复合氨基酸片对四氯化碳肝损伤保护作用的实验研究

目的：探讨复合氨基酸片（谷氨酰胺、精氨酸、甘氨酸和L-半胱氨酸）对四氯化碳（CCl4）肝损伤的保护作用。方法：将40只ICR小鼠随机分成阴性对照组、CCh模型组及490mg、980nag／（kgb．w）两个剂量组,剂量组每天灌胃给予复合氨基酸片,阴性对照组和CCIn模型组给予双蒸水。30d后,CCl4模型组及剂量组以5ml／（kgb．w）的剂量一次性经口给予色拉油配置的0．5％CCl4,24h后处死所有小鼠,测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平,取肝脏左叶进行组织病理学检查。结果：980mg／（kgb．w）剂量组的ALT、AST水平降低,与cch模型组比较,有极显著性差异（P〈0．01）;980mg／（kgb．w）剂量组发生肝细胞坏死的病变程度减轻,肝细胞坏死评分降低,与CCl4模型组比较,有极显著性差异（P〈0．01）。结论：复合氨基酸片对CCl4肝损伤具有辅助保护作用。     

中龙牌养肝茶对化学性肝损伤的保护作用

目的：通过实验，鉴定中华牌养肝茶的保肝作用，方法：选用Wistar大鼠，以四氯化碳（CCl4)造成急性肝损伤模型，不同剂量的中华牌养肝茶通过灌胃进行保肝，然后进行大鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT），天冬氨酸转氨酶（AST）测定及大鼠肝脏病是检查。结果：CCl4肝损伤对照组的ALT显著高于阴性对照组和各试验组，试验高剂量组大鼠肝细胞坏死较CCl4肝损伤对照组轻，差异显著。结论：可以认为中龙牌养肝茶具有对化学性肝损伤有辅助保护作用。     

善维片对化学性肝损伤保护作用的试验研究

目的：了解善维片对大鼠急性化学性肝损伤的保护作用，探讨评价保健品保肝作用实验的适宜观察时间。方法：按照卫生部《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行，并比较四氯化碳（CCl4）染毒后第48小时和第5天处死动物对各项指标的影响。结果：与肝损伤模型对照组相比，染毒后第48小时，善维片三个剂量组动物血清ALT（丙氨酸氨基转移梅）水平均有显著降低（P＜0．05 ），中、高剂量组血清AST（天门冬氨酸氨基转移酶）水平也有显著降低（P＜0．05），受试物各剂量组均改善肝细胞退行性变，且高剂量组可明显减轻CCl4引起的肝细胞坏死（P＜0．05）。而染毒后第5天时，包括肝损伤模型组在内的各实验组大鼠的血清ALT和AST活性均已与对照组差异无显著性，提示CCl4致急性肝损伤 此时已得到全面修复。结论：善维片对CCl4致急性肝损伤具有预防作用。评价受试物的保肝作用时，以CCl4染毒后第48小时处死动物观察肝脏功能学和形态学变化为宜。     

沙棘籽油对四氯化碳肝损伤的保护作用研究

目的研究沙棘籽油对四氯化碳(CCl4)引起的大鼠化学性肝损伤的保护作用,探讨其对CCl4肝损伤起保护作用的有效剂量。方法实验用健康雄性成年SD大鼠(180~220 g)72只,随机分为空白对照组、溶剂对照组、CCl4模型对照组和3个沙棘籽油实验组(0.167,0.333和0.500 g/kg体重)。沙棘籽油以食用花生油稀释至所需浓度,灌胃给予动物(2 ml/kg体重),空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃,溶剂和模型对照组给予等体积花生油灌胃。于实验第45天将各组动物隔夜禁食16 h,模型组及受试样品组一次灌胃给予CCl4(200 mg/kg体重),24 h后处死动物,股动脉取血分离血清,测定血清ALT、AST水平,并取肝脏进行病理组织学检测。结果与CCl4模型对照组相比,沙棘籽油各剂量组大鼠血清ALT、AST均明显降低[(2 419±1 335),(2 832±1 074),(2 424±955),(4 396±3 026),(4 579±990),(5 106±1 479),(4 503±782),(21 861±14 291)nmol.s-1/L](P0.05);病理组织学检查结果显示,沙棘籽油高剂量组(0.500 g/kg体重)大鼠肝细胞水样变性和坏死程度以及总病变计分明显减轻(136.0±47.0vs288.0±70.0,P0.05),而中、低剂量组差异无统计学意义。结论沙棘籽油对CCl4造成的肝损伤具有明显保护作用,本实验中得出的有效剂量为0.500 g/kg体重。     

小鼠急性四氯化碳肝损伤模型的建立及在保健食品筛选中的应用

目的通过建立小鼠急性肝损伤模型,并将该模型应用于保健食品保护化学性肝损伤功能的筛选。方法 小鼠腹腔注射按1.0ml/100 g.b.w,一次分别给予0.063％、0.125％、0.25％、0.5％和1.0％四氯化碳(CCl4)溶液,24 h后取血,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量变化;取肝脏常规病理制片。并利用以上实验所确立的小鼠急性肝损伤模型,测试样品的护肝功能。结果0.125％、0.25％、0.5％、1.0％CCl4各剂量组血清ALT与AST都比溶剂对照组高,差别有显著性意义(P<0.05)。CCl4各剂量组动物的肝脏病理变化以肝细胞气球样变及肝细胞坏死这两类型为主,其中0.125％、0.25％、0.5％、1.0％剂量组的肝脏病理损伤都比与溶剂对照组明显,差异有显著性意义(P<0.05)。用0.125％CCl4小鼠腹腔注射造模测试样品的结果显示,该受试样品具有一定护肝作用。结论建立了0.125％CCl4腹腔注射制造的小鼠急性肝损伤模型,可应用于保健食品护肝功能的筛选。     

左卡尼汀对四氯化碳致动物肝损伤的保护作用

[目的]研究左卡尼汀(L-carnitine,LC)对小鼠和大鼠实验性肝损伤的保护作用和机制.[方法]复制四氯化碳(CCl4)所致急性和慢性肝损伤的动物模型(小鼠腹腔注射CCl4,大鼠皮下注射CCl4).将受试动物随机分为正常对照组,CCl4模型组,LC组,硫普罗宁片(tiopronin tablets)对照组或水飞蓟片(legalon tablets)组.用酶生化法测定血清生化指标谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的水平,总胆红素(T-BIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白球比值(A/G),肝组织超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和抗超氧阴离子能力(A-ASC)的活性、总抗氧化能力(T-AOC)以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量.同时计算肝系数(liver index,LI),行慢性肝损伤组织病理学检查.[结果]经口给予各剂量LC(0.25-1.0 g·kg-1)后急性肝损伤动物血清ALT、AST及LI均明显降低,呈现剂量依赖性(P＜0.05,P＜0.01),大鼠和小鼠肝组织内SOD、GSH-px、A-ASC的活性及T-AOC水平均升高(P＜0.05,P＜0.01),而 MDA的含量随LC剂量的升高而降低(P＜0.05,P＜0.01).0.15 g·kg-1的LC能显著降低慢性肝损伤大鼠血清ALT、AST及LI、T-BIL(P＜0.01),增加TP、ALB和A/G比值(P＜0.01),并有效减轻大鼠肝组织病理性改变.[结论]LC对CCl4所致的动物急慢性肝损伤均具有保护作用,其机制与其抗氧化特性有关.     

灵芝三萜对化学性肝损伤保护作用研究

目的探讨服用灵芝三萜对小鼠因CCl4诱导的肝损伤的保护作用。方法连续30d给予动物受试物后,模型组及各剂量组动物给予3.2mg/ml的CCl4染毒,测定ALT、AST,并取肝脏进行组织病理学检查。结果灵芝三萜可明显抑制CCl4引起小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的升高,试验结束时,模型组ALT值为9658.5U/L,中、高剂量组分别为5899.2、3773.3U/L;模型组AST值为4962.8U/L,高剂量组为1999.9U/L,并能改善和恢复肝脏组织的病理指标。结论灵芝三萜对由CCl4引起的肝脏损伤有较好的保护作用。     

大豆、枸杞子、山楂复合提取物对小鼠化学性肝损伤的保护作用

目的 :　研究大豆、枸杞子、山楂复合提取物对小鼠化学性肝损伤的保护作用。方法 :　设立空白对照、肝损伤对照和 0 .0 6、0 .2 0、0 .60 g/( kg· bw)复合提取物五组 ,分别建立小鼠CCl4 肝损伤模型和乙醇肝损伤模型 ,4w后 ,前者测定血清中丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶 ( AST)活性 ,同时观察肝脏组织病理 ;后者测定肝匀浆中丙二醛 ( MDA)、谷胱甘肽( GSH)和甘油三酯 ( TG)含量 ,同时观察肝脏病理。结果 :　 CCl4 肝损伤模型 :复合提取物中剂量组的血清 ALT及中、高剂量组的血清 AST水平均较 CCl4 对照组降低 ,低剂量组发生肝细胞坏死和中、高剂量组发生炎症细胞浸润的程度明显较 CCl4 对照组轻。乙醇肝损伤模型 :低、高剂量组MDA和各剂量组 TG含量以及低、中剂量组脂肪变性评分均明显低于乙醇对照组。结论 :　大豆、枸杞子、山楂复合提取物对 CCl4 和乙醇诱导的小鼠化学性肝损伤有保护作用。     

豚鼠三氯乙烯中毒性肝损伤的作用剂量研究

目的掌握三氯乙烯(TCE)引起中毒性肝损伤的作用剂量。方法①取FMMU白化豚鼠25只,随机分成5组,每组5只,分别皮内注射TCE0、167、500、1500、4500mg/kg,48h后处死动物取血清分析丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB),取肝脏观察病理变化;②取FMMU白化豚鼠12只,随机分成2组,分别涂皮TCE0、900mg/kg,48h后处死动物,处理同上。结果与对照组(0mg/kg)相比,皮内注射TCE48h后4500mg/kg组的ALT、AST均升高(P<0.01),TP、GLB下降(P<0.05);1500mg/kg组AST升高(P<0.05)。4500mg/kg组动物均见明显的肝细胞脂肪变性,部分动物肝窦扩张,并见炎细胞浸润,肝细胞局灶性坏死;1500mg/kg组个别动物血管周围肝窦轻度扩张。与对照组比较,TCE900mg/kg涂皮组的观察指标未见显著异常。结论TCE皮内注射剂量低于500mg/kg,涂皮剂量低于900mg/kg时,都不会导致明显的肝损伤。TCE急性中毒性肝损伤病理学变化以脂肪变性为主。     

全芝孢子粉对化学性肝损伤保护作用的研究

目的探讨全芝孢子粉对化学性肝损伤保护作用。方法分别以0.33、0.67、2.00g/kgBW三个剂量对小鼠每日进行经口灌胃,连续30d后给予CCl4染毒,取血清测定ALT、AST,同时取肝脏进行组织病理学检查。结果CCl4模型对照组小鼠的ALT、AST含量比空白对照组高(P<0.05),低、中剂量组的ALT值与CCl4模型对照组比较,有下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论全芝孢子粉对CCl4化学性肝损伤有保护作用。     

葛根-红景天口服液对四氯化碳诱发急性肝损伤的保护作用

[目的 ]　观察葛根—红景天口服液对小白鼠脂质过氧化和转氨酶活性的影响以及肝脏病理学变化 ,并探讨其可能机制。　 [方法 ]　以四氯化碳 (CCl4)染毒小白鼠为肝损伤动物模型 ,按“保健食品功能学评价程序和检验方法”检测。　 [结果 ]　与四氯化碳模型组比较 ,葛根 -红景天中、高剂量组均可明显降低血清谷草转氨酶 (ALT)、血清谷丙转氨酶 (AST)活性和三酰甘油 (TG)、肝丙二醛 (MDA)含量 ;升高还原型谷胱甘肽 (GSH )含量。葛根 -红景天中、高剂量组可改善肝细胞退行性变 ,且高剂量组可明显减轻四氯化碳引起的肝细胞坏死。　 [结论 ]　葛根 -红景天口服液具有明显减轻由四氯化碳所致的肝脂质过氧化损害的作用 ,可能与其能清除自由基有关     

复肝肽对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨复肝肽对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠化学性肝损伤的保护作用.方法 将ICR小鼠随机分为5组,1个正常对照组、1个CCl4模型对照组和高、中、低剂量复肝肽 CCl4组(复肝肽的剂量分别为2.5、5.0、10.0 ml/kg),每组10只.采用CCl4致小鼠化学性肝损伤模型,观察各组小鼠肝损伤情况.结果 与CCl4模型对照组比较,中剂量复肝肽 CCl4组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);肝脏组织细胞变性、坏死程度明显减轻,差异有统计学意义(P＜0.05).与CCl4模型对照组比较,高剂量复肝肽 CCl4组小鼠肝脏组织细胞变性程度减轻,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 复肝肽对四氯化碳急性染毒致小鼠肝损伤的愈复有促进作用.     

Protection against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity by pretreating rats with the hemisuccinate esters of tocopherol and cholesterol.

Previous studies have demonstrated that alpha-tocopheryl hemisuccinate (TS) protects hepatocyte suspensions from chemical-induced toxicity. It has been suggested that TS cytoprotection is related to unique properties of the TS molecule or is dependent on the cellular release and activity of unesterified alpha-tocopherol (T). To test the unique cytoprotective nature of TS in vivo, the protective ability of T and tocopherol esters against carbon tetrachloride (CCl4)-induced hepatotoxicity in rats was examined. Hepatoprotection [determined by serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels and histopathology] was not observed after T (or tocopheryl acetate and tocopheryl nicotinate) administration, even though this treatment resulted in a fivefold elevation in hepatic T content. Only pretreatment with TS (100 mg/kg, intraperitoneally) resulted in partial hepatoprotection against CCl4 (2.9 g/kg, orally) toxicity. These findings suggest that hepatoprotection results not from the cellular accumulation of T but rather from the intact TS molecule. To test this hypothesis, the hepatoprotective capacity of cholesteryl hemisuccinate (CS), unesterified cholesterol, and cholesteryl acetate (CA) was examined against CCl4 toxicity. As observed with the tocopherol derivatives, pretreatment with unesterified cholesterol or CA demonstrated no protective ability. However, when rats were pretreated with CS (100 mg/kg), the hepatotoxic effects of CCl4 (elevated serum AST and ALT levels and centrilobular necrosis) were completely prevented. The prevention of CCl4-induced hepatotoxicity by CS and TS do not appear to result from an alteration in hepatic drug metabolism. These data clearly demonstrate that CS and TS are unique and powerful cytoprotective agents against CCl4 hepatotoxicity in vivo.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

甲醛致扩张性简单串联重复序列突变小鼠子代对四氯化碳和苯暴露易感性研究

目的 探讨甲醛染毒致基因组扩张性简单串联重复序列(ESTR)突变小鼠的子代对外源性化学物的易感性.方法 选择经甲醛染毒小鼠繁殖的有ESTR突变的F1子代小鼠(H组)与对照组小鼠(C组),在洁净环境中饲养传代至F10代.以F5和F10代小鼠分别建立四氯化碳(CCl4)致小鼠肝脏损伤模型(CCl4处理组腹腔注射含有CCl4的橄榄油10 ml/kg,CCl4浓度分别为0.05%、0.50%和5.00%)和苯致小鼠血液毒性模型(腹腔注射苯染毒剂量分别为500、1000 mg/kg).分别测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活力及肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,观察肝脏组织病理学变化以评价肝氧化损伤程度;检测小鼠胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率以评价苯的血液毒性.结果 C组F5代0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组小鼠血清中ALT、AST活力,F10代3个CCl4染毒剂量组ALT活力和0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组AST活力,H组F5、F10代3个CCl4染毒剂量组ALT活力和0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组AST活力均明显高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与溶剂对照组比较,C组F5、F10代0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组小鼠肝匀浆中SOD活力明显降低,F10代0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组小鼠肝匀浆中MDA含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);H组F5代0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组,F10代5.00%CCl4染毒剂量组小鼠肝匀浆中SOD活力明显降低,F5代3个CCl4染毒剂量组,F10代0.50%、5.00%CCl4染毒剂量组小鼠肝匀浆中MDA含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).甲醛染毒后基因组ESTR突变的F5代小鼠对CCl4的相对易感性比对照组相应子代明显增加,而F10代小鼠对CCl4的相对易感性明显降低.CCl4染毒后小鼠肝脏细胞坏死和脂肪变性均呈现剂量-效应关系,而且在H组明显较C组严重.C组及H组苯染毒小鼠骨髓细胞微核率(C组500 mg/kg苯染毒组:F5代为5.88‰±4.55‰,F10代为8.25‰±2.06‰;C组1000 mg/kg苯染毒组:F5代为7.50‰±6.99‰,F10代为10.67‰±1.16‰;H组500 mg/kg苯染毒组:F5代为7.88‰±3.09‰,F10代为9.20‰±1.30‰;H组1000 mg/kg苯染毒组:F5代为9.63‰±4.34‰,F10代为13.33‰±2.08‰)随苯剂量的增加而增加,与溶剂对照组(C组F5代为1.13‰±0.35‰,F10代为1.20‰±0.82‰;H组F5代为1.25‰±0.46‰,F10代为1.33‰±1.03‰)的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 甲醛暴露引起的基因组ESTR突变可改变子代小鼠对CCl4和苯的易感性.ESTR突变可能是影响机体对化学物易感性的生物学标志,其分子机制有待进一步阐明.

Abstract：

Objective To investigate the susceptibility to carbon tetrachloride and benzene in offspring of expanded simple tandem repeats (ESTR) mutation mice exposed to formaldehyde (FA). Methods F5 and F10 offspring (200 mg/m3 ×2 hours) served as H group and ICR mice were used as control group(group C). The F5 and F10 offspring were exposed to 10 ml/kg carbon tetrachloride at the doses of 0.05%, 0.50% or 5.00% for 24 hours, respectively or 500 or 1000 mg/kg benzene for 24 hours, respectively by intraperitoneal injection. Serum alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST) and the hepatic superoxide dismutase (SOD) or malondialdehyde (MDA) were detected; also the hepatic pathological changes were observed under light microscope; the micronucleus in sternum bone marrow cells as the biomarker of benzene blood toxicity were measured. Results ALT and AST activities in group C of F5 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4, ALT in groups C and H of F10 mice exposed to 0.05%, 0.50%, 5.00% CCl4, AST in groups C and H of F10 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4 were significantly higher than those in controls, respectively (P<0.05); as compared to the control, hepatic SOD activities in group C of F5 and F10 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4, in group H of F5 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4, and F10 mice exposed to 5.00% CCl4 were significantly reduced, respectively (P<0.05); however, MDA contents in group C of F10 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4, in group H of F5 mice exposed to 0.05% and 0.50%, 5.00% CCl4 and F10 mice exposed to 0.50% and 5.00% CCl4 were significantly increased than those in control group, respectively (P<0.05). The susceptibility to CCl4 in ESTR mutation F5 mice exposed to FA was significantly higher than that in control F5 mice, but the susceptibility to CCl4 in ESTR mutation F10 mice exposed to FA was significantly lower than that in control F10 mice. The histopathological examination showed that the injury of hepatocytes in C and H groups significantly increased CCl4 doses, and the injury of hepatocytes in H group was higher than that in C group. The micronuclear rates in C and H group mice exposed to benzene (500 mg/kg C group, F5 and F10 mice; 1000 mg/kg C group, F5 and F10 mice; 500 mg/kg H group, F5 and F10 mice; 1000 mg/kg C group, F5 and F10 mice) were 5.88‰±4.55‰, 8.25‰±2.06‰, 7.50‰±6.99‰, 10.67‰±1.16‰, 7.88v±3.09‰, 9.20‰±1.30‰, 9.63‰±4.34‰ and 13.33‰±2.08‰, respectively, which were significantly higher than those (1.13‰±0.35‰, 1.20‰±0.82‰, 1.25‰±0.46‰, 1.33‰±1.03‰) in the solvent control group(P<0.05 or P<0.01). Conclusion FA could result in the change of susceptibility to CCl4 and benzene in offspring of ESTR mutation mice. ESTR mutation may be a biomarker of the susceptibility to chemicals, but the molecular mechanisms should be investigated in the future.     

紫苏提取物对化学性肝损伤保护作用的研究

目的研究紫苏提取物(Perilla frutescens extract,PE)对急性化学性肝损伤的保护作用。方法80只雄性KM小鼠(体重20±2g)随机分为8组:正常对照组(NC),模型对照组(MC),阳性药联苯双酯(DDB)组(200mg/kg),迷迭香酸(rosmarinic acid,RAD)低、高剂量预防组(11、44mg/kg),PE低、中、高剂量预防组(30、60、120mg/kg)。NC、MC组灌胃生理盐水,其它各组灌胃同等容量的相应药物,每天给药1次。实验20d后,用四氯化碳(CCl4 0.05ml/kg)和乙酰氨基酸(APAP 250mg/kg)腹腔注射分别制作急性化学性肝损伤模型。测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、甘油三酯(TG)含量,肝组织匀浆超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量,并观察肝脏病理改变。结果PE(120mg/kg)能显著降低CCl4与APAP诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST活性、TG含量,升高肝脏SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量能明显减轻肝组织损伤程度;PE对正常小鼠血清ALT、AST、TG无影响。结论PE对CCl4或APAP诱导的小鼠急性化学性肝脏氧化损伤具有显著保护作用。     

菇精蛋白多糖对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的研究菇精蛋白多糖对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法清洁级ICR小鼠60只,随机分成低、中、高、溶剂对照和模型对照组,三个剂量组动物每日经口灌胃给予受试物,溶剂对照组和模型对照组给予蒸馏水,于实验第30 d模型组及各剂量组动物按0.01 ml/g.bw一次灌胃给予CCl4染毒,溶剂对照组给予玉米油,24 h后取血测定ALT、AST,取肝脏进行组织病理学检查。结果各剂量组均能抑制血清ALT、AST值的升高,减轻肝组织的病理损伤。结论菇精蛋白多糖对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。