归芪猪蹄汤在缓解化疗后患者白细胞减少中的应用

目的观察食疗方归芪猪蹄汤对化疗后白细胞减少的影响。方法选取本院2018年1月～2018年5月化疗的80例患者,将80例恶性肿瘤患者随机分成对照组和观察组各40例,2组患者均采用常规的化疗方案,观察组在此基础上加食归芪猪蹄汤,比较2组患者白细胞计数的变化。结果观察组在化疗后白细胞计数最低值显著高于对照组(P 0.05)。结论食疗方归芪猪蹄汤应用于化疗后白细胞减少效果显著。     

归芪口服液促进放射损伤小鼠骨髓造血恢复的研究

目的　探讨归芪口服液促进放射损伤小鼠早期骨髓造血恢复的可能机制。方法　4 2只清洁级近交系健康昆明小鼠随机分为三组,正常组不做任何处理,归芪组和对照组于6 .0Gy60 Coγ射线一次性全身均匀照射后,分别被胃饲归芪口服液(2 0 0mg/次,2次/d)和相同剂量的生理盐水。照射后第4、8和14d计数小鼠骨髓单个核细胞和骨髓组织中巨核细胞数,测量骨髓造血组织面积,并用免疫组织化学法检测骨髓组织中粘附分子CD4 4和CD5 4的表达水平。照射后第8d计数小鼠的脾集落形成单位(CFU S)数。结果　照射后第4、8、14d归芪组骨髓单个核细胞、骨髓组织中巨核细胞计数和骨髓造血组织面积均显著高于对照组(P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;第4、8d归芪组骨髓组织中CD4 4、CD5 4的表达水平均显著高于对照组(P <0 0 1) ,至第14d归芪组CD4 4、CD5 4表达水平下降,趋于恢复正常水平。照射后第8d归芪组CFU S计数显著高于对照组(P <0 .0 1)。结论　归芪口服液能够促进放射损伤小鼠早期骨髓造血功能的恢复,其机制可能是通过促进骨髓组织中粘附分子CD4 4、CD5 4的表达实现的。     

补肾健脾方治疗环磷酰胺所致小鼠骨髓造血抑制模型的研究

目的通过建立小鼠模型来证实补肾健脾方对环磷酰胺所致骨髓造血抑制的治疗作用。方法将C57BL/6小鼠分为正常对照组、骨髓造血抑制组和补肾健脾方治疗组,骨髓造血抑制组和补肾健脾方治疗组腹膜注射环磷酰胺3d,第4天开始,补肾健脾方治疗组给予中药方剂灌胃治疗,其余两组给予饮水灌胃对照。治疗14d后,利用血细胞分析仪和流式细胞仪分别检测小鼠外周静脉血血细胞计数、骨髓造血干细胞数目和骨髓单个核细胞增殖能力。结果与正常对照组相比,骨髓造血抑制组白细胞计数、骨髓造血干细胞数目、骨髓单个核细胞增殖能力明显下降(P0.01)。经补肾健脾方治疗后,补肾健脾方治疗组血小板计数、骨髓造血干细胞数目、骨髓单个核细胞增殖能力明显高于骨髓造血抑制组(P0.05)。结论补肾健脾方能减轻环磷酰胺化疗的不良反应,提高化疗药物的抗肿瘤效果。     

四种缓解化学药物治疗后骨髓抑制中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血和骨髓象的影响

目的:观察补气养血、健脾益肾的参芪颗粒,补气养血的复方阿胶浆,补气养阴的贞芪扶正颗粒,温肾健髓、益气养阴、生血止血的复方皂矾丸4种中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血及骨髓象的影响。方法:实验于2005-06/09在河南中医学院药理实验室完成。①选用健康昆明种成年小鼠150只,雌雄不拘。按随机数字表法分为15组,每组10只:高、中、低剂量贞芪扶正颗粒组分别按15,10,5g/kg(20mL/kg)剂量灌胃贞芪扶正颗粒混悬液(主要成分:黄芪、女贞子;甘肃扶正药业科技股份有限公司生产,批号040803);高、中、低剂量复方阿胶浆组分别按10,20,30mL/kg剂量灌胃复方阿胶浆(主要成分:阿胶、熟地黄、党参等;山东东阿阿胶股份有限公司生产,批号050446);高、中、低剂量复方皂矾丸组分别按2.4,1.6,0.8g/kg(20mL/kg)剂量灌胃复方皂矾丸混悬液(主要成分:皂矾、西洋参、海马等;陕西郝其军制药有限责任公司生产,批号041014);高、中、低剂量参芪颗粒组按3,2,1g/kg(0.2mL/10g)剂量灌胃参芪颗粒混悬液(主要成分:人参、黄芪、当归等;江西山高制药有限公司生产,批号040702);鲨肝醇组按10g(20mL)/kg剂量灌胃鲨肝醇混悬液;空白组和模型组灌胃同体积的生理盐水(0.2mL/10g)。每天给药1次,连续给药10d。从实验的第6天开始除空白组外,各组小鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg,连续给药5d。②各组小鼠分别于末次给药后24h,进行血常规检测。另取右侧股骨,镜下计数骨髓有核细胞数。③计量资料符合正态分布、方差齐者用t检验。结果:小鼠150只均进入结果分析。①对外周血的影响:模型组小鼠血白细胞、红细胞和血小板计数及血红蛋白水平、血细胞比容均明显低于空白组(t=2.49～8.19,P<0.05￣0.01)。鲨肝醇组、各剂量参芪颗粒组和复方阿胶浆组及贞芪扶正颗粒组、复方皂矾丸组小鼠血白细胞计数均明显高于模型组(t=3.67～9.12,P<0.01)。中剂量复方阿胶浆组、贞芪扶正颗粒组和复方皂矾丸组和高剂量贞芪扶正颗粒组小鼠血红细胞计数明显高于模型组(t=2.58～3.05,P<0.05￣0.01)。高、中剂量复方阿胶浆组和中、低剂量贞芪扶正颗粒组小鼠血血小板计数明显高于模型组(t=2.48～2.84,P<0.05￣0.01)。各剂量复方阿胶浆组和各剂量贞芪扶正颗粒组和中、低剂量复方皂矾丸组小鼠血血红蛋白水平明显高于模型组(t=2.21～3.28,P<0.05￣0.01)。中剂量参芪颗粒组、各剂量复方阿胶浆组、高剂量贞芪扶正颗粒组,以及高、中剂量复方皂矾丸组小鼠血细胞比容明显高于模型组(t=2.15～2.86,P<0.05)。②对骨髓象的影响:与空白组比较,模型组小鼠骨髓有核细胞数均明显低于空白组(t=8.08,P<0.01)。鲨肝醇组,各剂量参芪颗粒组、复方阿胶浆组、贞芪扶正颗粒组、复方皂矾丸组小鼠骨髓有核细胞数明显高于模型组(t=3.05～5.67,P<0.01)。结论:参芪颗粒、复方阿胶浆、贞芪扶正颗粒、复方皂矾丸对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血血细胞状况和骨髓象均有改善作用;其中贞芪扶正颗粒和复方皂矾丸对白细胞计数、红细胞计数的升高作用为优;贞芪扶正颗粒和复方阿胶浆对血小板计数升高作用为优;贞芪扶正颗粒、复方阿胶浆和复方皂矾丸对血红蛋白升高作用为优;4种中成药对血虚模型血细胞比容的影响相近;贞芪扶正颗粒对血虚模型有核细胞的升高作用为优。     

重组人骨形成蛋白成熟肽-4对辐射小鼠骨髓造血损伤的修复作用

目的探讨小鼠受到辐射后,重组人骨形成蛋白成熟肽-4（rhBMP-4m）对辐射引起的骨髓造血损伤的修复作用。方法通过60 Coγ射线照射,建立小鼠骨髓造血损伤模型,经 rhBMP-4m 连续治疗后,抽血检测小鼠外周血白细胞数,并进行骨髓单个核细胞计数,对脾结节进行计数并通过流式细胞仪检测骨髓单个核细胞中 CD34＋细胞比例,比较辐射组和实验组之间的差别。结果经 rhBMP-4m 治疗的小鼠,白细胞数、单个核细胞数、脾结节数和 CD34＋细胞比例均明显高于辐射组（P＜0．05）。结论对于辐射引起的小鼠骨髓造血损伤,rhBMP-4m 能够加快骨髓造血系统的重建。     

磷酸酯化银耳多糖对化学损伤小鼠造血功能的影响

目的探讨磷酸酯化银耳多糖对化学损伤小鼠造血功能的影响。方法分别采用阿糖胞苷和环磷酰胺构造化学损伤的动物模型,观察磷酸酯化银耳多糖在10 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg三个剂量时对化学损伤小鼠造血功能的影响。结果磷酸酯化银耳多糖高、中、低三个剂量均能够拮抗阿糖胞苷引起的小鼠WBC数目降低,经统计学处理差异有显著性(P<0.05)。尤以30 mg/kg剂量组效果最为显著(P<0.01)。从骨髓DNA水平变化看,磷酸酯化银耳多糖高、中、低三个剂量组相对于阿糖胞苷组均有增加的趋势,其中30 mg/kg剂量组差异有显著性(P<0.05)。磷酸酯化银耳多糖高、中、低三个剂量均能够拮抗环磷酰胺引起的小鼠WBC数目降低,经统计学处理差异有显著性(P<0.01)。从骨髓DNA水平变化看,磷酸酯化银耳多糖高、中、低三个剂量组相对于环磷酰胺组均有增加的趋势,其中60mg/kg剂量组差异有显著性(P<0.05)。结论磷酸酯化银耳多糖可以减轻化疗药物对小鼠造血功能的损伤,拮抗白细胞的降低。     

环磷酰胺致大鼠卵巢储备功能低下的模型对照研究

目的:比较环磷酰胺不同剂量致大鼠卵巢储备功能低下,对比分析出哪种剂量能制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。方法:将40只有正常周期的SD雌性大鼠随机分为4组:环磷酰胺高、中、低剂量组(分别以浓度计90、75、50mg/kg)和阴性对照组(空白),每组10只。除空白组外,环磷酰胺组均按照计量腹腔注射一次。造模结束后14d,处死大鼠,检测各组大鼠血清性激素及AMH水平,观察大鼠动情周期的变化及各组大鼠卵巢组织形态学变化,对比各组大鼠卵巢和子宫的质量。结果:(1)各组大鼠血清激素及AMH比较:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组致雌性大鼠FSH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),致雌性大鼠E2、AMH水平均显著降低,差异有统计学意义(P0.05),其中环磷酰胺中剂量组LH水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,各组大鼠FSH、LH水平均显著降低,E2、AMH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。(2)各组大鼠卵巢和子宫组织的质量:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.05),环磷酰胺高、中剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,空白组及高、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.01),空白组及低剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:环磷酰胺造成大鼠卵巢功能受到损害,中剂量环磷酰胺可以制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。     

氡及子体吸入对BALB/c小鼠造血功能影响的研究

目的 研究氡及其子体吸人对BALB／c小鼠造血功能的影响。方法雄性BALB／c小鼠吸人氡及其子体的累积剂量分别达0、21、33工作水平月(working level month，WLM)后，观察小鼠外周血血常规的变化，及小鼠脾脏指数、肾脏指数、胸腺指数的变化。同时检测了小鼠骨髓细胞DNA含量、骨髓有核细胞计数和骨髓粒细胞集落(CFU-G)增殖的变化。结果小鼠吸入氡及其子体后，与对照组相比，外周血中血细胞计数和红细胞平均值有显著性变化，红细胞、红细胞压积显著减少，提示有贫血症状；高剂量组血小板明显减少，而此剂量组脾脏指数增高，表明血小板可能分布异常；低剂量组DNA含量显著减少，骨髓有核细胞计数和CFU-G的增殖能力各剂量组无显著改变。结论在该实验的染毒剂量下，氡及其子体吸入可引起小鼠红细胞、HCT显著减少，血小板明显降低和脾脏指数增高，低剂量组DNA含量明显降低。     

脾低分子量提取物对小鼠白细胞减少症治疗作用及其机制的研究

目的:研究脾低分子量提取物对盐酸表柔比星引起的小鼠白细胞减少症的治疗效果并探讨其相关机制。方法:利用注射盐酸表柔比星(10 mg/kg)的方法,建立小鼠白细胞减少症的模型。在注射化疗药物之后,分别以不同剂量的脾低分子量提取物、灵芝口服液及重组粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)对白细胞减少症小鼠进行治疗。观察并记录各组小鼠体重、毛色及运动能力等一般生存状态指标;取各组小鼠尾静脉血并计数其中白细胞数量;取小鼠骨髓,观察骨髓涂片。结果:模型组小鼠体重后期逐渐下降,且出现毛色变暗、毛质粗糙、运动能力下降等现象;治疗组除应用rh G-CSF的动物以外,生存状况均有不同程度的改善。空白对照组小鼠白细胞数无明显波动;模型组及各治疗组小鼠注射表柔比星之后,外周血白细胞数均有所下降;高剂量脾低分子量提取物及rh G-CSF注射液治疗组小鼠白细胞数下降趋势低于其他各实验组。骨髓涂片结果显示,脾低分子量提取物治疗组小鼠骨髓象有核细胞占比显著高于模型组小鼠(P 0.05)。结论:脾低分子量提取物能够显著改善小鼠骨髓造血状态,促进受抑制的骨髓细胞增生,从而具有治疗小鼠白细胞减少症的作用。     

去甲斑蝥素对环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血功能的影响

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血的影响及机制。方法:采用CTX腹腔注射法复制白细胞减少症模型,以NCTD干预模型大鼠,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)数量,骨髓组织作切片HE染色观察病理改变,流式细胞术检测骨髓细胞增殖周期、凋亡率,免疫组织化学法检测骨髓组织中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX的表达。结果:NCTD干预白细胞减少症模型后,外周血WBC显著升高;模型大鼠骨髓骨髓组织结构破坏,造血细胞明显减少,NCTD干预后促进骨髓组织细胞结构显著恢复;NCTD可促使白细胞减少症模型大鼠骨髓细胞增殖及周期的转化,显著抑制CTX所诱导的骨髓细胞凋亡与坏死,上调抑凋亡蛋白BCL-2表达,下调促凋亡蛋白BAX的表达。结论:NCTD可刺激CTX诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血,促进外周血白细胞水平的恢复,其机制可能与NCTD调控骨髓细胞周期、抑制细胞凋亡等有关。     

混合造血干细胞移植联合过继免疫治疗对急性髓系白血病的疗效

本研究探讨混合造血干细胞移植(mix-HSCT)后给予单倍体相合供体淋巴细胞输注(hiDLI)加白介素2(IL-2)对急性髓系白血病(AML)患者的疗效。mix-HSCT即自体外周血造血干细胞与单倍体相合异体骨髓造血干细胞混合移植,49例AML患者在完全缓解期采用全身照射加VEMAC预处理方案后,接受了mix-HSCT。所有患者均经过化疗加G-CSF方法动员自体外周血造血干细胞,或供者骨髓造血干细胞未经过G-CSF动员。试验组33例患者在造血恢复后给予hiDLI+IL-2治疗1-8次。对照组16例患者造血恢复后未做特殊治疗。随访时间>3年。结果表明:所有患者均获得造血重建,无1例发生移植物抗宿主病(GVHD)。两组患者中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间分别为14(12-18)d和14(11-16)d,白细胞数≥4.0×108/L的中位时间分别为17(16-22)d和18(16-20)d,血小板数≥50×108/L的中位时间分别为25(24-29)d和25(23-26)d。移植后16-21 d时显示恢复期骨髓象。试验组有9例形成混合嵌合体(46XX/46XY),持续存在时间3-12个月,随访显示存活21例,长期无病存活率为63.6%。对照组中有3例形成混合嵌合体(46XX/46XY),持续存在时间3-6个月,随访显示存活7例,长期无病存活率为50.0%。结论:mix-HSCT后应用hiDLI+IL-2治疗对AML患者的造血功能恢复正常、长期无病生存可能有积极作用。     

NLRP3炎性复合体在异基因造血干细胞移植不同预处理方案所致肝损伤中的作用比较

目的 探讨NOD样受体蛋白（NLRP）3炎性复合体在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）不同预处理方案中所致肝损伤的作用.方法 选择50只无特殊病原体（SPF）级BALB/c（H-2Kd）雄性小鼠作为研究对象.将其采用计算机随机分组法分为实验组（n=40）和对照组（n=10）,再按照allo-HSCT前预处理方案不同,将实验组受鼠分为白消安/环磷酰胺（BU/CY）预处理组（n=20）和全身照射（TBI）预处理组（n=20）.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.于移植后第15天处死各组受鼠,收取其骨髓及肝脏标本,检测骨髓嵌合率和白细胞计数,并计算肝脏指数.将肝脏标本分成二部分,一部分通过苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学染色及Masson 3色染色分析肝脏组织的形态学变化,进行肝静脉闭塞病（HVOD）病理学评分;另一部分采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测各组受鼠肝脏组织中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、-18的相对表达量,评价细胞因子在移植后肝脏损伤中的作用;并检测细胞因子水解酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1与NLRP3炎性复合体在各移植受鼠肝脏组织中的相对表达量,分析其在不同预处理方案所致HVOD中的作用.结果 ①实验组受鼠骨髓细胞均成功植入,在移植后第15天,嵌合率均大于98.0％.②BU/CY预处理组受鼠并发HVOD的病理损伤程度较TBI预处理组严重,BU/CY预处理组受鼠的肝脏指数水平低于TBI预处理组;TBI预处理组受鼠中,5只受鼠的HVOD病理评分为中度,5只为重度,而BU/CY预处理组10只受鼠为重度.③BU/CY预处理组受鼠炎性细胞因子IL 1β、-18的相对表达量是TBI预处理组的13.9倍和5.5倍,两组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.④BU/CY预处理组受鼠caspase-1的相对表达量为TBI预处理组的19.5倍,二者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;BU/CY预处理组受鼠NLRP3的相对?     

丹参素对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究

目的:探讨丹参素对小鼠外周血造血干细胞的动员作用及其对小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞黏附分子的影响。方法:30只BALB/c小鼠随机分为三组:丹参素组、G-CSF组、生理盐水组,腹腔注射d1～d7,每日1次,第2～8天,采用外周血WBC和MNC计数、流式细胞术、造血祖细胞体外培养、免疫细胞化学等检测各组给药后对外周血WBC、MNC、CD34+细胞、CD49d阳性细胞、CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的产率及小鼠骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率的影响。结果:丹参素组给药第7天外周血WBC、MNC数量达到高峰,分别为给药前的3倍和3.5倍;丹参素组外周血CD34+、CD49d阳性细胞及骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率分别为(1.03±0.24)%、(12.59±2.64)%和(50.86±8.77)%,均明显高于生理盐水组(P<0.05);其CFU-GM、CFU-MK和CFU-E产率分别为(14.90±2.88)%、(12.50±4.06)%和(16.10±6.36)%,均明显高于生理盐水组(P<0.01)。结论:丹参素对小鼠外周血造血干细胞有一定的动员作用,且这一作用可能与其上调小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞黏附分子的表达有关。     

右旋蛋氨酸对小鼠造血系统辐射损伤的作用

本研究旨在探讨右旋蛋氨酸（D-methionine,D-met）对造血系统辐射损伤的影响。将C57BL／6小鼠分为对照组、照射组、D-met300mg／kg组＋照射组和D-met1000mg/kg＋照射组。对照组小鼠接受假照射,其余3组小鼠接受7．5Gy,1、4、8q和lGy1线的全身照射,分别用于小鼠存活率、骨髓细胞存活率、外周血白细胞数及其分类数以及骨髓细胞集落形成能力的检测。D-met于照射前30min腹腔注射。结果表明,300和1000mg／kgD-met均未显著提高7．5Gy照射小鼠的存活率;10-2、10-3和10-4mol／LD-met能明显提高1、4、8Gy照射小鼠骨髓细胞的存活率;300和1000mg／kgD-met虽能使受1Gy全身照射小鼠的外周血白细胞数有所增加,但与照射小鼠相比却无统计学差异,而对骨髓细胞集落形成能力具有明显的促进作用。结论：D-met可有效缓解辐射对骨髓细胞的杀伤作用,提高受照小鼠骨髓细胞的存活率,促进照射小鼠造血功能的恢复。     

叶绿素铜钠盐联合环孢菌素A对免疫介导再生障碍性贫血模型小鼠的实验研究

目的探讨叶绿素铜钠盐（SCC）联合环孢菌素A（CSA）治疗再生障碍性贫血（AA）的疗效。方法建立免疫介导AA模型小鼠，分别胃饲2种不同剂量SCC12.5mg／（kg·d）＋CsA12.5mg／（kg·d），SCC25mg／（kg·d）＋CsA12.5mg／（kg·d），以CsA，scc[各25mg／（kg·d）]为阳性对照组，正常对照组及模型对照组胃饲生理盐水，每组灌胃0.5ml／d，分2次给药，连续14d，分别检测血象，另取股骨作骨髓病理切片。结果SCC＋CsA小剂量组WBC、船、PLT均明显高于AA模型组，且HB，PLT分别高于SCC组和CsA组（P〈0．05）。骨髓病理切片显示SCC＋CsA小剂量组骨髓增生较模型组小鼠（造血组织容量〈34％）改善明显（造血组织容量80％）。结论SCC＋CsA促进AA模型小鼠造血功能，提高小鼠外周血白细胞、血红蛋白、血小板三系，对AA模型小鼠具有一定的治疗作用，且疗效好于单用SCC、CsA。     

末梢血与静脉血对化疗后骨髓抑制期白血病患者WBC、HB、PLT结果的对比分析

目的比较白血病患者化疗后骨髓抑制期末梢血与静脉血中白细胞（WBC）、血红蛋白（HB）、血小板（PLT）检测结果有无差别。方法采集2012年4月2013年4月我院血液科层流病房96名化疗后骨髓抑制期患者的末梢血和静脉血,用XT-2000i全血细胞分析仪测定白细胞（WBC）、血红蛋白（HB）、血小板（PLT）,统计分析两种检测手段的差异。结果末梢血的白细胞（WBC）检测结果为：1．106±0．684×10^9／L,静脉血检测结果为：0．918±0．780×10^9／L,末梢血白细胞检测值高于静脉血结果,两者具有统计学意义（P〈0．05）;末梢血中血红蛋白（HB）、血小板（PLT）检测结果分别为：69．875±15．437g／L,70．646±20．737×10^9／L,静脉血检测结果分别为：70．177±15．225g／L,70．583±20．625×10^9／L,两组血标本检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论为准确的判断白血病患者化疗后骨髓抑制的程度,血常规检测应以静脉血为佳,而不能采用末梢血检测以代替。     

GST-pi gene-transduced hematopoietic progenitor cell transplantation overcomes the bone marrow toxicity of cyclophosphamide in mice

Autologous transplantation of bone marrow cells (BMCs) transduced with the multidrug resistance 1 (MDR1) gene or dihydrofolate reductase (DHFR) gene has already been applied in clinical chemoprotection trials. However, anticancer drugs frequently used in high-dose chemotherapy (HDC), such as alkylating agents, are not relevant to MDR1 or DHFR gene products. In this context, we have previously reported that glutathione S-transferase-pi (GST-pi) gene-transduced human CD34(+) cells showed resistance in vitro against 4-hydroperoxicyclophosphamide, an active form of cyclophosphamide (CY). In the present study, a subsequent attempt was made in a murine model to evaluate the effectiveness of transplantation of GST-pi-transduced BMCs to protect bone marrow against high-dose CY. The gene transfection was carried out retrovirally, employing a recombinant fibronectin fragment. Transfection efficiency into CFU-GM was 30%. After the transplantation, recipient mice (GST-pi mice) received three sequential courses of high-dose CY. As the chemotherapy courses advanced, both shortening of recovery period from WBC nadir and shallowing of WBC nadir were observed. In contrast to the fact that three of seven control mice died, possibly due to chemotoxicity, all seven GST-pi mice were alive after the third course, at which point the vector GST-pi gene was detected in 50% of CFU-GM derived from their BMCs and peripheral blood mononuclear cells. When BMCs obtained from these seven mice were retransplanted into secondary recipient mice, 20% of CFU-GM from BMCs showed positive signals for vector GST-pi DNA after 6 months. These data indicate that the GST-pi gene can confer resistance to bone marrow against CY by being transduced into long-term repopulating cells.     

小鼠胎盘间充质干细胞移植对造血系统自然衰老的影响

背景：造血系统作为人体重要组成部分,随着年龄的增长会出现功能不断衰退。目的：观察小鼠胎盘间充质干细胞对小鼠造血系统自然衰老的延缓作用。方法：取孕13.5dBalb/c小鼠胎盘,制备胎盘间充质干细胞。6月龄Balb/c小鼠48只随机分均为细胞移植组和对照组。细胞移植组尾静脉输注胎盘间充质干细胞,每月1次,共6次;对照组输注生理盐水。第3个月进行外周血象、骨髓有核细胞计数、成纤维细胞集落培养、造血祖细胞集落培养和外源性脾集落形成单位计数检测;第6个月时增加骨髓切片观察、骨髓细胞重建造血能力测定。结果与结论：细胞移植组小鼠一般情况优于对照组;干预第3个月,细胞移植组的骨髓有核细胞计数、巨噬系祖细胞、巨核系祖细胞多于对照组,其他指标无明显差别;干预第6个月,除外周血象仍无差别外,其他的上述指标均明显高于对照组;观察期内两组的上述指标均随时间延长呈下降趋势,但细胞移植组下降速度明显慢于对照组,差异有显著性意义（P〈0.05）。组织学观察发现,细胞移植组骨髓造血组织较对照组丰富,而对照组骨髓脂肪化显著增加;实验还发现细胞移植组骨髓细胞的造血重建能力明显优于对照组。结果提示,小鼠胎盘间充质干细胞能够延缓小鼠造血系统的衰退。     

丹参素、川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究

目的探讨丹参素、川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞的动员作用及其对小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞粘附分子的影响。方法40只BALB／c小鼠，随机分为4组：丹参素组[300mg／（kg·d）]、川芎嗪组E50mg／（kg·d）]、rhG-CSF组[250μg／（kg·d）]、生理盐水组，腹腔注射d1～7，1次／d，第8天，采用外周血WBC、MNC计数、流式细胞术、造血祖细胞体外培养、免疫细胞化学等检测各组给药后对外周血WBC、MNC、CD34^＋细胞、CD49d阳性胞、CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的产率及小鼠骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率的影响。结果丹参素组给药第7天外周血WBC、MNC数量达到高峰，分别为给药前的3倍和3．4倍；丹参素组外周血CD34^＋、CD49d阳性细胞及骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率分别为（1．03±0．24）％、（12．59±2．64）％和（50．86±8．77）％，均明显高于生理盐水组（P〈0．05）；其CFU-GM、CFU-MK和CFU-E产率分别为（14．90±2．88）％、（12．50±4．06）％和（16．10±6．36）％，均明显高于生理盐水组（P〈0．01）；川芎嗪组给药第7天外周血WBC、MNC数量达到高峰，分别为给药前的3．2倍和3．9倍；川芎嗪组外周血CD34^＋、CD49d阳性细胞及骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率分别为（O．86±0．42）％、（12．91±2．84）％和（48．47±7．87）％，均明显高于生理盐水组（P〈0．05）；川芎嗪组CFU-GM、CFU-MK和CFU-E产率分别为（53．10±9．63）％、（20．40±5．36）％和624．50±5．35）％，均明显高于生理盐水组（P〈0．01）。结论丹参素、川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞有一定的动员作用，且这一作用可能与其上调小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞粘附分子的表达有关。     

去卵巢大鼠骨密度变化与骨髓造血功能改变的关系

本研究探讨去卵巢大鼠不同时段骨密度的改变与骨髓造血功能改变的关系。探讨骨质疏松的发生与造血功能的关联。50只3月龄SD雌性大鼠随机分为去卵巢（OVX）组和假手术（Sham）组,分别在4周、8周、12周、16周和20周处死。取左侧股骨测量骨密度。右侧远端股骨干骺端松质骨甲醛固定,常规制片观察骨髓组织病理改变,集落形成实验观察造血干细胞集落形成能力,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清造血生成因子粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）的浓度。结果表明,大鼠去卵巢4周还未出现明显的骨量丢失时,其骨髓组织即出现明显的脂肪组织容量增加,大鼠去卵巢8周、12周、16周和20周,与同时段假手术组比较股骨骨密度显著减低（P〈0．05）,同时伴有骨髓造血组织容量减少,脂肪组织容量增高,巨核细胞数目减少,破骨细胞数目和肥大细胞数目显著增加,与假手术组比较均有显著性差异（P〈0．05）。大鼠去卵巢16周后,造血干细胞形成粒-巨噬细胞集落能力明显低于假手术组。大鼠去卵巢12周后,GM—CSF水平明显低于假手术各组（P〈0．05）。结论：去卵巢大鼠骨密度减低的同时存在骨髓造血功能的减低,3月龄SD雌性大鼠去卵巢可以作为造血功能减低的动物模型,有助于临床上诸多造血功能减低的研究。