长链非编码RNA PVT1异常表达对肝癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(PVT1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖和迁移侵袭过程的影响及潜在调控机制。方法 检测HCC肿瘤组织和细胞中PVT1和微小RNA-488-3p(miR-488-3p)的表达水平。将MHCC97-H细胞分为Control组(空白未处理)、siRNA组(转染阴性对照siRNA-NC)、siRNA-PVT1组(干扰PVT1表达)和siRNA-PVT1+miR-488-3p inhibitor组(干扰PVT1表达同时抑制miR-488-3p表达)。MTT、划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测MHCC97-H细胞的增殖、迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证PVT1与miR-488-3p之间的靶向关系。结果 PVT1在HCC组织和细胞中表达水平增高(P<0.05),miR-488-3p在HCC组织和细胞中表达水平降低(P<0.05)。与siRNA组相比，siRNA-PVT1组MHCC97-H细胞增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数量均降低(P<0.05);与siRNA-PVT1组相比，siRNA-PVT1+miR-48...     

Notch信号通路对肝癌细胞迁移的调控机制研究

目的：探讨Notch信号通路对肝癌细胞迁移的调控机制。方法体外培养HepG2、MHCC97H、Huh-7肝癌细胞株和HL-7702正常肝细胞株,Transwell小室检测细胞迁移能力,蛋白免疫印迹法检测各细胞系Snail、E-cadherin蛋白表达水平,实时定量RT-PCR检测Snail、E-cadherin mRNA表达水平;采用DAPT阻断Notch信号通路,比较其对细胞迁移能力和Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达水平的影响。结果 HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞株迁移能力高于HL-7702细胞株（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7肝癌细胞株迁移能力比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞Snail蛋白及mRNA高于HL-7702细胞,E-cadherin蛋白及mRNA表达低于HL-7702细胞（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞间Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P﹥0.05）。HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞经DAPT处理后迁移能力低于未经DAPT处理的细胞株（P﹤0.05）,HL-7702细胞DAPT处理与未经DAPT处理迁移能力比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。DAPT处理后,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞株Snail蛋白及mRNA表达水平降低,E-cadherin蛋白及mRNA表达增加,与未经DAPT处理的细胞株比较差异具有统计学意义（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞间Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论 Notch信号通路可能是通过调控Snail、E-cad-herin通路调控肝癌细胞的迁移过程。     

趋化因子CXC受体3在肝细胞癌中的表达及意义

背景与目的:最近研究揭示趋化因子及其受体网络在肿瘤侵袭转移中起重要作用。本研究旨在探讨趋化因子CXC受体3(CXCR3)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中的表达,及其与HCC临床病理特征的关系。方法:选取7株人HCC细胞系、18例正常肝组织、64例HCC患者的癌组织和癌旁肝组织作为研究对象。采用RT-PCR和实时定量PCR方法,研究这些组织中CXCR3mRNA的表达情况。采用免疫组织化学方法,研究CXCR3蛋白的表达情况和HCC复发转移的关系。结果:在高转移细胞系MHCC97-H中,CXCR3与!2微球蛋白的mRNA拷贝均数之比为33.0×10-4,在低转移细胞系MHCC97-L中,该数值为8.7×10-4,在无转移能力的5株细胞系则未检出CXCR3的mRNA表达。在MHCC97-H和MHCC97-L中均见CXCR3蛋白强阳性染色,而在无转移能力的细胞系中只有HepG2见到微弱染色,其余4株均未见染色。CXCR3蛋白在HCC组织中的强阳性染色,与HCC的侵袭性正相关(P=0.003)。HCC组织中CXCR3蛋白强阳性的患者和CXCR3阴性或弱阳性的患者的1、2年无瘤生存率分别为66.7%、31.3%和75.0%、59.5%,差异有显著性(P=0.044)。结论:CXCR3的表达与HCC的侵袭和转移相关。     

靶向LASS2基因的小干扰RNA对人肝癌细胞侵袭能力的影响

目的:研究靶向人源性长寿保障基因2(homosapiens longevity assurance homologue 2,LASS 2)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肝癌细胞MHCC97-L体外侵袭能力的影响.方法:通过脂质体转染将靶向LASS2的siRNA转染MHCC97-L细胞,运用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)检测转染后LASS2 mRNA的表达,筛选有效的siRNA片段;运用 BCECF氢离子敏感荧光探针检测MHCC97-L细胞跨膜运输氢离子的功能;采用Western印迹法分析MHCC97-L细胞及上清液中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的表达情况;应用明胶酶谱法检测MHCC97-L细胞上清液中MMP-2的活性; Transwell法检测细胞体外侵袭能力.结果:筛选得到靶向LASS2的有效siRNA-1片段.MHCC97-L细胞转染LASS2 siRNA-1后,其跨膜运输氢离子的能力增强,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化,但分泌的MMP-2活性形式增加,与空白对照组和无关序列组比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞的体外侵袭能力明显高于无关序列组和空白对照组(P<0.05).结论:靶向LASS2的siRNA能有效下调其表达,并能提高MHCC97-L细胞在转染LASS2 siRNA后的体外侵袭能力.     

HBx通过上调前列腺素E2受体2的表达增强HL-7702肝细胞的侵袭能力

以HL-7702肝细胞为研究对象,探讨HBx的表达对EPs的影响以及与侵袭转移的相关性。方法:建立表达HBx的HL-7702人正常肝细胞（HL-7702/HBx）,采用HBx RNAi载体构建抑制HBx的HL-7702肝细胞株（HL-7702/HBx-siRNA）,检测抑制HBx前后细胞培养上清PGE2浓度的变化、细胞表达EPs mRNA和基质金属蛋白酶（MMPs）mRNA的变化,并进一步采用EP2-siRNA瞬时转染、Western-blot、明胶酶谱和Transwell小室等技术观察EP2表达的抑制对MMPs活性以及细胞侵袭和转移能力的影响。结果:与对照细胞相比,PGE2、EP2和MMP-2的mRNA相对表达值在HL-7702/HBx细胞明显增高（P<0.05）,分别为（123.9±9.9） pg·mL-1、（0.445±0.025） pg·mL-1和（0.226±0.016） pg·mL-1,在抑制HBx表达后则明显下调（P<0.05）,分别为（78.0±5.9） pg·mL-1、（0.336±0.007） pg·mL-1和（0.117±0.012） pg·mL-1;对照细胞HL-7702的EP2表达抑制前后,MMP2活性、细胞侵袭和移动能力变化不明显;而HL-7702/HBx细胞的EP2表达受抑制后,其MMP2活性和细胞侵袭能力则明显下降（P<0.05）,侵袭细胞数由（64.4±3.4）个/视野下降为（55.2±2.2）个/视野,细胞的移动能力变化不大。结论:HBx可以促进EP2表达和增加MMP2活性,并通过EP2上调HL-7702肝细胞的侵袭能力。抑制EP2表达可能对HBV感染的肝癌侵袭转移治疗研究具有潜在的应用价值。      

miR-369-5p抑制肝细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探讨miR-369-5p在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况、临床意义,观察miR-369-5p对HCC细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法:实时定量PCR检测miR-369-5p在HCC组织与相应癌旁组织、正常肝细胞（L02）与HCC细胞系中的表达情况;CCK-8实验检测MHCC-97H及HCCLM3细胞增殖能力;Transwell实验检测MHCC-97H及HCCLM3细胞迁移及侵袭能力;Targetscan数据库预测p21活化激酶4（p21 activated kinase 4,PAK4）为miR-369-5p下游靶基因;用双荧光素酶实验检测荧光素酶活性;蛋白免疫印迹试验检测MHCC-97H及HCCLM3细胞中PAK4的蛋白表达水平。结果:miR-369-5p在HCC组织及细胞系中均明显低表达,低表达miR-369-5p与肿瘤大小、TNM分期、微血管浸润相关;在MHCC-97H及HCCLM3细胞中过表达miR-369-5p抑制细胞的增殖、迁移及侵袭能力;通过生物信息学工具预测PAK4是miR-369-5p的下游靶基因;在MHCC-97H及HCCLM3细胞中过表达miR-369-5p下调PAK4蛋白的表达。结论:在HCC中miR-369-5p表达下调且其低表达与HCC恶性病理特征有关,在HCC中过表达miR-369-5p可通过下调PAK4表达抑制细胞增殖、迁移及侵袭。     

miR-21在肝癌细胞中的表达及其与抑癌基因PTEN的关系

目的 探讨miR-21在肝癌细胞中的表达水平及其与PETN的关系。方法 采用荧光定量PCR分别检测人肝细胞株WRL-68和肝癌细胞株MHCC97-H、SMMC-7721中miR-21和PTEN的表达;建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,给予miR-21抑制剂后,检测移植瘤中PTEN蛋白表达和下游信号p-Akt蛋白表达。结果 人肝细胞株WRL-68和肝癌细胞株MHCC97-H、SMMC-7721中miR-21的相对表达量（以U6为内参基因）分别为2.97±0.79、137.66±23.60、11.21±1.14,PTEN相对表达量分别为2.88±0.93、0.19±0.07、0.62±0.06;3种细胞转染miR-21抑制剂后,miR-21的相对表达量分别为1.29±0.33、36.90±11.84、6.22±0.85,PTEN相对表达量分别为6.11±1.07、2.65±0.66、4.32±0.84。人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型给予miR-21抑制剂后,MHHC97-H细胞中PTEN表达阳性,p-Akt表达下调。结论 miR-21是PTEN的上游调控因子,调节miR-21能引起PTEN的改变,继而调控Akt信号途径和细胞的增殖活性。     

miR-509-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌细胞迁移侵袭的影响

背景与目的：肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是世界范围内致死率第三高的恶性肿瘤，microRNA（miRNA）被认为在HCC的发病机制中起重要作用。本研究旨在探讨在原发性肝癌中miR-509-3p的表达水平、细胞功能及调控的相关基因。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）技术检测miR-509-3p在46例肝癌患者组织样本、人肝癌细胞系及永生化人正常肝细胞系中的表达水平，采用transwell实验检测miR-509-3p对肝癌细胞转移的影响。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测miR-509-3p与上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）之间的关系。结果：RTFQ-PCR技术检测结果显示，miR-509-3p在46例肝癌患者的肝癌组织样本以及MHCC97H、HCCLM3和SMMC-7721肝癌细胞系中异常高表达。体外功能实验证实抑制miR-509-3p表达能降低MHCC97H和HCCLM3肝癌细胞的迁移能力。Western blot检测结果显示，在MHCC97H和HCCLM3肝癌细胞中抑制miR-509-3p的表达可以降低MMP-9和MMP-2蛋白的表达。结论：本研究表明miR-509-3p通过正向调控MMP-9和MMP-2蛋白的表达而促进肝癌细胞的迁移和侵袭。     

RACK1对食管鳞癌细胞侵袭转移能力的抑制作用

目的:探讨RACK1表达水平与食管鳞状细胞癌不同转移潜能细胞侵袭转移能力的关系.方法:Transwell实验检测食管鳞癌EC9706-H、EC9706-L和EC109-H、EC109-L细胞的转移潜能;利用RT-PCR和Western blot方法,检测食管鳞癌高低转移细胞系EC9706-H、EC9706-L和EC109-H、EC109-L中RACK1的mRNA和蛋白表达水平.利用慢病毒转染技术上调RACK1低表达细胞中RACK1的表达后,采用Transwell实验检测其侵袭和迁移能力的变化.结果:EC9706-H细胞和EC109-H细胞的体外侵袭和迁移能力显著高于EC9706-L和EC109-L细胞系.RT-PCR和Western blot实验结果显示,RACK1在EC9706-H细胞和EC109-H细胞中呈低表达;而在EC9706-L细胞和EC109-L细胞中呈高表达.通过慢病毒转染技术上调EC9706-H和EC109-H细胞系中RACK1的表达,二者的侵袭转移能力明显降低.结论:RACK1表达水平与食管鳞癌细胞的侵袭转移能力负相关,过表达RACK1能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭转移能力.这提示,RACK1在食管鳞癌的侵袭转移中发挥重要作用,有可能成为其诊断、治疗及预后评估的新靶点.     

miR-199-3p通过对FGF2的调控抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、迁移作用及机制

目的:探讨miR-199-3p通过靶向调控抑制靶基因FGF2从而抑制肝癌MHCC97H细胞的增殖和迁移及机制。方法:qRT-PCR检测癌旁正常组织及肝癌肿瘤组织中miR-199-3p的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测肝癌细胞株Huh7、MHCC-97L、SMMC7721、HepG2和MHCC97H株其侵袭能力;qRT-PCR检测miR-199-3p在5株肝癌细胞系中的表达量;通过生物信息软件预测靶基因FGF2 mRNA 3' UTR的碱基存在miR-199-3p可能互补结合的位点并用荧光报告基因法及WB进行验证;通过qRT-PCR、免疫组化及Western blot检测FGF2在肝癌肿瘤组织和癌旁正常组织及各类肝癌细胞株表达的影响;Transwell、划痕、CCK8及流式细胞法检测miR-199-3p与FGF2对肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭、迁移及周期S期聚集能力的调控;采用MHCC97H细胞构建肝癌肿瘤异种移植小鼠模型进行肿瘤观测及免疫组化实验验证miR-199-3p对肝癌的调控作用。结果:miR-199-3p的表达水平与肝癌细胞侵袭转移能力相关;miR-199-3p能够通过抑制FGF2的mRNA翻译,抑制FGF2蛋白水平表达;FGF2与肝癌细胞侵袭转移能力相关;miR-199-3p可以负调控FGF2抑制肝癌MHCC97H细胞的生物行为;miR-199-3p 可抑制肝癌细胞中阳性信号,细胞增殖水平显著降低。结论:miR-199-3p通过抑制FGF2抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖和迁移。     

Axl gene knockdown inhibits the metastasis properties of hepatocellular carcinoma via PI3K/Akt-PAK1 signal pathway

The objective of this study is to clarify the possible role and mechanism of Axl in the tumorigenicity and metastasis process of hepatocellular carcinoma. The mRNA and protein expression levels of Axl in MHCC97-H and MHCC97-L cell lines were evaluated by real-time PCR and Western blot analysis. The key factor of phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)/Akt-p21-activated kinases-1 (PAK1) signaling pathway was studied after Axl expression was downregulated by shRNA. Finally, we analyzed the expression status of Axl protein expression in hepatocellular carcinoma tissues and its relationship with the prognosis of hepatocellular carcinoma. Axl was observed to be higher expressed in MHCC97-H cell lines compared to MHCC97-L cell lines. The downregulation of Axl in MHCC97-H cell lines resulted in the inhibition of the invasion ability of MHCC97-H cells both in vitro and in vivo. Interestingly, blocking PI3K/Akt signaling pathway by LY294002 or Akt siRNA could remarkably inhibit the PAK1 activation and cell invasion. Finally, the Axl protein expression was positively correlated with differentiation, lymph node metastasis, and clinical stage in patients with hepatocellular carcinoma patients (all P?<?0.01). These findings suggest that Axl can also regulate the metastasis process of hepatocellular carcinoma and may serve as a new prognostic marker and therapeutic target for treating hepatocellular carcinoma metastasis.     

CHST13抑制肝癌细胞侵袭能力的研究

目的 通过研究磺基转移酶CHST13在人肝癌高转移细胞株MHCC97-H和人肝癌低转移细胞株MHCC97-L中的差异表达,明确其与肝癌转移的相关性,从而证实肝癌转移诊断及抗肿瘤治疗新靶点.方法 采用实时PCR、Western blot分析磺基转移酶CHST13在人肝癌高、低转移细胞株的差异表达,通过RNA干扰技术干预CHST13基因,检测干扰前后MHCC97-L细胞的体外侵袭力及体内成瘤性.结果 CHST13在人肝癌高、低转移细胞株中表达具有明显差异;下调MHCC97-L细胞中CHST13基因表达后,穿过基底膜的细胞数量[（30±3）个]明显多于未处理组[（14±2）个],体外侵袭力显著增强（t=2.8,P=0.005）;相对于正常细胞[（0.5±0.06）g],干扰后细胞的肿瘤平均重量[（0.9±0.10）g]明显增大,体内成瘤性明显提高（t=2.5,P=0.01）.结论 磺基转移酶CHST13与肝癌细胞的侵袭、成瘤性密切相关,其有望成为肝癌临床治疗的新靶点.     

MicroRNA-10b promotes migration and invasion through CADM1 in human hepatocellular carcinoma cells

MicroRNA-10b (miR-10b) was recently reported to be dysregulated in some types of cancer and to play a role in invasion and metastasis. However, effects and potential mechanisms of action of miR-10b in the metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC) have not been explored. In this study, we confirmed that miR-10b is highly expressed in metastatic HCC tissues and in metastatic HCC cell lines by qRT-PCR. Moreover, patients with higher miR-10b expression had significantly poorer overall survival, and high miR-10b expression was an independent predictor of poor prognosis. Inhibition of miR-10b reduced cell migration and invasion in MHCC97H cells, whereas over-expression of miR-10b in HepG2 cells increased cell migration and invasion. Bioinformatics and luciferase reporter assays revealed that miR-10b binds the 3??-UTR of CADM1 mRNA and represses its translation. Western blot and qRT-PCR showed that CADM1 is inhibited by miR-10b over-expression. Silencing of CADM1 resulted in substantially increased cell motility and invasion similar to that observed with over-expression of miR-10b in HepG2 cells. These results suggest that miR-10b may positively regulate the invasion and metastasis of HCC through targeting CADM1.     

Human mesenchymal stem cells inhibit metastasis of a hepatocellular carcinoma model using the MHCC97-H cell line

The effects of mesenchymal stem cells (MSC) on the growth and metastasis of human malignancies including hepatocellular carcinoma (HCC) are controversial, and the underlying mechanisms are not yet understood. The aim of this study was to explore the role of MSC in the progression of HCC. We investigated the effect of MSC on in vitro proliferation and invasion and in vivo tumor growth and pulmonary metastasis of MHCC97-H HCC cells with a high metastatic potential. The mRNA and protein levels of transforming growth factor-beta 1 (TGFβ1) and MMP, and their association with the effects of MSC on HCC cells were also evaluated. Co-culture of MHCC97-H cells with MSC conditioned medium significantly enhanced in vitro proliferation but inhibited invasiveness. Following MSC treatment of a nude mouse model bearing human HCC, the MSC were predominantly located in the HCC tissues. Compared with controls, MSC-treated mice exhibited significantly larger tumors (3080.51 ± 1234.78 mm(3) vs 2223.75 ± 1000.60 mm(3), P = 0.045), but decreased cellular numbers of lung metastases (49.75 ± 18.86 vs 227.22 ± 74.67, P = 0.046). Expression of TGFβ1 and MMP-2 was significantly downregulated in the MSC-treated HCC cells. TGFβ siRNA concurrently downregulated expression of TGFβ and MMP-2 in HCC cells and blocked the MSC-induced proliferation and invasiveness of MHCC97-H cells. The MSC enhanced tumor growth but significantly inhibited the invasiveness and metastasis of HCC, possibly through downregulation of TGFβ1. These findings suggest that MSC could be useful in controlling metastatic recurrence of HCC.     

Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中的作用及机制

目的:探讨Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中的作用及相关机制。方法:体外培养肝癌细胞系SMMC-7721、MHCC97H和正常非肿瘤肝细胞系HL-7702,利用Transwell小室检测细胞的迁移能力,Western blot检测Notch1、Snail、E-cadherin、COX-2(环氧化酶-2)蛋白的表达。分别采用5μmol/L DAPT（3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯,γ-分泌酶抑制剂）阻断Notch信号通路和50μmol/L NS-398阻断COX-2,比较对细胞迁移能力的影响以及对肝癌细胞中Snail、E-cadherin表达的影响。结果:Notch1、Snail、E-cadherin、COX-2参与了肝癌细胞迁移过程,DAPT通过阻断Notch显著上调E-cadherin,影响细胞的迁移（P<0.05）,下调Snail和COX-2,NS-398通过阻断COX-2影响细胞的迁移（P<0.05）。结论:Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中起着非常重要的作用,其机制初步认为与Snail、E-cadherin、COX-2的表达有关。     

EphA2通过调控Grb2表达参与肝癌细胞侵袭的机制探讨

目的:检测促红细胞生成素肝细胞受体A2(EphA2)蛋白在肝细胞肝癌中的表达情况,探讨其参与调控肝癌细胞侵袭的可能内在机制。方法:培养人正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞株MHCC97H、Hep3B, 通过siRNA干扰法下调肝癌细胞中EphA2、生长因子受体结合蛋白2（Grb2）的表达,分为三组:未处理组（未处理肝癌细胞）、对照组（加入对照siRNA）和siRNA干扰组（加入siRNA干扰EphA2或Grb2）。通过Western blot法检测不同处理前后细胞中EphA2、Grb2蛋白的表达情况,Transwell小室检测细胞侵袭性。多组比较、组间比较分别采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果:体外侵袭实验结果显示MHCC97H、Hep3B、HL-7702穿透细胞的数量分别为:（401±3）/10 HPF、（111±4）/10 HPF、（31±3）/10 HPF,人正常肝细胞与人肝癌细胞相比差异具有统计学意义（P＜0.05）。EphA2、Grb2蛋白在人正常肝细胞与人肝癌细胞中的相对表达量相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 siRNA法抑制细胞EphA2表达后,Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为:（111±4）/10 HPF、（108±5）/10 HPF、（53±3）/10 HPF和（405±5）/10 HPF、（399±4）/10 HPF、（155±7）/10 HPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0．001)。检测EphA2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA抑制Grb2表达后,Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为:（109±3）/10 HPF、（107±4）/10 HPF、（56±4）/10 HPF和（403±4）/10 HPF、（402±4）/10 HPF、（163±5）/10 HPF,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。检测Grb2蛋白在Hep3B和MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。 siRNA抑制EphA2表达后,检测Grb2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量,siRNA干扰组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EphA2参与调控肝癌细胞侵袭的内在机制可能是通过调控Grb2蛋白的表达实现的,据此,我们得出EphA2可作为治疗肝细胞肝癌的新靶点。