散发性结直肠癌组织中FHIT、MSH2蛋白的异常表达及其临床意义

背景与目的:脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)蛋白表达缺失是胃肠道肿瘤的频发事件,但在大肠癌却有争议;最近研究表明FHIT蛋白表达失活可能是错配修复蛋白,尤其是mutS同种组织蛋白2(mutShomolog2,MSH2)改变的结果。本研究旨在探讨FHIT、MSH2蛋白在散发性结直肠癌(sporadiccolorectalcarcinoma,SCC)组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测手术切除的84例SCC及其对应癌旁正常结直肠组织和23例肠腺瘤组织标本中FHIT、MSH2蛋白的表达。结果:FHIT蛋白在SCC组织、结直肠腺瘤组织、癌旁正常结直肠组织中阳性率分别为48.81%、73.91%和100%,三者的阳性率差异有显著性(P<0.05)。FHIT蛋白表达水平与SCC患者的年龄、性别及肿瘤部位、组织学类型无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、Dukes分期和淋巴结转移有关(P<0.05),在浸润深度越深、分化程度越低、Dukes分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中,FHIT蛋白低表达就越明显;而MSH2蛋白表达水平仅与Dukes分期有关(P<0.05)。SCC中FHIT蛋白表达与MSH2蛋白表达呈正相关(r=0.3728,P<0.01)。结论:(1)FHIT蛋白表达水平与SCC的恶性程度有关,可作为预测SCC浸润转移潜能的一项有意义的生物学指标;(2)SCC中FHIT、MSH2蛋白表达二者之间呈正相关。     

结直肠癌中FHIT、c-met基因表达与增殖的关系及其预后研究

目的　研究FHIT基因、c met基因和增殖细胞核抗原 (PCNA)在结直肠癌中的表达及其关系。方法　采用枸橼酸 微波 Sp免疫组织化学方法检测 5 2例蜡块标本中FHIT基因、c met基因及PCNA的表达。结果　c met基因在大肠癌组织中的表达显著高于正常黏膜中的表达 ,在组织学分级中由高到低依次增高 ,且组间相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。FHIT基因在正常黏膜中的表达显著高于癌组织中的表达 (P <0 0 5 )。FHIT基因、c met基因与淋巴结转移有关 ,PCNA与淋巴结转移无关。PCNA表达与c met表达呈正相关 (rs =0 3 84) ,与FHIT表达无相关性 (rs =0 165 ) ,FHIT与c met表达呈负相关 (rs =-0 5 3 5 )。结论　FHIT基因、c met基因表达与结直肠癌发生及发展有关 ,二者可共同作为结直肠癌预后的判断指标     

散发性结直肠癌组织中FHIT蛋白表达的研究

目的:探讨散发性结直肠癌组织中脆性组氨酸三联体(fragile histidinetriad,FHIT)蛋白表达情况及其与临床病理指标之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测84例手术切除的散发性结直肠癌组织中FHIT蛋白的表达。结果:FHIT蛋白在84例散发性结直肠癌中表达阳性率为48·81%。FHIT蛋白低或不表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位、组织学类型无关,P>0·05;而与肿瘤浸润深度和分化程度、Duck’s分期和淋巴结转移有关,P<0·05。在浸润深度越深、分化程度越低、Duck’s分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中,FHIT蛋白低表达就越明显。结论:FHIT蛋白表达缺失可能参与散发性结直肠癌的演化和进展。     

散发性结直肠癌组织中FHIT蛋白表达的研究

目的：探讨散发性结直肠癌组织中脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad，FHIT）蛋白表达情况及其与临床病理指标之间的关系。方法：采用免疫组化SP法检测84例手术切除的散发性结直肠癌组织中FHIT蛋白的表达。结果：FHIT蛋白在84例散发性结直肠癌中表达阳性率为48．81％。FHIT蛋白低或不表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位、组织学类型无关，P〉0．05；而与肿瘤浸润深度和分化程度、Duck’s分期和淋巴结转移有关，P〈0，05。在浸润深度越深、分化程度越低、Duck’s分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中，FHIT蛋白低表达就越明显。结论：FHIT蛋白表达缺失可能参与散发性结直肠癌的演化和进展。     

Bcl-2、Caspase-3在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨结直肠肿瘤中Bcl-2 和Caspase-3蛋白的表达及其临床意义.方法:取42例结直肠腺癌、10例正常结直肠黏膜组织,以免疫组化方法(S-P法)检测Bcl-2和 Caspase-3蛋白的表达,分析其表达与结直肠腺癌临床病理特征的关系.结果:Bcl-2、Caspase-3在正常组织和大肠癌组织中的表达差异具有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2和Caspase-3与大肠癌分级有关(P＜0.05),但与Dukes分期、淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:腺癌组织中Bcl-2和Caspase-3 可能参与了结直肠癌的发生、发展过程,对大肠癌及腺癌进行Bcl-2和Caspase-3基因检测有助于大肠癌的早期诊断及预后评估.     

结直肠癌组织中Survivin表达的临床病理学意义

目的 :研究凋亡抑制蛋白Survivin在结直肠癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法 :采用SP法检测 10 6例结直肠癌组织中Sur vivin的表达 ,分析Survivin表达与各临床病理因素的关系 ;应用Kaplan Meier法分析Survivin表达对结直肠癌生存率的影响。结果 :Survivin在结直肠癌组织中的表达率为 64 2 % ( 68/10 6) ,癌旁形态学正常的结直肠黏膜未见Survivin表达 ;Survivin在中、高分化结直肠癌表达阳性率 72 4% ( 63 /87) ,明显高于低分化结直肠癌( 2 6 3 % ,5 /19) ,P <0 0 5。Survivin表达与患者性别、肿瘤位置、浸润深度、淋巴结转移、远处转移以及Duke’s分期差异无统计学意义 ,P >0 0 5。Sur vivin阳性表达的结直肠癌患者 5年生存率为 42 6% ( 2 9/68) ,Survivin阴性表达患者为 68 4% ( 2 6/3 8) ,差异有统计学意义 ,P <0 0 5。结论 :凋亡抑制蛋白Survivin在结直肠癌组织中存在高表达 ,与结直肠癌预后有关 ,可作为判断结直肠癌预后的辅助指标。     

三联脆性组氨酸及血管内皮生长因子在大肠癌中的表达

 目的　研究三联脆性组氨酸（FHIT）基因和血管内皮生长因子（VEGF）在大肠癌中的表达情况及其与大肠癌发生、发展及转移的关系。方法　通过免疫组织化学SP法检测89例大肠癌、26例正常大肠黏膜组织标本中FHIT和VEGF的表达情况,分析二者表达与大肠癌临床病理特征的关系,并观察FHIT与VEGF在大肠癌中的表达有无相关性。结果　89例大肠癌中37例（41.6 %）、26例正常大肠组织中2例（7.7 %）可检测到FHIT基因表达降低甚至缺失,差异有统计学意义（P <0.01）。FHIT基因在大肠癌中的表达与肿瘤组织学分级、Duke分期和淋巴结转移有关（P＜0.05）,与患者年龄、性别无关。VEGF在大肠癌、正常大肠黏膜组织中的阳性率分别为71.9 %、30.8 %,差异有统计学意义（P＜0.01）。VEGF在大肠癌中的表达与Duke分期、淋巴结转移和年龄有关,与组织学分级和性别无关。大肠癌中FHIT基因的表达和VEGF表达无明显相关性。结论　FHIT基因表达降低和VEGF表达升高与大肠癌的发生、发展、浸润及淋巴结转移有关,二者可以做为大肠癌诊断及判断肿瘤恶性程度的指标。     

Bcl-2、Caspase-3在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨结直肠肿瘤中Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达及其临床意义。方法：取42例结直肠腺癌、10例正常结直肠黏膜组织,以免疫组化方法（S—P法）检测Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,分析其表达与结直肠腺癌临床病理特征的关系。结果：Bcl-2、Caspase-3在正常组织和大肠癌组织中的表达差异具有统计学意义（P〈O．05）;Bcl-2和Caspase-3与大肠癌分级有关（P〈0．05）,但与Dukes分期、淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：腺癌组织中Bcl-2和Caspase-3可能参与了结直肠癌的发生、发展过程,对大肠癌及腺癌进行Bcl-2和Caspase-3基因检测有助于大肠癌的早期诊断及预后评估。     

Survivin在乳腺癌中的表达及其与Caspase-3、PCNA表达的关系

目的探讨Survivin在乳腺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系.方法用免疫组化S-P法检测Survivin在正常乳腺组织(10例)、乳腺囊性增生组织(18例)、不典型增生组织(20例)和乳腺癌组织(50例)中的表达以及Caspase-3、PCNA在乳腺癌组织中的表达.结果Survivin蛋白在正常乳腺组织无表达,在乳腺囊性增生组织、不典型增生组织、乳腺癌组织中的阳性率分别为5.6%(1/18)、45.0%(9/20)、72.0%(36/50),差异有显著性(P＜0.05).Survivin蛋白的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),与年龄、是否绝经、肿瘤大小和组织学分级均无关.Survivin与Caspase-3的表达呈负相关(P＜0.01).Survivin蛋白表达阳性的乳腺癌PCNA的标记指数明显高于Survivin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞PCNA的标记指数(P＜0.01).结论Survivin蛋白在乳腺癌中表达上调,提示其通过抑制凋亡在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点.Survivin通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡.Survivin不仅参与凋亡的调控,还促进了细胞增殖.     

Livin在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其与FHIT、Caspase-3相关性的初步研究

目的研究Livin在皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达及其与脆性组氨酸三联体（FHIT）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测Livin、FHIT、Caspase-3蛋白在48例SCC、20例慢性溃疡及12例正常皮肤组织中的表达。结果Livin在SCC的表达（33／48）明显高于慢性溃疡组织（3／20）及正常组织（0／12）（P〈0．01）;Caspase-3及FHIT在SCC中的表达明显低于正常皮肤和慢性溃疡组织（P〈0．01）;Livin、Caspase-3表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0．05）。Livin、Caspase-3的表达与患者的年龄、性别以及肿瘤大小差异无统计学意义（P〉0．05）。SCC组织中Livin与Caspase-3（rs=-0．509,P：0．004）、FHIT（rs=-0．413,P=0．023）的表达呈负相关。结论Livin、FHIT、Caspase-3在SCC中的异常表达可能与SCC的发生、发展有关,并有可能成为SCC的预防和治疗的靶标。     

Bag-1和Caspase-3在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨抗凋亡基因Bag-1和Caspase-3在正常大肠黏膜和大肠癌中的表达变化及与大肠癌发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化SP法,分别检测15例正常大肠黏膜和66例大肠癌中Bag-1和Caspase-3蛋白表达情况。结果 Bag-1蛋白在正常肠黏膜、大肠癌中的阳性表达率分别为13.3%、74.2%。Caspase-3蛋白在正常大肠黏膜和大肠癌中的阳性表达率分别为46.7%、68.2%。Bag-1蛋白表达与大肠癌分化程度、Duke＇s分期及淋巴结转移有关（P〈0.05）,而Caspase-3蛋白表达与分化程度、Duke＇s分期及淋巴结转移无关（P〉0.05）。大肠癌中Bag-1的表达与Caspase-3明显相关（P〈0.05）。结论 Bag-1和Caspase-3参与了大肠癌的发生发展过程,Bag-1可作为判断大肠癌生物学行为的新的生物学指标。     

Fragile histidine triad gene expression and its corralation with mismatch repair protein in human sporadic colorectal carcinoma

TheFragileHistidineTriad(FHIT)gene,encompassingtheFRA3Bfragilesiteatchromosome3pl4.2,isacandidatetumorsuppressorgeneinvolvedinmultipletumortypesincludingcolorectalcarcinomas[1,2].LossofDNAmismatchrepairisacommonfindinginhereditarynonpolyposiscoloncancer(HNPCC)aswellasinmanytypesofsporadichumantumors[3,4].RecentstudieshavesuggestedthatFHITgeneexpressioninactivationcanbeaconsequenceofdefectsinmismatchrepairproteins,particularlyMLH1andMSH2[5].Tolookintothissituation,weusedimmunohistoc…     

结直肠癌中FHIT蛋白的异常表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌中脆性组氨酸三联体(FH IT)基因蛋白表达状况与临床病理指标的关系。方法采用半定量免疫印迹(W estern b lot)检测30例结直肠癌及其癌旁正常组织(≥5 cm)FH IT蛋白表达状况。结果30例癌组织有56.7%的FH IT蛋白表达异常,FH IT蛋白表达量与患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小及组织学类型无关(P>0.05)而与肿瘤的组织分化程度、浸润深度、Dukes分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。在浸润深度越深、分化程度越低、Dukes分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中,FH IT蛋白低表达越明显。结论FH IT蛋白表达状况可能与结直肠癌组织学分级、浸润程度、Dukes分期及淋巴结转移相关,提示FH IT蛋白表达降低可能对结直肠癌发生、发展具有重要作用。     

脂多糖(LPS)刺激NLRP3/Caspase-1炎症信号通路促进口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激NLRP3/Caspase-1炎症信号通路促进口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞的增殖和迁移作用。方法:qRT-PCR、WB和ELISA检测OSCC患者癌旁组织及癌组织、正常口腔黏膜上皮细胞系（NOK）和OSCC细胞系SCC25和HSC3中NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA及蛋白表达;采用qRT-PCR、WB、CCK-8和划痕愈合实验检测LPS刺激前后SCC25和HSC3中NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白表达及其对细胞增殖和迁移生物学特性的影响。结果:OSCC患者癌组织中NLRP3、Caspase-1和IL-1β mRNA和蛋白表达较癌旁组织明显升高,P值分别为:0.035 3、0.024、0.036 2、0.035 4、0.041 3 和 0.014 8;SCC25 与 HSC3 细胞系中mRNA及蛋白表达较NOK细胞系明显升高,分别为NLRP3（P＜0.000 1,P＜0.000 1,P＜0.01,P＜0.01）、Caspase-1（P＜0.000 1,P=0.000 1,P＜0.01,P＜0.01）、IL-1β（P=0.000 3,P=0.001 2,P＜0.001,P＜0.001）;1 μg/mL LPS刺激12 h后,SCC25细胞系中NLRP3（P＜0.05,P＜0.001）、Caspase-1（P＜0.05,P＜0.001）和 IL-1β（P＜0.01,P＜0.01）的mRNA及蛋白表达均明显升高。10 μg/mL LPS刺激12 h后,HSC3中NLRP3（P=0.009,P＜0.01）、Caspase-1（P=0.018 1,P＜0.05）、IL-1β（P=0.016,P＜0.01）的mRNA及蛋白表达均明显升高;经LPS刺激后,SCC25（P＜0.000 1,P＜0.000 1）与HSC3（P＜0.000 1,P＜0.000 1）中细胞的增殖以及迁移能力均明显增强。结论:与癌旁正常组织相比,NLRP3/Caspase-1炎症信号通路在OSCC癌组织中表达明显增高,提示其可能在OSCC的发生发展中起着重要作用。 LPS可通过激活NLRP3/Caspase-1炎症信号通路进一步促进口腔癌细胞的增殖和迁移,提示口腔致病菌可通过分泌LPS促进OSCC的发生发展。     

Abnormal fragile histidine triad expression in advanced cervical cancer and evaluation of its utility as a prognostic factor

OBJECTIVE: The relationship between the abnormal expression of fragile histidine triad (FHIT) and the prognosis in advanced cervical cancer was investigated, focusing on the relation with radiosensitivity. METHODS: A retrospective study was performed in 54 patients with stage IIIb cervical squamous cell carcinoma who received radiation therapy as the initial treatment. Formalin-fixed paraffin-embedded tissues were immunohistochemically stained using anti-FHIT antibody. The survival curve for patients with abnormal FHIT expression (low expression) was prepared and the prognosis was compared with that for the normal expression group. The decrease rate of the serum squamous cell carcinoma antigen (SCC) levels (SCC index = SCC level after radiotherapy/SCC level before radiotherapy) was calculated. RESULTS: Abnormal FHIT expression was observed in 25 patients (46%). There were no significant differences in clinical backgrounds between the abnormal and normal FHIT expression groups. The 5-year survival rate was 72% in the abnormal expression group, showing no significant difference from that in the normal expression group (64%). The SCC indices were 0.21 +/- 0.14 and 0.29 +/- 0.19 in the abnormal and normal expression groups, respectively, showing no significant difference between the two groups. CONCLUSIONS: Abnormal FHIT expression was not correlated with radiosensitivity in patients with stage IIIb cervical cancer, showing that abnormal FHIT expression cannot be used as a prognostic factor.     

Down-regulation of FHIT inhibits apoptosis of colorectal cancer: mechanism and clinical implication

Fragile histidine triad (FHIT) gene, a candidate tumor suppressor gene located at 3p14.2, has been shown to be involved in carcinogenesis of many human tissues, including digestive tract tissues. However, the expression and role of FHIT in the initiation and the development of the colorectal cancer (CRC) are poorly understood. In our present study, we have demonstrated that the FHIT gene exhibits significantly decreased expression in human CRC compared to colorectal adenoma and normal colorectal tissue by tissue microarray (TMA). The positive of FHIT gene expression in normal colorectal tissue, adenoma and adenocarcinoma were 93.75%, 68.75% and 46.25%, respectively. We showed that decreased FHIT expression was significantly correlated with the progression of colorectal carcinoma (P<0.05) as well as differentiation and lymph node metastasis (P<0.05). Two somatic mutations in the FHIT gene were also detected in human CRC. The presence of these mutations correlated significantly with decreased FHIT expression in the human CRC. In addition, we identified decreased FHIT expression resulting in apoptosis inhibition and decreasing apoptosis associated with abnormal levels of some pro- and anti-apoptotic proteins (Bax, Bcl-2 and Survivin) by TUNEL and TMA. Our results demonstrated that the mutation in the FHIT gene significantly reduced FHIT expression in human CRC. Both TUNEL and TMA experiments demonstrated significantly inhibited apoptosis by down-regulation of Bax and up-regulation of Survivin and Bcl-2. Collectively, these studies identify the mechanism by which an important tumor suppressor gene, FHIT, inactivated specifically in human CRC, and contributes to our understanding of the mechanism of colorectal carcinogenesis.