依那普利、缬沙坦对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的通过依那普利、缬沙坦对肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)/Smad3及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨两药物对肝纤维化的治疗作用。方法制备四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型,60 d造模成功后分别给予依那普利、缬沙坦灌胃15 d。对各组大鼠肝组织进行HE及Masson染色,Western blotting检测TGFβ1/Smad3、CTGF蛋白表达,Real-time PCR检测TGFβ1/Smad3及CTGF mRNA表达。结果依那普利、缬沙坦可明显减轻大鼠肝组织纤维化程度,TGFβ1/Smad3、CTGF蛋白(0.51±0.10、0.49±0.11 vs.0.60±0.09;0.72±0.09、0.69±0.07 vs.0.98±0.13;0.51±0.05、0.47±0.13 vs.0.61±0.05,P均<0.05)及mRNA(2.77±0.83、2.97±0.48vs.4.07±0.97;4.15±0.98、4.17±0.98 vs.6.06±0.85;5.82±1.21、5.34±1.24 vs.7.63±1.25,P均<0.05)表达较模型组降低。结论依那普利、缬沙坦对大鼠肝纤维化具有抑制作用,为探索新的治疗药物提供了实验依据。     

高血糖对肝纤维化大鼠血清中TGF-β1、CTGF含量的影响

目的观察高血糖对肝纤维化大鼠血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)含量的影响,探讨高血糖与肝纤维化之间的相关性。方法将40只SD大鼠按照体重随机分为4组,每组10只,分别为对照组(C组)、高血糖组(H组)、肝纤维化组(M组)、高血糖+肝纤维化组(H+M组),其中用四氯化碳造肝纤维化模型,用链脲佐菌素诱导出现高血糖,8周后将动物处死,取血,采用酶联免疫分析法(ELISA法)检测4组动物血清中TGF-β1、CTGF的含量,采用实时定量RT-PCR检测4组动物血清中TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果 TGF-β1、CTGF含量及mRNA表达在H组与C组相比无显著差异(P0.05),M组及H+M组血清中上述指标明显高于C组(P0.05),而H+M组血清中上述指标升高更明显(P0.05);且TGF-β1与CTGF之间具有明显的正相关(r=0.812,P0.05)。结论高血糖能够增加肝纤维化大鼠血清中TGF-β1及CTGF的表达及含量,且TGF-β1与CTGF含量与肝纤维化程度呈正相关,可以作为评价肝纤维化的重要指标。     

肝组织CTGF、TGF-β_1的表达与肝纤维化关系的实验研究

目的:探讨免疫性肝纤维化肝组织结缔组织生长因子(CTGF)与转化生长因子β1(TGF-β1)的表达与肝纤维化的关系。方法:用猪血清大鼠腹腔内注射复制免疫损伤性肝纤维化模型,免疫攻击16周后处死动物,行肝组织病理分析,免疫组化法检测肝内CTGF、TGF-β1表达。结果:16周后模型组大鼠形成典型的肝纤维化,肝内CTGF与TGF-β1表达均显著增强,同时二者阳性分布部位相近,表达程度呈正相关性;且CTGF表达与组织病理上肝纤维化变化呈正相关性。结论:实验性肝纤维化过程中CTGF与TGF-β1促进肝纤维化的进展。     

TGF-β_1 PDGF-BB及CTGF在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达及意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化不同阶段转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)、结缔组织生长因子(CTGF)在肝组织中的表达及意义。方法根据慢性肝炎分期标准,将80例CHB患者分为S0组、S1组、S2组、S3组和S4组,观察各组肝组织TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF免疫组织化学染色;比较各组肝组织TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF含量,以及血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平,并分析TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF水平与血清肝纤维化相关指标的相关性。结果 TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF免疫组化染色结果及水平比较表明,肝组织中TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF水平均与肝纤维化程度密切相关,且随肝纤维化程度的加重而增加。从S0组到S4组,血清PCⅢ、CⅣ、HA、LN水平依次递增,各组间比较差异均有统计学意义(P0.01)。相关性分析结果表明,肝组织中TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF水平均与血清PCⅢ、CⅣ、HA、LN水平呈正相关(P0.05)。结论在肝纤维化的不同阶段,肝组织中TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF表达水平随肝纤维化程度的加重而增加,在早期肝纤维化诊断方面具有重要价值。     

促红细胞生成素衍生物抗糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的探讨氨甲酰促红细胞生成素(CEPO)对实验性糖尿病大鼠心脏的保护作用。方法高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,建模成功后按处理方式不同分为:空白组(A组),糖尿病模型组(B组),糖尿病+CEPO低剂量组(C组),糖尿病+CEPO中剂量组(D组),糖尿病+CEPO高剂量组(E组),重组人促红细胞生成素(rh EPO)+糖尿病组(F组)。利用HE染色、Masson染色观察大鼠心肌形态学变化。免疫组化方法检测心肌转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生子因子(CTGF)蛋白表达情况。应用SPSS 13.0统计软件包进行数据处理,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK检验。结果糖尿病大鼠心肌内胶原组织明显增多,TGF-β1、CTGF蛋白表达增多,与对照组比较差异有统计学意义(TGF-β1:9.84±1.33 vs.4.91±1.16;CTGF:9.67±1.52 vs.3.44±1.34;P<0.05),CEPO可使心肌内胶原组织减少,TGF-β1、CTGF蛋白表达减少,并且剂量越大疗效越明显(TGF-β1:6.38±1.26;CTGF:6.09±1.66,P<0.05)。结论 CEPO可改善糖尿病大鼠心肌纤维化程度,其疗效具有剂量依赖性。     

转化生长因子-β_1和Smad7信号通路与大鼠肝纤维化的相关性

目的探讨肝纤维化组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad7基因在信号传导通路中的作用。方法 40只Wistar大鼠随机分为对照组和模型组各20只,模型组腹腔注射质量分数10%四氯化碳注射液8周,对照组腹腔注射质量分数0.9%氯化钠注射液。2组于8周后检测血清谷草转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和TGF-β1水平,组织病理观察肝组织炎症反应及纤维化程度,采用Western blot与RT-PCR法检测肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白和mRNA水平。结果模型组血清GPT[(178.45±24.36)u/L]、HA[(693.37±206.35)μg/L]和TGF-β1[73.94±28.37)u/L]水平明显高于对照组[(42.80±8.37)u/L、(59.35±28.12)μg/L和(20.68±17.85)u/L](P0.05);模型组肝组织TGF-β1mRNA和蛋白(0.86±0.04、3.86±0.87)、Smad3mRNA和蛋白(0.52±0.03、2.63±0.94)表达水平高于对照组(0.31±0.03、1.07±0.60,0.21±0.01、0.81±0.04)(P0.05),Smad7 mRNA和蛋白(0.33±0.02、1.20±0.53)表达水平低于对照组(0.77±0.02、2.83±1.15)(P0.05)。结论 TGF-β1、Smad7信号传导通路过度活化及血清GPT、HA和TGF-β1水平升高,可能与肝纤维化的发生和发展密切相关,TGF-β1高表达在促进肝纤维化发生中起重要作用。     

苦参碱对房颤犬心房肌胶原合成及TNF-α、TGF-β1和CTGF的影响

目的：探讨苦参碱对犬心房颤动（房颤）心房肌组织中胶原合成以及肿瘤坏死因子（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法健康比格犬10只采用快速右心室起搏造房颤模型,随机分成房颤组和房颤＋苦参碱组各5只。采用天狼星红染色,计算胶原容积分数（CVF）以测定纤维化程度;采用免疫组织化学法检测右心房TNF-α、TGF-β1和CTGF的蛋白表达情况;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测TNF-α、TGF-β1和CTGF的mRNA水平表达情况。结果与房颤组相比,房颤＋苦参碱组纤维化程度降低,CVF 明显下降（P＜0.05）,TNF-α、TGF-β1和 CTGF 蛋白表达水平下降,且TNF-α和TGF-β1的mRNA表达水平显著下降（P＜0.05,P＜0.01）。结论苦参碱可能通过抑制TNF-α、TGF-β1和CTGF的表达,抑制房颤心房肌胶原合成,改善心房组织纤维化程度。     

红细胞生成素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及对MCP-1和TGF-β1表达的影响

目的探讨红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteralobstruction,UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用及其对单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant pro-tein-1,MCP-1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠分为假手术组(20例),UUO对照组(20例)及EPO治疗组(20例),分别于手术后第3,7,14,21d处死动物留取肾组织标本。应用马松染色进行肾间质纤维化程度评分;应用免疫组化方法和Western blot方法测定肾组织中MCP-1、TGF-β1的表达程度。结果马松染色显示手术后第3,7d,EPO治疗组肾间质纤维化程度较UUO对照组明显减轻(P0.05)。手术后第3,7,14d,EPO治疗组MCP-1、TGF-β1的表达明显低于UUO对照组(P0.05)。结论 EPO可以减轻UUO模型大鼠早期肾间质纤维化程度,该作用可能与EPO抑制肾组织MCP-1和TGF-β1的表达有关。     

川芎嗪对肾间质纤维化中TGF-β1/miR-29表达的影响

目的:观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠模型肾间质纤维化(renal interst it ial f i brosi s,R I F)、间质损伤及TGF-β1/miR-29表达的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(Ctrl组)、假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、缬沙坦组(VAN组)和TMP组各10只。经相应处理后,通过HE,Masson染色观察肾组织的病理学表现;同时采用SP免疫组织化学法检测各组病变组织中TGF-β1的表达情况;最后采用RT-PCR技术比较各组TGF-β1,miR-29基因的表达。结果:HE染色结果显示Ctrl组、Sham组、UUO组、VAN组及TMP组的肾间质损伤评分分别为0.27±0.10,0.30±0.12,8.79±1.03,6.23±0.81及4.57±0.74。Masson染色胶原半定量分析结果显示Ctrl组、Sham组、UUO组、VAN组及TMP组的评分分别为0.21±0.03,0.23±0.06,2.49±0.33,1.63±0.07及1.32±0.04。SP免疫组织化学染色显示模型组TGF-β1的蛋白表达高于对照组;而缬沙坦和TMP可部分逆转TGF-β1蛋白的表达,且TMP的效果优于缬沙坦。RT-PCR结果显示模型组的TGF-β1 mRNA表达增高、miR-29 mRNA表达降低。TMP组和缬沙坦组TGF-β1 mRNA表达明显低于模型组,而miR-29 mRNA表达则明显高于模型组;且TMP组TGF-β1 mRNA表达高于缬沙坦组。结论:缬沙坦和TMP可明显减轻UUO致RIF中肾组织学损伤,且TMP的疗效优于缬沙坦。此外TMP还可抑制TGF-β1而促进miR-29的表达。     

环氧合酶-2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对梗阻性肾病大鼠模型肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及机制。方法：采用单侧输尿管结扎(UUO)建立梗阻性肾病模型,并随机分为模型组和治疗组,另设假手术组作对照。治疗组每日给予塞来昔布100mg／kg,模型组、假手术组每日给予等体积的生理盐水于造模前1d至造模后14d灌胃,分别于UUO后3d、7d、14d分批处死,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1、CTGF的基因表达,免疫组化技术检测TGF-β1、CTGF、α-SMA、FN的蛋白表达,放免法检测组织内cAMP的水平。结果：与假手术组相比,模型组TGF-β1、CTGF的基因表达显著上调,cAMP的水平下降(P<0．001)。塞来昔布对梗阻肾TGF-β1的表达无显著改变,但能升高组织内cAMP水平,抑制CTGF的表达,纤维化程度减轻。结论：在梗阻性肾病大鼠中TGF-β1、CTGF的表达均显著升高,选择性COX-2抑制剂通过升高组织内cAMP的水平来抑制TGF-β1的下游因子——CTGF的表达延缓肾间质纤维化。     

牛珀至宝微丸对肺损伤早期纤维化大鼠TGF-β1表达的影响

目的观察牛珀至宝微丸对肺损伤早期纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法 48只SD大鼠随机均分为4组:对照组(C组)、内毒素组(LPS组)、低剂量牛珀至宝微丸预处理组(LD组)、高剂量牛珀至宝微丸预处理组(HD组)。采用气管内联合腹腔注射内毒素法复制肺损伤早期纤维化模型。实验结束前留取标本测定肺血管通透性(EB值)及肺组织湿/干重量比(W/D);HE染色光镜下观察肺损伤程度(DAD评分);用免疫组化法和蛋白质免疫印迹法测定肺组织TGF-β1蛋白表达;Van Gieson染色法检测肺组织胶原纤维表达。结果与LPS组比较,LD组以及HD组,尤其是HD组的EB、W/D值和DAD评分明显降低(P<0.01),光镜下肺肺损伤及纤维化的程度均减轻,肺组织中TGF-β1表达明显减少(P<0.01)。结论牛珀至宝微丸通过抑制肺组织TGF-β1蛋白的激活,有助于减轻内毒素所致肺损伤早期纤维化。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯在二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠中的作用及机制

目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,Col-Ⅲ)表达的影响,探讨PDTC抗肝纤维化的可能机制。方法 22只SD大鼠随机分为对照组6只,模型组8只和治疗组8只。模型组和治疗组腹腔注射质量分数0.5%DMN溶液2mL/kg,每2d注射1次,连续4周,诱导大鼠肝纤维化模型;对照组腹腔注射等量生理盐水。治疗组造模期间给予PDTC溶液150mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。实验结束后处死大鼠,取肝左叶组织光镜下观察肝组织病理改变,采用电泳迁移率试验检测肝组织NF-κBp65活性,实时荧光定量PCR法检测肝组织NF-κBp65、TGF-β1和Col-ⅢmRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织NF-κBp65着色细胞数目和Col-Ⅲ着色面积。结果对照组肝小叶结构正常,细胞排列规律,未见肝细胞变性、坏死;模型组肝细胞融合性坏死,胶原纤维明显增生,假小叶形成;治疗组肝细胞肿胀、变性及炎症细胞浸润程度均较模型组轻;模型组、治疗组肝组织NF-κBp65活性[(76.6±6.5)%、(51.2±4.6)%],NF-κBp65mRNA(0.019 3±0.005 0、0.009 5±0.002 1)、TGF-β1mRNA(0.017 5±0.001 2、0.009 7±0.001 1)及Col-ⅢmRNA表达(0.077 5±0.030 5、0.030 1±0.003 3)均高于对照组((28.5±3.3)%、0.003 0±0.001 4、0.004 7±0.000 9、0.015 2±0.005 5)(P0.05),NF-κBp65着色细胞数目[(68.60±4.65)、(49.65±3.60)个]均较对照组[(14.68±2.98)个]多(P0.05),Col-Ⅲ着色面积[(10.39±1.53)、(7.36±1.17)μm2]均较对照组[(2.46±0.31)μm2]大(P0.05);模型组肝组织NF-κBp65活性,NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA及Col-ⅢmRNA表达均较治疗组高,NF-κBp65着色细胞数目较治疗组多,Col-Ⅲ着色面积较治疗组大(P0.05);Pearson相关分析结果显示,肝组织NF-κBp65活性与NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA、Col-ⅢmRNA表达,NF-κBp65着色细胞数目,Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.884,P0.001;r=0.976,P0.001;r=0.769,P0.001;r=0.934,P0.001;r=0.942,P0.001),TGF-β1 mRNA与Col-ⅢmRNA表达及Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.831,P0.001;r=0.918,P0.001)。结论PDTC可能通过抑制NF-κB活性,下调TGF-β1表达,抑制以Col-Ⅲ为主要成分的细胞外基质过度沉积,来发挥抗肝纤维化作用。     

苯那普利和氯沙坦对肾间质纤维化幼鼠组织型转谷氨酰胺酶和转化生长因子-β_1的抑制作用

目的探讨苯那普利和氯沙坦对肾间质纤维化幼鼠组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的抑制作用。方法雄性wistar幼鼠60只随机分为对照组、模型组和干预组,每组20只。对模型组和干预组幼鼠建立单侧输尿管结扎模型,干预组从建模后第2天起灌胃给予苯那普利和氯沙坦各6mg/(kg·d),1次/天,对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水。于实验开始后第3、7、14、28天每组取5只鼠制成标本进行HE染色、Masson染色,采用非生物素标记的PV6001二步法,检测3组肾组织tTG、TGF-β_1的表达。结果 Masson染色结果显示对照组肾间质纤维化面积较小,模型组肾间质纤维化面积显著增加,干预组小部分纤维化面积较模型组降低,差异有统计学意义(P0.01)。对照组TGF-β_1和tTG表达在对照组较少,模型组高表达,干预组较模型组有所减少,3组比较差异有统计学意义(P0.01),且随着时间增加,模型组和干预组幼鼠TGF-β_1和tTG表达上升,差异有统计学意义。模型组幼鼠tTG水平与Masson染色面积呈正相关关系(r=0.854,P0.01);tTG水平与TGF-β_1水平呈正相关关系(r=0.813,P0.01)。结论肾间质纤维化过程中tTG与TGF-β_1呈正相关关系,苯那普利和氯沙坦抗纤维化作用可能与抑制tTG与TGF-β_1有关。     

热休克蛋白对实验性肝纤维化中TGF-β1的影响

[目的]观察热休克蛋白(HSP)高表达时在实验性肝纤维化大鼠中转化生长因子1(TGF-β1)表达情况,探讨肝纤维化发生过程中HSP对细胞因子TGF-β1的影响.[方法]用硫代乙酰胺诱导肝纤维化动物模型,采用免疫组化、计算机图像分析等技术,观察TGF-β1在正常对照组,肝纤维化模型组以及热休克反应后肝纤维化模型组中的表达和定位特点,检测HSP高表达时各组间TGF-β1的变化.[结果]TGF-β1在实验性肝纤维化发展时期,其表达增高差异有显著性(P＜0.05).热休克反应实验组中TGF-β1的表达可见明显降低(P＜0.05).[结论]TGF-β1在实验性肝纤维化发生发展中起着重要作用,而在HSP高表达时TGF-β1受到抑制.HSP可能通过抑制TGF-β1的产生而减缓肝纤维化发生.     

HGF诱导脐带间充质干细胞通过TGF-β/Smad通路改善大鼠脂肪肝炎合并肝纤维化的作用机制

【目的】探讨肝细胞生长因子(HGF)诱导脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)通过转化生长因子β(TGF-β)/Smad通路改善大鼠脂肪肝炎合并肝纤维化的作用机制。【方法】取SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组、实验模型组(模型空白组、模型治疗1组和模型治疗2组)。实验模型组大鼠给予高脂饲料喂养联合皮下注射40%四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液;正常对照大鼠予普通饲料喂养及皮下注射橄榄油溶液,建模6周后正常对照组与模型空白组予尾静脉注射PBS缓冲液;模型治疗1组予hUC-MSCs注射;模型治疗2组予含HGF的hUC-MSCs注射,观察3周后,所有大鼠采血检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)水平,然后处死,称量体重、肝湿重,计算肝指数;留取肝脏组织进行HE、Masson染色评估肝脏组织病理情况,观察肝脏损伤及肝纤维化情况;采用免疫组化方法检测肝脏组织中的TGF-β1、Smad3的表达水平。【结果】与模型空白组相比,正常对照组、模型治疗1组、模型治疗2组中大鼠肝湿重、肝指数及ALT、AST水平均显著下调;ALB水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。模型空白组可见明显大泡性脂肪变性,伴有明显的肝纤维化,甚至形成不具正常结构的假小叶;模型治疗两组肝纤维化程度、脂肪细胞数量较模型空白组显著减轻,且模型治疗2组的脂肪变性及肝纤维化程度较模型治疗1组稍有减轻。与模型空白组大鼠相比,正常对照组、模型治疗1组、模型治疗2组中大鼠的TGF-β1、Smad3表达水平均显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】hUC-MSCs治疗脂肪肝炎合并肝纤维化大鼠有一定的作用,HGF诱导的hUC-MSCs作用效果优于hUC-MSCs,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路有关。     

IgA肾病模型中小管间质损伤及替米沙坦的干预作用研究

目的:观察大鼠IgA肾病模型中小管间质的损害,并应用替米沙坦对其进行干预,研究其保护作用及可能机制.方法:运用牛血清白蛋白(BSA)+脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCl4).方法:建立IgA肾病模型,设立正常对照组、Iga模型组、替米沙坦治疗组,实验前后进行相关生化指标的测定,光学显微镜观察肾脏组织形态改变;免疫组化观察各组TGF-β1、α-SMA表达;RT-PCR检测TGF-β1、MCP-1变化.结果:模型组尿蛋白量增高.治疗组则有所降低(1.59±0.18 vs 14.14±1.99 vs 1.88±0.09),差异具有统计学意义;实验前后模型组肾功能改变显著,治疗组前后变化无统计学意义;模型组大鼠肾脏组织存在不同程度的系膜细胞增生及间质炎细胞浸润,而治疗组上述变化减轻;免疫组化及RT-PCR显示TGF-β1、α-SMA及MCP-1在正常组肾小管及间质中微量表达,模型组高表达,治疗组表达减少.结论:IgA肾病存在肾小管间质的损伤;替米沙坦可减少IgA肾病大鼠尿蛋白的排泄,抑制炎症及纤维化因子的表达,对Iga肾病小管间质的损伤起保护作用.     

TGF-β1 mRNA和CTGF mRNA在大鼠原代培养肺成纤维细胞中的表达

目的检测原代培养大鼠肺纤维化的成纤维细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA和结缔组织生长因子(CTGF)m RNA的表达。方法 12只Wistar大鼠,随机分为28 d正常组(生理盐水组)和28 d模型组(博莱霉素A2组),于实验第28天将大鼠处死,行HE和VG染色。分离大鼠肺组织用于体外原代培养成纤维细胞,传代后的成纤维细胞通过细胞爬片核酸原位杂交检测TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA的表达情况。结果 HE染色显示28 d模型组肺泡结构破坏并伴有成纤维细胞灶形成,VG染色示28 d模型组肺间质可见大量红色的胶原纤维沉积。波形蛋白(vimentin)免疫组化鉴定所培养细胞为成纤维细胞。TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA细胞爬片原位杂交结果显示,28 d模型组大鼠肺成纤维细胞胞质中可见棕黄色颗粒,两种因子均呈阳性表达,28 d正常组胞质内几乎未见黄色颗粒,两种因子均呈阴性表达。结论原代培养大鼠肺成纤维细胞中TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA均在28 d模型组呈阳性表达,提示TGF-β1和CTGF参与了肺纤维化的发病过程。     

白藜芦醇联合厄贝沙坦对大鼠肺纤维化及TGF-β1、NF-κB的影响

目的探讨白藜芦醇联合厄贝沙坦对大鼠肺纤维化及肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响,分析其治疗肺纤维化可能作用机制。方法将105只雄性大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、厄贝沙坦组、白藜芦醇组、厄贝沙坦+白藜芦醇组各21只,除正常对照组外,其余各组均注入博莱霉素建立肺纤维化动物模型,造模后第2天给予相应药物干预,观察大鼠肺组织病理变化、肺组织TGF-β1、NF-κB表达。结果厄贝沙坦+白藜芦醇组第14 d肺泡炎评分、肺纤维化评分(1.5±0.4、1.2±0.5)明显低于模型对照组,21 d评分(1.2±0.3、1.0±0.6)明显低于厄贝沙坦组、白藜芦醇组;14 d、21 d TGF-β1、NF-κB(0.43±0.11、0.31±0.09,0.38±0.11、0.44±0.12)ng/ml均低于模型对照组、厄贝沙坦组、白藜芦醇组。结论白藜芦醇联合厄贝沙坦对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化有明显的改善作用,可能与抑制肺纤维化大鼠肺组织内TGF-β1、NF-κB表达有关。     

肝细胞生长因子基因治疗减轻胆管结扎肝纤维化的实验研究

目的:验证肝细胞生长因子(HGF)基因治疗在胆管结扎肝纤维化中的保护作用。方法:用雄性CD-1小鼠,随机分为3组。正常对照组仅解剖肝门分离胆总管,不作胆管结扎;胆管结扎的2组,分别给予HGF质粒(pCMV-HGF,1μg/g)和空质粒(pcDNA3),每2周1次。3个月后将小鼠处死,评价肝纤维化程度。结果:肝细胞生长因子基因治疗能显著减少胆管周围胶原的沉积,表现在:肝胶原染色(Masson-Trichrome染色)减少;胆管周围Ⅰ型和Ⅲ型胶原的免疫荧光染色减少。和空质粒组相比,HGF治疗组肝组织羟脯氨酸的含量显著降低(两组分别为0.48±0.04μg/mgvs1.37±0.06μg/mg,P<0.05);肝纤维母细胞的激活减少——表现为肝组织中α-SMA的表达减少(两组分别为0.32±0.05vs.0.84±0.14,P<0.05);TGF-β1的表达减少(两组分别为0.69±0.11vs.1.31±0.23,P(0.01)。结论:在胆管结扎肝纤维化中,肝细胞生长因子基因治疗能减轻肝纤维化的程度,肝细胞生长因子可用于肝纤维化的治疗。     

β-arrestin1通过活化p38信号转导通路激活肝星状细胞促进肝纤维化

目的 探讨β-arrestin1(ARRB1)在肝纤维化中的作用，阐明ARRB1和p38信号转导通路诱导肝星状细胞活化从而促进肝纤维化的机制。方法 选取C57BJ/6L背景的雄性小鼠12只，随机分为对照组和模型组，每组6只小鼠，采用浓度为20%的四氯化碳诱导肝纤维化小鼠模型，并于临床收集肝硬化患者的肝组织及健康对照志愿者的肝组织样本。采用HE和天狼星红染色来评估肝纤维化情况。通过免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法检测ARRB1、p38、磷酸化p38(pp38)及纤维化相关指标α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白的表达水平。在人肝星状细胞LX2中使用转化生长因子-β(TGF-β)细胞因子诱导其活化，并分析ARRB1的表达水平；进而利用小干扰RNA和质粒沉默或者过表达ARRB1，同时配合p38特异性抑制剂（SB203580），揭示两者的调控关系。结果 在肝纤维化组织中ARRB1表达升高，p38信号活化增强（P均<0.05）。在肝星状细胞LX2中，TGF-β可以激活肝星状细胞并表达ARRB1和增强p38信号。ARRB1表达的升高或抑制可以相应地影响p38信号从...