核因子-κB受体活化因子配体在大鼠正畸牙压力侧牙周组织中的表达

目的：探讨正畸牙移动中，压力侧牙周组织中核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的表达在破骨细胞诱导和骨改建中的作用。方法：建立大鼠正畸牙移动模型，对压力侧牙周组织中RANKL蛋白的表达及破骨细胞的生成进行检测。结果：TRAP( )破骨细胞在牙移动第3、5和7天时数量明显增多；免疫组化检测显示牙周成骨细胞、骨衬里细胞、牙周纤维细胞和位于骨陷窝内的破骨细胞，是表达RANKL的主要细胞。与对照组RANKL持续弱阳性表达比较，实验组RANKL在正畸牙移动第3、5和7天时出现强阳性表达，其表达变化与破骨细胞的数量变化较为一致。结论：在大鼠正畸牙移动中，RANKL可能在压力侧牙周组织破骨细胞的形成和骨改建中发挥了重要作用。     

重组人血小板衍生生长因子-BB对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞内黏着斑激酶表达的影响

目的观察血小板衍生生长因子-BB（plateletderived growth faetor-BB,PDGF—BB）对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞内黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）表达的影响,探讨PDGF-BB对正畸牙移动骨改建中破骨细胞的作用及其下游信号通路。方法80只sn雄性大鼠上颌安装施加50g力的正畸装置,牵引上颌第一磨牙近中移动,隔日于正畸牙局部黏膜注射10ng的重组人血小板衍生生长因子-BB（recombinant human ptatelet derived growth factor-BB,rhPDGF-BB）,对照组注射磷酸盐缓冲液,在加力后1,4、7、10、14d处死动物,制备标本并测量牙齿移动距离,抗酒石酸酸性磷酸酶计数压力侧破骨细胞数量,免疫组织化学方法观察破骨细胞内FAK表达变化。结果PDGF-BB明显促进压力侧破骨细胞增殖,加速正畸牙移动,除第1天实验组与对照组牙移动距离差异无统计学意义以外,其余均有统计学意义（p〈0．05）;各观察点实验组破骨细胞FAK表达均高于对照组,灰度值比较差异均有统计学意义（p〈0.05）。结论外源性的PDGF—BB影响正畸牙移动骨改建过程。在大鼠正畸牙压力侧牙槽骨改建的过程中,FAK参与了破骨细胞信号转导的下游通路,其表达能被外源性的rhPDGF-BB所调节。     

低能量微波照射对大鼠正畸牙移动及牙周组织改建的影响

目的： 探讨低能量微波照射对大鼠正畸牙移动及牙周组织改建的影响。方法： 将SD大鼠随机分为对照组和实验组。采用螺旋弹簧加力法,通过镍钛拉簧装置构建大鼠正畸模型。实验组每天1次,用微波治疗仪照射被移动的第一磨牙,每次30 min;对照组不施加任何干预措施。分别在造模当天、第7、14、21天处死大鼠,测量大鼠第一磨牙的移动距离。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测大鼠牙周组织中破骨细胞计数;免疫组织化学检测破骨细胞分化因子（ODF）的表达;实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA的表达。采用SPSS 20.0软件包对实验数据进行统计学分析。结果： 第7、14、21天时,与对照组相比,实验组大鼠第一磨牙移动距离、牙周组织中破骨细胞计数、ODF表达显著升高（P<0.05）,牙周组织中IL-6和TNF-α的mRNA表达显著下降（P<0.05）。结论： 低能量微波照射能明显加快正畸牙移动速度,抑制炎性基因表达,促进牙周组织改建。     

增龄因素对鼠正畸牙齿移动中牙周组织骨保护素(OPG)表达的影响

目的 :比较在正畸牙齿移动中幼年鼠和成年鼠牙周组织骨保护素 (Osteoprotegerin ,OPG)信使RNA(mRNA)表达的不同 ,以探讨增龄因素影响正畸骨改建的分子机制。材料与方法 :以 4周 (幼年鼠 )和 2 4周 (成年鼠 )雄性大鼠为实验动物 ,牵引左上第一磨牙中移动为正畸牙齿移动模型 ,右上第一磨牙为对照 ,利用OPG多相寡核苷酸探针原位杂交检测实验侧和对照侧牙周膜组织OPGmRNA的表达。结果 :1.幼年鼠对照侧近牙周膜的牙槽骨面可见破骨细胞和相应的骨陷窝 ;成年鼠牙周膜内细胞的OPGmRNA表达高于幼年鼠 ;2 .幼年鼠正畸牙齿移动中 ,加力后 6小时牵张侧近牙槽骨表面可见OPG表达阳性细胞排列 ,加力 2 4小时可见骨吸收陷窝内多核破骨细胞亦有明显OPGmRNA表达 ;压力侧加力 3小时开始即可观察到破骨细胞的数目明显增多 ,OPGmRNA在牙周膜细胞中的表达未见明显改变 ;3.与幼年鼠相比 ,成年鼠正畸牙齿移动中 ,牵张侧牙周膜细胞的OPGmRNA表达没有明显改变 ,压力侧加力 3小时仍未见典型的破骨细胞和骨吸收陷窝 ,加力 2 4小时见破骨细胞。结论 :增龄因素使牙周组织内OPG表达明显增强 ,加力后幼年牙周膜细胞较早表现出张力侧OPG表达增强和压力侧破骨细胞活动增强 ,幼年较成年的牙周组织有较强的骨改建能力。     

组织工程修复区早期牙移动压力侧牙周组织的改建

目的: 探讨牙槽骨组织工程修复区内早期牙移动时压力侧的牙周改建情况,为组织工程技术在正畸中应用的安全性和可行性提供实验依据。方法: 选取30只新西兰大白兔,通过拔除下颌第一磨牙并扩大拔牙窝,建立双侧牙槽骨的超临界骨缺损,分别以实验组骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）与颗粒型多孔β磷酸三钙（beta-tricalcium phosphate,β-TCP）支架复合构成的组织工程骨和对照组单纯β-TCP支架进行右侧和左侧骨缺损修复。术后8周,选取6只兔进行植骨区取材,评价2组的成骨效果。对剩余兔进行下颌两侧第二磨牙加力,近中向牵引4周。分别在加力后的第1、2、3、4周各处死6只动物,测量牙移动距离并制作组织学切片,通过H-E染色观察牙周组织变化,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法计数压力侧破骨细胞数目。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 植骨术后8周,实验组成骨效果优于对照组。牵引4周后,正畸牙在实验组牙槽骨修复区内的移动量大于对照组。牵引第2、3、4周时,实验组移动牙压力侧的破骨细胞数量均高于对照组,差异具有统计学意义。结论: BMSCs复合β-TCP支架能够良好地修复牙槽骨缺损,邻牙在组织工程修复区内早期移动时,再生的牙周组织改建活跃,有加速牙移动的趋势。     

rhPDGF-BB与rhTGF-β1联合应用对大鼠正畸牙压力侧破骨细胞FAK mRNA表达的影响

目的：观察外源性的血小板衍生生长因子-BB （rhPDGF-BB）与转化生长因子-β1（rhTGF-β1）联合应用对大鼠正畸牙压力侧破骨细胞FAK mRNA 基因水平的表达变化。方法：将160只SD大鼠随机分为实验组和对照组。每组又根据检测时间点不同分为5个小组（n＝16）,分别建立正畸牙移动模型。实验组从加力第1天开始在正畸牙颊侧黏膜下隔日注射rhP-DGF-BB 10 ng与rhTGF-β15 ng,对照组注射相同容量的PBS。加力后1、4、7、10和14 d分别处死每大组的一小组大鼠。收集标本,用TRAP染色观察压力侧破骨细胞数量的变化,实时定量PCR（RT-PCR）检测FAK mRNA基因的表达。结果：rhP-DGF-BB及rhTGF-β1联合注射明显促进压力侧破骨细胞数目的增加（P＜0．05）;破骨细胞内FAK mRNA基因量的表达7 d前增加（P＜0．05）,7 d后逐渐降低,14 d时与对照组无显著差异（P＞0．05）。结论：外源性PDGF-BB和TGF-β1联合应用促进正畸牙压力侧破骨细胞增殖,增加了破骨细胞内FAK mRNA基因表达。     

增龄因素对鼠正畸牙齿移动中牙周组织骨保护素（OPG）表达的影响

目的 比较在正畸牙齿移动中幼年鼠和成年鼠牙周组织骨保护素(osteoprotegerin,OPG)信使RNA(mRNA)表达的不同,以探讨增龄因素影响正畸骨改建的分子机制。方法以4周(幼年鼠)和24周(成年鼠)雄性大鼠为实验动物,牵引左上第一磨牙近中移动为正畸牙齿移动模型,原位杂交检测牙周膜组织OPG mRNA的表达。结果 1.幼年鼠正畸牙齿移动中加力后3小时张力侧近牙槽骨表面可见OPG表达阳性细胞排列;与幼年鼠相比,成年鼠加力后牵张侧牙周膜细胞的OPG mRNA表达没有明显改变。2.幼年鼠加力后6小时开始压力侧即可观察到破骨细胞的数目明显增多,成年鼠加力后,压力侧加力24小时可见破骨细胞;无论幼年和成年鼠压力侧牙周膜细胞的OPG mRNA表达在加力前后均未见明显改变。结论 增龄因素使牙周组织内OPG表达明显增强;成年牙周组织中较强的OPG表达可能与成人正畸出现的牙槽骨吸收、牙齿移动迟缓相关。     

糖尿病大鼠正畸牙齿移动及组织学变化

目的 探讨糖尿病大鼠正畸牙移动对牙周组织的影响。方法 选用80只雄性SD大鼠，牵引左上颌第一磨牙近中移动。实验组以STZ腹腔注射制备Ⅰ型糖尿病模型，对照组注射柠檬酸缓冲液，3周后开始实验。分别在加力0、3、7、14、21天处死大鼠，记录上颌第一磨牙移动距离，组织HE染色后，观察牙周组织形态学的改变。结果 ①实验组大鼠牙齿移动距离在移动末期明显大于对照组；②实验组骨质疏松；③实验组大鼠压力侧破骨细胞数在骨吸收期少于对照组，3、7、14天有统计学意义；④实验组大鼠在骨形成期张力侧成骨细胞数少于对照组，14、21天有统计学意义。结论 ①糖尿病性骨质疏松导致正畸牙齿移动末期牙齿移动速度加快；②糖尿病骨质反应能力降低，牙齿移动过程中破骨活动和成骨过程均受抑制。     

牙周炎正畸牙周组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的实验研究

目的观察胰岛素样生长因子-I在牙周炎正畸牙移动过程中的表达,探讨其对炎性正畸牙周组织的影响。方法 36只wistar大鼠建立牙周炎动物模型,并随机平分为牙移动1天、3天、7天、14天、21天组及对照组,近中移动各实验组大鼠上颌第一磨牙,处死后制取牙周组织标本,行HE染色和免疫组化分析。结果在既定时间内,IGF-Ⅰ在压力侧和张力侧均有阳性表达,在加力第3天两侧表达均达到峰值,但强度较弱。结论 IGF-Ⅰ在正畸牙周组织改建中,参与了炎症正畸牙周组织改建过程,影响张力侧的成骨活动和压力侧的破骨活动。     

大鼠正畸牙移动过程中牙周膜骨硬化蛋白的表达

目的 观察正畸牙移动过程中大鼠牙周组织中骨硬化蛋白（Sclerostin）的表达及分布,研究Sclerostin在正畸牙移动骨改建中的作用。方法 选取24只Wistar大鼠,安装加力装置,加载50 g力近中移动左侧第一磨牙,分别于安装加力装置后的0、1、3、5、7、14 d处死大鼠,用苏木精-伊红（HE）染色观察第一磨牙牙周组织形态学变化,抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察破骨细胞的数量变化,免疫组织化学染色方法探究第一磨牙牙周膜中Sclerostin的表达变化。结果 HE染色显示随加力时间的延长压力侧骨组织破坏逐渐加重,免疫组织化学染色显示Sclerostin的表达逐渐增加,5 d时达到高峰,之后又逐渐降低,压力侧表达多于张力侧。结论 Sclerostin可能通过Wnt信号通路或者直接或间接控制骨形态发生蛋白参与了正畸牙移动骨改建过程。     

正畸牙移动过程中高迁移率族蛋白B1的改变

目的:研究高迁移率族蛋白B1(High Mobility Group Box-1,HMGB1)在正畸牙移动过程中的表达,以指导正畸临床加力。方法:30只Wistar大鼠,分为0、1、3、5和7 d组,每组6只;左侧施加0.6 N以近中移动上颌第一磨牙,右侧放置正畸装置但不加力作为对照;HE染色观察正畸牙移动过程中牙周组织的变化,免疫组织化学染色观察牙周支持组织中HMGB1的变化,以平均光密度法检测组织中HMGB1的表达量。结果:HE染色显示,加力1 d~7 d,大鼠第一磨牙牙周组织呈现正畸牙移动的典型变化:压力侧牙周膜变窄,呈现纤维排列紊乱,破骨细胞数目逐渐增多;张力侧牙周膜增宽,纤维排列整齐,成骨细胞数目逐渐增多。免疫组织化学染色显示,压力侧1 d时HMGB1表达量最低(0.0012 ± 0.0009),显著低于1 d对照组(0.0239 ± 0.011),从1~7 d,压力侧HMGB1逐渐增加,到7 d时到达加力后最高值(0.0127 ± 0.0014);张力侧1 d时HMGB1表达量(0.0193 ± 0.0012)低于1 d对照组(0.0284 ± 0.009),到5 d时,张力侧HMGB1达到最高值(0.0324 ± 0.0014),但与5 d对照组(0.0289 ± 0.0012)无显著差别。结论:过大的正畸矫治力减少压力侧牙周组织内HMGB1的表达,减慢透明样组织清除和正畸牙移动。     

偏侧咀嚼对正畸牙移动影响的实验研究

目的通过建立偏侧咀嚼大鼠模型,探讨偏侧咀嚼对正畸牙移动过程的影响。方法选择30只6～8周龄,（250±10）g,雄性SD大鼠,随机分为实验组与对照组,每组各15只。通过拔除实验组大鼠右下颌所有磨牙使右上颌第一磨牙丧失咬合接触建立大鼠偏侧咀嚼动物模型,同时,在两组大鼠双侧上颌切牙和第一磨牙间放置镍钛拉簧,初始力值为50g,近中移动磨牙。分别于第0、3、7、10、14天测量大鼠上颌第一磨牙近中移动的距离并通过HE染色观察大鼠上颌第一磨牙牙周组织形态学变化。结果各时间点代偿性咀嚼增强侧牙移动速率均小于对照组（P〈0.05）,牙周组织变化与对照组相似;失咬合侧牙移动速率大于对照组（P〈0.05）,牙周组织出现退行性改变;但三种咬合状态下牙齿移动速率曲线均表现为瞬时运动、迟滞期及后期移动三个阶段。结论动物实验证实偏侧咀嚼引起正畸牙牙周组织发生相应改变最终影响牙移动速率,但无论牙移动速率快慢,牙移动均符合正畸性牙移动的一般规律。     

Conference Report

Abstract

The influence of the anticonvulsive drug phenytoin on the periodontal tissues during orthodontic tooth movement in the rat was studied. The experimental and the control group each consisted of 10 Sprague-Dawley rats. The test group was injected daily with phenytoin during the experimental period of 6 weeks. A fixed appliance for expansion was applied on the first molars in both groups after 2 weeks (day 15). At the end of the experiment (day 42), radiographic measurements revealed less tooth movement in the phenytoin-treated rats. Compared to the control group, significant histologic changes in the periodontal tissues such as increased density of fibroblasts, decreased number of osteoclasts in contact with alveolar bone wall of the pressure side and deeper layer of non-mineralized osteoid on the tension side were observed in the phenytoin group.     

兔BMSCs复合β-TCP修复牙槽骨缺损后牙移动时机的探讨

目的 探讨兔骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）复合β磷酸三钙（β tricalcium phosphate,β-TCP）构建的组织工程骨修复牙槽骨缺损区内开展正畸牙移动的最佳介入时机。方法 选择40只新西兰大白兔,拔除右侧下颌第一磨牙,扩大牙槽窝,形成6 mm×4 mm×8 mm的缺损,植入构建好的兔BMSCs复合β-TCP组织工程骨（实验侧）,左侧单纯拔牙（对照侧）。分别在术后2、4、8、12周进行下颌第二磨牙近中移动,加力4周后取标本。测量下颌第二磨牙的移动距离,H-E染色观察第二磨牙近远中牙周组织变化。TRAP染色,选取压力侧牙周组织进行破骨细胞计数。BMP-2免疫组织化学染色观察张力侧牙周组织平均吸光度值。采用SAS 8.0软件包对数据进行统计学分析。结果 2周、4周组实验侧牙移动距离、TRAP阳性细胞计数、BMP-2吸光度值均显著小于对照侧;8周组、12周组实验侧与对照侧的各项指标无统计学差异。结论 兔BMSCs复合β-TCP修复兔下颌牙槽骨缺损8周后是进行正畸牙移动的适宜时机。     

局部注射重组人转化生长因子对大鼠正畸牙移动的影响

目的:探讨局部注射重组人转化生长因子 (rhTGF -β1)对大鼠正畸牙移动速度的影响。方法:80只模型大鼠随机分为实验组和对照组,每组又按1、4、7、10和14 d再分为5个小组,每小组8只。实验组从加力的第1天开始,每2 d在大鼠加力侧上颌第一磨牙颊侧黏膜下注射rhTGF-β1 0.1 mL(5 ng/mL),对照组注射相同容量的PBS。加力后依实验设计时间分别处死每1小组大鼠。体视显微镜观察并采集图像,运用计算机图像分析软件测量牙移动的距离,同时应用TRAP组织化学染色观察不同时段压力侧破骨细胞数量的变化,采用SPSS 17.0 软件包对数据进行统计学分析。结果:局部注射rhTGF-β1的牙移动速度较对照组快,在加力后第7天,牙移动距离差异显著(P<0.05);第10天和第14天相比,差异显著(P<0.01)。实验组压力侧破骨细胞的TRAP阳性细胞数较对照组显著增多(P<0.01)。结论:局部注射rhTGF-β1增强了大鼠正畸牙破骨细胞的活性,促进了破骨细胞的骨吸收功能,加速了正畸牙移动。     

Tooth movement and changes in periodontal tissue in response to orthodontic force in rats vary depending on the time of day the force is applied.

The purpose of this study was to investigate whether there are any differences in tooth movement or in the response of periodontal tissue to orthodontic force when the force is applied at different times of the day. One hundred 6-week-old male Wistar rats were divided into one control group without force application and three experimental groups based on the time of day the force was applied to the upper first molars. Animals in the whole-day group received force continuously throughout the experimental period, while animals in the light- and dark-period groups received force only during the light (07:00-19:00) or dark period (19:00-07:00), respectively. Tooth movement was measured using the occlusal view of a precise plaster model with a profile projector. Periodontal tissues were evaluated histologically. The time course of tooth movement varied among the groups. Tooth movement over 21 days in the whole-day and light-period groups was about twice that as in the dark-period group. The formation of new bone on the tension side in the whole-day and light-period groups was more than twice that as in the dark-period group. On the pressure side, more osteoclasts appeared on the alveolar bone in the whole-day and light-period groups than in the dark-period group. The light-period group showed less extensive hyalinization of the periodontal ligament (PDL) than the whole-day group. The area of root resorption on day 21 also varied among the groups. Interference by masticatory forces did not seem to be a principal cause of the decreased tooth movement in the dark-period group. These results indicate that there are considerable variations in tooth movement and in the response of periodontal tissue to orthodontic force when the force is applied at different times of the day in rats. The results suggest that diurnal rhythms in bone metabolism have important implications in orthodontic treatment.     

局部注射阿仑膦酸钠对大鼠正畸牙移动的影响

目的观察局部注射阿仑膦酸钠对大鼠正畸牙移动及牙周组织的影响。方法32只Wistar大鼠分为对照组和低剂量、中剂量、高剂量三个实验组,使用40g力牵其左侧上颌第一磨牙近中移动,实验中分别将生理盐水、0.02mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L的阿仑膦酸钠溶液注射入各组大鼠上颌第一磨牙近中腭侧的粘骨膜下,注射于实验前3d开始,每3天一次,每次50μl。分别在0、1、3、7、14、17、21d时取模法测量大鼠牙移动量。第21天取上颌组织块经固定、脱钙、脱水、包埋后切片,HE染色观察牙周组织变化,TRAP染色观察压力区破骨细胞数、破牙骨质细胞数,比较各组间是否有差异。结果①各实验组大鼠第一磨牙移动距离显著低于对照组,并随药物浓度增高其抑制效果增强。②实验组压力区破骨细胞数和破牙骨质细胞数显著低于对照组。结论局部注射不同浓度阿仑膦酸钠能获得不同的抑制牙齿移动的效果,可应用于临床中作为一种增强支抗的手段。