非小细胞肺癌患者血清蛋白质标记物的检测

目的 检测非小细胞肺癌患者(NSCLC)血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于NSCLC早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测235例血清标本的蛋白质质谱,并结合生物信息学方法(支持向量机)分析数据.结果 筛选出3个质荷比(m/z)位于6628,9191和11412的蛋白质标记物,构建NSCLC早期诊断模型.联合3种潜在蛋白质标记物,经留一法交叉验证,区分NSCLC和正常健康对照的敏感性为98%,特异性为96%.盲法验证显示,该模型诊断NSCLC的敏感性为96.56%,特异性为94.79%.结论 SELDI-TOF-MS结合支持向量机建立NSCLC血清蛋白质指纹图谱模型是早期诊断NSCLC的一种敏感性高、特异性强的新方法,值得进一步研究与应用.     

SELDI-TOF-MS技术诊断贲门癌高发区慢性萎缩性贲门炎及贲门黏膜不典型增生

目的探讨贲门癌高发区人群贲门黏膜不典型增生(DYS)、慢性萎缩性贲门炎(CAG)的血清学诊断方法,为贲门癌高危人群的筛查提供新手段。方法采用弱阳离子结合芯片(WCX2)及表面增强激光解吸/电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测食管癌高发区无症状普查人群143人(其中活检组织诊断为正常63人,CAG57人,DYS23人)的血清蛋白质质谱,对原始信号的总离子强度及相对分子质量做均一化校正及噪声滤过,并对同一质荷比蛋白质质谱峰平均强度值做组间t检验。应用BiomarkerPattern软件建立决策树分类模型,经10倍交叉验证得到该分类模型对测试组病变人群的诊断率和排除率。结果采用DYS和正常组质荷比为M3894·0的一种蛋白质建立的决策树分类模型,其对测试组DYS诊断率为87%,排除率为86%;CAG和正常组则有质荷比为M2942·15和M33316·6的2种蛋白质建立决策树分类模型,对测试组CAG诊断率为93%,排除率为92%。结论SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测血清蛋白质质谱法诊断贲门癌高发区DYS和CAG有较高的敏感性和特异性,为贲门癌高危人群筛查提供了新的血清学手段。     

内镜下碘染色用于江苏淮安地区食管疾病筛查1983例研究

目的探讨内镜下碘染色在食管癌高发区的食管早癌内镜筛查中的重要临床价值。 方法2014至2016年在江苏省淮安市清浦区武墩镇及盐河镇等对1983例40～60岁人群进行食管癌内镜筛查,对比碘染色前后食管黏膜颜色和形态的变化,并对黏膜染色异常者行活检病理检查。 结果740例患者共835处病灶接受食管组织活检,有273例于碘染色前发现(白光状态下),碘染色后再发现562例。其中碘染后新发现5例黏膜内癌,205例各种异型增生,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明碘染色后食管癌及癌前病变的检出率明显高于染色前。 结论内镜下食管黏膜碘染色可明显提高筛查过程中食管癌及癌前病变的检出率,且因其价格低廉,操作简单,值得临床推广应用。     

林州市食管癌和癌前病变检出率的群体对照研究

目的观察林州市高危人群中食管癌和癌前病变的检出率是否降低。方法根据1980年在林州市城郊乡内镜普查527例居民的性别和年龄构成,在同一人群中随机选择与之匹配的人群样本,进行内镜检查和活检病理组织学检查。结果958例受检人群中,检出食管癌、贲门癌32例,检出率3.34%。其中,食管早期表浅癌14例,进展期癌4例;贲门早期表浅癌10例,进展期癌4例。检出食管上皮异型增生91例,占9.50%。其中,轻度、中度和重度异型增生的检出率分别为7.72%、1.57%及0.21%。与1980年普查结果比较,癌和异型增生的检出率无明显差异（P〉0.05）。结论林州市城郊乡普查人群中,食管癌和癌前病变的检出率未见降低。     

内镜窄带成像技术在早期食管癌及癌前病变诊断中的应用

目的 探讨内镜窄带成像技术(NBI)在食管癌及癌前病变诊断中的价值.方法 对205例患者采用普通胃镜及胃镜NBI检查食管,病灶取病理活检,食管癌及中重度异型增生者进入本研究,比较普通胃镜及胃镜NBI对食管癌及中重度异型增生的诊断价值,分析食管癌及癌前病变的NBI表现.结果 普通放大胃镜不易观察到食管上皮内血管,NBI观察食管黏膜呈淡青色,放大观察可清楚地观察到茶色的食管上皮内血管及青色的深层血管.NBI观察早期食管癌及异型增生病灶呈茶色,病灶处深层血管不能显示.5例中重度异型增生及2例m1癌病灶的上皮乳头内血管环(IPCL)均表现为IPCL-Type Ⅳ-1型改变,2例m2癌为IPCL-Type Ⅳ-2型改变;3例m3及1例sm1癌为IPCL-Type Ⅳ-3型改变;3例sm2及8例进展期癌为IPCL-Type Ⅳ-4型改变.结论 NBI可观察食管黏膜及黏膜下的血管改变,较普通胃镜更易发现早期食管癌及癌前病变病灶.     

内镜下碘染色诊断早期食管癌的临床研究

目的 探讨内镜下碘染色对早期食管癌及癌前病变的诊断价值.方法 将内镜下有可疑食管病变的220例患者随机分为染色组和对照组各110例.用Lugol液对染色组进行食管黏膜染色检查,并对不染色和浅染色区进行病理活检.对照组不行Lugol液染色,仅根据临床经验进行病理活检.结果 染色组不着色或浅着色69例(62.7%),活检发现食管癌14例(12.7%),其中早期食管癌3例,鳞状上皮异型增生9例(8.1%);对照组110例活检发现食管癌2例(1.8%),轻中度异型增生4例(3.6%).两组食管癌诊断率的差异有统计学意义.结论 内镜下碘染色能减少食管黏膜活检误差,提高食管癌诊断率,有助于发现早期食管癌及其癌前病变.     

河南食管癌高低发区人群食管上皮p53变化和细胞增生状况的比较研究

目的探讨食管癌高、低发区人群食管上皮肿瘤抑制基因ｐ５３的变化及其与细胞增生状况的关系，以了解食管癌变的分子学基础．方法食管癌高发区居民２２０例和低发区居民５０例分别进行食管内镜检查、粘膜活检和组织病理学检查．根据细胞和组织形态结构区分为正常、基底细胞增生和间变，并采用免疫组化ＡＢＣ法分析各级病变和正常上皮Ｐ５３蛋白及细胞增生核抗原（ＰＣＮＡ）的改变，并计数上皮单位面积内Ｐ５３和ＰＣＮＡ阳性细胞数，进行定量比较研究．结果河南高、低发区人群食管上皮细胞均出现不同程度的Ｐ５３和ＰＣＮＡ的变化．高、低发区居民食管正常上皮和病变组织ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数和高发区Ｐ５３阳性细胞数随病变加重呈升高趋势．但是，低发区居民食管上皮Ｐ５３阳性细胞数却无此现象．结论肿瘤抑制基因ｐ５３的变化和ＰＣＮＡ改变有明显关系，均随病变的进展而升高．高发区居民食管各级病变Ｐ５３改变明显高于低发区居民，此结果有助于对食管癌地域性分布差异的分子学基础的了解．     

SELDI技术筛选肺癌患者血清标志蛋白的临床价值

目的探讨表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术筛选肺癌患者血清标志蛋白的临床价值。方法用SELDI-TOF-MS技术、弱阳离子交换蛋白芯片,检测肺癌和肺良性病变患者的血清蛋白质质谱图;用Biomarker Pattern软件分析肺癌差异蛋白并初建其诊断模型,通过盲筛验证诊断模型。结果发现有统计学差异的蛋白峰20个,其中肺癌患者血清高表达蛋白质波峰14个,低表达蛋白质波峰6个;用质荷比2 090.77、2 503.31 Da的差异蛋白峰建立分类树模型,其诊断肺癌的灵敏度88%,特异度95%;盲筛验证灵敏度90%,特异度100%,粗符合率93.33%,Youden指数0.9。结论SELDI-TOF-MS技术筛选的肺癌血清差异性蛋白及分类树模型,诊断肺癌的灵敏度高、特异性好。     

食管早癌的内镜诊断

食管癌的死亡率较高,其预后与早期发现、早期诊断密切相关.通常将食管鳞状上皮重度异型增生和原位癌定义为癌前病变,无淋巴结转移的黏膜内癌和黏膜下癌（即T1 N0M0期）定义为早期食管癌.根据食管、胃肠上皮性肿瘤Vienna分类,将原位癌和重度异型增生归类于高级别黏膜内瘤变,轻度和中度异型增生归类于低级别黏膜内瘤变.     

早期肝纤维化外周血清标志物筛选的初步研究

目的探讨早期病毒性乙型肝炎（乙肝）肝纤维化的潜在血清标志物并建立相应的诊断模型。方法采用表面增强激光解吸/离子化时间飞行质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测20个健康人和31例早期乙肝肝纤维化患者的血清蛋白质谱,用biomarker Wizard软件筛选出早期肝纤维化的差异表达蛋白质谱峰,用Biomarker Pattern软件对差异蛋白峰值进行线性分析并建立诊断模型。结果在分子量为2000～20000Da的区间内检测出97个峰值,15个为差异蛋白峰,其中早期肝纤维化患者有3个上调,12个下调。用质荷比为M4799和M6125的差异蛋白联合建立的诊断模型最优,其特异度为80%（16/20）,灵敏度为87%（27/31）。结论 SELDI-TOF-MS在筛选早期肝纤维化血清学标志物方面具有较高的灵敏度和特异性,作为肝纤维化早期筛选的方法尚需大宗病例证实及临床后续验证。     

不同食管病变中端粒酶活性与端粒酶RNA组分、端粒酶逆转录催化亚单位的相关性及其意义

目的　探讨不同食管病变中端粒酶活性 (TA)、端粒酶RNA组分 (hTR)及端粒酶逆转录催化亚单位 (hTERT)的表达 ,彼此间相关性及其预后意义。方法　采用TRAP 银染、原位杂交及免疫组化技术检测TA、hTR及hTERT在 38例食管鳞癌组织、15例不典型增生及 12例正常食管粘膜中的表达情况。结果　食管鳞癌TA、hTR及hTERT的阳性表达率分别为 84 2 1%( 32 /38)、71 0 5 %( 2 7/38)及 81 5 8%( 31/38) ,不典型增生组织中TA、hTR及hTERT阳性表达率分别为 6 0 0 0 %( 9/15 )、33 33%( 5 /15 )及 40 0 0 %( 6 /15 ) ,与正常组织比较 ,具有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,TA与hTR及hTERT的表达具有相关性 (P <0 0 5 )。TA、hTR及hTERT的表达与临床病理因素无关 (P >0 0 5 )。结论　TA、hTR及hTERT在食管癌的发生发展中起着重要作用 ;hTR及hTERT能够反应端粒酶活性 ,三者均为食管鳞癌恶性表型增高的标志 ;hTR及hTERT具有独立的预后意义。     

血清胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值

目的探讨血清胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值。方法收集我院2011年6月-2011年11月经胃镜活检病理诊断浅表性胃炎27例,癌前状态51例,癌前病变8例,胃癌17例,晨起空腹采静脉血3 mL,收集血清,以酶联免疫吸附测定(ELISA)定量检测血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、PGⅡ水平,计算PGⅠ/PGⅡ(PGR)值。结果在浅表性胃炎、癌前状态、癌前病变、胃癌中血清PGⅠ水平及PGR逐渐降低,而血清PGⅡ水平逐渐升高;血清PGⅠ、PGR在胃癌与浅表性胃炎、癌前状态比较差异有统计学意义,与癌前病变比较差异无统计学意义;血清PGⅡ在胃癌与浅表性胃炎、癌前状态、癌前病变比较差异均有统计学意义;胃癌与癌前疾病ROC曲线下面积PGⅠAUCROC=0.782,PGⅡAUCROC=0.919,PGR AUCROC=0.989,PGⅠ为93.53 g/L时诊断胃癌的敏感性76.47%,特异性76.27%;PGⅡ为58.85 g/L时诊断胃癌的敏感性82.35%,特异性89.83%;PGR为1.88时诊断胃癌的敏感性94.12%,特异性89.83%。结论血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR值对诊断胃癌有较高的敏感性和特异性,可用于胃癌筛查和早期诊断。     

Correlation of matrix metalloproteinase suppressor genes RECK, VEGF, and CD105 with angiogenesis and biological behavior in esophageal squamous cell carcinoma

AIM： To explore the expression of reversion inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs （RECK）, vascular endothelial growth factor （VEGF） and endoglin （CD105） protein and its correlation with occurrence, development, invasion and metastasis in esophageal squamous cell carcinoma （ESCC）. METHODS： Streptavidin-peroxidase （SP） immunohistochemistry was used to detect expression of RECK and VEGF in 62 cases of ESCC, 31 cases of adjacent atypical hyperplastic epithelium and 62 cases of normal esophageal epithelium. CD105 Mb was used to assess microvessel density （MVD）. RESULTS： The expression of RECK was closely correlated with histological grade, infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of RECK decreased during cancer development： normal esophageal epithelium （85.5%, 53/62）, adjacent atypical hyperplastic epithelium （71.0%, 22/31）, and carcinoma （59.7%, 37/62）. There was a significant difference among the groups （P 〈 0.05）. The expression of VEGF protein was closely correlated with infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of VEGF protein increased during cancer development： normal esophageal epithelium （29.0%, 18/62）, adjacent atypical hyperplastic epithelium （54.8%, 17/31）, and carcinoma （67.7%, 42/62）. There was a significant difference among the groups （P 〈 0.05）. MVDCD105 increased in accordance with histological grade, butthere was no significant difference （grade Ⅰ, 36.92 ± 10.85; grade Ⅱ, 37.65 ± 9.50; and grade Ⅲ, 38.06 ± 12.19）. The MVDCD105 was closely correlated with infiltration and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of RECK was inversely correlated with the expression of VEGF and CD105.CONCLUSION： RECK, VEGF and CD105 play important roles in the infiltration, metastasis and carcinogenesis in esophageal carcinoma. Angiogenesis in ESCC may be promoted by over-expression of CD105.     

TWEAK及其受体Fn14蛋白在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TNF-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化法分别检测手术切除的45例食管鳞癌组织、22例癌旁不典型增生组织及22例正常食管黏膜组织中TWEAK及Fn14蛋白表达,并且对二者在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况进行相关性分析.结果:食管鳞癌组织中TWEAK蛋白表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为6.455,11.645及4.185,P均<0.05);在食管鳞癌癌变过程中TWEAK蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为27.3%(6/22)、40.9%(9/22)、64.4%(29/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=9.018,P<0.05);Fn14蛋白表达也与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为10.873、12.513、9.244及13.137;均P...     

DAPK1、ERα、HLA-Ⅰ基因蛋白表达水平与宫颈病变病理进程的相关性

目的从蛋白质水平观察死亡相关蛋白激酶(DAPK1)、人类白细胞抗原-Ⅰ(HLA-Ⅰ)、雌激素受体(ER)α基因表达水平与不同病理级别的宫颈病变的相关性。方法收集汉族妇女宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈鳞癌患者石蜡包埋组织标本115例,采用免疫组织化学方法鉴定蛋白表达水平。结果 DAPK-1、ERα、HLA-Ⅰ基因在宫颈炎/CINⅠ组织中阳性表达率分别为90%、76%、88%;在CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中这些基因阳性表达率分别为53%、48%;45%、24%;67%、40%。在CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中这些基因阳性表达率明显低于宫颈炎/CINⅠ,各组阳性表达率差异显著(P<0.05),随着宫颈病变病理变化的加重,基因蛋白阳性表达率逐渐降低。结论 DAPK1、HLA-Ⅰ、ERα基因表达阳性或缺失可能是CIN及宫颈鳞癌的重要生物学特征,与宫颈癌发生关系密切,这些基因的检测可能作为预测CIN和宫颈癌的重要生物指标。     

Autoantibody detection to tumor‐associated antigens of P53, IMP1, P16, cyclin B1, P62, C‐myc,Survivn, and Koc for the screening of high‐risk subjects and early detection of esophageal squamous cell carcinoma

The aim of this study was to evaluate the diagnostic values by detecting sera autoantibodies to eight tumor‐associated antigens (TAAs) of P53, IMP1, P16, cyclin B1, P62, C‐myc, Survivn and Koc full‐length recombinant proteins for the screening of high‐risk subjects and early detection of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Enzyme‐linked immunosorbent assay was used to detect autoantibodies against the eight selected TAAs in 567 sera samples from four groups, including 200 individuals with normal esophageal epithelia (NOR), 214 patients with esophageal basal cell hyperplasia (BCH), 65 patients with esophageal dysplasia (DYS), and 88 patients with ESCC. In addition, the expression of the eight antigens in esophageal tissues was analyzed by immunohistochemistry. Statistically significant distribution differences were identified among the four groups for each of the individual autoantibodies to six TAAs (P53, IMP1, P16, cyclin B1, P62, and C‐myc); the detection rates of antoantibodies were positively correlated with the progression of ESCC. When autoantibody assay successively accumulated to six TAAs (P53, IMP1, P16, cyclin B1, P62, and C‐myc), a stepwise increased detection frequency of autoantibodies was found in the four sera groups (6% in NOR, 18% in BCH, 38% in DYS, and 64% in ESCC, respectively), the risks to BHC, DYS, and ESCC steadily increased about 3‐, 9‐, and 27‐folds. The sensitivity and the specificity for autoantibodies against the six TAAs in diagnosing ESCC reached up to 64% and 94%, respectively. The area under the receiver operating characteristic curve for the six anti‐TAA autoantibodies was 0.78 (95% confidence interval 0.74–0.83). No more increasing in sensitivity was found with the addition of new anti‐TAA autoantibodies. A combination detection of autoantibodies to TAAs might distinguish ESCC patients from normal individuals and the patients with esophageal precancerous lesions.     

CA19-9、CA125和碱性磷酸酶对胆囊癌临床分期的意义

背景：近年原发性胆囊癌的发病率明显上升,提高胆囊癌的早期诊断是改善治疗和预后、提高生存率和生活质量的关键。目的：探讨检测CA19-9、CA125和碱性磷酸酶（AKP）对胆囊癌的临床分期以及术前评估的意义。方法：收集2003年1月~2010年5月华中科技大学同济医学院附属协和医院经病理检查确诊为原发性胆囊癌的159例患者,对不同TNM分期胆囊癌患者的血清CA19-9、CA125和AKP进行比较分析。结果：Ⅰ＋Ⅱ＋ⅢA期、ⅢB期、Ⅳ期胆囊癌患者血清CA19-9、CA125和AKP水平相比差异有统计学意义（P〈0.01）;Ⅰ＋Ⅱ＋ⅢA期血清CA19-9阳性率和AKP异常率显著低于ⅢB期、Ⅳ期（P〈0.01）,而血清CA125阳性率显著低于Ⅳ期（P〈0.01）。Ⅰ＋Ⅱ＋ⅢA期血清CA19-9水平和阳性率以及AKP水平和异常率均显著低于ⅢB＋Ⅳ期（P〈0.01）,而血清CA125水平和阳性率均无明显差异。联合检测的阳性率明显高于单个指标的阳性率（P〈0.01）。结论：CA19-9、CA125、AKP可作为胆囊癌的辅助诊断手段,对胆囊癌的临床分期和术前评估具有较好的临床价值。联合检测可提高诊断效率。     

大肠黏膜表面结构对早期大肠癌及其癌前病变的诊断价值

目的 探讨大肠黏膜病变表面腺管开口分型对早期大肠癌及癌前病变的临床应用价值.方法 应用电子放大内镜结合黏膜染色方法观察了144例患者共162处大肠黏膜病变,并结合病变大体形态特点及病理组织学结果进行分析.结果 162处病变中非肿瘤性病变表现为Ⅰ型及Ⅱ型腺管开口者占76.5%（26/34）;肿瘤性病变表现为Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型腺管开口者占96.1%（123/128）.癌性病变则主要以Ⅴ型腺管开口为主,占75.0%（9/12）,其中3例进展期癌均表现为ⅤN型腺管开口.结论 大肠黏膜腺管开口分型对判断非肿瘤性病变、肿瘤性病变及早期大肠癌具有重要意义,并对临床治疗方式的选择具有指导意义.