补肾清毒法对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型和功能的影响

目的:观察研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DC)表型及功能的变化,探讨补肾清毒法治疗CHB的作用机制。方法:筛选血清HBV DNA>105拷贝/mL且无其他肝脏疾病及自身免疫性疾病的CHB患者49例。其中补肾清毒法治疗组28例,核苷类似物治疗组21例,疗程均为24周。治疗前后均从患者外周血分离单个核细胞,体外诱导培养DC。用流式细胞仪检测DC表型HLA-DR、CD80、CD83、CD86的表达,MTT法检测DC的自体淋巴细胞反应,ELISA法测定IL-12、IL-10的水平。结果:CHB患者DC的扩增数量、速度低于正常人。CHB患者治疗后HLA-DR、CD80、CD83、CD86的表达均高于治疗前,补肾清毒法组HLA-DR、CD80、CD86表达率高于核苷类似物组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者经治疗后,DC自体混合淋巴反应中刺激能力较治疗前升高,但仍低于健康人水平,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB患者和正常人DC上清液中IL-10的量,各组间差异无统计学意义。混合淋巴细胞反应上清液中IL-l2的量两组经治疗后,较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾清毒法能改善DC的表型表达率和抗原递呈能力及其分泌功能,部分恢复CHB患者免疫功能。     

氨溴索对慢性阻塞性肺疾病患者CD4~+、CD8~+的影响

目的探讨氨溴索对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清CD4+、CD8+分子的影响。方法选取该院呼吸内科收治的COPD患者1 024例,采用双盲法将其分为三组,对照组381例,予常规药物治疗,复方异丙托溴铵溶液2.5 ml,溶于2.5 ml 0.9%氯化钠注射液中,雾化吸入,2次/d,10 d为1个疗程;实验组320例,注射用氨溴索30 mg,溶于5 ml 0.9%氯化钠注射液中,雾化吸入,2次/d;安慰剂组323例,予0.9%氯化钠注射液5 ml,2次/d,雾化吸入10 d。1个疗程结束后,观察三组患者治疗前后体内血清CD4+、CD8+含量以及两者比值及药物治疗的总有效率。结果治疗后,安慰剂组患者体内血清CD4+、CD8+含量及两者比值无统计学意义(P>0.05);治疗后,实验组与对照组血清CD4+含量显著升高、CD8+含量显著降低、两者比值显著升高,且实验组显著优于对照组(P<0.05)。治疗后,实验组和对照组总有效率显著高于安慰剂组,且实验组显著高于对照组(P<0.05)。结论氨溴索可有效改善COPD患者血清CD4+、CD8+含量以及两者比值,对COPD患者有较好的治疗效果,值得临床广泛推广。     

健脾补肾法对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的增效作用及其与Th1/Th2的相关性

[目的]观察健脾补肾法对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)的增效作用及其与辅助性T细胞Th1/Th2的相关性.[方法]120例CHB E-抗原阳性患者,随机分为2组,观察组采用健脾补肾中药联合拉米夫定治疗,对照组仅用拉米夫定治疗,定期观察肝功能、乙肝三系、乙肝病毒核酸(HBV-DNA)、酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异等指标,疗程均为1 a.疗程结束后2组各随机抽取30例,采集外周血检测干扰素γ(IFNγ)和白细胞介素4(IL-4).[结果]观察组与对照组相比,在缩短肝功能、病毒载量恢复时间,提高E-抗原(HBeAg)转换率、延长YMDD变异时间等方面均有统计学意义(均P<0.05),观察组治疗后IFN-γ明显高于对照组,IL-4明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).[结论]健脾补肾中药能够提高拉米夫定治疗CHB的疗效,其与Th1/Th2相关.     

香菇多糖对老年中晚期消化道恶性肿瘤患者C3、CD3、CD4及CD4/CD8比值的影响

目的探讨香菇多糖对老年中晚期消化道恶性肿瘤患者C3、CD3、CD4及CD4/CD8比值的影响。方法 80例老年中晚期消化道恶性肿瘤患者,随机分为两组,每组40例,对照组进行常规治疗,研究组进行常规治疗加香菇多糖治疗,分析两组患者的效果。结果研究组临床缓解率显著高于对照组(P<0.05);两组C3、CD3、CD4及CD4/CD8比值等免疫功能指标比较有统计学差异(P<0.05)。结论应用香菇多糖可明显提高老年中晚期消化道恶性肿瘤患者的C3、CD3、CD4及CD4/CD8比值。     

和解汤对慢性乙型肝炎功能性T细胞亚群的影响

[目的]探讨和解汤对慢性乙型肝炎(CHB)功能性T淋巴细胞亚群的影响.[方法]将72例CHB患者随机分为2组,治疗组(42例)采用和解汤治疗,对照组(30例)采用核苷类似物治疗,观察2组治疗后外周血功能性T淋巴细胞亚群(CD8 CD28 、CD4 CD28 )、白细胞介素2(IL-2)水平及乙肝病毒(HBV)标志物及肝功能的变化.[结果]治疗组治疗后CD8 CD28 、CD4 CD28 T细胞和IL-2水平较治疗前明显升高(P＜0.05),6例患者HBeAg阴转、HBV DNA量下降至1×105 copy/ml以下;对照组治疗前后CD8 CD28 T细胞、CD4 CD28 T细胞及IL-2水平无明显变化(P＞0.05),1例患者HBeAg阴转,22例HBV DNA量下降至1×105 copy/ml以下.CHB显效者治疗后CD8 CD28 、CD4 CD28 T细胞水平和IL-2水平明显升高(P＜0.01);非显效组治疗前后CD8 CD28 T细胞、CD4 CD28 T细胞水平无明显变化(P＞0.05).[结论]和解汤清除HBV的疗效,可能与CD8 CD28 T细胞的有效激活有关,细胞免疫在HBV感染发病机制和病毒清除过程中起重要作用.     

慢性乙型肝炎患者不同免疫状态及抗病毒治疗早期外周血NK细胞亚群变化特点

目的观察慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同免疫状态下外周血NK细胞亚群特点,比较聚乙二醇干扰素及核苷(酸)类似物抗病毒治疗早期外周血NK细胞亚群变化差异。方法收集门诊不同免疫状态下的CHB患者81例,其中免疫耐受期(immune-tolerance phase,IT)患者22例,免疫活化期(immune-activation phase,IA)患者52例,非活动携带组(inactive carry phase,IC)7例,同时纳入健康志愿者(healthy controls,HC)39例作为对照。对27例符合抗病毒治疗标准的患者进行抗病毒治疗,并完成随访。其中22例采用核苷(酸)类似物治疗,5例采用聚乙二醇干扰素治疗。流式细胞术检测患者抗病毒治疗0周、4周、8周、12周及24周外周血NK细胞亚群的比例。结果免疫耐受组、非活动携带组NK细胞总数较健康对照组明显上升(P0.05)。非活动携带组CD56~(dim)NK细胞比例较健康对照组升高(P=0.02)。免疫耐受组及免疫活化组患者外周血CD56~(bright)NK细胞以及CD56~(bright)/CD56~(dim)NK比值与健康对照组相比均明显升高(P0.05);比较CHB患者聚乙二醇干扰素及核苷(酸)类似物抗病毒治疗各时间点外周血NK亚群比例发现,CD56~(dim)NK细胞比例无明显差异。聚乙二醇干扰素组CD56~(bright)NK细胞比例在8周、12周、24周时明显高于核苷(酸)类似物组,差异有统计学意义(P0.05)。结论外周血NK细胞亚群可能与慢性HBV持续感染相关。在抗HBV治疗过程中,聚乙二醇干扰素可能通过上调CD56brightNK细胞发挥免疫调节作用。     

HBV感染后外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与疾病进展的相关性

目的:探讨HBV感染者外周血CD4~ CD25~ Fox- p3~ 调节性T细胞水平与HBV感染后疾病进程的相关性.方法:HBV感染者136名及健康对照40名,应用流式细胞仪胞内染色技术检测外周血CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞表达,结合HBV感染者临床情况进行分析.结果:HBV感染者外周血CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞表达率较健康对照组显著增高(7.48%±1.03% vs 3.58%±0.71%,P<0.01);慢性乙肝组与慢性重型乙肝组相比,外周血CD4~ CD25~ Foxp3~ T调节细胞的表达率有明显差异(6.55%±1.26% vs 8.65%±2.58%,P<0.05);HBV病毒载量的对数值与外周血CD4~ CD25~ Foxp3~ T调节细胞的表达率之间存在正相关(r=0.332,P<0.01).结论:HBV感染者外周血CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞水平与疾病进展明显相关.     

慢性HBV感染患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达及其临床意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞与慢性HBV感染后不同临床转归和临床特点的相关性。方法在26例慢性乙型肝炎(CHB)患者、15例无症状HBsAg携带者(ASC)和11例肝炎肝硬化(LC)患者和16例正常对照者,分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平。结果CHB组和ASC组的CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分率分别为4.40±2.76%和4.43±2.10%,均高于正常对照组(2.70±0.97%),差异显著(P0.01);CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平与HBVDNA水平无相关性(r=0.018,P0.05);在HBeAg阳性与阴性组患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达也无明显的差异(P0.05)。结论慢性HBV感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平升高,可能与HBV感染的慢性化有关。     

重型肝炎患者淋巴细胞亚群的变化及其意义

为了解重型肝炎(SH)患者T淋巴细胞亚群的变化及对疾病的预后的影响。对我院收治的46例重型肝炎病例(死亡组29例,存活组17例)与40例慢乙肝(CHB)的抗凝血,通过流式细胞仪检测其T淋巴细胞亚群,并与临床预后进行比较。结果:SH T淋巴细胞亚群计数CD3 、CD4 CD8-、CD4-CD8 细胞明显低于CHB组(P<0.05),可检测到大量幼稚的CD4 CD8 双阳细胞且其计数明显高于慢乙肝组(P<0.001),SH死亡组CD3 细胞明显低于存活组(P=0.04),CD4 CD8 双阳细胞明显高于存活组(P=0.005)。存活组随着病程恢复,CD3 、CD4 CD8-、CD4-CD8 细胞缓慢上升,死亡组持续低水平;存活组病程恢复时CD4 CD8 细胞逐渐下降,但死亡组反而上升。结论:T淋巴细胞亚群的变化特别是CD4 CD8 细胞的上升对预后判断有重要参考价值。     

CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞在小鼠肺结核发生中的作用

目的 研究CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Treg)在小鼠肺结核发生中的作用.方法 PC61处理组小鼠腹腔注射抗-CD25(PC61),50μg/只,消除体内的Treg,IgG对照组注射相同剂量的IgG同型对照抗体.3 d后静脉注射H37Rv 0.1 mL(含1×10~6CFU活菌),攻击小鼠.流式细胞技术分析PC61对小鼠体内不同组织中Treg的消除效果,体外分析Treg消除对特异性细胞免疫、肺组织病理学和肺组织内结核分枝杆菌生长情况的影响.采用方差齐性F检验和非配对t检验比较实验数据.结果 PC61处理组与IgG对照组小鼠脾细胞中Treg占CD4~+T淋巴细胞比例在第10天分别为(21.13± 3.58)%和(30.42± 4.20)%(f=2.38,P<0.05);第30天为(16.12± 1.26)%和(17.34± 1.62)%(t=0.84,P>0.05),Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比例在第10天为(32.07± 3.95)%和(60.55± 5.48)%(t=5.96,P<0.05).外周血也有类似结果.在PC61处理组及IgG对照组,感染后第10、30和60天时体外培养小鼠脾细胞分泌的卡介苗特异性细胞因子1L-17(ng/L)分别为5.1± 0.9比0、43.1± 10.0比5.9±2.8、124.8± 5.8比102.5±8.1(t=7.90,t=5.10,t=3.19;均P<0.05);IFN-7(ng/L)分别为28.4±8.2比4.0± 1.3、685.9±128.6比418.7± 20.4、310.9± 119.7比32.8±7.5(t=4.21,t=8.43,t=3.27;均P<0.05);TNF-a(ng/L)分别为38.6±5.0比16.3±4.0、112.9± 12.3比71. 5± 12.6、86.2± 8.2比0(t=4.95,t=3.33,t=14.8;均P<0.05).PC61处理小鼠在感染早期(第10天)肺内结核菌量低于IgG对照小鼠(t=4.63.P<0.01),但后期比较差异无统计学意义.PC61处理小鼠感染后期(第120天)肺组织病理改变较IgG对照组为轻.结论 结核菌感染后小鼠Treg显著增加;Treg能有效抑制结核菌特异性细胞免疫.进而影响小鼠肺内结核菌的清除和结核病的发生.     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化及意义

目的:通过检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血CD4 CD25 调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的比例及变化规律,探讨Treg细胞在ITP发病中的可能作用。方法:采集30例急、慢性ITP患者治疗前、后和20例正常对照者的外周血标本,流式细胞仪检测Treg细胞的比例及变化,并评价其与血小板计数的相关性。结果:30例ITP患者治疗前Treg细胞的比例为(1.59±0.86)%,明显低于正常对照组(3.87±1.73)%(P<0.01),治疗后其比例显著升高,为(2.51±1.17)%,明显高于治疗前(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.01);Treg细胞在治疗显效和良效组显著高于进步和无效组(P<0.01),进步组与无效组比较差异无统计学意义(P>0.05);此外治疗前后Treg细胞比例与血小板计数呈显著正相关(P<0.05)。结论:ITP患者外周血Treg细胞比例降低,但随免疫抑制治疗的疗效逐渐升高,提示CD4 CD25 调节性T细胞可能参与了ITP的发病机制。     

支气管哮喘大鼠CD4+CD25+T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的 研究支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液、脾脏CD4+CD25+T细胞的变化,及地塞米松对CD4+CD25+T细胞的影响.方法 50只SD大鼠随机分为5组,空白对照(A)组,哮喘(B)组,地塞米松1(C)组、地塞米松2(D)组,地塞米松3(E)组.A组第l天给予腹腔注射生理盐水l ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化.B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原l ml(卵蛋白1 mg+灭活百日咳杆菌9×106个+氢氧化铝干粉100 mg)混悬液,第15～21天给予1%的卵蛋白雾化30 min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0.2 mg/kg、1 mg/kg、2 mg/kg.采用流式细胞仪检测的方法 ,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4+CD25+T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响.结果 B组BALF、外周血、脾脏CD4+CD25+T细胞表达占CD4+T细胞的百分比分别是(42.21±5.62)%、(12.69±2.70)%、(11.15±1.05)%,A组结果 分别是(18.76±5.85)%、(6.21±1.73)%、(7.85±2.13)%.B组与A组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05);C组、D组、E组BALF中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比表达分别是(10.49±4.03)%、(13.28±5.12)%、(7.51±5.39)%,显著低于A组和B组,(P＜0.05,P＜0.01);外周血中,C组(6.03±1.43)%、D组(4.88±0.95)%与A组(6.21±1.73)%比较,差异无统计学意义,E组(3.49±0.62)%与C组、A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).脾脏中,C组(7.25±1.82)%、D组(8.63±3.18)%与A组(7.85±2.13)%比较,差异无统计学意义,E组(3.38±1.37)%与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD4+CD25+T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一.地塞米松可以抑制CD4+CD25+T细胞的表达.BALF内CD4+CD25+T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4+CD25+T细胞变化可了解肺部情况.     

CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在大鼠肝纤维化模型中的变化

目的 探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Tregs)在肝纤维化免疫发病机制中的作用.方法 26只大鼠分为对照组(6只)和模型组(20只),通过皮下注射四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型,检测血清肝功能和纤维化指标,观察肝脏病理学变化,流式细胞仪测定外周血及脾脏CD4+CD25+Tregs数量的变化.两组间差异比较采用t检验,相关性采用Pearson直线相关分析.结果 模型组血清ALT、AST升高,Alb下降;HA、PC Ⅲ、Ⅳ C分别为(177.42±61.25)/μg/L、(34.86±7.47)μg/L、(7.32±3.71)μg/L,较对照组明显升高(t=-3.670、-5.661、-3.950,均P<0.01);模型组肝脏组织胶原纤维大量增生,分割肝小叶并包绕成假小叶.模型组外周血中CD4+CD25+Tregs占CD4+T淋巴细胞比例为(7.41±2.15)%,较对照组的(12.88±2.93)%低(t=3.752,P<0.01);模型组脾脏中Tregs为(9.49±1.16)%,较对照组的(13.16±2.36)%亦低(t=2.793,P<0.05).ALT、AST与外周血和脾脏中Tregs水平呈直线负相关(ALT、AST与外周血中Tregs:r分别为-0.727、-0.698,ALT、AST与脾脏中Tregs:r=-0.663、-0.535;均P<0.05);而Alb与外周血和脾脏中Tregs水平无直线相关(r=0.423、0.372,均P>0.05);HA、PCⅢ、ⅣC与外周血和脾脏中Tregs水平呈直线负相关(HA、PCⅢ、ⅣC与外周血中Tregs:r=-0.719、-0.558、-0.792,HA、PCⅢ、ⅣC与脾脏中Tregs:r=-0.424、-0.685、-0.506;均P<0.05).结论 CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型CD4+CD25+Tregs的表达降低,其肝纤维化的免疫学发病机制有待进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate the role of CD4+ CD25+ regulatory T lymphocyte(Tregs)in the immunological pathogenesis of liver fibrosis.Methods Twenty-six rats were divided into two groups:control group(6 rats)and model group(twenty rats).The rat model of liver fibrosis was induced bv subcutaneous injection of carbon tetrachloride(CCl4).The serums were collected for detection of hepatic function and fibrosis parameters.Hepatic tissue samples were used to observe the histopathological changes.The flow cytometry was used to detect the proportions of Tregs in both peripheral blood and spleen.The data were evaluated by t-test.The relationship between two variables was analyzed using Pearson linear correlation.Results The levels of serum alanine aminotransferase (ALT)and aspartate aminotransferase (AST) were significantly increased,but the level of serum albumin (Alb) was obviously decreased.The concentrations of serum hyaluronic acid (HA),procollagen type Ⅲ(PCⅢ),collagen type Ⅳ(CⅣ)of the model group increased to(177.42±61.25)μg/L,(34.86±7.47)μg/L and(7.32±3.71)μg/L,respectively,which were higher than those in the control group(t=-3.670,-5.661,-3.950,respectively;all P<0.01).In model group,hepatic lobules were full of collagen fibers and the hepatic pseudolobule formation was observed.The proportion of peripheral blood Tregs in CD4+ T lymphocyte in liver fibrosis model was(7.41±2.15)%,which was significantly lower than that in control group(12.88±2.93)%(t=3.752,P<0.01).Furthermore,the frequency of Tregs in spleen of the model group was(9.49±1.16)%,which was also significantly lower than that in control group(13.16±2.36)%(t=2.793,P<0.05).In addition,the levels of serum ALT,AST and fibrosis parameters were inverselv correlated with the frequency of Tregs in spleens and peripheral blood(ALT and Tregs in blood:r=-0.727,AST and Tregs in blood:r=-0.698,ALT and Tregs in spleen:r=-0.663,AST and Tregs in spleen:r=-0.535,HA and Tregs in blood:r=-0.719,PCⅢ and Tregs in blood:r=-0.558,CⅣ and Tregs in blood:r=-0.792,HA and Tregs in spleen:,r=-0.424,PCⅢ and Tregs in spleen:r=-0.685,CⅣ and Tregs in spleen:r=-0.506;all P<0.05).However,the linear correlations between serum Alb and Tregs in spleens and peripheral bloods were not observed(r=0.423,0.372,respectively,both P>0.05).Conclusion These findings suggest that the reduction of CD4+ CD25+ Tregs probably play an important role in the immunological pathogenesis of liver fibrosis.     

CD178在肾综合征出血热患者外周血T细胞亚群表达的研究

为研究 CD1 78在肾综合征出血热 (HFRS)患者外周血 T细胞亚群的表达及意义 ,应用荧光抗体标记和流式细胞仪技术分析 CD1 78(Fas配体 )在 HFRS患者及健康人群 (对照组 )外周血 CD 4、CD 8T细胞表达的水平。结果 HFRS患者发热期组和多尿期组外周血 CD 4T淋巴细胞比例与正常对照组比较差异无显著性 ;而 CD 8T细胞明显增加 (P<0 .0 1) ;CD 4/CD 8比值明显下降 (P<0 .0 5 ) ;CD 4、CD1 78 T淋巴细胞和 CD 8、CD1 78 T淋巴细胞皆显著增高 (P<0 .0 5及 P<0 .0 0 1)。HFRS患者发热组和多尿组 CD 8T细胞的 CD1 78的表达率分别为 2 2 .18%和2 9.92 % ,而 CD 4T细胞的 CD1 78表达率分别为 4 .80 %和 5 .2 5 %。认为 HFRS的发病过程中 CD1 78主要表达于CD 8T淋巴细胞亚群 ,且发病早期和末期均有高表达     

扩张型心肌病患者CD4~+CD25~+Foxp3~+ T细胞的检测及意义

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的水平及意义。方法:采用流式细胞术检测DCM患者30例及健康对照组20例外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+T细胞的比例。结果:DCM患者外周血CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例为(8.53±1.64)%,显著低于健康对照组的(11.4±2.17)%,P0.01;DCM患者CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例为(0.99±0.54)%,显著低于健康对照组的(1.55±0.55)%,P0.01;且DCM患者心功能越差,CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例越低。结论:DCM患者调节性T细胞比例的减少,可能打破了自身免疫耐受,发生了针对心肌抗原的自身免疫反应,参与了DCM的发病。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后血小板CD40L及血小板指标临床相关性分析

【摘要】：目的：研究急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后血小板CD40L及血小板指标之间相关性。方法：在我院接收的急性ST段抬高型心肌梗死患者中,选择2014年5月至2015年5月实施PCI术的患者58例作为研究对象,此组患者为观察组,选择同期健康体检人员53名作为对照组,对所有研究对象的血小板CD40L、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板平均体积(MPV)、肌钙蛋白I(Tn-1)等指标进行测定,患者测定时间为手术前、后,对照组人员测定时间为参加研究时,比较两组研究对象各个指标水平,研究血小板CD40L及血小板指标的相关性。结果：观察组患者术前测得血小板CD40L(MFI)、Tn-1与对照组有显著差异,有统计学意义(P<0.05);观察组患者术前测得PCT、PLT、PDW、MPV与对照组差异较小,无具统计学意义(P>0.05);观察组患者术后测得血小板CD40L(MFI)、Tn-1、MPV、PDW均与对照组有显著差异,有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后测得PCT、PLT与对照组差异较小,无统计学意义(P>0.05);观察组患者术后测得血小板CD40L(MFI)、Tn-1、MPV、PDW均与术前有较大差异,有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后测得PCT、PLT与对照组差异较小,无统计学意义(P>0.05);STEMI患者行PCI术后,MPV、PDW与血小板CD40L呈正相关关系,P<0.05;Tn-1、PCT、PLT与血小板CD40L之间没有相关性,P>0.05。结论：血小板形态发生变化是急性ST段抬高型心肌梗死患者进行PCI术后血小板活化的特征,而血小板CD40L的表达受到血小板指标的影响,会产生炎症、凝血等情况,应予以重视。     

感染弓形虫小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞的变化

目的 观察小鼠感染刚地弓形虫后脾脏CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的动态变化。 方法 将28只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组，其中3组每鼠腹腔接种弓形虫速殖子悬液200 μl（含弓形虫速殖子5×10⁴个/ml），对照组腹腔接种灭菌PBS 200 μl。分别于弓形虫感染后第2、4和6天取脾，制成单个核细胞，用实时荧光定量PCR检测脾CD4⁺ T细胞Foxp3基因表达水平，流式细胞仪检测脾CD4⁺CD25⁺调节性T细胞占CD4⁺ T细胞的比例，并对CD4⁺CD25⁺调节性T细胞和CD4⁺ T细胞进行绝对计数。 结果 感染后第4和6天，小鼠脾脏CD4⁺ T细胞Foxp3 mRNA相对表达水平分别为 1.89±0.23和1.79±0.24， 均显著高于正常水平（1.00±0.12）（P＜0.01）；CD4⁺CD25⁺调节性T细胞占CD4⁺ T细胞的比例从感染后第2天（15.07%±2.73%）开始上调（P＜0.05），至感染后第4 和6天分别为24.29%±3.19%和19.80%±2.66%，均明显高于正常水平（11.58%±2.04%） （P＜0.01）；脾脏CD4⁺ T细胞占脾细胞的比例及其绝对数量均从感染后第2 天开始降低，至感染后第6 天分别降至5.49%±1.71%和（1.71±0.44）×10⁶ （P＜0.01）。 结论 弓形虫感染导致小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺调节性T细胞占CD4⁺ T细胞的比例上调，而脾脏CD4⁺ T细胞的显著减少是促成比例上调的主要原因。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在约氏疟原虫感染小鼠应答早期中的作用

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在约氏疟原虫感染早期的作用及意义。方法用约氏疟原虫(致死型)感染DBA/2和BALB/c小鼠,计数红细胞感染率;在感染后第0d、3d、4d、5d和6d提取脾细胞应为,流式细胞术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞百分含量;ELISA法检测脾细胞培养上清IFNγ、IL10和TGFβ1水平。结果DBA/2小鼠的IFNγ水平在感染后第3d迅速升高后缓慢下降(P<0.01),CD4+CD25+T细胞数仅在感染后第5d出现有意义的升高(P<0.05),而IL10水平和CD4+T细胞数量都无明显改变。BALB/c小鼠的IFNγ水平在感染后第3d出现有意义的升高后迅速下降(P<0.01),CD4+CD25+T细胞数在感染后第3d开始明显升高,于感染后第5d出现下降(P<0.05),而IL10水平自感染后第3～6d持续维持高水平(P<0.05),CD4+T细胞数量于感染后第6天明显下降(P<0.05)。结论CD4+CD25+调节性T细胞在致死型约氏疟原虫感染BALB/c小鼠早期可能通过抑制性细胞因子IL10发挥免疫抑制作用。