PON1的活性逐渐降低,且0.2~1.2 mM OA组LO2细胞PON1的活性显著低于Control组,过表达PON1不影响PON1活性,0.2~1.2 mM OA组LO2细胞内脂质含量显著高于Control组,显著低于OA组;TNF-α组LO2细胞PON1、p-IRS1、p-AKT、FAS、HMGCR、SREBP2和SREBP1C蛋白表达量相比于Control组显著降低,转染PON1质粒显著增加PON1,同时p-IRS1、p-AKT、FAS、HMGCR、SREBP2和SREBP1C蛋白表达量显著增加。结论PON1活性与含量和NAFLD血脂代谢及胰岛素抵抗显著相关,且可能通过调控p-IRS1/AKT通路影响胰岛素抵抗,并调控脂质代谢。     

非酒精性脂肪肝患者血浆同型半胱氨酸水平测定及临床意义

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者空腹血清同型半胱氨酸(Hcy) 浓度变化的临床意义,同时探讨在NAFLD中Hcy浓度与叶酸及维生素B12浓度变化的相关性.方法 对352例健康体检人群行B超检查,其中NAFLD组159例,正常对照组193例,分别检测血浆Hcy、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移...     

普罗布考对大鼠非酒精性脂肪性肝病的预防及机制研究

目的 观察普罗布考对大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的预防作用．并探讨其可能作用机理。方法 24只雄性sD大鼠随机分3组：正常对照组、NAFLD对照组、普罗布考干预组。以高脂饲料饲养诱发脂肪肝大鼠模型。18周末，处死所有动物，检测血脂、肝功能、肝脂质含量、氧化还原指标、肝组织病理学等。结果与NAFLD对照组比较，普罗布考干预组TC（2．98±0．90）mmol／L vs（4．45±1．15）mmol／L，ALT（78．25±18．47）U／L vs（110．2±36．33）U／L及肝组织TG含量（2．61±0．20）mmol／L vs（2．93±0．36）mmol／L均显著下降（P均〈0．05），其肝脂肪变性及炎症程度亦显著减轻（P均〈0．05）。结论 普罗布考可对高脂饲料饲养诱发的大鼠NAFLD产生保护作用；其保护作用与提高机体抗氧化能力．减轻组织氧化应激损害有关。     

JNK信号通路在非酒精性脂肪肝病形成中的作用及其机制

目的 观察C-Jun氨基末端激酶(JNK)信号传导通路在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠中的表达,探讨其在NAFLD发病中的作用.方法 雄性SD大鼠64只,随机分为8周对照组、12周对照组、8周高脂组及12周高脂组各16只,对照组喂饲普通饲料,高脂组喂饲高脂饲料.正糖高胰岛素钳夹实验技术检测葡萄糖输注率(GIR),生物化学法检测空腹血糖(FBS)、ALT、AST、甘油三酯(TG)、总胆同醇(TC);放射免疫法检测空腹胰岛素(FIns)、肿瘤坏死因子α(TNFα);分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFAs);Western blot检测肝组织JNK1、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物1丝氨酸307磷酸化(p-IRS-1~(Ser307))、蛋白激酶B(PKB)、蛋白激酶B丝氨酸473磷酸化(p-PKB~(Ser473)).正态分布数据采用t检验,偏态分布数据采用秩和检验. 结果 8周高脂组与8周对照组、12周高脂组与12周对照组比较:体质量、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC,FIns、FFAs、TNF α,及肝匀浆TG、TC、FFAs、MDA,高脂组(8、12周)均明显高于对照组(8、12周),t值分别为5.90和7.92、9.91和7.42、5.49、4.99和5.31、7.37、2.30和5.86、2.64和3.85、3.86和6.61、10.53、7.07和8.45、T=89.5和T=100、5.20和6.18、11.90和17.83,P值均<0.05或相似文献