镉诱导小鼠脾淋巴细胞超氧化物歧化酶活性和细胞毒性比较

目的 研究不同形态镉化合物诱导脾淋巴细胞（sLC)抗氧化水平和细胞毒性的差异。方法 纯化的镉金属硫蛋白（CdMT)和CdCl2作为有机镉和无机镉受试物，给予小鼠灌胃染毒2周和4周，检测sLC中镉含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、DNA链损伤和细胞免疫功能。结果 染镉后可诱导SOD活性，但细胞内镉含量增高、诱导DNA单链断裂（DNA－SSB)和免疫抑制在CdCl2和CdMT染毒组间存在明显差异。结论 有机镉经口染毒可诱导脾细胞毒性，但明显轻于无机镉；提示镉的不同存在形式是影响其细胞分布并导致免疫毒性差异的原因之一。     

重复性注射镉金属硫蛋白诱导小鼠肾脏金属硫蛋白基因的表达

目的　探讨重复性注射镉金属硫蛋白(CdMT)对小鼠肾脏金属硫蛋白(MT)基因表达的影响。方法　以β-actin为内参照,采用半定量RT-PCR方法检测重复性CdMT染毒后小鼠肾脏MT1和MT2基因的表达水平及与染镉剂量和肾皮质镉含量之间的相关性。结果　随着CdMT剂量的增加,MT1、MT2基因的表达水平都相应升高,当CdMT染毒总剂量达到0.60mg/kg时,肾皮质中MT1、MT2基因的表达水平分别为1.60±0.12及1.44±0.05,与相应的对照组(1.22±0.16及0.92±0.12)相比,均明显升高,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);肾皮质中MT1及MT2基因表达水平分别与肾皮质中镉的含量呈正相关,其相关系数分别为r=0.72(P<0.01)及r=0.71(P<0.01)。结论　镉对MT1及MT2基因表达具有较强的诱导能力;肾皮质中MT1和MT2基因表达的变化趋势基本相同     

外源性镉金属硫蛋白对小鼠脾淋巴细胞功能影响的研究

目的 分析外源性镉金属硫蛋白（CdMT）的免疫毒性。方法 采用分离纯化经诱导合成的CdMT作为受试物与CdCI2比较,经口给予BALB／C小鼠不同剂量染毒2周和4周,检测脾T淋巴细胞增殖和T细胞亚群评价细胞免疫功能。结果 与阴性对照和脱金属硫蛋白（Apo-MT)组相比,CdMT组和CdCI2组表现为T细胞增殖功能降低;L3T4^ 亚群减少、Lyt2^ 亚群升高、L3T4^ /Lyt2^ 比值降低;且在CdMT组的改变明显低于相同含量的CdCI2组。结论 外源性CdMT经口作用可体内脾淋巴细胞免疫抑制作用,并与染毒剂量和时间有关,但CdMT经口免疫毒性低于CdCI2;结果可为评价环境镉暴露的生物学作用提供依据。     

氯化镉和镉金属硫蛋白对大鼠肝细胞毒性的比较

无机镉(Cd)主要分布于肝脏,导致肝毒性损害。而镉金属硫蛋白(CdMT)则主要分布于肾脏,导致肾毒性损害。CdMT对培养的肾细胞毒性要比Cd大。但是CdMT对所有的培养细胞毒性是否都比Cd大,以及体内和体外毒性是否存在高度的相关尚不清楚。本研究旨     

镉金属硫蛋白灌胃小鼠后镉的细胞分布及毒性

目的 探讨镉金属硫蛋白（CdMT)灌胃小鼠染毒后镉的细胞分布及淋巴细胞毒性。方法 应用分离纯化的CdMT灌胃染毒小鼠4周，检测血红细胞镉（RBC－Cd）和脾淋巴细胞镉（sLC-Cd)的含量，及脾T淋巴细胞增殖功能、T细胞亚群和DNA单链断裂（DNA－SSBs)。结果 RBC－Cd和 LC-Cd在CdMT染毒后明显增高；脾淋巴细胞毒性表现为增殖减低，T细胞亚群改变和DNA－SSBs尾长增加，且与细胞内镉含量有明显相关。结论 经消化道途径接触CdMT可致镉的吸收和在淋巴细胞内分布，导致DNA损伤和细胞免疫功能抑制。     

重复性注射镉金属硫蛋白致小鼠肾脏的急性损害

目的 探讨重复性镉金属硫蛋白（CdMT)注射对实验小鼠肾脏的急性损伤作用。方法 末次CdMT染毒64h后，观察肝、肾组织中镉、钙友及尿液中钙及总蛋白的变化情况。结果 随着染镉剂量的增高，肝及肾皮质中钙含量相应增加，并与染镉剂量成明显的剂量-反应关系，而且进入体内的镉主要蓄积在肾脏中；同时尿钙及尿蛋白也随着染镉剂量有增加的趋势；结论 重复性CdMT染毒主要引起实验性小鼠肾脏的损害，钙稳态失衡是可能的毒作用机制之一。     

富硒乳酸菌对镉暴露机体自然杀伤细胞活性调节

目的探讨镉暴露机体脾脏自然杀伤(NK)细胞活性变化及富硒乳酸菌对其的调节作用。方法72只健康成年雌性SD大鼠，随机分成4组，即对照组(C组)、低剂量镉染毒组(L-CA组)、中剂量镉染毒组(M-Cd组)、高剂量镉染毒组(H-Cd组)，C、L-CA、M-CA、H-CA组分别饲喂含镉0，2，5，10mg／kg饲料的全价饲料进行镉暴露实验，连续9周。另选择48只健康成年雄性小鼠，随机分成C组、Cd组、镉染毒 中剂量富硒乳酸菌制剂保护组(Cd-MSe组)、镉染毒 高剂量富硒乳酸菌制剂保护组(Cd-HSe组)，CA、CA-MSe、CA-HSe组小鼠每天分别按含镉0．5mg／kg体重腹腔注射CdCl2溶液进行镉暴露，C组注射与Cd组同等剂量的生理盐水。连续12d。结果在整个实验期内，慢性镉暴露各组大鼠脾脏NK细胞活性均下降，且呈明显剂量-时间-反应关系；急性镉暴露小鼠NK细胞活性明显低于C组，而Cd-MSe组高于或显著高于Cd组，与C组接近，CA-HSe组虽高于CA组但低于C组和Cd-MSe组。结论急、慢性镉暴露均引起NK细胞活性下调，富硒乳酸菌能有效地对镉造成的机体损伤有保护作用，调节和改善NK细胞活性。     

亚慢性镉暴露对雄性大鼠生殖毒性的研究

目的　探讨亚慢性镉暴露对雄性大鼠生殖系统的毒作用。方法　 2 4只清洁级SD系雄性大鼠 ,分为对照组、低、中及高剂量染镉组。分别给予 0 ,0 1,0 2 ,0 4mgCd2 /kg体重皮下注射染毒 5周。实验结束后剖杀动物取睾丸、附睾组织待检。结果　 (1)高剂量组睾丸脏器系数高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;各染镉组精子数、活动率均低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而畸形率明显上升 (P <0 0 5 ) ;(2 )中、高剂量组睾丸组织血色素水平与丙二醛 (MDA)含量显著性升高 (P <0 0 5 ) ,而金属硫蛋白 (MT)含量只有高剂量组高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　亚慢性镉暴露对大鼠睾丸有明显的毒性作用 ,其机制与镉致睾丸脂质过氧化、睾丸MT不易被诱导或保护作用较低有关。     

异搏定和氯丙嗪对镉慢性肾毒性影响的实验研究

目的:对慢性镉染毒(Cd)大鼠投予异搏定(Ver)和氯丙嗪(CPZ),探讨这两种物质对镉慢性肾损伤的影响。方法:实验用4组大鼠,单纯镉染毒组和Ver、CPZ预处理组均皮下注射含Cd 1．4mg／kg的氯化镉(CdCl2)溶液,每周3次,连续6周。Ver和CPZ预处理组在每次皮下注射CdCl2前1h,分别向腹腔注射Ver 4mg／kg和CPZ 5mg／kg,,对照组大鼠在相同时间注射生理盐水5ml／kg,,在实验开始后第2,4,6周时收集尿样,测定尿N-乙酰-B—D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活力和尿蛋白含量。最后一次注射后24h处死大鼠,采集血液,取肾脏,测定血清尿素氮(BUN),血、肾皮质和尿中的Cd、Ca及血、肾皮质中丙二醛(MDA)含量。结果镉染毒4周时,与单纯镉染毒组比较,Ver和CPZ预处理组的尿NAG活力和尿蛋白含量均明显降低;镉染毒6周时,Ver和CPZ预处理组的血Cd、血清BUN、尿Ca及肾皮质MDA含量均明显降低。CPZ预处理组肾皮质Cd和血MDA含量也明显降低。结论:Ver和CPZ具有防止镉所致慢性肾损伤的作用,其机制可能是减轻镉对肾脏的脂质过氧化损伤。     

重复性注射镉金属硫蛋白致小鼠肾脏损伤的时程变化

目的 探讨重复性短时间间隔皮下注射镉金属硫蛋白（CdMT)对小鼠肾脏损伤的时程变化。方法 染毒组小鼠给予首次高剂量（0.05mg/kg)和随后重复4次相同低剂量（0.025mg/kg)的CddMT,每次间隔时间为2h,在首次染毒后12、24、72、168和336h处死动物,对照组注射相同体积的生理盐水,观察肝、肾皮质组织中镉、钙以及尿液中镉、钙及尿蛋白的变化。结果 皮下注射CdIMT后,肾皮质中钙含量均高于对照组,在染CdMT后第24及336h肾皮钙含量明显升高,且随着时间的延长尿蛋白、尿钙也有升高的趋势,尿蛋白、尿钙的高峰均出现在注射CdMT后168h,结论 重复性短时间间隔皮下注射CdMT造成小鼠肾脏损害可维持较长的时间,钙稳态失衡是可能的毒作用机制之一。     

镉对Ⅱ型糖尿病小鼠金属硫蛋白基因表达的诱导与镉肾脏毒性之关系

目的 探讨金属硫蛋白基因诱导表达能力与Ⅱ型糖尿病小鼠（ob/ob小鼠）对镉金属硫蛋白肾脏毒性易感性之间的关系。方法 以β-actin为内参照,采用半定量RT－PCR方法检测在相同肾皮质镉水平条件下,镉对ob/ob小鼠和瘦型小鼠（正常小鼠）肾皮质MT1和MT2基因的诱导表达。结果 镉对ob/ob小鼠肾皮质MT1和MT2基因诱导表达的能力过低,而镉对瘦型小鼠MT1及MT2基因具有明显的诱导能力。结论 本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉肾脏毒性易感的可能原因与糖尿病小鼠肾中镉对MT基因的诱导能力过低有关。     

Ⅱ型糖尿病小鼠对镉金属硫蛋白致肾脏毒性的易感性

[目的]探讨Ⅱ型糖尿病小鼠对重复性镉金属硫蛋白（CdMT)染毒致肾脏损伤的易感性。[方法]18只6月龄雄性Ⅱ型糖尿病小鼠（Umea ob/ob小鼠）和18只同种系非Ⅱ型糖尿病的雌性瘦型小鼠（正常小鼠）,各自随机分为3个组,采用背部皮下注射方式染毒。为了使两种类型小鼠肾皮质中达到相似的染镉浓度,根据两种小鼠肾脏体系数之比值来确定不同的CdMT染毒剂量。[结果]ob/ob小鼠尿NAG、尿钙及肾皮质钙含量在低肾皮质镉剂量时升高,而瘦型小鼠在试剂量时的相应指标无明显改变。[结论]本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉的肾脏毒性易感。     

Immunization with plasmid DNA encoding the integral membrane protein, Sm23, elicits a protective immune response against schistosome infection in mice.

Schistosomes are helminth parasites infecting at least 200 million people worldwide. In this study, we evaluated the feasibility of using a nucleic acid vaccine to induce protective immune responses to the Schistosoma mansoni integral membrane protein Sm23. C57BL/6 mice were immunized by intramuscular injection in three separate vaccination trials. ELISA and Western Blot analyses indicated that mice immunized with a DNA plasmid construct encoding Sm23 (Sm23-pcDNA) generated specific IgG for Sm23, while sera from mice immunized with the control pcDNA plasmid did not. The vaccine elicited IgG(2a), and IgG(1) antibody isotypes. We also tested the adjuvant activity of IL-12 and IL-4 on humoral responses to Sm23. Co-immunization with plasmid encoding IL-12 did not affect the level of anti-Sm23 IgG(2a), but did reduce the IgG(1) level. In contrast, co-injection with a plasmid encoding IL-4 significantly reduced the level of anti-Sm23 IgG(2a), while the level of IgG(1) was largely unchanged. Importantly, the Sm23-pcDNA vaccine provided statistically significant levels of protection against challenge infection (21-44%, P<0.001-0.02). Co-administration of plasmids encoding either IL-12 or IL-4 did not significantly enhance this protective effect.     

硒激活Nrf2对镉致小鼠肝脏氧化损伤保护作用的研究

摘要:目的　研究硒对镉暴露小鼠肝脏转录因子（Nrf2）表达的影响及其保护作用的机制。方法　60只ICR小鼠随机分为5组,对照组采用去离子水灌胃（10 ml/kg）,镉暴露组用氯化镉（7 mg/kg）灌胃,硒处理组分别采用不同浓度的亚硒酸钠（0.05、0.1、0.2 mg/kg）灌胃后用氯化镉（7 mg/kg）灌胃,30 d后颈椎脱臼处死。光镜下观察肝脏形态学变化,测定血清谷丙转氨酶（ALT）和血清谷草转氨酶（AST）、肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）,蛋白印迹法（Western blot）检测肝脏Nrf2表达水平。结果　光镜观察镉暴露组小鼠肝脏结构形态有明显损伤,而硒处理组（0.2 mg/kg）小鼠肝脏形态损伤不明显。镉暴露组AST、ALT、MDA、ROS均高于对照组,有统计学意义（P＜0.05）,硒处理组（0.2 mg/kg）AST、MDA、ROS低于单独镉暴露组,差异有统计学意义（P＜0.05）。镉暴露组和硒处理组肝脏Nrf2的表达量均高于对照组,其中硒处理组Nrf2（0.1、0.2 mg/kg）的表达量明显高于镉暴露组（P＜0.05）。结论　硒可通过抑制ROS和上调Nrf2蛋白表达,对镉暴露小鼠肝脏的氧化损伤具有保护作用。     

镉对人胚肾细胞中经典瞬时受体电位通道mRNA表达影响

目的观察不同质量浓度的氯化镉(CdCl2)染毒后人胚肾细胞(HEK 293T细胞)经典瞬时受体电位通道(TRPC)6个亚型mRNA表达水平的改变,在mRNA水平上探讨镉对肾细胞钙通道的影响。方法 HEK 293T细胞分别暴露于7.5、15.0、30.0、45.0和60.0μmol/L的CdCl28 h后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力;实时荧光定量聚合酶链反应法检测0、15.0和30.0μmol/L CdCl2作用8 h和30.0μmol/L CdCl2染毒4 h后TRPC 6个亚型mRNA表达水平。结果以对照组(CdCl20μmol/L)HEK 293T细胞存活率为100%,各不同质量浓度的染毒组细胞存活率分别为79.40%、77.29%、72.26%、70.25%、60.80%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。经CdCl2染毒后,各染毒组HEK 293T细胞的TRPC 6个亚型mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 CdCl2可能引起HEK 293T细胞的TRPC基因mRNA的表达水平发生改变。     

绞股蓝总皂甙对氯化镉所致睾丸生殖细胞毒性的影响

目的：观察绞股蓝总皂甙（GPS）对雄性小鼠染镉后对睾丸生殖细胞的保护作用。方法：预先灌服GPS200mg/kg／d，连续16d后，腹腔注入氯化镉（Cd)3mg/kg/d 5d，观察睾丸病理切片和精子畸形率。结果：预服GPS的小鼠染镉后，其精子畸形率 比单纯染镉组下降53．01％（P＜0．01）。睾丸病理切片单纯染镉组出现病理改变，与预服GPS组相比未见明显差别。表明GPS对Cd所致小鼠精子畸形率有较好的抑制作用。结论：GPS可用于防治Cd对生殖系统的损害作用。     

Porcine Ig isotypes: function and molecular characteristics

In pigs, protection against the toxigenic extra-cellular bacterium Actinobacillus pleuropneumoniae was correlated with an increased IgG(1):IgG(2) ratio of haemolytic toxin-specific antibodies. In all species so far studied, IgG isotype expression is controlled by Type 1 (IFN-gamma, IL-12) and Type 2 (IL-4, IL-10) cytokines which dictate immune response polarization to cell-mediated (CMI) or antibody-mediated immunity (AMI), respectively. Thus, immunoglobulin (Ig) isotypes reflect Type 1 or Type 2 immune responses. Immunoglobulin isotype production by porcine B-cells cultured in the presence of recombinant porcine (rp) cytokines varies by individual, however pigs tend to generate a high IgG(1):IgG(2) ratio in response to rp IL-10 and the inverse in response to rp IFN-gamma or rp IL-12. Differential Ig isotype production should favor an isotype with a functional advantage to control the inciting infection and disease. However, functions of porcine Ig isotypes have not been described. To compare function of porcine IgM, IgG(1) and IgG(2) of defined specificity for hen eggwhite lysozyme (HEWL), Ig isotypes were affinity purified from serum by HEWL specificity and by isotype-specific mouse monoclonal antibodies. Their ability to activate complement (C') and to opsonize was tested in vitro. Porcine IgG(2) had greater guinea pig C' activating ability than did IgG(1). Neither isotype opsonized HEWL-conjugated sheep erythrocytes in vitro. Amino acid sequence analysis of IgG isotypes revealed that all subclasses have putative C' binding sites but that IgG(2a), IgG(2b) and IgG(4) were more flexible in the middle hinge region than IgG(1) and IgG(3) and would likely activate C' more efficiently. Thus, porcine IgG isotypes associated with resistance and susceptibility to disease also differ in their actual and predicted biological functions.     

金属硫蛋白与镉中毒性肝肾损害的关系

目的观察亚慢性镉中毒性肝肾损害,并初步探讨金属硫蛋白（ＭＴ）与肝肾损害的关系。方法用Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射０．５ｍｇ／ｋｇＣｄ２＋的ＣｄＣｌ２３次／周,共１０周,染毒后不同时期处死大鼠,观察肝肾功能变化。结果染毒６周后,大鼠出现了明显的肝肾损害,相应组织中Ｃｄ∶ＭＴ的摩尔数之比均超过７,且随染毒总剂量的增加,Ｃｄ∶ＭＴ值明显增加,病变程度加重。结论肝肾是亚慢性镉中毒的靶器官,非ＭＴ结合的镉可能是损害肝、肾的主要成分。     

镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响

目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子-kappaB(NF-κB)活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞,采用B55δ编码基因PPP2R2D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02-2R2D-PC1和L02-2R2D-PC3细胞株,以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80μmol/L的氯化镉(CdCl2)处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测细胞核内NF-κBp65蛋白的活化情况;荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较,CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高(Pearson’s r均P<0.05);与CdCl2组比较,冈田酸+CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加(P<0.05);与对照组比较,CdCl2组细胞G1期比例下降、S期比例增加(P<0.05);胞核p65蛋白水平增高,COX-2 mRNA水平上调;这种效应在不同细胞株之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期S期阻滞,这种效应与NF-κB信号通路的活化有关。