内毒素对人牙髓、牙周膜成纤维细胞DNA含量的影响

具核梭杆菌和牙髓类杆菌内毒素脂多糖(LPS)在50μg/ml浓度下可使人牙髓,牙周膜成纤维细胞核面积值和DNA含量升高,而100μg/ml浓度则可使细胞DNA含量降低,内毒素在不同浓度对细胞DNA含成的影响有显著差异。     

内毒素对人牙周膜成纤维细胞超微结构的影响

具核梭杆菌和牙髓类杆菌100μg/ml浓度可使体外培养的人牙周膜成纤维细胞线粒体膜破裂、溶酶体膜受损、细胞出现大量空泡表明细胞功能受损。     

FGF-2对体外培养人牙髓细胞FGFR和OPN表达活性的影响

目的:研究成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)对体外培养的人牙髓细胞表面成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响。方法:以改良组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Western blotting法检测不同浓度FGF-2作用下牙髓细胞FGFR的表达情况;应用Real Time-PCR法,检测不同浓度FGF-2作用下牙髓细胞OPN mRNA的表达。结果:与对照组相比,FGF-2在1～50 ng/mL浓度下均可促进牙髓细胞FGFR的表达(P<0.05),最佳显效浓度为10 ng/mL。FGF-2在1～50 ng/mL浓度下均可诱导牙髓细胞OPN mRNA表达(P<0.05),OPN mRNA的表达在10 ng/mL的FGF-2作用下达到高峰。结论:FGF-2可促进体外培养人牙髓细胞FGFR和OPN的表达,在牙髓牙本质复合体修复中可能发挥重要作用。     

牙髓拟杆菌内毒素对人牙髓和牙周膜成纤维细胞生长抑制的体外研究

采用提纯的牙髓拟杆菌ATCC35406内毒素脂多糖和MTT法，观察体外培养下内毒素对人牙周膜和牙髓成纤维细胞的生长抑制作用．结果显示：内毒素对上述细胞的生长其有明显的抑制作用．这种作用具有浓度和时间依赖效应．     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙髓细胞增殖和迁移的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对体外培养人牙髓细胞增殖、迁移活性的影响。方法以常规组织块培养法体外获得人牙髓细胞,实验组分别加入终浓度为1.0、5.0、10.0和50.0ng/ml的bFGF,对照组仅加入等量的空白培养基,采用CCK-8法分别测定450nm下各组光吸收度A值,研究bFGF对牙髓细胞增殖活性的影响;应用Transwell小室培养法,研究bFGF对牙髓细胞迁移活性的影响。结果与对照组相比,bFGF在1.0～50.0ng/ml浓度下可促进牙髓细胞的增殖（P〈0.05）,bFGF最低显效浓度为1.0ng/ml,最佳显效浓度为10.0ng/ml。bFGF在1.0～50.0ng/ml浓度下诱导细胞迁移（P〈0.05）。结论 bFGF可诱导体外培养人牙髓细胞的增殖和迁移,在牙髓牙本质复合体修复中可能发挥重要作用。     

bFGF对人牙髓、牙周膜成纤维细胞生物学效应的研究

目的：了解碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙髓、牙周膜成纤维细胞的生物学效应,为bFGF在牙髓、牙周病中的治疗研究提供新的实验依据。方法：利用3H-TdR掺入法观察在bFGF作用下人牙髓、牙周膜成纤维细胞DNA和胶原蛋白合成的情况。结果：20ng/mL～60ng/mLbFGF可明显促进人牙髓、牙周膜成纤维细胞DNA的合成（P〈0.01）,在40ng/mL浓度时牙髓,牙周膜成纤维细胞DNA合成最高,40ng/mLbFGF作用于牙髓,牙周膜成纤维细胞,24～48h可使细胞DAN合成显著增多,牙髓成纤维细胞在36h时DNA合成达最高峰,牙周膜成纤维细胞在24h时DNA合成达最高峰;bFGF对牙髓,牙周膜成纤维细胞胶原蛋白的合成无明显促进作用（P〉0.05）。结论：人牙髓、牙周膜成纤维细胞是bFGF的靶细胞,其胞膜上可能有bFGF特异性受体的存在,也表明bFGF在牙髓、牙周组织的创伤愈合中可能起重要作用。     

牛血浆粘连蛋白对培养的人牙髓成纤维细胞FN和Ⅲ型胶原表达的影响

观察了不同浓度牛血浆纤维粘连蛋白（ＦＮ）对培养的人牙髓成纤维细胞Ⅲ型胶原、ＦＮ表达的影响；用图象分析仪对染色强弱进行相对定量分析，ＦＮ（１０、２０μｇ／ｍｌ）组的人牙髓细胞Ⅲ型胶原表达最强，ＦＮ（４０，８０μｇ／ｍｌ）组的人牙髓细胞ＦＮ表达最强，说明ＦＮ的不同浓度影响了培养的人牙髓成纤维细胞的功能，ＥＬＩＳＡ测定结果可做为图象分析的参考与补充。     

牙源性脓肿标本中的产黑色素类杆菌群菌株分离鉴定

本文对４４例牙源性脓肿（尖周脓肿２４例，牙周脓肿１２例，冠周脓肿８例）脓液标本中的产黑色素类杆菌群菌株进行分离、培养、鉴定。其中３８例存在产黑菌群，以中间型类杆菌阳性率最高。牙龈类杆菌在牙周脓肿中检出率最高。２４例尖周脓肿可分离出６株牙髓类杆菌而其它两种牙源性脓肿则无牙髓类杆菌，推测该菌与牙髓尖周感染的病理过程有关。     

3种口腔厌氧菌荚膜对人牙龈成纤维细胞增殖抑制作用

采用细胞计数法研究了３种口腔厌氧菌荚膜对人牙龈成纤维细胞的增殖抑制作用。结果显示：牙龈卟啉菌荚膜和中间型普里沃氏菌荚膜具有明显抑制作用，并呈浓度依赖性，作用２４ｈ后抑制作用呈不可逆性。牙髓卟啉菌荚膜对人牙龈成纤维细胞无明显抑制作用。实验结果提示：口腔厌氧菌荚膜在牙周病、尖周病早期病变中可能起着重要作用     

牛血浆纤维粘连蛋白对人牙髓成纤维细胞增殖,DNA合成,细胞…

采用四唑盐比色法（ＭＴＴ）、３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验、细胞大小测定的图象分析等方法，观察不同浓度牛血浆纤维粘连蛋白（ＦＮ）和人工合成肽段（ＲＧＤＳ，４０ｕｇ／ｍｌ）对外培养的人牙髓细胞的影响。ＦＮ（２０、４０ｕｇ／ｍｌ）可促进牙髓成纤维细胞增殖、刺激细胞ＤＮＡ合成，ＦＮ（１０、８０ｕｇ／ｍｌ）、ＲＧＤＳ（４０ｕｇ／ｍｌ）和空白组成对牙髓细胞无上述效应。４种浓度ＦＮ和ＲＧＤＳ（４０ｕｇ／ｍｌ）均使牙髓细     

产黑色素类杆菌与牙髓感染的关系

近年来,随着厌氧菌培养,分离和鉴定等技术的发展,大量的研究表明感染根管内的优势菌群是厌氧菌。 产黑色素类杆菌(black-pigmented bacteria,BPB)一直被认为同牙髓感染有关。本研究旨在进一步评价产黑色素类杆菌的存在同牙髓感染临床症状和体征之间的相关性。     

冻融前后人牙髓等成纤维细胞生物学特征的比较

本研究对体外培养的第5代人牙髓牙周牙龈成纤维细胞进行了冷冻和复苏,三种细胞复苏的存活率分别为14%、19%和24%,复苏后细胞的生长曲线和倍增时间等生物学特征与冻存前基本一致,提示冻融后的人牙髓牙周牙龈成纤维细胞基本保持冻融前的生物学特征.     

内毒素刺激单核细胞培养上清对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的:观察经内毒素脂多糖(LPS)刺激的单核细胞培养上清对人牙髓细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨单核细胞介导下LPS和CD14在人牙髓细胞分化中的作用.方法:采用经具核梭杆菌LPS刺激的单核细胞培养上清作用于体外培养的人牙髓细胞,通过OD值测定,观察单核细胞培养上清对人牙髓成纤维细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.结果:LPS直接刺激人牙髓细胞,牙髓细胞ALP活性明显上升,但LPS刺激的单核细胞培养上清对人牙髓细胞ALP活性有明显的抑制作用.抗CD14抗体在有血清的条件下作用于单核细胞,可以阻断单核细胞介导下LPS对牙髓细胞ALP活性的抑制.结论:单核细胞介导的LPS对牙髓细胞ALP活性有抑制作用,其机制可能依赖CD14.     

三种根管内厌氧菌荚膜对人牙龈成纤维细胞的生长抑制作用

本文研究了三种根管内厌氧菌纯化荚膜对人牙龈成纤维细胞的抑制作用。结果显示牙龈卟啉菌和中间型普里沃氏菌纯化荚膜可以明显抑制成纤维细胞ＤＮＡ合成，使细胞、细胞核面积增大，但细胞未出现死亡、溶解现象，两种荚膜对成纤维细胞的作从里浓度依赖性，以牙龈卟啉菌荚膜作用最强，牙髓卟啉菌荚膜作用不明显。纯化荚膜对成纤维细胞的作用主要是诱导其过早老化。     

两种固定包埋法对离体培养人牙髓成纤维细胞超微结构的影响

本文比较了微量培养细胞简易包埋法和常规离心沉淀法对人牙髓成纤维细胞超微结构的影响．简易包埋法简单易行，较大限度地保存了人牙髓成纤维细胞的超微结构，特别是细胞内、外的胶原纤维和细胞内的微丝等骨架结构，是一种较好的观察单层细胞超微结构的方法。     

大蒜素对人牙周膜成纤维细胞的生物学作用

目的:探讨在不同浓度大蒜素作用下对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(human periodontalligament cells,HPDLCs),增殖和总蛋白含量的变化。方法:体外培养人牙周膜成纤维细胞,分别经0(对照组),10-2,10-1,1,10,102,103mg/L浓度的大蒜素作用后,采用MTT法、考马斯亮蓝染色法,观察大蒜素对HPDLCs增殖、总蛋白含量影响。结果:大蒜素浓度在10-2、10-1、1 mg/L时对人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量无明显影响;10、102、103mg/L时明显抑制人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量,且其抑制作用随浓度增大而增强,103mg/L效应最大,呈明显的浓度依赖性(P<0.05)。结论:大蒜素能浓度依赖性抑制人牙周膜成纤维细胞的增殖和蛋白合成。     

两型腺相关病毒对培养人牙髓细胞转染效率的研究

目的探讨两种不同腺相关病毒（AAV）介导的增强型绿色荧光蛋白rAAV2-EGFP和rAAV2/1-EGFP对人牙髓细胞的转染效率及对人牙髓细胞的毒性,为AAV携带目的基因治疗提供理论依据与实验基础。方法采用组织块加酶消化法培养人牙髓细胞并鉴定组织来源。按照感染复数（MOI）为10^4、10^5、5×10^5转染第2代人牙髓细胞,并选择最适MOI值;流式细胞仪检测转染后7d,rAAV2-EGFP和rAAV2/1-EGFP对人牙髓细胞的转染效率;MTT法检测AAV2-EGFP,AAV2/1-EGFP转染后4、6、8、10、12d人牙髓细胞的增殖活性。结果荧光显微镜下观察rAAV-EGFP对人牙髓细胞的转染效率及荧光蛋白强度,随着MOI值的增加而增高,其中105为转染最适MOI值,7d时,流式细胞仪检测AAV2-EGFP、AAV2/1-EGFP转染率分别为35.8%、76.9%;病毒转染细胞后,细胞生长正常,MTT显示转染后各转染组与未转染组的吸光度值差异无统计学意义。结论rAAV2-EGFP对体外培养的人牙髓细胞转染效率高于rAAV2/1-EGFP,是腺相关病毒中转染人牙髓细胞比较适合的载体。     

MMP-3诱导人牙髓成纤维细胞CCN2mRNA的表达及意义

目的：通过观察基质金属蛋白酶-3（MMP-3）对体外培养人牙髓成纤维细胞中结缔组织生长因子（CTGF/CCN2）mRNA的影响,揭示MMP-3促进牙髓损伤愈合的机制。方法：选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓以常规体外酶消化培养法获得人牙髓成纤维细胞,利用RT-PCR方法检测经MMP-3诱导30min后人牙髓成纤维细胞中CCN2mRNA的表达。结果：正常组和实验组人牙髓成纤维细胞均有CCN2mRNA表达,但是经MMP-3诱导后的人牙髓成纤维细胞CCN2mRNA的表达更强。结论：MMP-3通过诱导CCN2mRNA的合成,从而促进牙髓损伤的愈合。     

内皮素促人牙髓细胞生长作用的体外研究

目的探讨不同浓度内皮素－１（ＥＴ－１）对人牙髓细胞的促增殖作用。方法采用人牙髓细胞体外培养技术和四唑盐（ＭＴＴ）显色分光光度法。结果不同浓度ＥＴ－１均有程度不同的促人牙髓细胞生长作用,并呈浓度依赖性。结论ＥＴ－１为促人牙髓细胞生长因子,可能对牙髓组织的再生修复起作用。     

牛血浆纤维粘连蛋白对人牙髓成纤维细胞增殖、DNA合成、细胞形态的影响

采用四唑盐比色法（ＭＴＴ）、３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验、细胞大小测定的图象分析等方法，观察不同浓度牛血浆纤维粘连蛋白（ＦＭ）和人工合成肽段（ＲＧＤＳ，４０μｇ／ｍｌ）对体外培养的人牙髓细胞的影响。ＦＮ（２０、４０μｇ／ｍｌ）可促进牙髓成纤维细胞增殖、刺激细胞ＤＮＡ合成，ＦＮ（１０、８０μｇ／ｍｌ）、ＲＧＤＳ（４０μｇ／ｍｌ）和空白组对牙髓细胞无上述效应。４种浓度ＦＮ和ＲＧＤＳ（４０μｇ／ｍｌ）均使牙髓细胞处于伸展状态，支持细胞的粘附。说明ＦＮ可促进牙髓细胞增殖，并可通过整合素受体调节细胞与基质之间的联系。