PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

背景与目的：PI3K/AKT信号通路可能在人脑恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。本研究探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法：采用免疫组化Envision二步法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白在42例不同级别脑胶质瘤、10例正常脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,用统计学方法分析人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性及其三者与胶质瘤不同分级之间的关系。结果：PI3K在人脑胶质瘤组织的阳性表达率是80.95%,而正常脑组织中表达率为20.00%,两者间差异有统计学意义（P〈0.05）;PI3K蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是66.67%、95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）。胶质瘤组织与正常脑组织中AKT蛋白阳性率分别是85.71%与30.00%,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;AKT蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是76.19%与95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）;胶质瘤组织与正常脑组织中PTEN蛋白阳性率分别是45.24%、100%,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;PTEN蛋白在低级别胶质瘤中的阳性率52.38%,而高级别胶质瘤表达率为38.10%,两者之间差异有显著性（P〈0.05）;PTEN与PI3K、AKT蛋白在脑胶质瘤中的表达分别呈负相关（P〈0.01）;PI3K与AKT蛋白的阳性表达呈正相关（P〈0.01）。结论：（1）在人脑胶质瘤组织中PI3K、AKT蛋白表达明显增高,且PI3K、AKT蛋白阳性表达与胶质瘤恶性程度正相关,说明了PI3K/AKT信号通路在胶质瘤的恶性转化中发挥着重要作用。（2）胶质瘤组织中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于其在正常脑组织中的表达,与胶质瘤的恶性程度负相关,提示了PTEN蛋白的表达下降或缺失导致其抑癌功能减弱甚至丧失,其与胶质瘤的发生发展密切相关。（3）在人脑胶质瘤组织中,PTEN与PI3K、AKT蛋白表达呈负相关,揭示了在胶质瘤的发生发展中PTEN与PI3K、AKT的作用可能互相拮抗,PTEN蛋白的表达下降或缺失与PI3K、AKT的过度表达可能共同促进了胶质瘤的恶性进展。     

抑癌基因PTEN、PI3K、AKT在肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨抑癌基因PTEN、PI3K、AKT在肺癌中的表达及临床病理学意义研究。方法采用免疫组化SP法检测PTEN、PI3K和AKT蛋白在62例肺癌组织和30例癌旁肺组织中的表达情况,并分析两者的相关性及与临床病理特征的关系,探讨其在肺癌中的作用机制。结果 PTEN mRNA在肺癌组织中表达明显低于癌旁组织,但PI3K mRNA和AKT mRNA在肺癌组织中表达则高于癌旁组织,差异均有统计学意义（P＜0．05）。 PTEN在肺癌组织中的阳性表达率为48．39％（30/62）,明显低于癌旁组织,而PI3K和AKT在肺癌组织中的阳性表达率分别为79．03％（49/62）和70．97％（44/62）,明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义（ P＜0．01）。 PTEN、PI3K表达与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及病理类型相关,而AKT表达与肺癌的TNM分期、淋巴结转移及病理类型相关（ P＜0．05）。 PI3K与AKT表达呈正相关（P＜0．05）,与PTEN表达呈负相关（P＜0．05）,AKT与PTEN表达呈负相关（P＜0．05）。结论抑癌基因PTEN在肺癌中的低表达和PI3K/AKT的高表达,提示了PTEN、PI3K及AKT可能促进了肺癌的发生、发展及转移,而PI3 K/AKT细胞信号通路在此过程中起重要作用,可为肺癌的基因靶向治疗提供一个新的方向。     

PI3K/AKT2在胃癌组织表达及其与临床病理特征和生存期的关系

目的探讨PI3K、AKT2在胃癌、癌旁组织中的表达,分析其表达水平与临床病理特征和预后的关系。方法用组织芯片和免疫组织化学法检测189例胃癌组织、54例癌旁组织、32例正常胃黏膜中PI3K、AKT2的表达。结果胃癌、癌旁组织和正常胃黏膜PI3K阳性表达率分别是76.7%、25.9%和25.0%。AKT2阳性表达率分别是75.7%、27.8%和37.5%。胃癌组织PI3K表达与有无淋巴结转移、浸润深度、分化程度和Lauren分型有关（P〈0.05）,与肿瘤大小无关（P〉0.05）。AKT2表达与肿瘤大小、有无淋巴结转移、浸润深度、分化程度、Lauren分型有关（P〈0.05）。单因素生存分析显示,PI3K、AKT2阳性组对胃癌患者生存期的影响有统计学意义（P〈0.05）,Cox多元回归分析显示,AKT2的异常表达可以作为影响胃癌预后的独立因素（P〈0.05）。结论 PI3K/AKT2细胞信号传导通路参与胃癌的发生、发展、浸润转移,是胃癌发生的晚期事件。AKT2的表达可以作为胃癌预后的独立指标。     

EYA1 通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胃癌SGC-7901 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的:探讨EYA1(eyes absent 1)通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞的恶性进展及其相关机制。方法:收集2016年6月至2018年6月陆军军医大学附属西南医院全军普通外科中心29例胃癌组织及其癌旁组织标本,采用Wb和qPCR实验检测胃癌组织和癌旁组织中EYA1 mRNA和蛋白的表达水平。人胃癌细胞株SGC-7901培养完成后,采用过表达EYA1质粒或siRNA干扰质粒转染胃癌SGC-7901细胞;分别采用MTT、流式细胞术、划痕愈合和Transwell实验检测胃癌SGC-7901细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。结果:胃癌组织中EYA1 mRNA 和蛋白表达水平较癌旁组织均明显降低（P<0.01）;过表达EYA1可明显提高SGC-7901 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）、抑制细胞凋亡（P<0.05）。过表达EYA1 可明显促进PTEN的表达、抑制PI3K/AKT通路的激活（均P<0.05或P<0.01）;但在PTEN干扰后以上作用均受到了明显抑制（均P<0.05或P<0.01）。结论:EYA1可通过促进PTEN的表达抑制PI3K/AKT信号通路,从而抑制胃癌SGC-7901细胞的恶性生物学行为。     

PTEN-PI3K信号转导途径与非小细胞肺癌生物学行为的关系

目的 探讨PTEN-PI3K信号转导途径中PTEN与PI3K的蛋白表达与非小细胞肺癌（NSCLC）生物学行为的关系。方法 采用第二代免疫组化Elivision法和Western blot法检测59例NSCLC组织中PTEN与PI3K的蛋白表达。结果 通过Western blot和免疫组化检测PTEN、PI3K的蛋白表达结果一致，在NSCLC组织中阳性表达率分别为55．93％（33／59）、77．97％（46／59）。NSCLC组中PTEN、PI3K蛋白的阳性表达率分别与正常肺组织和癌旁增生肺组织相比，差异均有显著性（P〈0．05）。PTEN蛋白阳性表达率与肺癌的组织学分型、分化程度无关（P〉0．05），而与淋巴结转移有关（P=0．009）。PI3K蛋白的阳性表达率与NSCLC的组织学类型无关（P〉0．05），但与细胞分化程度以及与淋巴结转移均有关（P〈0．05）。PTEN与PI3K之间具有显著负相关性（P=0．003）。结论 PI3K蛋白的过表达和PTEN蛋白的低表达与肺癌的发生以及肺癌的浸润转移密切相关。PTEN蛋白的低表达可能刺激了PI3K蛋白的强表达。     

CiRS-7/P13K/AKT轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响及紫草素干预机制研究

摘 要：［目的］ 探讨小脑变性相关蛋白1反义转录物(cerebellar degeneration-related protein 1 antisense,CDR1as,又名 ciRS-7)调控磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol-3 kinase,P13K）/蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）通路对乳腺癌细胞生物学行为影响及紫草素干预机制。［方法］ 选取河南黄河科技学院附属医院收治的41例乳腺癌患者癌组织及癌旁正常乳腺组织,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测ciRS-7、P13K及AKT 信使RNA（messenger RNA,mRNA）表达情况。选取乳腺癌细胞株MCF-7及正常乳腺细胞MCF-10A进行体外实验。采用RT-PCR法检测MCF-7和MCF-10A细胞ciRS-7、P13K及AKT mRNA表达水平。向MCF-7细胞株转染 ciRS-7抑制剂（转染组） 和ciRS-7 inhibitor 阴性对照（阴性对照组）48 h后,采用Western blot法检测细胞P13K、磷酸化P13K（phosphorylation- phosphatidylinositol-3 kinase,p-P13K）、AKT、磷酸化AKT（phosphorylation- protein kinase B,p-AKT）蛋白表达量,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室体外侵袭和迁徙实验检测细胞的体外迁移及侵袭能力。采用不同浓度（0、4、8、16 μmol/L）紫草素对MCF-7细胞进行干预,48 h后检测细胞增殖抑制率及凋亡率,RT-PCR法检测ciRS-7、P13K及AKT mRNA表达,Western blot法检测细胞P13K、p-P13K、AKT、p-AKT蛋白表达量。［结果］ 相较于癌旁组织和MCF-10A细胞,乳腺癌组织和MCF-7细胞ciRS-7、P13K及AKT mRNA水平更高（P＜0.05）。MCF-7细胞转染后,相较于阴性对照组,转染组P13K、p-P13K、AKT和p-AKT蛋白相对表达量有所降低,且细胞迁徙及侵袭能力均降低;转染48 h后,转染组和阴性对照组增殖抑制率分别为36.71%±4.22%、0.09%±0.05%,两组凋亡率分别为27.84%±3.57%、5.44%±1.28%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。随着紫草素干预浓度的增加,48 h细胞增殖抑制率及凋亡率也有所上升,ciRS-7、P13K及AKT mRNA水平以及P13K、p-P13K、AKT、p-AKT蛋白相对表达量有所降低（P＜0.05）。 ［结论］ ciRS-7可通过P13K/AKT通路对乳腺癌细胞生物学行为产生影响,紫草素抑制乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡,其机制可能与ciRS-7/P13K/AKT通路有关。     

人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白的表达及其与胶质瘤发生发展的相关性

目的探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白的表达及其与胶质瘤发生发展的相关性。方法选取脑胶质瘤患者84例,依据病理分级将这些患者分为低恶性组(Ⅰ~Ⅱ级,n=42)和高恶性组(Ⅲ~Ⅳ级,n=42)。将这些患者作为脑胶质瘤组,另选取同期采集的20例正常脑组织作为正常对照组。对胶质瘤不同病理分级与正常脑组织中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达、人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性进行统计分析。结果脑胶质瘤组PI3K、AKT阳性率均显著高于正常对照组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于正常对照组(P<0.05);脑胶质瘤组中高恶性组PI3K、AKT阳性率均显著高于低恶性组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于低恶性组(P<0.05);高恶性组、低恶性组PI3K、AKT阳性率均显著高于正常对照组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于正常对照组(P<0.05)。84例人脑胶质瘤组织中,66例PI3K、AKT蛋白共同阳性表达,2例共同阴性表达。人脑胶质瘤中PI3K、AKT与PTEN蛋白表达均呈负相关关系(P<0.05),而PI3K与AKT呈显著的正相关关系(P<0.05)。结论人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白在脑胶质瘤中的表达提升,与胶质瘤病理分级呈显著的正相关关系。     

过氧化物氧化还原酶蛋白1在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生长调控机制的研究

目的  探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1（PRDX1）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生长调控的机制。方法  选择2017年4月至2019年2月在北大医疗鲁中医院进行手术治疗的86例乳腺癌患者为研究对象，分析PRDX1表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。培养MCF7乳腺癌细胞株，分组转染成空白对照组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA转染组。检测不同组细胞增殖抑制率及凋亡率，采用Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果  ①PRDX1在乳腺癌及癌旁组织中的阳性率为58.1%（50/86）、23.3%（20/86）、在正常组织中的阳性率为3.7%（3/82），PRDX1在乳腺癌癌组织中的阳性率较高，且PRDX1阳性表达与乳腺癌患者的TNM分期、病理分级有关（P＜0.05）。②MTT检测结果显示，在24h、48h、72h时，siRNA-NC组的细胞抑制率分别为1.6%、1.7%、2.4%，PRDX1-siRNA组分别为5.6%、15.3%、38.4%，PRDX1-siRNA组的细胞抑制率高于空白组与siRNA-NC组(P＜0.05)。③流式细胞检测显示，空白组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA组的凋亡率分别为（7.7±1.3）%、（7.4±1.5）%、（25.7±4.2）%，PRDX1-siRNA的肿瘤凋亡率最高。④Western blot检测显示，与空白组相比，siRNA-NC组的PI3K蛋白、AKT蛋白表达量无明显变化，但PRDX1-siRNA组中PI3K蛋白、AKT蛋白的表达量下降（P＜0.05）。结论  PRDX1在乳腺癌患者中的阳性率明显提高。在MCF7乳腺癌细胞株中，抑制PRDX1表达水平可通过降低PI3K/AKT信号通路活性，促进乳腺癌细胞凋亡。     

过氧化物氧化还原酶蛋白1在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生长调控机制的研究

目的  探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1（PRDX1）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生长调控的机制。方法  选择2017年4月至2019年2月在北大医疗鲁中医院进行手术治疗的86例乳腺癌患者为研究对象，分析PRDX1表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。培养MCF7乳腺癌细胞株，分组转染成空白对照组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA转染组。检测不同组细胞增殖抑制率及凋亡率，采用Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果  ①PRDX1在乳腺癌及癌旁组织中的阳性率为58.1%（50/86）、23.3%（20/86）、在正常组织中的阳性率为3.7%（3/82），PRDX1在乳腺癌癌组织中的阳性率较高，且PRDX1阳性表达与乳腺癌患者的TNM分期、病理分级有关（P＜0.05）。②MTT检测结果显示，在24h、48h、72h时，siRNA-NC组的细胞抑制率分别为1.6%、1.7%、2.4%，PRDX1-siRNA组分别为5.6%、15.3%、38.4%，PRDX1-siRNA组的细胞抑制率高于空白组与siRNA-NC组(P＜0.05)。③流式细胞检测显示，空白组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA组的凋亡率分别为（7.7±1.3）%、（7.4±1.5）%、（25.7±4.2）%，PRDX1-siRNA的肿瘤凋亡率最高。④Western blot检测显示，与空白组相比，siRNA-NC组的PI3K蛋白、AKT蛋白表达量无明显变化，但PRDX1-siRNA组中PI3K蛋白、AKT蛋白的表达量下降（P＜0.05）。结论  PRDX1在乳腺癌患者中的阳性率明显提高。在MCF7乳腺癌细胞株中，抑制PRDX1表达水平可通过降低PI3K/AKT信号通路活性，促进乳腺癌细胞凋亡。     

乳腺癌组织和细胞中低表达的LZTS2 通过PI3K/AKT信号通路抑制癌细胞增殖、迁移和EMT

[摘要] 目的：探讨亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2（leucine zipper tumor suppressor 2, LZTS2）基因在人乳腺癌组织和细胞系中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和EMT的影响及其作用机制。方法：收集2016 年1 月至2016 年12 月开封中心医院乳腺外科收治的50 例女性乳腺癌患者的癌及癌旁组织标本和乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468 以及正常人乳腺上皮细胞株HBL-100,用qPCR 和Western blotting 检测乳腺癌组织和细胞中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平。构建pcDNA-LZTS2 真核表达载体并采用脂质体转染MCF-7 细胞,同时转染pcDNA3.1 作为阴性对照。用Western blotting 检测转染48~72 h 后MCF-7 细胞中LZTS2 蛋白表达水平;用MTT法、Transwell 小室法检测LZTS2 过表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时用Western blotting检测细胞中EMT相关蛋白Cyclin D1、波形蛋白、神经钙黏蛋白、上皮钙黏蛋白以及PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达。结果：人乳腺癌组织中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织（P<0.05 或P<0.01）;乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231 和MDA-MB-468 细胞中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平显著低于乳腺上皮细胞HBL-100（P<0.05 或P<0.01）。与空白对照组和pcDNA3.1组相比,pcDNA-LZTS2 组MCF-7 细胞中LZTS2 蛋白表达水平明显上调（P<0.01）,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著受到抑制（P<0.05 或P<0.01）,同时过表达LZTS2 细胞中Cyclin D1、波形蛋白和神经钙黏蛋白表达水平均明显降低（P<0.05 或P<0.01）、上皮钙黏蛋白表达水平明显升高（均P<0.01）,显示LZTS2 过表达通过降低p-PI3K和p-AKT 表达而抑制PI3K/AKT信号通路。结论：LZTS2 在乳腺癌中低表达,过表达LZTS2 能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能与抑制细胞EMT过程的PI3K/AKT信号通路有关。     

PTEN,P-AKT,P-ERK蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的：检测PTEN和P—AKT，P—ERK蛋白在胃癌中的表达，并探讨其相互关系。方法：应用免疫组织化学方法检测65例胃癌及癌旁组织中PTEN和P—AKT，P—ERK蛋白的表达情况。结果：PTEN蛋白在胃癌中表达的阳性率（58．46％）明显低于相应正常组织（100％）（P〈0．01），其表达水平与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）。P—AKT蛋白在胃癌中表达的阳性率（67．69％）明显高于相应正常组织（26．15％）（P〈0．01），其表达与淋巴结转移有关（P〈0．01），与浸润深度、分化程度和TNM分期无关（P〉0．05）。P—ERK蛋白在胃癌中表达的阳性率（86．15％）明显高于相应正常组织（16．92％）（P〈0．01），其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05），与分化程度无关（P〉0．05）。胃癌组织中PTEN和P—AKT、PTEN和P—ERK蛋白表达之间呈明显负相关（P〈0．01）。结论：PTEN的低表达或失表达，可能与P—AKT、P—ERK的异常激活有一定联系，从而对胃癌的发生、发展起重要作用。     

PIK3CA and PTEN Genes Expressions in Breast Cancer

Background: The phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) intracellular signaling pathway plays an importantrole in breast cancer. The current study aimed to evaluate the expressions of two main regulators of PI3K pathway;phosphatidylinositol-3- kinase catalytic subunit alpha as activator (PIK3CA), and phosphatase and tensin-homologas inhibitor (PTEN), in breast carcinoma tissue, and compare with their expressions in adjacent normal breast tissue.Methods: A total of fifty female patients with breast carcinoma from surgical oncology unit of Alexandria-MainUniversity Hospital were included in this study. The Quantitative Real Time PCR was used to quantify expressions ofPIK3CA and PTEN. Results: PIK3CA mRNA expression was significantly increased in breast cancer tissues comparedto normal breast tissues (P<0.001, Z=5.700), also PTEN mRNA expression was significantly higher in breast carcinomatissue compared to normal breast tissue (P<0.001, Z=5.362). Conclusion: Increased the expressions of PIK3CA andPTEN mRNA in breast cancer tissue compared to normal breast tissue.     

PTEN, more than the AKT pathway

Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10 (PTEN)/phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/AKT constitute an important pathway regulating the signaling of multiple biological processes such as apoptosis, metabolism, cell proliferation and cell growth. PTEN is a dual protein/lipid phosphatase and its main substrate phosphatidyl-inositol 3,4,5 triphosphate (PIP3) is the product of PI3K. Increase in PIP3 recruits AKT to the membrane where is activated by other kinases also dependent on PIP3. Many components of this pathway have been described as causal forces in cancer. PTEN activity is lost by mutations, deletions or promoter methylation silencing at high frequency in many primary and metastatic human cancers. Germ line mutations of PTEN are found in several familial cancer predisposition syndromes. Recently, many activating mutations in the PI3KCA gene (coding for the p110alpha catalytic subunit of PI3K) have been described in human tumors. Activation of PI3K and AKT are reported to occur in breast, ovarian, pancreatic, esophageal and other cancers. Genetically modified mice confirm these PTEN activities. Tissue-specific deletions of PTEN usually provoke cancer. Moreover, an absence of PTEN cooperates with an absence of p53 to promote cancer. However, we have observed very different results with the expression of activated versions of AKT in several tissues. Activated AKT transgenic lines do not develop tumors in breast or prostate tissues and do not cooperate with an absence of p53. This data suggest that an AKT-independent mechanism contributes to PTEN tumorigenesis. Crosses with transgenic mice expressing possible PTEN targets indicate that neither cyclin D1 nor p53 are these AKT-independent targets. However, AKT is more than a passive bridge toward PTEN tumorigenesis, since its expression not only allows but also enforces and accelerates the tumorigenic process in combination with other oncogenes.     

An integrative genomic and proteomic analysis of PIK3CA, PTEN, and AKT mutations in breast cancer

Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/AKT pathway aberrations are common in cancer. By applying mass spectroscopy-based sequencing and reverse-phase protein arrays to 547 human breast cancers and 41 cell lines, we determined the subtype specificity and signaling effects of PIK3CA, AKT, and PTEN mutations and the effects of PIK3CA mutations on responsiveness to PI3K inhibition in vitro and on outcome after adjuvant tamoxifen. PIK3CA mutations were more common in hormone receptor-positive (34.5%) and HER2-positive (22.7%) than in basal-like tumors (8.3%). AKT1 (1.4%) and PTEN (2.3%) mutations were restricted to hormone receptor-positive cancers. Unlike AKT1 mutations that were absent from cell lines, PIK3CA (39%) and PTEN (20%) mutations were more common in cell lines than tumors, suggesting a selection for these but not AKT1 mutations during adaptation to culture. PIK3CA mutations did not have a significant effect on outcome after adjuvant tamoxifen therapy in 157 hormone receptor-positive breast cancer patients. PIK3CA mutations, in comparison with PTEN loss and AKT1 mutations, were associated with significantly less and inconsistent activation of AKT and of downstream PI3K/AKT signaling in tumors and cell lines. PTEN loss and PIK3CA mutation were frequently concordant, suggesting different contributions to pathophysiology. PTEN loss rendered cells significantly more sensitive to growth inhibition by the PI3K inhibitor LY294002 than did PIK3CA mutations. Thus, PI3K pathway aberrations likely play a distinct role in the pathogenesis of different breast cancer subtypes. The specific aberration present may have implications for the selection of PI3K-targeted therapies in hormone receptor-positive breast cancer.     

KAI1/CD82在原发性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨KAI1/CD82在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR和免疫组化方法对69例原发性乳腺癌组织、癌旁组织和区域淋巴结组织中KAI1 mRNA和CD82蛋白的表达进行研究。结果:在69例原发性乳腺癌中,癌旁组织中KAI1基因在区域淋巴结转移阴性组和区域淋巴结转移阳性组的mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。癌组织和区域淋巴结组织中KAI1基因在区域淋巴结转移阴性组和区域淋巴结转移阳性组的mRNA表达有显著差异(P<0.05)。CD82表达与临床病理类型以及PR表达无相关性(P>0.05),而与临床分期、组织学分级、区域淋巴结转移、远处转移、ER表达有相关性(P<0.05)。结论:KAI1/CD82的表达与乳腺癌的转移及某些临床病理因素有关,具有一定的临床指导意义。     

转录因子Sp1和存活素在乳腺癌中的表达及相关性研究

目的 探讨转录因子Sp1和存活素(Survivin)在乳腺癌中的表达及意义并分析两者相关性。方法 纳入我院2013年6月—2015年6月确诊为乳腺癌的患者70例,应用免疫组织化学染色的方法检测Sp1和Survivin在70例乳腺癌及20例癌旁正常组织中的表达,并检测两者的表达与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 Sp1和Survivin在乳腺癌中表达的阳性率分别为71.43%和78.57%,正常乳腺组织中表达阳性率分别为30%和10%,差异有统计学意义(P＜0.05),两者的表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、TNM分期、脉管浸润有关(P＜0.05);而与患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级无相关性(P＞0.05);在乳腺癌组织中Sp1和Survivin的表达之间呈正相关(r=0.517,P＜0.01)。结论 转录因子Sp1和Survivin与乳腺癌的发病密切相关,可能作为临床判断乳腺癌的辅助性指标,二者联合检测对预后的判断具有一定的指导价值。     

lncRNA CASC11通过EZH2调控PI3K/AKT通路促进食管鳞癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的:探讨lncRNA CASC11对EZH2及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号轴的调控作用,及对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞顺铂（DDP）耐药性的影响。方法:取ESCC组织（76例）及癌旁组织（76例）,并体外培养正常食管黏膜上皮细胞（HET-1a）及ESCC细胞系（TE-1、Eca109、KYSE150、KYSE450和KYSE510）,qRT-PCR法检测lncRNA CASC11表达。逐步增加DDP浓度构建DDP耐药ESCC细胞（TE-1/DDP）,并随机分成si-NC组、si-lncRNA-CASC11组、si-lncRNA CASC11+IGF-1组、si-lncRNA CASC11+si-PTEN组,另取正常培养的TE-1细胞为Control组。克隆形成实验、CCK-8、流式细胞术、Transwell分别检测细胞增殖、耐药性、凋亡、迁移;qRT-PCR及Western Blot法检测lncRNA CASC11及EZH2、PI3K/AKT途径抑制物PTEN、PI3K/AKT通路蛋白、EMT标记蛋白（E-cadherin、N-cadherin）表达;RNA免疫沉淀（RIP）法检测PTEN对EZH2的调控关系;染色质免疫沉淀（ChIP）检测EZH2、PTEN、lncRNA CASC11三者间调控关系。将lncRNA CASC11敲低TE-1/DDP细胞接种于裸鼠皮下并进行DDP干预,检测瘤体体积及瘤体重量,免疫组化分析Ki67活性。结果:lncRNA CASC11在ESCC癌组织、细胞系和TE-1/DDP细胞中的表达均显著升高（P＜0.05）。敲低lncRNA CASC11可抑制TE-1/DDP细胞增殖、迁移及EMT进程,触发细胞凋亡,并抑制细胞耐药及EZH2-PI3K/AKT生存途径的活化（P＜0.05）。裸鼠荷瘤实验证实敲低lncRNA CASC11可增加TE-1细胞对DDP的敏感性（P＜0.05）。EZH2可结合PTEN启动子并降低PTEN表达,而敲低lncRNA CASC11可减少EZH2与PTEN启动子区域的结合。PTEN敲低或给予IGF-1干预,均可部分逆转lncRNA CASC11敲低发挥的抗癌及抗DDP耐药性产生的作用（P＜0.05）。结论:lncRNA CASC11可通过与EZH2相互作用来沉默PTEN,激活PI3K/AKT介导的细胞存活途径,提高ESCC对DDP的耐药性,而敲低lncRNA CASC11可降低癌细胞对DDP的耐药性,增强ESCC对DDP的化疗敏感性。     

miR-140-5p靶向HDAC7抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制探讨

目的:探讨miR-140-5p靶向组蛋白去乙酰化酶7(histone deacetylase 7,HDAC7)调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC组织及癌旁组织中miR-140-5p的表达水平。用miR-140-5p mimic（模拟物）及miR-140-5p NC（阴性对照）转染A549细胞,CCK8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-5p与HDAC7的靶向关系,Western blot检测各组细胞HDAC7及PI3K、p-PI3K、AKT、和p-AKT表达水平。结果:与癌旁组织相比,miR-140-5p在NSCLC组织中的表达水平明显减低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与miR-140-5p NC组相比,过表达miR-140-5p后A549细胞在48和72 h的增殖能力明显降低（P＜0.05）;且细胞克隆形成、细胞迁移和侵袭能力均降低（均P＜0.05）,PI3K/AKT信号通路中关键分子p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低（均P＜0.05)。生物信息学预测HDAC7可能是miR-140-5p的一个靶基因,且双荧光素酶报告结果证实miR-140-5p直接靶向调节HDAC7表达。结论:miR-140-5p通过靶向HDAC7表达进而抑制NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。