烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠的细胞转化能力测定及其促体外细胞集落形成的效应

本实利验用叙利亚金黄地鼠胚胎细胞(SHE)检测了合成洗衣粉和洗涤剂的主要成分,烷基苯磷酸钠(Alkylbenzene Sulfonafe,ABS)和烷基磺酸钠(Alkyl Sulfonate,AS)。结果表明ABS及AS对体外培养的SHE细胞无恶性转化作用,但有促进其集落形成的效应。另外,本实验建立了体外短期转化测试系统,为检测环境中的致癌物及促癌物提供了简便迅速可靠的试验手段。     

雌性激素体外诱发小鼠胚胎细胞肿瘤性转化的进一步研究

本文进一步观察戊酸雌二醇(E)和已酸孕酮(P)两种成分单独应用是否对小鼠胚胎细胞有致癌作用,同时与促进剂TPA联合应用是否会增强其致癌性。 EP、E、P、EP TPA、E TPA、P TPA组细胞均有转化灶形成。抗乌哇巴因抑制生长试验阴性,说明细胞无Na~ /K~ ATP酶位点突变。转化细胞在软琼脂培养基有细胞集落形成。未见TPA明显增强E和/或P的致癌性。上述结果表明雌性激素诱发细胞转化过程,不是通过细胞突变,而可能是通过阻断核分裂中期,形成多倍体,导致细胞转化。     

硅灰石对金仓鼠胚胎细胞转化作用的研究

硅灰石是一种新开发的天然矿物纤维,我国自八十年代开采以来,应用日益扩大。动物实验表明硅灰石具有致癌性,体外研究证明可引起中国仓鼠肺细胞(CHL)的染色体畸变和姐妹染色体交换。1987年,IARC(国际癌症研究所)将硅灰石列为潜在致癌物。迄今为止,对国产硅灰石的研究尚未见有报道,国外对硅灰石致癌性的研究也仅限于动物实验。本文采用金仓鼠胚胎细胞(SHE)体外转化方法研究国产硅灰石的致癌性并探讨其可能的作用机制。实验结果表明:     

纳米雄黄对肺癌A549细胞增殖影响及其机制的探讨

目的:探讨纳米雄黄对肺癌A549细胞增殖的影响及其可能机制.方法:制备纳米雄黄,体外培养肺癌A549细胞株.实验分组:对照组,纳米雄黄干预组(10％和25％纳米雄黄),DDP干预组(2μg/mL),10％联合组(10％纳米雄黄+ DDP),25％联合组(25％纳米雄黄+DDP).运用免疫组化法测定β-catenin蛋白表达情况,RT-PCR法检测c-myc mRNA表达.结果:肺癌A549细胞在加入纳米雄黄干预下,β-catenin蛋白表达与c-myc mRNA表达均受到不同程度的抑制,对照组、10％纳米雄黄组、25％纳米雄黄组、DDP组、10％联合组及25％联合组的β-catenin蛋白表达阳性率分别为(78.26±5.21)％、(53.64±5.57)％、(50.82±4.39)％、(45.26±3.75)％、(31.22±1.63)％和(24.07±1.15)％,c-myc mRNA相对表达量依次为(0.41±0.030)％、(0.35±0.015)％、(0.30±0.018)％、(0.26±0.019)％、(0.14±0.012)％及(0.06±0.010)％；与对照组相比,随着纳米雄黄药物浓度的增加及联用化疗药物,β-catenin蛋白表达阳性率逐渐降低,c-myc mRNA的表达量不断下降,纳米雄黄抑制作用与药物浓度呈依赖性,药物浓度越大抑制作用越明显,并且与化疗药DDP联用具有协同作用.结论:纳米雄黄可通过降低β-catenin及c-myc mRNA在肺癌A549细胞中的表达,阻断Wnt信号转导通路,有效抑制细胞增殖发挥抗肿瘤作用.     

靶向hoxa9 siRNA联合小剂量阿糖胞苷对U937细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默hoxa9基因联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对U937细胞增殖、凋亡的影响.方法 设计合成针对hoxa9的特异性siRNA,应用脂质体介导转染U937细胞.利用RT-PCR法、Western blot法分别检测各组细胞hoxa9 mRNA、蛋白的表达;siRNA和(或)小剂量Ara-C分别作用U937细胞后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 靶向hoxa9的siRNA可有效沉默hoxa9的表达,hoxa9 mRNA及蛋白相对水平明显下降.RNAi联合小剂量Ara C作用于U937细胞后对细胞增殖抑制作用最强,48 h细胞凋亡率显著升高,与其余组比较均有统计学差异(P＜0.05).结论 靶向hoxa9的siRNA联合小剂量Ara-C能显著抑制U937细胞增殖并促进其凋亡,为研究hoxa9联合化疗治疗白血病的作用机制及应用于临床提供实验依据.     

不同剂量顺铂治疗非小细胞肺癌的疗效观察

作者报告中剂量DDP(50～80mg/M~2)与小剂量(20mg/日×5)DDP为主的联合化疗,对非小细胞肺癌疗效及毒副反应进行观察比较。结果:前者有效率(CR+PR)为38％,后者为25.5％,P<0.01,有非常显著性差异,而毒副反应两组无显著差性异性(P>0.05),说明中剂量近期疗效明显优于小剂量组。中位生存:中剂量组7个月,小剂量组8个月。两组比较无显著差异(P>0.08)。     

人脐带血清培养癌细胞的新方法

作者探讨用人的脐带血清(HCS)替带小牛血清(FCS)做癌细胞培养。材料 (1)HCS制取:HCS取自健康妊娠妇女。对照用市场所售小牛血清。 (2)实验细胞:用T-24,HeLa和Vero细胞,将细胞加用5％FCS在RPMI1640培养基中维持传代。方法 (1)增殖培养细胞数目的探讨:实验细胞放在加入10％HCS或FCS的RPMI1640培养基中,用96穴平底微孔板37℃,二氧化碳孵箱培育120小时后,用结晶紫染色,测定其吸光     

人源细胞因子诱导的杀伤细胞联合化疗药物对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用

目的 比较单独应用细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞、化疗药物和CIK细胞联合化疗药物对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用,为临床上联合应用CIK细胞和化疗药物治疗肿瘤提供实验依据。方法 应用成分血分离机采集5例健康自愿者外周血单个核细胞(PBMC),经含IFN-γ、IL-2以及抗CD3单抗的细胞因子鸡尾酒诱导成CIK细胞,以流式细胞仪检测细胞表型。裸鼠肩胛部皮下接种BEL-7402肝癌细胞,第5天起相同部位分别给予生理盐水(对照组)、不同剂量的CIK细胞(CIK-1组和CIK-2组)、丝裂霉素-C(单纯化疗组)和CIK细胞联合丝裂霉素-C(联合治疗组),观察它们对肝癌生长的抑制作用。结果多因子诱导培养后,CD3、CD3^ CD8^ 、CD3^ CD56^ 和CD25^ 效应细胞亚群的比例明显升高,分别由最初的64.0％、28.0％、7.8％和9.1％,上升至94.7％、67.7％、61.3％和84.0％,其中CD3^ 、CD3^ CD8^ 细胞的比例在培养期间内可维持较高水平,CD25^ 和CD3^ CD56^ 细胞的比例分别于培养后的第7天和第13天达最高值,而后开始下降。在90d的观察期内,对照组、化疗组、CIK-1组、CIK-2组和联合治疗组的裸鼠成瘤牢分别为100％、70.0％、80.0％、70.0％和66.7％,生存率分别为10.0％、60.0％、40.0％、50.0％和75.0％,而且联合治疗组肿瘤生长缓慢,肿瘤组织坏死明显。结论 CIK细胞联合化疗药物对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用大于单独应用CIK细胞或化疗药物。     

顺铂与阿霉素合用的抗瘤活性与剂量的关系

以体外培养瘤细胞集落形成率、荷瘤小鼠生命延长率(ILS)和小鼠实体瘤的抑瘤率作为药效的评价指标,观察顺铂(DDP)与阿霉素(ADM)合用的剂量效应关系。小剂量DDP与ADM的联用时相加作用明显。一种药已达有效量再与另一药小剂量合用其效应与单药足量的效应无显著差异;若两药有效量联合,虽能提高ILS,但表现出毒性增强。     

小剂量顺铂对中晚期非小细胞肺癌的放疗增敏疗效观察

目的 探讨小剂量顺铂对中晚期非小细胞肺放疗患者的疗效增敏作用.方法 将111例不适合手术的中晚期非小细胞肺癌患者随机分为单纯放疗组55例和小剂量顺铂联合放疗的治疗组56例,两组患者的放射治疗方法相同,治疗组在每日放疗的同时,静脉滴注小剂量顺铂.结果 两组病例全部随访5年,单纯放疗组患者的完全缓解率(CR)为27.27％,治疗组的完全缓解率(CR)为55.36％,差异具有统计学意义(P＜0.05).单纯放疗组1、2、5年生存率分别为47.17％、33.96％、9.43％,治疗组1、2、5年生存率分别为74.07％、51.85％、18.52％,治疗组1、2、5年生存率均高于单纯放疗组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组与单纯放疗组不良反应均可耐受,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小剂量顺铂对中晚期非小细胞肺癌有疗效增敏作用,且不良反应较轻.     

EB病毒基因片段的生物学活性——Ⅰ、基因片段转染、细胞转化与裸鼠成瘤的研究

过去有人提出EBV—DNA是通过病毒颗粒感染,或者是携带EBV基因的细胞与宿主细胞融合这两种途径之一,导致病毒基因转输入宿主细胞DNA。近年我们注意到:基因片段转染,是基因转移和导致细胞转化的一种重要形式。 本实验应用DNA介导的基因转移的钙沉淀改良法,在体外培养将EBV重复序列区的BamHl—W及其相邻片段转染宿主细胞(大鼠成纤维细胞,Rat—1),3周内出现转化灶,经半固体培养基进行转化选择,从而获得多株高效转化克隆,其中W_4和W_(10)通过裸鼠体内接种与鼠间移植,最后建立高移植成功率(94—100％)的可移植性裸鼠瘤(CH—1,CH—2)。 经SP6/T7RNA多聚酶诱导RNA探针、缺口翻译DNA探针和亚细胞定位的原位杂交探针综合应用,测知经EBV基因片转转染后多次传代的转化细胞(W_(10),W_4)和多次移植的裸鼠瘤(CH—1,CH—2)DNA中存在着EBV基因片段。另一方面,测知人类的鼻咽癌组织和Burkitt淋巴瘤细胞株以及绒猴的EBV转化细胞株中,恒定地整合着该基因片段。因此,EBV基因片段的活性及其在癌变过程中的作用,与癌基因激活等问题值得进一步研究。     

小剂量MAE方案治疗难治与复发急性白血病

目的:探讨小剂量米托蒽醌(MTZ)、阿糖胞苷 (Arc)联合依托泊甙(VP-16)治疗难治与复发急性白血病的疗效及毒副作用.方法:难治与复发急性白血病52 例,应用小剂量MAE方案化疗,完全缓解后应用中剂量阿糖胞苷或预激方案巩固.结果:22例急性非淋巴细胞白血病中,10例(45.5%)达完全缓解(CR),2例(9.1%)部分缓解(PR),总有效率为54.5%;30例急性淋巴细胞白血病中,9例(30.0%)CR,2例(6.6%)PR, 总有效率为36.6%.毒副作用主要是骨髓抑制、恶心、呕吐.结论:小剂量MAE 方案治疗难治与复发急性白血病的疗效较好,毒副作用较轻.     

苏乐康胶囊和叔丁基羟基茴香醚阻断理化致癌因子对小鼠的致癌作用

苏乐康胶囊(SC)和叔丁基羟基茴香醚(BHA)有效地阻断了雌性激素(EP)对雌性和雄性LACA品系小鼠的致癌作用以及SC阻断了EP加γ线联合对雌性NIH小鼠的致癌作用。使肿瘤发生率由25.7～31.3％降到0.0～5.3％,P<0.05或<0.005。     

小剂量阿糖胞苷诱导神经母细胞瘤细胞分化的研究

[目的]通过人神经母细胞瘤(NB)SMS-KCNR细胞的体外实验,观察小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对NB细胞的诱导分化作用.[方法]MTS法检测小剂量Ara-C对SMS-KCNR细胞增殖的影响;观察小剂量Ara-C处理后SMS-KCNR细胞的形态变化;流式细胞仪检测小剂量Ara-C处理后SMS-KCNR细胞的细胞周期分布;Western blot检测TrkA、N-myc蛋白的表达,RT-PCR检测TrkA及MYCN mRNA水平的变化.[结果]小剂量Ara-C对SMS-KCNR细胞的增殖具有抑制作用,诱导SMS-KCNR细胞周期停滞于S期,G2/M期细胞比例下降(P＜0.05).经小剂量Ara-C处理后SMS-KCNR细胞形态与正常神经节细胞类似,并使TrkA的表达上调(P＜0.05),MYCN的表达下调(P＜0.05).[结论]小剂量Ara-C对SMS-KCNR细胞具有诱导分化作用,该作用可能与TrkA表达上调,MYCN表达下调有关.     

硅灰石和石棉诱发CHL细胞姊妹染色单体交换和染色体畸变

硅灰石和石棉纤维均属天然矿物纤维,由于矿物纤维的商业用途极为广泛,接触矿物纤维的职业和非职业人群不断扩大,因此,有关矿物纤维致突变和致癌性的问题近年愈发引起各国学者的关注。动物实验表明硅灰石具有致癌性,体外可引起金仓鼠胚胎细胞(SHE)转化。1987年,IARC(国际癌症研究所)将石棉列为肯定致癌物,硅灰石列为潜在致癌物。迄今对国产石棉致突变和致癌性的研究尚不充分,而对国产硅灰石则尚未见报道。本文研究了国产硅灰石和石棉诱发中国仓鼠肺细胞SCE和CA的作用并探讨其可能的作用机制。     

bcl-2抑制剂联合地西他滨治疗慢性粒-单核细胞白血病转化型急性髓系白血病一例并文献复习

目的 提高对转化型急性髓系白血病(AML)及其治疗方法的认识.方法 报道1例慢性粒-单核细胞白血病(CMML)转化为AML患者的诊断及治疗过程,并进行文献复习.结果 患者为老年男性,初步诊断为CMML,并快速转化为AML-M4.初始给予小剂量地西他滨(10 mg/周,皮下注射)诱导分化治疗,3周后联合bcl-2抑制剂(venetoclax)治疗,取得了较好的疗效.但患者年龄较大,合并脏器功能受损,最终因呼吸衰竭,进而多器官衰竭死亡.结论 转化型AML目前尚无标准的治疗方案,预后差,长期生存率低,需要探索新的治疗方法来提高患者生存率.     

Preliminary Study on Biological Properties of Adult Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells

目的本研究拟建立成人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)体外培养和扩增的方法,探讨其生物学特性,为进一步将其应用于临床奠定理论和实验基础。方法取正常成人骨髓液5 mL,用Percoll分离液(密度1．073g/mL)经密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以2×108个细胞／cm2的密度接种于含10％新生牛血清的LG-DMEM培养液。经培养、扩增后,进行倒置相差显微镜观察其形态,MTT法测定生长曲线,流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期的检测,并在透射电镜下观察其超微结构。MtT法观察MSCs的免疫调节功能,观察MSCs对K562细胞生长的影响。检测MSCs培养上清中HA、IV-C、LN浓度的动态变化。结果培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一,为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观,生长曲线示其增殖能力强。流式细胞仪检测显示有90％以上的细胞处于G0／G1期,表面标记物中CD4表达阳性,而造血细胞表面标志CD3、CD4、CD7、CD13、CD14、CD15、CD19、CD22、CD33、CD34、CD45和与移植排斥发生密切相关的HLA-DR表达阴性。超微结构显示细胞内有丰富的细胞器。成人骨髓MSCs抑制PHA诱导的异体淋巴细胞增殖转化,其增殖转化抑制率为60．68％(P<0．01)。抑制作用同样存在于培养上清中,其增殖转化抑制率为9．00％(P<0．05)。在有PHA刺激淋巴细胞增殖的情况下,培养上清中增殖转化抑制率达20．91％(P<0．01)。和单独的K562细胞生长曲线相比,与骨髓MSCs共孵育的K562细胞生长缓慢,无明显的指数生长期。由浓度变化曲线图可以看出,随着天数的延长,HA升高较迅速,而IV-C、LN则浓度变化不大。结论所建立的分离和培养方法可获取骨髓粘附细胞中一组独特的细胞群,具有MSCs的生物学特性。初步的生物学特性研究显示其具有免疫调节、抗肿瘤、造血支持等作用,可作为组织工程中的种子细胞。     

胡麻油烟凝聚物诱导人胚肺二倍体细胞恶性转化作用

背景与目的:研究胡麻油烟对人体潜在的致癌危险性.材料与方法:以胡麻油烟凝聚物(SOFA)作为受试物染毒人胚肺二倍体细胞,建立体外恶性转化实验系统,对转化细胞进行ConA凝集实验、软琼脂培养实验以及裸鼠体内致瘤实验,观察并检测细胞是否发生恶性变.结果:实验剂量范围内的SOFA(25～400 μg/ml)能够诱导人胚肺二倍体细胞形成细胞恶性转化灶,转化灶细胞生长失去接触抑制性、饱和密度增大、ConA凝集能力增强、锚着依赖性丧失及裸鼠体内具有成瘤性等多种细胞发生恶性变的生物学特性改变.结论:SOFA具有诱导人胚肺二倍体细胞恶性转化的作用,对人体具有潜在致癌作用.     

小剂量多西他赛持续化疗联合树突状细胞生物免疫治疗抑制VEGF分泌

背景与目的肺癌生存期有限,需要探索一种新颖的治疗模式。本研究应用免疫治疗联合小剂量化疗的方法,观察联合治疗的抑瘤效应。方法 C57/BL6J小鼠负荷3LL肿瘤,按照不同的治疗模式:对照组、小剂量持续化疗组、树突状细胞(dendritic cells,DCs)生物免疫治疗组和小剂量化疗联合DC生物免疫治疗组;观察不同治疗模式下小鼠的生存时间;应用微渗析分析联合液相芯片分析瘤体内bFGF和VEGF的分泌。结果接受小剂量化疗联合DC生物免疫治疗组的小鼠中位生存时间为(27.6±3.2)天,与对照组(13.5±2.7)天、生物免疫治疗组(13.1±2.3)天、小剂量持续化疗组(11.8±3.0)天间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合治疗组瘤体内在48 h、72h内VEGF的分泌下降,较其余治疗组的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论小剂量化疗联合DC生物免疫治疗能抑制肿瘤内VEGF的分泌。     

高温与放射对鼻咽癌上皮样细胞联合杀伤作用的研究

高温与放射联合应用于治疗恶性肿瘤近年来受到重视。体内、体外实验以及临床实践都表明高温与放射对肿瘤或培养的瘤细胞都具有杀伤的协同作用或相加作用。我们曾经用高温(43.5℃)加放射(500R)处理长期培养的人食管癌109细胞和短期培养的食管癌组织,发现二法合并确有协同的联合杀伤作用。本文则以鼻咽癌上皮样细胞