HBV核心蛋白结构与功能及其在基因治疗策略上的应用

核心蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制过程起关键的作用。近年来对HBV核心蛋白(HBc)单体及其形成的核壳结构与功能有了深入的认识,HBc基因特定部位中插入外源基因后,其产物在细胞内仍能正确地折叠和自身装配,因而有可能在细胞内表达假HBc并掺人240个野生型HBc后,共同形成核壳结构,抑制其功能的发挥,干扰HBV复制。本文就HBc结构与功能区域的基础生物学及其在基因治疗策略上的应用进展作了综述。     

血清HBsAg滴度与HBcAg及HBV-DNA检测临床意义探讨

乙型肝炎 (乙肝 )病毒 (HBV)颗粒 ,又称 Dane颗粒。其表面由表面蛋白 (HBs Ag)构成。核心由核心蛋白 (HBc Ag)构成。 Dane颗粒通过裂解剂裂解 ,经 EL ISA法检出 HBc Ag阳性或经荧光定量 PCR检测 HBV- DNA阳性 ,表示 HBV在体内复制〔1 - 3〕。 HBs Ag为乙肝病毒感染指标 ,为探讨其滴度高低与乙肝病毒在体内复制状况的相关性及其临床意义 ,本文对血清 HBs Ag滴度与 HBc Ag及 HBV- DNA检测结果 ,报告分析如下。1　材料和方法1 .1　临床标本1 .1 .1　 HBs Ag阳性、HBe Ag阳性、抗 - HBc阳性 (简称“大三阳”)患者血清 80…     

乙型肝炎病毒C基因多态性及其蛋白特性分析

目的 调查中学生人群乙型肝炎病毒(HBV)C基因多态性及其乙型肝炎病毒C蛋白(HBc)特性变化,为了解乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)变异提供理论依据.方法 采用HBV-C基因特异性引物对23份义乌地区大学生HBV携带者(血清学检测为大三阳患者)血清标本进行PCR扩增鉴定,并取21份PCR检测阳性产物直接测序;进一步用Vector NTI 8.0和DNA Star软件分析HBV-C基因多态性及HBc蛋白特性的变化.结果 23份标本中,HBV-C DNA阳性率91.30％;与标准基因序列(Gen Bank X01587)比较,HBV-C基因同源性为93.3％～95.1％;分别形成54种突变模式,其中一处由于核苷酸的改变,翻译的氨基酸也发生了相应的改变,此处氨基酸序列的第130处脯氨酸(P)突变为苏氨酸(T),其余标本均为同义突变;但突变处编码蛋白在亲水性、表面可及性及抗原性与标准株相比较无明显变化.结论 义乌市大学生HBV携带者HBV-C基因序列有一定程度的变异.     

前S1蛋白检测与血清丙氨酸氨基转移酶关系的探讨

乙型肝炎病毒（HBV）的外衣壳蛋白包括S蛋白、前S1蛋白（Pre—S1）和前S2蛋白，近年来研究资料显示，Pre—S1蛋白含有肝细胞膜受体，与病毒侵入肝细胞以及复制关系密切。血清中丙氨酸转移酶（ALT）在肝炎急性期升高明显，是判断肝脏损害程度的主要指标。我们对HBV感染者的Pre—S1、HBV—DNA和“二对半”指标阳性不同情况分组后对其结果进行分析比较，以探讨Pre—S1的检测与肝功能损伤的关系。     

MicroRNA-27a通过靶向HBx mRNA抑制HBV复制

目的　探究微小RNA-27a（microRNA-27a, miR-27a）在HBV感染中的作用及分子机制。方法　实时定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）方法检测miR-27a对HBV DNA和HBV RNA的影响。ELISA法检测miR-27a对HBeAg和HBsAg的影响。生物信息学预测miR-27a的靶基因,然后用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和western blot检测miR-27a是否能够直接靶向靶基因以及对靶基因mRNA和蛋白表达的影响。最后用qRT-PCR检测HBV蛋白表达对miR-27a的影响。结果　MiR-27a能抑制HBV DNA、HBV RNA、HBeAg和HBsAg等HBV复制和表达的指标。生物信息学预测和双荧光素酶报告基因检测表明miR-27a能够直接靶向HBx,抑制HBx mRNA和蛋白表达。反之,HBx蛋白表达能抑制细胞内miR-27a的表达。结论　MiR-27a通过直接靶向HBx进而抑制HBV的复制和表达,可以作为一种新的治疗HBV感染的潜在靶点。     

HBV基因组内分子变异的临床意义

HBV基因组在正常复制周期可发生突变,导致出现新的变异株.本文综述了人体对HBV的体液免疫和细胞免疫,前核心基因的变异及其在不同地理区域与临床的联系,核心基因、前S基因和HBsAg变异的临床意义以及HBsAg阴性的肝病.     

乙型肝炎血清学标志临床意义的再认识

随着检测技术的发展，对乙型肝炎血清学标志（HBVM）临床意义的认识正在逐渐深入和不断更新。高度敏感和特异的聚合酶链反应（PCR）用于检测血清和其它临床标本中HBVDNA，使对HBVM临床意义有了新的认识。人群中存在HBsAg阴性的HBV携带者，相当数量HBsAg阴性的慢性肝病患者为HBV感染所致；抗－HBs出现后仍可有HBV复制；单项抗－HBc阳性者中确有部分为HBV低水平携带；单用HBeAg和抗－HBe作为HBV复制和传染性指标是不可靠的。     

HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达

目的 研究HB4颗粒为呈现载体的阳V多表垃复合基因在哺乳动物细胞NS-l内的表达。方法 PCR扩增HBc 1-72aa及93-183aa编码序列并合成HBV多表位复合基因，定向克隆至pcDNA3．1( )。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆。阳性质粒以Lipofetamine介导转染NS-l细胞，通过ELISA及间接免疫荧光等方法检侧细胞表达产物。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因。重组于成功转染NS-l细胞并表达HBc-Mep融合蛋白。结论 HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS-l内正确表达目的蛋白。为研究pHBc-Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。为后期检测核酸疫苗pHBcMep的细胞免疫效果提供靶细胞。     

人肺表面活性物质结合蛋白A的研究现状

本文综述了人肺表面活性物质结合蛋白Ａ（ＳＰ－Ａ）的研究现状，主要是其结构和功能，细胞内的合成和代谢以及其基因的结构和转录调控，ＳＰ－Ａ与临床的关系等。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与乙肝表面抗原大蛋白检测的临床意义

乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）S基因编码合成的HBV外膜蛋白由3种蛋白组成,包括主蛋白即乙肝表面抗原（HBsAg）、中蛋白（即HBsAg和Pre-S2蛋白）和大蛋白（即HBsAg、Pre-S1蛋白和Pre-S2蛋白,LHBs）。近年来,随着对HBV外膜蛋白在乙肝发病机制、感染与病毒复制等方面研究的深入,研究者们逐渐认识到HBV外膜大蛋白具有越来越重要的临床意义.     

乙型肝炎病毒血清标志物单独核心抗体阳性者中乙型肝炎病毒隐匿性感染的分子特性

目的 探讨乙肝血清标志物单独抗核心抗体(HBc Ab)阳性者中乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)隐匿性感染(occult HBV infection,OBI)流行状况和病毒分子特性。方法 应用ELISA方法对本院乙肝标志物检测单独HBc Ab阳性者进行复检,采用荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法对复检单独HBc Ab阳性者的HBV-DNA进行荧光定量,对病毒核酸检测阳性者扩增Pre S/S基因区并进行直接测序分析。结果 在总共复检的343列单独HBc Ab阳性者中,有338例样本复测HBc Ab单独阳性。定量PCR检测发现OBI者6例(1. 8%),其中成功测序4例。序列结果分析发现2例B2基因型,2例C1基因型。4例样本均在Pre S/S基因区发生了变异,S基因区变异多在B细胞表位和T细胞表位区,其中有3例样本存在a决定簇变异。结论 单独HBc Ab阳性者确实存在OBI,HBV基因组S区a决定簇内存在变异,可能与OBI的发生相关。临床上要注意单独HBc Ab阳性者HBV隐匿性感染的漏诊。     

荧光定量PCR检测HBV DNA

目的：探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBV M)表现模式的关系。方法：对1207例慢性乙型肝炎患者进行血清HBV DNA荧光定量PCR分析，HBV M检测采用ELISA法。结果：血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关，HBsAg与HBeAg的存在影响HBV DNA水平变化。结论：HBbAg和HBV DNA有明显的相关，抗—HBe、抗HBc阳性者病毒末完全停止复制，只是复制水平降低。     

乙肝病毒C基因及其编码蛋白研究概述

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起的一种严重危害人类健康的传染病.HBV核心蛋白在病毒的装配、肝炎的发生、发展中起重要作用.本文就HBV核心蛋白的编码C基因、蛋白的结构功能及所引起的细胞免疫应答特点,特别是HBV核心相关抗原(HBV,HBcrAg)作为一种重要的血清学指标在临床上的应用以及BCP(basal core promoter)双突变在对乙肝病情的影响等作了概述.     

乙型肝炎的血清学诊断

一、概述乙肝的诊断通常依据流行病学资料、临床症状、体征、实验室检查及病原学检测综合判断，并排除其他疾患。肝活俭可进一步通过免疫理化测定病毒抗原，探查可能重叠感染的病因，判断组织学活动性及其伴随的病变。在利用临床、病原和组5只学相结合对急、慢性肝炎诊断和分型时，近来强调以病原学为基础，因病毒复制状态、病较变异及重叠感染与组织学严重程度的演变有关。：、HBV基因组及其血清标人物（一）HBVIk因组HBV为嗜肝DNA病毒，3ZE上的基因组有4个开放读架，分别编码有关病毒复制、伴活、结构蛋白及功能蛋白的病毒基因。在…     

人肺表面活性物质结合蛋白A的研究现状

本文综述了人肺表面活性物质结合蛋白Ａ的研究现状，主要是其结构和功能，细胞内的合成和代谢以及其基因的结构和转不调控，ＳＰ－Ａ与临床的关系等。     

健康促进企业和健康企业的内涵与实践辨析

[摘要]?微小RNA （microRNA, miRNA）在宿主-病毒相互作用中起关键调节作用，参与HBV感染、复制和HBV相关疾病的调节。细胞miRNA可以通过直接结合HBV转录物或通过靶向与HBV生命周期相关的细胞因子间接调节HBV转录和复制。反过来，HBV感染也可以影响宿主细胞内的miRNA水平。HBV和miRNA之间的相互作用在HBV复制和HBV相关疾病的发病机制中发挥重要作用。本文对miRNA与HBV的相互关系进行综述，为进一步探讨HBV感染致病的分子机制和开发新的抗HBV治疗策略提供参考。     

841人乙肝核心抗体(抗HBc)测定

研究资料证明,乙肝核心抗体(抗—HBc)是乙肝病毒(HBV)在机体内复制或感染后恢复的重要标志。1983年5—6月我们用酶联免疫吸附试验法(ELlSA)对广东省廉江县841人进行抗—HBC检测,现将结果整理汇报如下。     

HBV X基因及其表达产物的研究进展

本文概述了乙型肝炎病毒(HBV)X基因的转录、翻译与调控,X基因变异,X蛋白与HBV复制、肝细胞癌发生的关系,以及X蛋白对MHC激活的研究进展。     

乙型肝炎病毒X基因变异与隐匿性感染的关系

隐匿性HBV感染指患者血清HBsAg阴性,而血清和(或)肝组织HBV DNA阳性,其发生机制仍未明了.目前,对HBV基因变异的研究大多集中在S基因,而X基因是病毒复制的重要调节区,是转录、反转录和正链合成的起点,此处变异可能会影响到病毒的转录和复制,但由于X基因结构和功能的复杂性,目前对其变异与隐匿性HBV感染的关系研究相对较少.此文就HBV X基因变异对隐匿性HBV感染的发生和影响进行综述.     

乙肝病毒前S1蛋白检测的临床研究

目的 探讨血清前S1蛋白在乙型肝炎病毒（HBV）感染中的临床意义。方法 采用ELISA法对70例乙型肝炎患者前S1蛋白、乙肝血清标志物进行检测，同时进行HBV-DNA测定，并取30份体检正常者血清作为正常对照。结果 HBV高复制组（HBeAg、HBV-DNA、HBcAb阳性）中血清前S1蛋白阳性率高，低复制组阳性率较低。结论 血清HBV前S1蛋白是反映HBV复制状态、传染性和预后的良好指标之一。