RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,分别检测非小细胞肺癌患者和对照组患者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:43例非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达阳性率为56%,对照组阳性率为5%,两组外周血CK19 mRNA阳性率比较有显著性差异(P＜0.01);外周血CK19 mRNA阳性率与病理类型无相关性;淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为66%(21/32)和18%(2/11),二者差异显著(x2=6.65,P＜0.05).随TNM分期上升,CK19mRNA阳性率增加(x2=18.03,P＜0.01).结论:CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标志物,该方法敏感性高,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床分期和治疗.     

荧光定量PCR检测上皮性恶性肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA

[目的]探讨荧光定量PCR技术检测外周血CK19、CK20mRNA对上皮性恶性肿瘤微转移的临床意义.[方法]采用荧光定量PCR技术检测41例上皮性恶性肿瘤患者术前外周血CK19、CK20mRNA的表达情况.[结果]41例肿瘤患者中CK19mRNA阳性率26.82%,CK20mRNA阳性率21.95%,两者均阳性5例(12.19%).CK19、CK20mRNA阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤细胞分化程度无关(P＞0.05),而与肿瘤分期相关,其差异有显著性.[结论]CK19、CK20mRNA可作为一个检测上皮性恶性肿瘤患者外周血微转移标志物,两者联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.     

生长激素释放肽在非小细胞肺癌中的表达及意义

[目的]探讨生长激素释放肽(Ghrelin)在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义.[方法]应用免疫组织化学法检测72例肺癌组织及30例肺正常组织中Ghrelin的表达,分析非小细胞肺癌不同临床病理特征组Ghrelin的表达差异.[结果]在肺癌组织中Ghrelin阳性率为58.33％,显著高于正常肺组织的13.33％(P＜0.05); Ghrelin表达与患者性别、吸烟、分化程度、病理类型均无相关性(P＞0.05),与临床分期、淋巴结转移有关(P＜0.05).[结论]非小细胞肺癌组织中Ghrelin过度表达,可能对肺癌的发生发展及侵袭转移起着一定的作用.     

NF-κB、cyclin D1和p27在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)、细胞周期素D1(cyclin D1)和p27在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化S-P法检测58例非小细胞肺癌(NSCLC)和15例正常肺组织中NF-κBp65、cyclin D1、p27的表达.结果:NSCLC组织中NF-κBp65和cyclin D1的表达明显高于正常肺组织中的表达(P＜0.01),p27表达则明显低于正常肺组织(P＜0.01).NF-κBp65表达与NSCLC瘤体大小、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05);cyclin D1表达与瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05);p27表达与瘤体大小、肿瘤分化密切相关(P＜0.05).NF-κBp65与cyclin D1在NSCLC组织中的表达呈正相关(P＜0.05),cyclin D1与027的表达呈负相关(P＜0.05),NF-κBp65与p27的表达无相关性(P＞O.05).结论:NF-κB、cyclin D1、p27与非小细胞肺癌的发生、发展有关,检测三种蛋白的表达可以间接判断NSCLC的生物学行为.     

Livin和CXCR4蛋白表达与肺癌生物学特征关系的初步探讨

[目的]探讨凋亡抑制蛋白Livin与趋化因子受体CXCR4在肺癌组织与癌旁组织中表达水平及两者的关系.[方法]用Western Blot法检测50例肺癌组织及20例对照组中Livin及CXCR4的蛋白表达水平.[结果]肺癌组织中Livin蛋白表达阳性率为76％(38/50),显著性高于对照组30％(P＜0.01);肺癌组织中CXCR4蛋白表达阳性率为88％(44/50),高于对照组50％(P＜0.01).Livin和CXCR4蛋白在肺癌组织中的表达与性别、年龄、肿瘤大小、病理类型、分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期均无关(P＞0.05).且Livin蛋白表达与CXCR4蛋白表达呈正相关0=0.552,P＜0.01).[结论]Livin蛋白与CXCR4蛋白在肺癌组织呈高表达,两者表达呈正相关,这两种蛋白在肺癌发生、发展中可能存在协同作用.     

CK20、CK19、CEA在肺癌患者外周血中的表达及其意义

背景与目的 恶性肿瘤在其早期阶段即可能发生微转移,由于进入血液循环中的肿瘤细胞数目极少,常规的检测手段不易发现,现代分子生物学技术进展使微转移检测成为可能.本研究联合检测肺癌患者的外周血CK20、CK19、CEA mRNA表达,并分析其临床意义.方法 应用巢式RT-PCR法分析83例肺癌患者外周血单个核细胞CK20、CK19、CEA mRNA表达情况;另取15例食管癌组织为阳性对照,15例非肿瘤患者外周血为阴性对照.结果 83例肺癌患者外周血中,CK20阳性表达率为34/83(41.0%),CK19阳性表达率为30/83(36.1%),CEA阳性表达率为40/83(48.2%);三者至少一项阳性的表达率为61/83(73.5%).15例食管癌组织中CK20、CK19、CEA阳性表达率100%,15例阴性对照组外周血CK19、CEA阳性表达率均为2/15(13.3%);CK20阳性表达率为1/15(6.6796).CK20、CK19、CEAmRNA阳性表达与肿瘤有无转移有关(P<0.05),与肿瘤患者的年龄、性别无关.结论 CK20、CK19、CEAmRNA可作为检测肺癌患者外周血微转移的靶基因,联合检测CK20、CK19、CEA可增加外周血循环癌细胞的检出率,CK20、CK19、CEAmRNA同时表达可增加实验结果特异性.     

上皮性钙黏附蛋白和β-连环素在非小细胞肺癌中的表达及其意义

背景与目的肿瘤的浸润和转移严重威胁着人类生命,正确认识和评估肿瘤的生物学行为有重要的临床意义.上皮性钙黏附蛋白(E-cad)和β-连环素(β-cat)的异常表达在肿瘤浸润转移过程中发挥着重要作用.本研究的目的是探讨它们在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌分型、分化、转移和预后的关系.方法采用免疫组织化学(SP)法,检测129例非小细胞肺癌组织中E-cad及β-cat的表达.结果E-cad及β- cat在非小细胞肺癌组织中的异常表达率分别为62.0%和65.1%.E-cad在鳞癌中的异常表达率显著高于腺癌(P＜0.05);E cad及β-cat在低分化非小细胞肺癌中的异常表达率显著高于中高分化肺癌(P均＜0.05);E-cad及β-cat在Ⅲ、Ⅳ期非小细胞肺癌中的异常表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P均＜0.01);伴有淋巴结转移的非小细胞肺癌中E-cad及β cat异常表达率显著高于不伴有淋巴结转移者(P＜0.05,P＜0.01).E-cad及β-cat正常表达的肺癌患者5年生存率显著高于异常表达的肺癌患者(P＜0.05,P＜0.01).结论E-cad及β-cat的异常表达与非小细胞肺癌分化、分期、转移密切相关.检测它们的表达对预测患者预后有重要意义.     

非小细胞肺癌组织CD44V6和CK19表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨CD44V6与CK19在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学技术检测60例肺癌及20例正常良性病变肺组织标本中CD44V6与CK19的表达状况.结果:CD44V6在NSCLC组织中的表达显著高于正常肺组织(P＜0.05),且与临床分期、淋巴结转移成正相关,P＜0.05.CK19在NSCLC组织(85.0%)和正常肺组织(90.0%)中均为高表达,与病理类型,组织分化和淋巴结转移等无关.结论:CD44V6高表达与NSCLC侵袭转移密切相关,可作为判断肿瘤转移及预后的重要生物学指标.CK19高表达与临床病理特征无关.     

内皮抑素在非小细胞肺癌中的表达及其与肺癌临床病理生理特征的关系

目的研究非小细胞肺癌组织中内皮抑素(endostatin)的表达及其与肺癌临床和病理生理特征的关系.方法采用免疫组化LSAB法检测46例肺癌组织、14例肺良性病变组织中endostatin的表达.结果①endostatin在肺癌组织中的表达水平(84.91%±7.65%)显著高于癌旁肺组织(63.70%±12.45%)和肺良性病变组织(40.29%±15.01%)(P＜0.01),癌旁肺组织亦显著高于肺良性病变肺组织(P＜0.01);②endostatin表达水平与肺癌原发肿瘤大小、有无远处转移、细胞分化程度、P-TNM分期均有密切关系(P＜0.05),而与肺癌原发部位、组织学类型、淋巴结转移状态、患者的性别、年龄、吸烟史等均无明显关系(P＞0.05);③多因素相关分析发现endostatin表达水平与原发肿瘤的大小、有无远处转移、P-TNM分期均呈负相关(P＜0.05),与细胞分化程度呈正相关(P＜0.01),与原发肿瘤部位、淋巴结转移状态、组织学类型、性别、年龄、吸烟史均无显著相关性.结论非小细胞肺癌组织中endostatin的表达水平可能是预测肿瘤恶性行为的有用指标.     

GPD2 在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究GPD2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达和临床意义,及GPD2基因对裸鼠成瘤能力的影响。方法:选取119例NSCLC肿瘤组织及配对正常组织,行GPD2免疫组化实验,并分析GPD2的表达与NSCLC患者临床病理特征的关系。使用ＲNA干扰慢病毒载体感染A549细胞,接种至裸鼠右侧腋窝,监测小鼠肿瘤生长情况,测量最终体积和重量。结果:肺癌患者肿瘤组织中GPD2的表达明显高于对照组(P＜0.01)。III/IV期组织中GPD2表达明显高于I/II期（P＜0.05）,同时GPD2在淋巴结转移患者中高表达（P＜0.05）。 shGPD2细胞形成肿瘤体积明显小于shCtrl细胞形成肿瘤体积,且肿瘤生长速度远低于shCtrl细胞形成的肿瘤。结论:GPD2蛋白在NSCLC组织中表达显著高于癌旁组织,其表达水平与患者TNM分期、淋巴结转移均显著相关,可能参与了NSCLC的发生、发展。     

大肠癌患者外周血细胞CD44s和CD44V5及CD44V6 表达的研究

目的探讨大肠癌患者外周血细胞 CD44s、CD44V5 和 CD44V6的表达与肿瘤转移和预后的关系.方法采用流式细胞术对 62 例大肠癌患者外周血细胞 CD44s、CD44V5 和 CD44V6 的表达率进行检测,并分析他们之间的相关性.结果大肠癌患者外周血细胞的 CD44V5+ 细胞和 CD44V6+ 细胞检出率均显著高于正常对照组,P<0.01;且转移者显著高于未转移者,P＜0.01;而 CD44s+ 细胞检出率却显著低于正常对照组,P<0.05;且伴转移者显著低于未转移者,P<0.01;肿瘤患者外周血细胞 CD44V5+ 和 CD44V6+ 细胞表达率与 CD44s+ 细胞检出率呈显著的负相关,r1=0.84,P1<0.05和r2=-0.87,P2<0.01.结论CD44V5 及 CD44V6 的表达与肿瘤转移密切相关,检测大肠癌患者外周血中的 CD44s、CD44V 及 CD44V6 的表达可为肿瘤的发生、发展及预后判断提供依据.     

实时荧光定量RT-PCR检测肺癌、癌旁组织及外周血中CK19 mRNA的表达及临床意义

目的 探讨角蛋白CK19在肺癌患者癌和癌旁组织及外周血循环细胞中的表达特点及其临床意义。方法 采用实时荧光定量RT-PCR的方法对62例肺癌患者癌和癌旁组织内CK19mRNA表达进行检测，并与其对应的外周血中的CK19 mRNA表达结果进行比较。结果 62例肺癌患者的癌和癌旁组织和外周血中CK19mRNA均有表达（分别为61．2％、32．2％、40．3％），而肺癌组织中CK19mRNA水平明显高于癌旁组织，两者差异显著（P〈0．05）。外周血中CK19mRNA的表达与临床分期和病理类型无关；却与肺癌组织中CK19mRNA的高表达水平及淋巴结是否转移密切相关；健康对照组则无阳性。结论 实时荧光定量RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达有较高的敏感性和特异性，且操作方便，在肿瘤微转移的诊断监测方面有一定的应用价值。     

恶性肿瘤患者外周血细胞肿瘤转移促进基因的表达检测

目的:探讨肿瘤转移促进基因在恶性肿瘤患者外周血细胞中的表达规律。方法:采用流式细胞术对173例各种恶性肿瘤患者外周血细胞的CD44S+、CD44V5+、CD44V6+和cerbB2+细胞表达率进行了检测和分析。结果:恶性肿瘤患者外周血细胞CD44V5、CD44V6和cerbB2表达率均显著高于正常对照组,P<001或P<005;在不同肿瘤类型中,不同肿瘤转移促进基因上调的幅度明显不同:胃癌以CD44V5表达率为最高,大肠癌以CD44V6为最高,卵巢癌、宫颈癌和乳腺癌则以cerbB2为最高;肿瘤转移者显著高于未转移者,P<001或P<005。而恶性肿瘤患者外周血细胞CD44S的表达率的变化规律与CD44V5、CD44V6、cerbB2的表达完全相反,它们之间差异均有统计学意义,P<005。但CD44S在各种类型肿瘤患者血细胞中的表达率之间均差异无统计学意义,P>005。结论:恶性肿瘤能使患者外周血细胞的肿瘤转移促进基因表达率出现某些异常;而这种表达异常与恶性肿瘤转移的关系十分密切;不同肿瘤患者血细胞表达的肿瘤转移促进基因的类型有一定的倾向性。     

肺癌患者外周血中CD25^＋和CD4^＋细胞的相关性分析

目的探讨肺癌患者外周血中CD25+(IL-2R)和CD4+(Th)细胞表达水平变化的相关性.方法采用流式细胞术检测101例肺癌患者外周血中CD25+和CD4+细胞的表达水平,并对两者之间的变化关系进行了相关性分析.结果肺癌患者外周血中CD25+和CD4+细胞的检出率显著低于正常对照组(P＜0.01).对各组肺癌病例CD25+和CD4+细胞检出率的相关分析表明,两者之间呈明显的直线回归的统计相关性.结论肺癌患者外周血中CD25+细胞和CD4+细胞均明显减少,其外周血中CD25+细胞表达水平的变化可能是由CD4+细胞变化引起的.     

肺癌患者外周血CK19mRNA与微转移的实验研究

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19mRNA的表达情况,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。方法：选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT—PCR方法检测外周血CK19mRNA,相对定量分析结果。结果：肺癌组与健康对照组CK19mRNA阳性表达率分别为72．5％（29／40）、14．0％（7／50）,差异显著（P〈0．05）;相对表达量分别为1．69±0．44、0．28±0．12,有显著差异（P〈0．05）。阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性;相对表达量在中央型、T3＋T4、Ⅲ期＋Ⅳ期及低分化患者数值较高,但不具有统计学意义,鳞癌患者高于腺癌,且有显著差异（P〈0．05）。结论：CK19mRNA作为Real—time RT—PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标记物,具有一定临床应用价值,但特异性仍需提高,应进一步扩大样本进行研究及随访。相对定量分析是一种值得推荐、准确简便的荧光实时相对定量方法。     

非小细胞肺癌患者Th17细胞相关因子的表达及其临床意义

目的:通过检测Th17细胞及其相关因子在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达,探讨其在NSCLC中的临床意义。方法:选择我院2016年2月至2019年2月收治的41例NSCLC患者纳为NSCLC组,选择同期在我院接受体检的健康人员19例为正常对照组（NC组）。收集NC组受检者外周血及NSCLC患者外周血、癌病灶组织和癌旁组织。采用流式细胞术检测外周血Th17细胞水平;酶联免疫吸附法检测外周血及肺组织匀浆上清液中IL-17水平;免疫组化染色法检测组织中IL-17（IL-17+细胞）水平。对比不同病理类型、病理分期NSCLC患者外周血、癌病灶组织及癌旁组织Th17、IL-17水平。结果:NSCLC组患者外周血Th17细胞及IL-17水平均高于NC组,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测显示IL-17+细胞以细胞质呈棕黄色和（或）棕褐色为阳性表达,癌病灶组织中见典型IL-17+细胞明显散落,成团染为棕褐色。NSCLC患者癌病灶组织Th17、IL-17水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。不同性别、年龄患者外周血Th17细胞水平差异均无统计学意义（P>0.05）。肺鳞癌和肺腺癌患者外周血Th17及癌病灶组织和癌旁组织中Th17、IL-17水平差异无统计学意义（P>0.05）。Ⅲ-Ⅳ期NSCLC患者外周血、癌病灶组织、癌旁组织Th17、IL-17水平均高于Ⅰ-Ⅱ期,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:Th17细胞及其相关因子在NSCLC患者外周血及癌病灶组织中表达明显上调,且随着肿瘤病理分期增加显著升高,可能与NSCLC的发生发展有关。     

胃癌患者不同组织CD44v5+细胞表达率的比较

 目的　探讨胃癌患者不同组织CD4 4v5的表达规律。方法　采用流式细胞术对于 39例胃癌患者的癌灶、癌旁组织、淋巴结转移灶和外周血细胞的CD4 4v5表达率进行了检测和对比分析。结果　胃癌患者不同组织的CD4 4v5 +细胞检出率均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。胃癌患者各种组织CD4 4v5 +细胞表达率大小顺序为癌灶 >癌旁组织 >淋巴结转移灶 >外周血细胞 ,前三者和外周血细胞之间有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,而前三者之间却无显著性差异 (P >0 .0 5 )。在胃癌患者的各种组织中 ,伴肿瘤转移患者的CD4 4v5 +细胞检出率均显著高于未转移者 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　胃癌患者身体各种组织的CD4 4v5 +细胞表达率显著升高 ,且CD4 4v5 +细胞表达率与肿瘤转移密切相关。     

肿瘤转移抑制基因编码蛋白在癌患者外周血中的表达

目的　探讨肿瘤转移抑制基因编码蛋白在癌患者外周血细胞中的表达规律。方法　采用流式细胞术对 173例各种癌患者外周血nm2 3 +、DCC +、p16+和p5 3V +细胞检出率进行检测。结果　恶性肿瘤患者外周血nm2 3 +、DCC +和p16+细胞检出率均显著低于正常对照 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,但分布各有不同 ;而p5 3V +细胞检出率显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。癌转移者外周血nm2 3 +、DDC +和p16+的表达水平显著低于未转移者 (P <0 .0 1)或P <0 .0 5 ) ,而p5 3V则相反。结论　恶性肿瘤能使患者外周血细胞的肿瘤转移抑制基因抑编码蛋白表达水平出现明显异常 ,而这种异常表达与恶性肿瘤转移的关系十分密切 ;不同肿瘤患者异常表达的肿瘤转移抑制基因类型有一定的倾向性。     

肿瘤坏死因子的调节性T细胞与肝癌发生的相关性

目的探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)的调节性T细胞与肝癌发生的相关性。方法选取124例肝癌患者作为肝癌组,选择同期健康查体者124例作为对照组。检测2组血清TNF-α含量与肝功能,采用流式细胞仪检测外周血CD4⁺调节性T细胞比例并进行相关性分析。结果肝癌组的血清TNF-α含量高于对照组,血清AFP、ALT、AST、TBil含量也高于对照组,对比差异都有统计学意义(P>0.05)。肝癌组的CD4⁺调节性T细胞比例显著低于对照组(P<0.05)。相关分析显示肝癌患者CD4⁺调节性T细胞比例与TNF-α、AFP、ALT、AST、TBil都存在相关性(P<0.05)。多元线性回归分析显示TNF-α、AFP、ALT为影响CD4⁺调节性T细胞比例的主要因素(P<0.05)。结论肝癌患者的外周血CD4⁺调节性T细胞比例呈现下降趋势,与患者的TNF-α含量与肝功能状态有相关性。     

几种恶性肿瘤患者外周血细胞CD44V5的检测

目的　探讨不同恶性肿瘤患者外周血细胞肿瘤转移基因的表达规律。方法　采用流式细胞术对 187例各种恶性肿瘤 (包括肺癌、胃癌、骨肉瘤、胸腺瘤、大肠癌等 )患者外周血细胞CD44V5 ( +)细胞检出率进行了检测和分析。结果　大部分恶性肿瘤患者外周血细胞CD44V5 ( +)细胞检出率均显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,仅乳腺癌患者外周血CD44V5 ( +)细胞的表达率与正常对照无显著差异 (P >0 0 5 )。在胃癌和大肠癌患者中 ,伴有转移者外周血细胞CD44V5 ( +)检出率显著高于未转移者 (P <0 0 1)。结论不同恶性肿瘤患者的外周血细胞CD44V5基因表达率不同。CD44V5检测还可能对肿瘤恶性程度和预后判断有重要价值