孕激素及间质细胞培养液对原代培养内膜腺上皮HOXA11基因表达的影响

目的:探讨间质细胞是否参与了孕激素对子宫内膜腺上皮的调控,及其初步的作用机制。方法:将增生期子宫内膜间质细胞经激素处理后进行培养,提取培养液。用浓度为30%的提取培养液对腺上皮细胞进行原代培养,当细胞生长融合时,加入孕酮或孕雌激素培养4h、24h。提取细胞总RNA,用半定量RT-PCR方法检测腺上皮细胞HOXA11基因表达量。结果:当内膜腺上皮细胞中含有30%经孕激素处理的间质细胞培养液时,加入孕激素或孕、雌激素后其HOXA11基因,在培养4h时表达量有下降趋势;24h时,表达量下降明显;而用RU486预处理后再加入孕激素或雌孕激素,腺上皮细胞HOXA11基因表达量与对照组无差异;当上皮细胞中含有30%经RU486预处理后,再加入孕激素处理的间质细胞培养液时,孕激素或孕、雌激素对内膜腺上皮HOXA11表达的负调控作用在4h时消失;24h时,转为正调控(HOXA11基因表达量增加)。结论:孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因的负调控作用需要问质细胞分泌的孕激素依赖因子的参与,而且由间质细胞和内膜腺上皮中的孕激素受体共同介导完成这一负调控作用。     

雌／孕激素对原代培养的子宫内膜内皮细胞HOXA11和PR基因表达的影响

目的：探讨雌、孕激素（尤其孕激素）对从子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因和孕酮受体(progesterone receptor,PR)基因表达的影响，以及二者表达量变化的相互关系。方法：将6例增生期子宫内膜腺上皮细胞进行原代培养，当细胞生长融合时，加入17β-雌二醇或／和孕酮培养4h、4d、6d、8d，提取细胞总RNA,半定量RT－PCR法检测HOXA11mRNA和PRmRNA表达量变化。结果：17β－雌二醇使上皮细胞HOXA11和PR基因表达量增加；而孕酮的作用效应则有所不同，当孕酮作用于与间质细胞分离培养的上皮细胞时，其HOXA11的表达增加，当上皮与间质细胞混合培养时，孕酮则降低上皮细胞HOXA11表达；孕酮对PR的影响则显示无论分离培养还是与间质细胞混合培养的上皮细胞，孕酮均可使上皮细胞PRmRNA表达量降低。结论：子宫内膜HOXA11基因表达受雌、孕激素调节、孕激素对内膜腺上皮HOXA11和PR基因均起负调控作用，但二者的发生机制有所不同。     

雌/孕激素对原代培养的子宫内膜上皮细胞HOXA11和PR基因表达的影响

目的:探讨雌、孕激素（尤其孕激素）对人子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因和孕酮受体（pro-gesterone receptor,PR）基因表达的影响,以及二者表达量变化的相互关系。方法:将6例增生期子宫内膜腺上皮细胞进行原代培养,当细胞生长融合时,加入17β-雌二醇或/和孕酮培养4h、4d、6d、8d,提取细胞总RNA,用半定量RT-PCR法检测HOXA11mRNA和PRmRNA表达量变化。结果:17β-雌二醇使上皮细胞HOXA11和PR基因表达量增加;而孕酮的作用效应则有所不同,当孕酮作用于与间质细胞分离培养的上皮细胞时,其HOXA11的表达增加,当上皮与间质细胞混合培养时,孕酮则降低上皮细胞HOXA11表达;孕酮对PR的影响则显示无论分离培养还是与间质细胞混合培养的上皮细胞,孕酮均可使上皮细胞PRmRNA表达量降低。结论:子宫内膜HOXA11基因表达受雌、孕激素调节,孕激素对内膜腺上皮HOXA11和PR基因均起负调控作用,但二者的发生机制有所不同。     

月经周期人子宫内膜腺上皮和基质细胞HOXA11表达的差异

目的:探讨HOXA11在月经周期人子宫内膜腺上皮和基质细胞中的表达规律及其生理意义。方法:免疫组织化学方法观察38例子宫内膜腺上皮和基质细胞HOXA11蛋白质的表达;用细胞分离筛选法,分离出子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞,采用半定量RT-PCR和Dot-blot方法分别观察HOXA11在腺上皮和基质细胞中的表达。结果:腺上皮细胞HOXA11在分泌中晚期表达量较增生期和分泌早期显著降低;基质细胞HOXA11的表达从增生期到分泌期逐渐增加,以分泌中晚期表达量最高。结论:内膜腺上皮和基质细胞HOXA11表达在分泌中晚期变化最显著,而且其表达量呈反相变化,即腺上皮表达量下降,基质细胞表达量增加。提示HOXA11基因与着床期子宫内膜的分化、成熟密切相关;其对内膜腺上皮和基质细胞的调控机制可能不尽相同。     

HOXA-11基因与不孕及妊娠失败关系的研究

目的 :研究HOXA 11基因与不孕及妊娠失败的关系。方法 :选择 4 1例不明原因不孕症患者及 30例难免流产患者 ,同时选择 2 8例正常未孕者及 18例正常早期妊娠者分别作为对照组 ,留取子宫内膜或蜕膜组织。子宫内膜标本通过组织学检查分为增生期或分泌期。难免流产及正常妊娠组均妊娠 6～ 9周。采用原位杂交方法检测所有子宫内膜或蜕膜组织中的HOXA 11基因mRNA的表达。结果 :整个月经周期子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞中均有HOXA 11基因mRNA表达 ,并因月经周期不同而有所波动。HOXA 11基因mRNA在分泌中晚期子宫内膜间质细胞中阳性表达率为 10 0 % ,在增生期子宫内膜间质细胞中的阳性表达率为 6 3.6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;在不明原因不孕症患者中HOXA 11基因失去了它在正常子宫内膜表达的周期性变化 ,而且基因表达缺失明显。HOX A 11基因在正常增生期及分泌期子宫内膜腺上皮细胞或间质细胞中的阳性表达率分别为90 .9%、82 .4 %和 6 3.6 %、10 0 % ,在不孕症增生期及分泌期子宫内膜两种细胞的阳性表达率分别为 38.9%、4 7.8%和 2 2 .2 %、39.1% ,两组分别比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;HOXA 11基因在正常早期妊娠蜕膜细胞中持续表达 ,其阳性表达率均为 10 0 % ,在难免流产蜕膜细胞中的阳性表达     

RU486对子宫内膜增生症腺上皮中NF-κB/p65、p16和ki67蛋白表达水平的影响

目的:探讨NF-κB/p65、p16、ki67在RU486治疗子宫内膜增生症前后腺上皮中表达变化的意义。方法:37例因阴道不规则出血刮宫诊断为子宫内膜增生症的患者,按10 mg/d剂量连续服用3个月的RU486进行治疗。采用SP非生物素二步法的免疫组织化学染色法检测治疗前后子宫内膜腺上皮NF-κB/p65、p16、ki67蛋白的表达情况。结果:治疗后NF-κB/p65蛋白的阳性信号强于治疗前(P<0.05),而治疗前后p16蛋白的阳性信号无明显差异(P>0.05),但极强阳性大腺体的数量明显多于其它大腺体(P<0.01);治疗后与治疗前相比ki67蛋白表达量明显下降(P<0.05)。结论:RU486治疗子宫内膜增生症可能与NF-κB/p65介导的信号通路有关;RU486可通过非p16相关的机制降低子宫内膜细胞的增殖活性。     

离体培养下人子宫内膜细胞内皮素-1免疫活性物质的分泌与调节

本文应用免疫组化法观察人子宫内膜组织中的内皮素-1免疫活性物质(ET-1-ir)主要分布在腺细胞及腺腔上皮中,间质中分布很少.放免法(RIA)测得离体培养的人子宫内膜腺细胞培液中含有大量ET-1-ir,含量随培养时间延长而减少,并受雌、孕激素及RU486、dbcAMP、FK抑制,受佛波酯显著刺激而变化.间质细胞离体培养下几乎不分泌ET-1-ir.从而提示月经来潮、内膜脱卸及修复、增生可能与内膜腺体自分泌大量ET-1-ir有关.     

不明原因不孕症子宫内膜上皮钙黏素的表达

目的:探讨上皮钙黏素(E-cadherin)在人子宫内膜组织中的表达与不明原因不孕症的关系。方法:采用免疫组化SP法,检测35例正常及41例不明原因不孕症子宫内膜E-钙黏素的表达水平。结果:正常组各期子宫内膜腺上皮均见E-钙黏素的表达,且在分泌中期达到高峰;增生期未见间质细胞的表达,但在分泌中期表达最强。不孕组增生期腺上皮E-钙黏素仅有弱表达,分泌期表达显著增加(P <0.05)。分泌中期与早、晚期比较,差异无显著性(P >0.05);分泌期部分间质细胞少量表达,无统计学意义。结论:E-钙黏素在人子宫内膜腺上皮和间质细胞规律性表达,其表达异常,可能是导致不孕的重要原因。     

诊断性刮宫在功能失调性子宫出血诊治中的价值及其合理应用

诊断性刮宫（简称诊刮）是诊断宫腔疾病的重要方法之一，其目的是刮取宫腔内容物或子宫内膜作病理检查以协助诊断。由于子宫内膜是受卵巢激素影响的最敏感的靶器官，子宫内膜的腺上皮和间质细胞受卵巢雌、孕激素影响而发生相应的变化，诊断性刮宫刮取的子宫内膜可间接反     

原位杂交检测同源框基因HoxAll在人月经周期子宫内膜的表达

了解HoxAll基因在人月经周期子宫内膜的表达及变化，探索该基因对正常内膜周期的调节功能。应用地高辛标记的RNA探针进行原位杂交。HoxAll基因主要在内膜间质细胞中表达，增殖期与分泌期比较未见明显差异。腺上皮细胞中HoxAll基因的表达量虽较间质细胞少，但有明显的周期性变化，以增生殖期腺上皮细胞表达量较高，分泌早期开始下降，到分泌中晚期表达量极低或不表达。HoxAll基因在月经周期人子宫内膜中的这种表达时空的变化与孕酮受体(PR)非常相似，提示HoxAll基因的表达与卵巢激素及其受体的调控有着密切的关系，HoxAll在分泌中期内膜腺上皮中表达下降是内膜分化的重要指标志。     

子宫内膜腺上皮细胞凋亡及相关基因表达调节的体外研究

为探讨Ｅ２、Ｐ、ＲＵ４８６及ＴＮＦ α对子宫内膜腺体细胞凋亡及其相关基因表达的调节,离体原代培养人子宫内膜腺体细胞经 ＴＵＮＥＬ 及免疫组化法检测。结果表明：（１）外源加入Ｅ２抑制腺体细胞凋亡,刺激Ｂｃｌ ２ 的表达。（２） Ｐ 抑制腺体细胞的凋亡,不刺激Ｂｃｌ ２、Ｆａｓ 及Ｆａｓ Ｌ 的表达。（３） ＲＵ４８６ 刺激Ｆａｓ 抗原增加并诱发腺体细胞凋亡。（４） ＴＮＦ α诱发内膜腺体细胞凋亡,对Ｂｃｌ ２、Ｆａｓ 及Ｆａｓ Ｌ 的表达无影响。从而提示,Ｅ２、Ｐ及ＴＮＦα对内膜凋亡的发生均有作用; ＲＵ４８６ 抗早孕可能与其诱导凋亡的发生有关。     

HOXA11基因在人良、恶性子宫内膜增生组织中的表达及临床意义

目的:探讨HOXA11蛋白在人子宫内膜良、恶性增生组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法检测正常增生期(20例)、单纯型及复杂型增生(39例)、不典型增生(33例)和子宫内膜腺癌(41例)子宫内膜组织中HOXA-11的蛋白表达情况。结果:HOXA11在人子宫的内膜腺上皮和间质、肌层及血管壁中均有表达,其中在内膜腺上皮和间质的表达随着增生程度的增加而呈下降趋势,子宫内膜癌组织则显著性下降(P<0.01),在肌层及血管壁中表达各组间无差异。结论:在子宫内膜由良性到恶性增生的演变过程中,HOXA11表达呈下降趋势,可作为子宫内膜恶性变的生物学指标之一。     

Interruption of endometrial maturation without hormonal changes by an antiprogesterone during the first half of luteal phase of the menstrual cycle: a contraceptive potential.

OBJECTIVE: To examine hormonal and endometrial responses to intermittent low-dose RU486 administration in the luteal phase of the menstrual cycle. DESIGN: Prospective open trial in which subjects serve as their own controls. PATIENTS/PARTICIPANTS: Eight normal cycling women. INTERVENTIONS: RU486 (10 mg, orally) was administered 5 and 8 days after urinary luteinizing hormone (LH) surge of treatment cycle. MAIN OUTCOME MEASURES: Daily serum concentrations of LH, follicle-stimulating hormone, estradiol (E2), and progesterone (P) were determined in control, treatment, and recovery cycles (n = 5) or treatment and recovery cycles (n = 3). Changes in endometrial morphology and immunohistochemical staining for P receptor (PR) and E2 receptor (ER) were determined during control (or recovery) and treatment cycles. RESULTS: Cycle length and hormonal patterns were unaltered after treatment with RU486. As demonstrated by reduced stromal edema and delayed glandular development, endometrial dyssynchrony occurred in all eight treatment cycles. In addition, seven of eight treatment cycle endometria demonstrated a decrease in PR staining without consistent change in ER staining. CONCLUSIONS: Two low doses of RU486 given 72 hours apart during the luteal phase of the cycle disrupted ongoing endometrial maturation without altering the hormonal and time course of the menstrual cycle. This study provides a basis for the development of a novel form of luteal contraception.     

Difference in alpha(v)beta3 integrin expression in endometrial stromal cell in subgroups of women with unexplained infertility

OBJECTIVE: The aim of the study was to evaluate the endometrial receptivity by using alpha(v)beta3 expression in the midsecretory phase in different endometrial compartments in women with unexplained infertility. STUDY DESIGN: A prospective controlled clinical trial in a setting of a university teaching hospital was performed. Thirty-three fertile and 33 infertile women were included in the study. Midluteal endometrial biopsies of the endometrium were carried out during the implantation window. Immunohistochemical staining was performed for the expression of alpha(v)beta3 in endometrial samples. Alpha(v)beta3 expression was measured using the HSCORE scoring system in the endometrial glandular and luminal epithelium and in the endometrial stroma. Serum levels of estradiol, progesterone, follicle-stimulating hormone, luteinizing hormone, thyroid-stimulating hormone, prolactin, total testosterone and dehydroepiandrosterone sulphate were measured in the early follicular phase and in the midluteal phase. RESULTS: The average alpha(v)beta3 integrin expression at different sites of the endometrium was not different in the infertile and fertile controls. However, the stromal alpha(v)beta3 integrin was found to be expressed significantly less in a subgroup of women with lower than average alpha(v)beta3 integrin expression in luminal epithelium than in fertile controls and significantly more in a subgroup of women with higher than average alpha(v)beta3 integrin expression in luminal epithelium. There was no difference in stromal alpha(v)beta3 integrin expression in the lower or higher glandular alpha(v)beta3 integrin expression subgroups. CONCLUSIONS: Alpha(v)beta3 integrin expression in endometrial stromal cells may be different in subgroups of women with unexplained infertility.