大鼠前庭神经核复合体内5-HT能终末与表达5-HT1A受体的前庭臂旁核投射神经元之间的联系

目的 观察大鼠前庭神经核复合体(VNC)内5-羟色胺(5-HT)样阳性终末与表达5-HT1A受体(5-HT1A R)的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系.方法 运用逆行束路追踪和免疫荧光组织化学染色相结合的双重标记技术,在激光共焦显微镜下观察.结果 将四甲基罗达明(TMR)注入臂旁核后,在双侧VNC的各个核团内均可观察到许多TMR逆标神经元,但以同侧为主.免疫荧光组织化学染色结果显示,在前庭内侧核(MVe)、前庭下核(SpVe)、前庭上核(SuVe)、前庭外侧核(LVe)、X核以及Y核的一些区域内,许多神经元表达5-HT1A R样免疫阳性,并可观察到大量5-HT样阳性纤维和终末.激光共焦显微镜下可进一步观察到一些TMR逆标神经元同时呈5-HT1A R样免疫阳性,且有部分5-HT样阳性终末与TMR/5-HT1A R双标神经元的胞体或树突形成密切接触.结论 提示5-HT可能通过5-HT1A R对前庭神经核复合体-臂旁核间的信息传递发挥调控作用.     

雌性大鼠下丘脑5-羟色胺1A和2A受体亚型的定位分布

本研究应用免疫细胞化学技术观察了雌性成年SD大鼠下丘脑内5-HT1A受体亚型(5-HT1AR)和5-HT2AR免疫阳性结构的分布。结果显示:5-HT1AR免疫阳性神经元在视前区大细胞核、视前室周核、视上核和下丘脑外侧前核等核团内密集分布。在内侧视前核、外侧视前区、下丘脑室周核、下丘脑外侧区、背内侧核、腹内侧核、结节核、结节乳头体核、乳头体内侧核和乳头体外侧核等结构内也有较多的分布;而在正中视前核、视交叉上核、下丘脑室旁核、下丘脑背侧核、弓状核、乳头体上核和乳头体前核等部位有散在的分布。与5-HT1AR不同,5-HT2AR免疫阳性反应产物主要见于纤维和终末,阳性胞体少且染色淡。5-HT2AR阳性胞体见于下丘脑室旁核、视上核、腹内侧核、结节核、视前内侧区、外侧区、外侧前核、下丘脑背内侧核等处。另外,在视前区前内侧视前核、视交叉上核背侧和外侧可见围绕血管分布、密集成团簇状、带有大小不同膨体的阳性神经纤维缠结。本文结果提示5-HT1AR阳性结构广泛地分布于大鼠下丘脑,而5-HT2AR在下丘脑分布较为局限。二者不同的分布特点,提示它们可能介导5-HT在下丘脑的不同生理功能。     

5-羟色胺3A型受体在成年小鼠杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达

目的:研究5-羟色胺3A型受体(5-HT3Areceptor;5-HT3AR)在杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达。方法:以成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠作为材料,利用免疫组织化学技术在激光共聚焦显微镜下观察成年小鼠杏仁体基底外侧核中5-HT3AR在不同类型中间神经元内的表达。结果:杏仁体基底外侧核中分布着大量的5-HT3AR免疫阳性神经元。5-HT3AR在小鼠杏仁体基底外侧核中Calretinin(CR)、血管活性肠肽(Vasoactive in-testinal peptide,VIP)和Reelin免疫阳性的中间神经元中大量表达,而在Calbindin(CB)、Parvalbumin(PV)或Neu-ropeptide Y(NPY)免疫阳性的中间神经元中很少表达。结论:杏仁体基底外侧核中存在5-HT3AR免疫阳性中间神经元,不同类型的中间神经元中5-HT3AR的表达比例不同。     

5-HT及其2A受体在大鼠丘脑前核的表达

目的研究5-羟色胺(5-HT)及其5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)在大鼠丘脑前核的表达,探讨两者参与学习记忆的形态学依据。方法免疫组织化学ABC法观察5-HT及5-HT2AR在丘脑前核内的表达情况。包埋前免疫电镜技术观察丘脑前核群的5-HT能投射纤维终末。结果免疫组化结果显示:在大鼠丘脑前核群的前、中、后部均可见阳性的5-HT能神经元及大量串珠状的投射纤维终末,其中背侧核(AD)的神经元着色较深,胞体较大,纤维密集,平均光密度值(A值)与腹侧核(AV)的比较差异显著(P0.05);5-HT阳性反应产物主要定位于胞浆内,胞核不着色。包埋前免疫电镜显示:阳性5-HT能轴突终末与树突形成非对称性的轴-树突触。在AD、AV内可见黄色的5-HT2AR阳性神经元,其中AD的神经元胞体较大,着色较AV深,阳性产物灰度值二者比较差异显著(P0.05);阳性产物主要定位于神经元胞膜,胞核不着色。结论 5-HT和5-HT2AR在大鼠丘脑前核表达,在AD、AV的表达强度不同。     

小鼠中缝背核至丘脑室旁核参与伤害性信息的形态学研究

目的:观察中缝背核(DR)内5-羟色胺(5-HT)能神经元向丘脑室旁核(PVT)内速激肽-1(TAC1)免疫阳性神经元的投射,并观察该通路在伤害性刺激下的激活情况。方法:将逆行示踪剂荧光金(FG)注入小鼠PVT,观察FG逆标神经元在DR内的分布,同时利用免疫组织荧光染色技术观察DR内5-HT能神经元与FG逆标神经元之间的共存情况;继而选用TAC1-ires-Cre小鼠结合RV逆标病毒,在DR观察向PVT内TAC1阳性神经元发出投射的突触前神经元的分布;最后利用TAC1-ires-Cre与Rosa26:CAG-LSL-tdTomato(Ai9)杂交小鼠制备坐骨神经分支损伤(SNI)模型,观察PVT内被激活的TAC1阳性神经元与5-HT能神经终末之间的关系。结果:(1)将FG注入PVT后,在DR的吻、中、尾段均可见FG逆标神经元,其分布以中段为主,吻、尾段数量相对较少,并且在DR内观察到5-HT和FG的双标神经元。(2)向TAC1-ires-Cre小鼠的PVT内注射RV逆行跨突触三联病毒后,在DR内也可见RV标记的突触前神经元,主要分布于DR中段。(3)SNI模型下TAC1-Cre::Ai...     

5-羟色胺3A受体在成年小鼠海马中间神经元中的分布

目的:利用成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠,研究5-羟色胺3A受体(5-HT3AR)在海马中间神经元中的分布情况。方法:成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠经心脏灌注固定后,利用免疫荧光双标记方法,并结合激光共焦显微镜扫描技术,观察5-HT3AR在成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠海马中不同中间神经元内的表达和分布情况。结果:5-HT3AR在成年小鼠整个海马中都有分布,且主要在CA1区、CA2/CA3区和齿状回有大量5-HT3AR免疫阳性细胞;激光共聚焦显微镜下观察到5-HT3AR阳性产物在细胞核、细胞浆和树突上均有表达;免疫荧光双标实验结果表明5-HT3AR阳性产物在CB(calbindin),CR(calretinin),Reelin,Som(somatostatin),NPY(neuropeptide Y)和VIP(vasoactive intestinal peptide)免疫阳性神经元中表达,但在PV(parvalbumin)免疫阳性神经元中不表达。定量结果显示:几乎所有的VIP阳性神经元均表达5-HT3AR阳性,约3/4的CR阳性神经元表达5-HT3AR,约1/2的CB、Reelin、NPY和Som阳性神经元表达5-HT3AR阳性;约1/4的5-HT3AR阳性神经元中表达Reelin,1/5的表达Som,5-HT3AR/CB和5-HT3AR/CR双标神经元各占5-HT3AR阳性神经元的1/10左右。结论:5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠能够作为研究海马中5-HT3AR功能及其在中间神经元中的作用机制研究的工具鼠。     

大鼠神经系统内5-羟色胺_(1A)受体亚型的定位分布(英文)

应用免疫组织化学技术观察了大鼠神经系统内 5 -羟色胺 1A受体亚型 ( 5 -HT1 AR)免疫阳性结构的分布。结果显示 :5 -HT1 AR免疫阳性结构主要分布于梨状皮质、隔核、丘脑腹后核、丘脑网状核、杏仁基外侧核、Purkinje细胞层、红核、面神经核、斜方体核等 ;在海马、额叶皮质、丘脑背内侧核、脚间核、三叉神经中脑核、中缝背核、三叉神经脊束核、脊髓背角浅层、背根神经节和三叉神经等结构内有中等强度的分布 ;在嗅球、尾壳核、苍白球、斜角带核、终纹床核、缰核、黑质、上橄榄等部位有弱的分布。本文的结果提示 5 -HT1 AR阳性结构广泛地分布在大鼠神经系统 ,它们可能介导 5 -HT在神经系统中的多种生理功能     

大鼠前扣带回皮质5-HT_(1A,1B,2A,2C)受体亚型蛋白表达的细胞定位

目的:观察5-HT_(1A、1B)和5HT_(2A、2C)等受体在大鼠前扣带回皮质(anterior cingulated cortex,ACC)的分布及细胞定位。方法:将20只成年雄性Sprague-Dawley大鼠平均分成四组,每组5只分别进行四种亚型5-HT的免疫组织化学反应。动物经过灌注固定、脑冠状切片(25μm)后,以卵白素-生物素复合物法(ABC法)对切片进行染色、显微镜观察。结果:四种5-HT受体亚型在ACC都有分布。ACC内II-VI层均有5-HT_(1A)免疫阳性反应神经元的胞体和树突。5-HT_(1B)受体亚型定位在神经元胞体上,表达较弱。I-III层5-HT_(2A)免疫阳性反应较强,主要为标记的锥体神经元树突(Cg1区III层观察到部分阳性反应的神经元胞体);而V-VI层可见到明显的免疫阳性神经元胞体。5-HT2C受体定位于ACC之II-VI层神经元胞体上。结论:5-HT_(1A)、5-HT_(1B)、5-HT_(2A)和5-HT_(2C)等不同受体亚型在ACC内细胞上的定位有一定差异,提示它们介导5-HT对ACC神经元发生调节反应的细胞作用部位有选择性,因之它们介导的5-HT对ACC神经元的作用效果也可能不同。     

大鼠神经系统内5-羟色胺2A受体亚型的免疫组织化学定位

目的：观察大鼠神经系统内5－羟色胺受体2A亚型（5－HT2AR）免疫组织化学染色阳性结构的分布。方法：5－HT2AR特异性抗体的免疫组织化学染色。结果：5－HT2AR阳性细胞体主要分布于嗅球的小球层和僧帽细胞层、海马始层、外侧缰核、丘脑背外侧核、下丘脑室旁核、中脑中央灰质、小脑浦肯野细胞、脑干运动核和感觉神经节等；5－HT2AR阳性纤维和终末主要分面于嗅球的小球层和内丛层、大脑皮质、外侧隔核、杏仁外侧核、丘脑网状核、腹侧顶盖区、桥核、下橄榄及脑干运动核等。结论：5－HT2AR亚型阳性结构广泛分布于大鼠神经系统，它们可能介导5－HT在神经系统中的多种生理功能。     

大鼠伏核内5-羟色胺样和甲硫氨酸-脑啡肽样免疫反应阳性结构的观察

本文借助免疫组织化学技术,在光镜和电镜水平观察了大鼠伏核内5-羟色胺(5-HT)样和甲硫氨酸-脑啡肽(Met-ENK)样免疫反应阳性结构的分布。光镜观察:5-HT样免疫反应阳性的纤维和终末可见于伏核不同平面的各亚区,但内侧区和腹侧区的明显地多于背侧区和外侧区,尾段的阳性纤维多于吻段。根据伏核内5-HT样纤维的直径、行径和膨体的数量,可将其分为粗纤维、中等粗细纤维和细纤维3种,此3种纤维的区分以内侧区和腹侧区较明显。未见5-HT样阳性胞体。Met-ENK样免疫反应阳性的胞体仅见于腹侧区和内侧区腹侧部,少量散在分布。Met-ENK样阳性纤维和终末也主要分布于内侧区和腹侧区,外侧区和背侧区较少。Met-ENK样阳性纤维均属细纤维,行径弯曲,外观呈绒毛状。Met-ENK样阳性胞体、纤维和终末在吻尾方向上的分布无明显差异。电镜观察:5-HT样阳性轴突终末与阴性树突形成对称和非对称型轴树突触;Met-ENK样阳性树突与阴性轴突终末形成对称和非对称型轴-树突触。上述突触多见于内侧区和腹侧区。     

5-羟色胺在大鼠腰骶髓后连合核和中间带外侧核参与盆腔内脏炎性痛调控的形态学研究

本研究运用荧光金(FG)逆行束路追踪与5-HT1A受体免疫荧光组织化学染色技术相结合,观察了大鼠腰骶髓后连合核(DCN)和中间带外侧核(IML)内感受盆腔内脏伤害性信息并向外侧臂旁核(LPB)发出投射的神经元呈5-HT1A受体免疫反应阳性。将FG注入一侧LPB后,可在腰骶节段(L6-S2)观察到大量的FG逆标神经元,这些FG逆标神经元主要集中于DCN和IML内,以同侧为主;5%福尔马林注入大鼠结肠后,Fos蛋白阳性神经元主要分布于腰骶髓DCN和IML,以同侧为主,在同侧脊髓背角I层、II层和深层也有少量的分布。另外,在腰骶髓DCN和IML内,还可观察到大量5-HT1A受体阳性的神经元胞体、纤维和终末,同时有部分Fos蛋白阳性的FG逆标神经元呈5-HT1A受体阳性。上述结果提示,大鼠腰骶髓DCN和IML内的5-HT能终末可能对盆腔内脏伤害性信息的传递发挥调控作用。     

后肢去负荷改变大鼠前庭复合体各亚核Fos表达(英文)

目的:以Fos蛋白表达为指标,分别研究后肢去负荷(hindlimb unloading,HU)以及去负荷一定时间后双轴旋转刺激对大鼠前庭核复合体(vestibular nucleus complex,VNC)各亚核神经元活动的影响。方法:动物分为后肢去负荷(即HU)组、HU处理后双轴旋转组(HU-R)和对照组(即假运动刺激组)。应用免疫组织化学ABC法,检查各组动物VNC各核团内Fos蛋白表达,统计Fos阳性神经元数目。结果:后肢去负荷1d可刺激VNC吻侧部前庭内侧核(MVe)、前庭下核(SpVe)两亚核内Fos阳性神经元数目较对照组有显著增加;但是,随后肢去负荷时间延长,VNC各核Fos阳性神经元数趋向于回到对照水平。2h双轴旋转刺激HU1d大鼠后,VNC所有核团内Fos阳性神经元数目都显著性增加;大鼠HU7d后再行双轴旋转刺激,MVe和SpVe内Fos阳性神经元数目有显著性增加。结论:地面模拟失重可刺激大鼠VNC神经元活动,随时间延长,模拟失重动物出现适应现象,前庭神经元活动减弱;运动刺激前庭感受器后,模拟失重动物VNC神经元活动显著增强。     

Immunoreactivity for calcium-binding proteins defines subregions of the vestibular nuclear complex of the cat

The vestibular nuclear complex (VNC) is classically divided into four nuclei on the basis of cytoarchitectonics. However, anatomical data on the distribution of afferents to the VNC and the distribution of cells of origin of different efferent pathways suggest a more complex internal organization. Immunoreactivity for calcium-binding proteins has proven useful in many areas of the brain for revealing structure not visible with cell, fiber or Golgi stains. We have looked at the VNC of the cat using immunoreactivity for the calcium-binding proteins calbindin, calretinin and parvalbumin. Immunoreactivity for calretinin revealed a small, intensely stained region of cell bodies and processes just beneath the fourth ventricle in the medial vestibular nucleus. A presumably homologous region has been described in rodents. The calretinin-immunoreactive cells in this region were also immunoreactive for choline acetyltransferase. Evidence from other studies suggests that the calretinin region contributes to pathways involved in eye movement modulation but not generation. There were focal dense regions of fibers immunoreactive to calbindin in the medial and inferior nuclei, with an especially dense region of label at the border of the medial nucleus and the nucleus prepositus hypoglossi. There is anatomical evidence that suggests that the likely source of these calbindin-immunoreactive fibers is the flocculus of the cerebellum. The distribution of calbindin-immunoreactive fibers in the lateral and superior nuclei was much more uniform. Immunoreactivity to parvalbumin was widespread in fibers distributed throughout the VNC. The results suggest that neurochemical techniques may help to reveal the internal complexity in VNC organization.     

大鼠囊泡膜谷氨酸转运体和5羟色胺阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系(英文)

本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术和免疫电镜双重标记技术,对大鼠囊泡膜谷氨酸转运体 (VGluT1和VGluT2)和 5 -羟色胺(5- HT)阳性终末与三叉神经中脑核(Vme)神经元之间的联系进行了观察。在激光共聚焦显微镜下,Vme内可观察到许多磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)阳性神经元,其中绝大多数为大的假单极神经元。VGluT1和VGluT2免疫阳性的神经纤维和终末广泛分布于Vme内,其中VGluT2阳性纤维和终末的分布密度高于VGluT1。在Vme内还可观察到相当数量的 5- HT阳性终末,其中部分终末同时呈VGluT2免疫阳性。一些VGluT1、VGluT2、5- HT及VGluT2 /5- HT双重标记的阳性终末与PAG阳性的Vme神经元胞体形成密切接触。在电镜下,分别用银加强的金颗粒和DAB反应产物显示VGluT1 /VGluT2和 5- HT阳性终末。在Vme内只观察到部分终末呈VGluT2和 5- HT双重免疫阳性,并且这些终末主要形成非对称性突触。以上结果提示,在口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中,谷氨酸能和 5 HT能神经终末可能通过Vme神经元对该信息进行复杂的调控。     

5-HT_(2~7)受体亚型mRNAs在坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠背根神经节的表达变化

本研究利用反转录 聚合酶链式反应(RT- PCR)方法,观察了坐骨神经分支选择性损伤(SNI)所致神经病理性痛条件下,大鼠背根神经节(DRG)中 5- HT2~7受体亚型mRNAs的时程表达变化。用RT- PCR方法在正常大鼠DRG中检测到 5-HT2A、5- HT3、5- HT4、5 -HT5A和 5 HT7受体亚型mRNAs的表达,但未检测到 5 -HT2B、5- HT2C、5- HT5B和 5 -HT6受体亚型mRNAs。SNI能诱导 5 -HT2A、5- HT3、5 -HT4 和 5- HT7受体亚型mRNAs在损伤侧DRG的表达上调。其中, 5- HT2A受体亚型mRNA的表达在术后 3d时开始升高,持续增加至 28d; 5- HT3 受体亚型mRNA的表达在术后 4d时明显增加, 14d时达到高峰; 5- HT4受体亚型mRNA于术后 3d的表达明显增加, 21d时达到高峰; 5-HT7 受体亚型mRNA的表达在术后 1d时即显著升高,一直维持高水平的表达至28d。未检测到 5- HT5A受体亚型mRNA的表达变化。在SNI对侧的DRG,各受体亚型mRNAs的表达未出现明显变化。部分 5- HT受体亚型在SNI模型DRG的表达具有不同的时程变化特点,提示它们在SNI所致的神经病理性痛中发挥着不同的作用。     

围绕两轴进行复杂的旋转刺激后大鼠全脑内Fos的表达(英文)

为了探讨旋转刺激与运动病发生的关系,本研究利用一种复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激器刺激大鼠后,观察大鼠全脑内Fos蛋白的表达情况。动物被随机地分成四组,即正常对照组、两轴旋转刺激组、双侧迷路毁损组以及双侧迷路毁损后接受旋转刺激组。采用免疫组织化学染色方法观察全脑不同核团内Fos蛋白的表达情况。结果显示:(1)正常对照组和双侧迷路毁损组大鼠的脑内均未检测到Fos样免疫阳性产物;(2)两轴旋转刺激组的大鼠在给予复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激后,在大鼠脑和脑干的多个核团内均可检测到Fos样免疫阳性神经元,其阳性产物主要表达于细胞核。其中在脑干内的前庭复合体的不同亚核(包括前庭内侧核、前庭上核和前庭下核),孤束核、蓝斑核、臂旁内侧核、臂旁外侧核,间脑的室旁核以及边缘系统的杏仁核等内均可观察到密集分布的Fos样免疫阳性神经元;(3)双侧迷路毁损组大鼠在接受复杂的围绕两轴旋转刺激后,在上述相应核团内均难以检测到Fos蛋白的表达。以上研究结果提示两轴旋转刺激可以有效地激活前庭神经元,而大鼠在接受前庭刺激后,脑和脑干的许多核团内大量的神经元可能通过与前庭核复合体发生直接或间接的纤维联系也被激活,这些被激活的神经元可能与运动病发生的复杂机制有关。