EGFR mRNA上调在食管鳞状细胞癌患者预后预测中的意义

摘 要：［目的］ 探讨表皮生长因子受体（EGFR）基因突变和表达在食管鳞状细胞癌中的意义。［方法］ 分别应用real-time RT-PCR、免疫组化技术检测105例食管鳞状细胞癌组织中EGFR mRNA及蛋白表达水平,应用ADx-ARMS和PCR-Sanger测序法检测上述标本中EGFR基因18、19、20、21外显子突变,分析EGFR表达状态与临床、病理特征及患者生存期的关系。［结果］ 105例食管鳞状细胞癌组织中仅3例（2.9%,3/105）呈EGFR蛋白弱阳性表达,与癌旁组织相比无显著性差异（P>0.05）。92.4%（97/105）的食管鳞状细胞癌组织中EGFR mRNA表达水平上调,与癌旁组织相比有显著性差异（P=0.000）。且肿瘤组织EGFR mRNA表达水平分别与淋巴结转移（P=0.001）、神经浸润（P=0.039）及TNM分期（P=0.003）显著相关。Kaplan-Meier生存分析显示,EGFR mRNA表达水平上调患者的平均生存期（16.7个月）显著短于EGFR mRNA表达正常/下调患者（19.1个月）,其中8个EGFR mRNA正常表达病例生存情况均良好。多因素Cox回归分析表明,EGFR mRNA为食管鳞状细胞癌患者独立的预后因子,其相对危险度为1.368（P<0.001）。［结论］ EGFR mRNA可作为食管鳞状细胞癌患者预后标志物,其表达上调提示患者预后不良。     

miR-221在110例喉鳞状细胞癌中的表达及其临床预后价值分析

摘 要：［目的］ 探讨微小RNA-221（microRNA-221,miR-221）在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达水平及其与临床病理特征和预后的关系。［方法］ 收集110例LSCC患者的临床病理资料,应用实时荧光聚合酶链反应（real-time fluorescence PCR,RT-PCR）方法检测LSCC组织中miR-221的表达。应用ROC曲线确定miR-221在LSCC癌组织中相对表达量作为最佳截断值,分析miR-221高低表达与LSCC患者临床病理特征的关系。应用Kaplan-Meier和Log-rank生存分析法分析miR-221表达与LSCC患者预后的关系。Nomogram列线图评估LSCC患者术后1、3、5生存率。免疫组化方法检测LSCC患者肿瘤组织中PD-L1的表达,分析PD-L1与miR-221表达的关系。［结果］ miR-221表达与LSCC患者的年龄有关（P＜0.05）。生存分析显示,miR-221低表达患者预后较高表达患者好（DFS：χ2=10.380,P=0.001 3;OS：χ2=7.356,P=0.006 7）。单因素和多因素分析结果显示：肿瘤大小、淋巴结转移、miR-221表达是LSCC患者无病生存期和总生存期的独立预后因素。miR-221低表达伴PD-L1高表达的LSCC患者,相对其他组生存时间长、预后好。［结论］ miR-221在LSCC组织中高表达,与患者不良预后有关;miR-221低表达伴PD-L1高表达者预后更好。     

MicroRNA-34a调控KLF4转录因子

摘 要：［目的］ 研究microRNA-34a（miR-34a）与其靶基因KLF4转录因子在结直肠癌发生化疗耐药中的作用。［方法］ 利用miRDB和microRNA公共数据库筛选出miR-34a的直接作用靶点KLF4 3′-UTR区。运用real-time PCR方法检测人5-氟尿嘧啶（5-Fu）耐药和敏感的结直肠癌组织及癌旁组织中miR-34a与KLF4的表达水平；建立5-Fu抵抗性结直肠癌细胞系，运用real-time PCR方法检测耐药细胞中KLF4的表达；上调5-Fu耐药结直肠癌细胞中miR-34a的表达，明确在结直肠癌5-Fu耐药细胞系中miR-34a对KLF4的调控作用。［结果］ 在40例5-Fu耐药的结直肠癌组织中miR-34a呈低表达，KLF4呈高表达，且miR-34a在癌组织及癌旁组织中的表达与KLF4呈显著负相关（r=-0.678，P<0.001）；在5-Fu耐药结直肠癌细胞系HCT-8/5-Fu和SW-480/5-Fu中KLF4呈高表达，且上调耐药细胞中miR-34a可抑制耐药细胞中KLF4的表达。［结论］ KLF4转录因子在5-Fu化疗耐药的结直肠癌组织中呈低表达，并与miR-34a呈负相关，上调miR-34a的表达可直接抑制KLF4的表达，提示miR-34a负向调控KLF4具有逆转结直肠癌细胞化疗耐药的可能。     

miR-21、PDCD4表达对Ⅱ期食管鳞癌术后患者生存期的影响

摘 要：［目的］ 探讨微小RNA 21（microRNA-21,miR-21）和细胞程序性死亡蛋白（programmed cell death protein 4,PDCD4）在Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织中表达,分析其与临床病理特征的关系及对预后的影响。［方法］ 收集胸中段Ⅱ期食管癌术后患者标本97例,将样本组织脱蜡提取总RNA;应用实时免疫荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法检测所有标本癌组织、癌旁组织miR-21的表达情况;免疫组化法检测测癌组织和癌旁组织PDCD4蛋白表达水平。 ［结果］ miR-21在Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织中的表达较癌旁组织升高（t=12.06,P＜0.01）,PDCD4在癌组织中的表达较癌旁组织降低（t=8.36,P＜0.01）。miR-21和PDCD4在癌组织中的表达呈负相关（r=-0.41,P＜0.01）,在癌旁组织中的表达呈正相关（r=0.51,P＜0.01）。癌组织中miR-21的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移、内镜下病变长度呈正相关（r=0.23,P=0.02;r=0.22,P=0.03;r=0.38,P＜0.01）、与分化程度呈负相关（r=-0.60,P＜0.01）,PDCD4蛋白的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移、内镜下病变长度负相关（r=-0.21,P=0.04;r=-0.24,P=0.01;r=-0.37,P＜0.01）、与分化程度呈正相关（r=0.53,P＜0.01）,二者与年龄、性别、位置不相关（P＞0.05）。COX回归模型发现Ⅱ期食管鳞癌患者肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分化程度、内镜下病变长度、miR-21表达、PDCD4表达均为影响患者PFS的因素（?字2=10.36,P=0.01;?字2=7.89,P＜0.01;?字2=6.48,P=0.02;?字2=5.32,P=0.03;?字2=9.56,P=0.01;?字2=5.40,P=0.02）。miR-21对于术后3年PFS、OS预测曲线下面积分别为73.5%、81.0%（P<0.01）;PDCD4对于术后3年PFS、OS预测曲线下面积分别为77.3%、73.2%（P<0.01）。miR-21、PDCD4高、低表达组PFS差异有统计学意义（?字2=19.6,P＜0.01;?字2=11.45,P＜0.01）,OS差异也有统计学意义（?字2=27.84,P＜0.01;?字2=21.35,P＜0.01）。［结论］Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织与癌旁正常组织中miR-21、PDCD4蛋白表达存在明显差异。高表达miR-21提示预后较差,而高表达PDCD4提示预后较好。     

食管鳞状细胞癌组织中lncRNA HOTAIR表达的临床病理意义及其与上皮间质转化的关系

[目的]探讨食管鳞状细胞癌组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTAIR表达的临床病理意义及其与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。[方法]选择2015年1月至2019年12月在重庆荣昌区人民医院手术治疗的85例食管鳞状细胞癌患者,收集食管鳞状细胞癌组织及对应的癌旁组织,检测lncRNA HOTAIR的表达水平以及EMT标志基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达水平及蛋白高表达率。采用Pearson检验及Spearman检验分析lncRNA HOTAIR与EMT标志基因表达的相关性。随访食管鳞状细胞癌患者的总生存期、无进展生存期,采用Kaplan-Meier曲线分析lncRNA HOTAIR表达水平与总生存期、无进展生存期的关系。[结果]食管鳞状细胞癌组织中lncRNA HOTAIR的表达水平、N-cadherin及Vimentin的mRNA表达水平及蛋白高表达率均高于癌旁组织(1.58±0.38 ...     

LSD1和EZH2蛋白表达与食管鳞癌术后预后相关性分析

目的 表现遗传学是当前肿瘤生物学研究的热点,本研究探讨食管鳞状细胞癌癌组织中组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1 (lysine specific demethylase 1,LSD1)和Zeste基因增强子(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的蛋白表达与术后预后的相关性.方法 收集2008-05-07-2009-8-20在安阳市肿瘤医院胸外科行食管癌根治术的食管鳞癌患者85例.选取食管鳞癌组织85例,淋巴结转移癌组织30例,癌旁组织30例.免疫组织化学法检测食管鳞癌组织、淋巴结转移癌组织、癌旁组织中LSD1和EZH2蛋白表达.采用x2检验分析LSD1和EZH2蛋白表达与临床病理特征的关系;Spearman法分析LSD1和EZH2两者的相关性;Kaplan-meier法和Logrank-test检验分析LSD1和EZH2蛋白表达与术后总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression free survival,PFS)的关系,Cox模型多因素预后分析.结果 LSD1在食管鳞癌组织和淋巴结转移癌组织中的高表达率分别为64.7％ (55/85)和70.0％(21/30);癌旁组织均为少量阳性表达(低表达),主要位于增殖较旺盛的鳞状上皮基底部;LSD1在食管鳞癌组织、淋巴结转移癌组织的表达均高于癌旁组织(P＜0.001,P=0.001),食管鳞癌组织与淋巴结转移癌组织中的表达差异无统计学意义,P=0.598.EZH2在食管鳞癌组织、淋巴结转移癌组织和癌旁组织中的高表达率分别为62.3％(53/85)、76.7％ (23/30)和20.0％ (6/30);EZH2在食管鳞癌组织、淋巴结转移癌组织的表达均高于癌旁组织(P＜0.001,P=0.001),食管鳞癌组织与淋巴结转移癌组织中的表达差异无统计学意义,P=0.155.Spearman相关分析显示,LSD1和EZH2蛋白表达存在正相关,r=0.239,P=0.028.LSD1蛋白表达水平与pT分期(P=0.007)和分化程度(P=0.021)相关.EZH2蛋白表达水平与pT分期(P=0.022)、pN分期(P=0.046)和分化程度(P=0.018)相关.单因素分析显示,LSD1高表达患者的mOS和mPFS均低于低表达患者,均P＜0.001.EZH2高表达患者的mOS和mPFS均低于低表达患者,均P＜0.001.亚组分析LSD1和EZH2同时高表达患者的中位总生存期(median overall survival,mOS)和中位无进展生存期(median progress free survival,mPFS)均低于非LSD1和EZH2同时高表达患者,均P＜0.001.多因素分析显示,LSD1表达为独立的PFS预后指标,P=0.005;EZH2表达为独立的OS和PFS预后因素(P=0.003,0.014).结论 LSD1和EZH2在食管鳞癌组织和淋巴结转移癌组织中表达上调,高表达的患者与术后不良预后有关.     

高危人乳头状瘤病毒感染宫颈癌患者miR-34a-5p表达及意义

摘 要：［目的］ 探讨高危人乳头状瘤病毒（high risk human papillomavirus，HR-HPV）感染宫颈癌患者组织及血清miR-34a-5p的表达以及血清miR-34a-5p对宫颈癌的诊断价值。［方法］ 采用RT-PCR检测70例HR-HPV阳性宫颈癌组织和癌旁组织、100例HR-HPV阳性宫颈癌患者血清、80例HR-HPV阳性宫颈上皮内瘤病变(CIN)患者血清、80例健康体检者血清中miR-34a-5p的表达水平。Pearson法分析组织和血清中miR-34a-5p表达量的相关性，分析miR-34a-5p与宫颈癌临床病理特征的关系，分析血清miR-34a-5p诊断宫颈癌的价值。［结果］ 宫颈癌组织miR-34a-5p相对表达量明显低于癌旁组织（P＜0.05）。宫颈癌患者血清miR-34a-5p相对表达量明显低于CIN患者和正常人（P＜0.05），CIN患者血清miR-34a-5p相对表达量明显低于正常人（P＜0.05）。癌组织miR-34a-5p相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05)。血清miR-34a-5p相对表达量与淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05)。miR-34a-5p在癌组织与血清中的相对表达量呈正相关（r=0.459，P＜0.05）。血清miR-34a-5p诊断宫颈癌的ROC曲线下面积为0.860（95%CI：0.803~0.917）。［结论］ HR-HPV宫颈癌患者血清miR-34a-5p下调，与癌组织miR-34a-5p表达呈正相关，有望成为宫颈癌诊断的分子标志物。     

CRABP2、FABP5、RARγ和PPARβ/δ在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨CRABP2、FABP5、RARγ和PPARβ/δ在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法检测172例食管鳞癌患者和配对的癌旁正常组织中CRABP2、FABP5、RARγ、PPARβ/δ的表达,统计学方法分析各蛋白的表达与临床病理特征的关系并评估预后价值。结果:CRABP2和FABP5在食管鳞癌中低表达,CRABP2的低表达和ESCC临床病理特征无相关性;FABP5的高表达与淋巴结转移(P=0.032)、浸润深度(P=0.041)、AJCC分期(P=0.013)相关。CRABP2和FABP5之间呈正相关(r=0.156,P=0.041)。CRABP2高表达患者的总生存期较长(P=0.025),CRABP2可以作为评估食管鳞癌患者总生存期的独立预后因素,FABP5则是评估食管鳞癌患者无进展生存期的独立预后因素。结论:CRABP2和FABP5有望成为改善食管鳞癌预后的新靶点。     

miR-145在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

摘 要：［目的］ 探讨miR-145在配对的非小细胞肺癌 (non-small cell lung cancer,NSCLC) 患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达情况,分析其与临床病理因素和预后的关系。［方法］ 应用实时定量聚合酶链反应（q-RT-PCR）检测miR-145在配对的NSCLC患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达水平。［结果］ miR-145在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.001)。miR-145诊断NSCLC的ROC曲线下面积为0.895。miR-145在Ⅲ~Ⅳ期和中低分化的NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平明显低于Ⅰ~Ⅱ期和高分化的肿瘤组织（P＜0.05）。miR-145低表达组的总生存率明显低于miR-145高表达组（P＜0.05）。［结论］ miR-145在NSCLC组织中的表达下调,在NSCLC的发生中可能发挥抑癌基因的作用,可能是NSCLC的诊断及预后标志物之一。