分化型甲状腺癌细胞株131^I照射后摄碘能力及特异基因表达变化的实验研究

目的：分化型甲状腺癌131^I治疗后可出现失分化的现象,本文通过体外培养的甲状腺癌FTC-133细胞株在低剂量131^I照射后摄碘能力的变化及甲状腺细胞特异蛋白（NIS、RSHR、TPO、Tg）及其mRNA水平变化,初步研究131^I照射与甲状腺癌失分化的关系。方法：培养的FTC-133细胞株,用诊断剂量的131^I内照射（不同时间,不同剂量）,测量细胞摄125^I能力的变化,并利用蛋白印迹法、放射免疫分析和免疫荧光检测NIS、TSHR、TPO、Tg蛋白含量和定位,利用实时荧光聚合酶链反应检测上述蛋白mRNA水平的变化。结果：131^I照射使FTC-133细胞摄125^I能力（cpm/min值）下降,各试验组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,利用15μCi照射48h吸碘率下降最明显,下降率为34.6%（t=12.72,P〈0.01）,NIS、TSHR、TPO、Tg蛋白以及mRNA均下降,在48h下降最明显,与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0.05）,蛋白定位照射前后无明显变化。结论：131^I照射可使FTC-133细胞摄碘能力下降,NIS、TSHR、TPO、Tg蛋白及mRNA水平下降,131^I照射可以使分化型甲状腺癌细胞出现分化程度降低。     

促甲状腺激素受体及碘钠泵在人甲状腺癌中的表达及临床意义

目的 研究促甲状腺激素受体(TSHR)、碘钠泵(NIS)在甲状腺癌中的表达,探讨其在人甲状腺癌治疗中的作用. 方法采用免疫组织化学SABC法,检测TSHR、NIS在45例人正常甲状腺组织、45例乳头状甲状腺癌及21例未分化甲状腺癌中的表达. 结果 TSHR及NIS在人正常甲状腺组织的表达均高于其在乳头状甲状腺癌和未分化甲状腺癌中的表达.在人正常甲状腺组织,TSHR和NIS蛋白均定位于滤泡上皮细胞膜上;在乳头状甲状腺癌组织,TSHR蛋白定位于细胞膜和细胞质中,NIS蛋白仅在细胞质中有阳性表达;在未分化甲状腺癌,TSHR和NIS均定位于细胞质. 结论 TSHR、NIS的定位及表达水平与甲状腺癌的分化程度密切相关,可能成为预测甲状腺癌促甲状腺激素抑制治疗及131Ⅰ治疗是否有效的指标.     

血清Tg变化在甲癌术后131I首次清甲中的价值

目的:评价在分化型甲状腺癌患者术后<'131>I首次清甲中血清Tg变化对于清甲效果的预测价值.方法:38例接受甲状腺全切或次全切手术后行放射性<'131>I首次清甲治疗的分化型甲状腺癌患者,应用放射免疫分析所有患者服用<'131>I前的血清Tg(TgD0),以及服用<'131>I后第5d的血清Tg(TgD5),观察清甲...     

不同碘浓度对大鼠甲状腺摄碘功能的影响

观察不同碘摄入量对大鼠促甲状腺激素受体（TSHR）mRNA、钠碘转运体（NIS）mRNA以及血清过氧化物酶抗体（TPOAb）表达水平的影响。方法 SD大鼠30只,随机分成低碘组（LI）、适碘组（NI）和高碘组（HI）,每组10只。于实验第8、16周分批处死。实时荧光定量聚合酶链式反应法测定TSHR mRNA及NIS mRNA表达水平。酶联免疫分析法观察血清TPOAb浓度。结果 实验8周,低碘组和高碘组TSHR mRNA及NIS mRNA表达水平均低于适碘组,差异有统计学意义（P＜0.05）;且血清TPOAb浓度高于适碘组,但差异无统计学差异（P＞0.05）;实验16周,高碘组和低碘组的TSHR mRNA和NISmRNA表达水平均明显低于适碘组,差异有统计学意义（P＜0.05）;血清TPOAb浓度高于适碘组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 包括碘过量和碘缺乏在内的长期碘营养障碍均可降低NIS及TSHR的正常表达,同时提高甲状腺自身抗体的浓度,影响甲状腺摄碘功能。     

分化型甲状腺癌患者停服甲状腺素前后Tg及TgAb的变化分析

甲状腺球蛋白抗体（antithyroglobulin,TgAb）为甲状腺球蛋白（thyroglobulin,Tg）的抗体,一般情况下,分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma,DTC）TgAb阳性患者手术后或1治疗后随着体内Tg量的下降,TgAb在一定的时间内会随之下降。本文通过对131例分化型甲状腺癌患者停服甲状腺素（thyroxine,TH）前后Tg及融TgAb的分析,观察短期内Tg的变化是否会引起TgAb的变化。     

分化抑制蛋白1在小鼠树突状细胞肉瘤细胞分化中的作用

目的 研究降低分化抑制蛋白1(Id.1)的表达在树突状细胞肉瘤(DCS)细胞分化中的作用.方法 通过RNA干扰技术来降低DCS细胞株中Id-l蛋白的表达,Western blot和real.timePCR分别检测该蛋白在蛋白水平和mRNA水平L的变化;倒置显微镜下观察降低Id.1蛋白表达后DCS细胞形态的变化;Casy细胞计数分析仪检测细胞大小的分布情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化.通过Western blot和免疫组织化学检测树突状细胞的分化标志如Id-2、CD86、CDllc、MHC II的变化.生长曲线及四甲基偶氮唑盐(MTY)法检测DCS细胞的增殖情况的变化;通过TransweH和克隆形成率测定分别观察降低Id-1蛋白前后细胞侵袭、成瘤能力的变化.以不加siRNA的空白组和无关 对照siRNA作阴性对照,以诱导分化剂丁酸钠作为阳性对照.结果 降低Id-1蛋白表达后DCS细胞分枝增多,细胞体积明显增大,核质比下降,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.01),树突状细胞分化标志Id-2、CD86等表达上调,细胞增殖受到抑制,侵袭、成瘤能力减弱(P<0.01).结论 通过RNA干扰技术降低Id-1基因的表达,可以促进恶性实体肿瘤细胞的分化,降低恶性程度.     

分化型甲状腺癌患者131I治疗前后Tg和TgAb的分析

甲状腺球蛋白(Tg)测定在分化型甲状腺癌(DTC)患者术后,131I治疗中的随访起重要作用,目前的检测方法中,Tg测定均受到TgAb(甲状腺球蛋白抗体)的干扰,本文分析116例DTC患者131I治疗前后Tg和TgAb的变化,初步探讨Tg和TgAb的关系.     

saRNA调控NIS基因介导131I对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的实验研究

目的 探索通过小激活RNA(saRNA)调控钠碘转运体(NIS)基因特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为RNA激活(RNAa)技术介导核素基因治疗肿瘤的应用提供实验依据.方法 saRNA的设计合成:通过基因BLAST比对,设计与合成三条针对NIS基因的saRNA序列;细胞转染:以LipofectaminTM 2000为saRNA载体,将saRNA转染到肝癌HepG2细胞后72h,采用Western blotting分析NIS蛋白的表达水平,筛选出RNAa效率最高的saRNA,并进一步分析saRNA转染后不同时相NIS的表达水平,以及saRNA浓度-NIS表达水平的浓度-效应关系;体外核素摄取实验:体外培养条件下,评价转染肝癌HepG2细胞对125I的摄取;细胞生长增殖抑制实验:体外培养条件下,评价131 I对转染肝癌细胞的生长抑制率.结果 saRNA可上调NIS基因表达水平,其中saRNA482序列上调NIS表达水平最高;saRNA上调NIS的峰值出现在转染后72h,NIS维持高表达水平在10d以上;且NIS上调水平随saRNA浓度增高而增高.体外培养条件下,转染细胞与未转染细胞的摄碘水平差别明显,其中最高者摄碘较对照细胞高出64倍.体外培养条件下,相对未转染组肝癌细胞,131I对转染组HepG2细胞的生长抑制率为60.7％.结论 本研究设计合成的靶向NIS基因的saRNA可上调肝癌细胞NIS的表达水平,增强肝癌细胞摄取放射性碘的能力,研究还证实,通过RNAa调控NIS基因表达可介导131I治疗肝癌的潜力.     

锌指蛋白12过表达促进甲状腺癌细胞的增殖并抑制其凋亡

目的探讨SMAD-相互作用锌指蛋白12(ZCCHC12)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用Western blot检测30例甲状腺癌患者癌组织和癌旁组织中ZCCHC12的蛋白表达及细胞中cleaved caspase-3、caspase-9、BMP-2、p-SMAD1、SMAD1和ID3的蛋白表达。ZCCHC12过表达质粒pcDNA3.1-ZCCHC12或抑制质粒ZCCHC12 siRNA转染甲状腺癌细胞系CGTH W-3和FTC-133。MTT法检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 ZCCHC12的表达在甲状腺癌组织较癌旁组织中显著增加(P0.05)。ZCCHC12过表达显著增强了CGTH W-3和FTC-133的细胞增殖、降低了细胞凋亡、抑制了凋亡蛋白cleaved caspase-3和caspase-9的表达并升高了BMP-2、p-SMAD1和ID3的蛋白表达(P0.05)。ZCCHC12抑制质粒则与过表达质粒作用相反。结论 ZCCHC12通过调控BMPs/SMAD通路增强甲状腺癌细胞CGTH W-3和FTC-133的增殖并抑制其凋亡。     

NIS基因转染对肝细胞癌NIS蛋白表达及摄碘功能的影响

目的:探讨肝细胞癌细胞核素靶向治疗方法。方法:提取NIS基因片段并构建重组质粒pcDNA3/NIS,将重组质粒导入肝细胞癌HepG2细胞。转染后24 h利用Western-Blot法检测HepG2细胞NIS蛋白表达,采用125I结合试验评估转染后细胞的摄碘率,采用DAPI染色法评估HepG2细胞摄125I后的凋亡情况。实验组与对照组之间NIS蛋白表达、摄碘率以及细胞凋亡率比较采用t检验。结果:蛋白电泳表明经NIS基因转染后,实验组HepG2细胞已表达NIS蛋白,表达强度显著高于对照组（t=2.693, P<0.05）。实验组HepG2细胞摄碘率B/T%平均为（18.4±5.8）%,显著高于对照组（t=36.842, P<0.05）。结合125I后24 h,实验组凋亡细胞数多于对照组,平均凋亡率为（19.2±5.3）%,显著高于对照组（t=3.086, P<0.05）。结论:转染外源性NIS基因可上调肝细胞癌HepG2细胞NIS蛋白表达,使其具备摄碘功能,加快细胞凋亡,为放射性碘靶向治疗提供实验依据。     

甲状腺癌转移灶失分化影响因素分析

目的：分化型甲状腺癌（DTC）转移灶失分化的患者预后较差。本文研究DTC转移灶的影响因素。方法：回顾性分析在我科行131I治疗有转移的DTC患者121例。转移灶通过18F-FDG肿瘤显像、131I-SPECT/CT、CT、MRI、B超等影像学手段结合血清HTg诊断,部分通过手术病理证实。转移灶摄碘情况通过大剂量131I治疗后全身显像上观察。根据转移灶摄碘情况将患者分为摄碘组和不摄碘组（失分化组）,分析相关影响因素。结果：51例（42.1%）患者转移灶不摄碘。单因素分析提示,淋巴结转移灶较远处转移更容易发生失分化（χ2=4.338,P〈0.05）,而肺转移和骨转移之间无明显差异（χ2=1.509,P〉0.05）。双变量logistic回归模型提示导致转移灶不摄碘的危险因素有：乳头状癌（OR=0.059;95%CI 0.010,0.037;P〈0.01）、年龄（OR=1.050;95%CI 1.019,1.082;P〈0.01）、转移发生时间（OR=4.122;95%CI 1.421,11.894;P=0.000）和复发（OR=4.299;95%CI 2.132,7.685,P=0.000）。结论：DTC患者中淋巴结转移灶较远处更容易发生失分化不摄碘,但是远处转移中肺转移和骨转移发生失分化的几率无明显差异。年龄、乳头状癌、转移发生时间和复发是影响失分化的危险因素。     

血清CEA、 Tg联合检测在甲状腺良、恶性肿瘤中的临床价值

目的 探索血清CEA、Tg联合检测在甲状腺良、恶性肿瘤中的临床价值.方法 采用化学发光法分别检测经病理证实的68例分化型甲状腺癌(DTC)术前和手术联合131I清甲治疗后、65例甲状腺腺瘤、55例正常对照的CEA、Tg水平,并将结果应用SPSS13.0软件进行统计学分析.结果 术前DTC组的CEA水平明显高于腺瘤组(P＜0.05)、Tg水平与腺瘤组差异无统计意义(P ＞0.05);DTC组患者手术联合131I清甲治疗后的Tg水平有显著性下降(P＜0.05);术后Ⅰ和Ⅱ期DTC患者的Tg、CEA水平明显低于Ⅲ和Ⅳ期的(P＜0.05).结论 血清CEA、Tg联合检测对手术及131I清甲治疗后DTC患者的治疗效果及预后判断有较大价值,CEA检测对确诊中晚期的DTC患者有辅助诊断作用.     

~(131)I治疗对青少年分化型甲状腺癌患者外周血的影响

观察131I治疗青少年分化型甲状腺癌(DTC)对外周血的影响。31例青少年(≤20岁,随访时间6～18个月)DTC患者接受131I治疗后(剂量2.96～11.1GBq),利用全自动血液分析仪,对131I治疗前、治疗后1个月、治疗后6个月及随访末白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neut)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HBG)及血小板(PLT)进行检测,对131I治疗前后结果进行对比分析。服用131I治疗后1个月,患者PLT下降(P<0.01),WBC下降(P<0.05),RBC下降(P<0.05)、HBG降低(P<0.05),Neut未见明显变化(P>0.05);治疗后6个月患者WBC、Neut、RBC、HBG及PLT均接近治疗前水平(P>0.05),大剂量组(7.4～11.1GBq)患者随访末外周血各指标均与首次治疗前水平无差异(P>0.05)。131I治疗青少年DTC,对外周血有一过性影响,是一种安全的治疗手段。     

SPECT/CT融合显像在分化型甲状腺癌转移灶诊断中的应用价值分析

目的 探讨SPECT/CT 131I显像在诊断分化型甲状腺癌转移灶中,以及在131I放射治疗后复发和转移中的应用价值,为临床诊断和治疗甲状腺癌提供依据.方法 选择2013年5月至2016年5月我院住院治疗经病理证实的分化型甲状腺癌住院患者90例,分别实施131I-WBS,131I-SPECT/CT显像诊断,观察显像诊断结果以及Tg水平.结果 131 I-WBS共诊断出125个复发和转移病灶,其中113个经病理检查证实,其诊断灵敏度和准确度分别为85.03％,78.62％:131I-SPECT/CT共诊断出134个复发和转移病灶,其中128个经病理检查证实,其诊断灵敏度和准确度分别为91.16％,87.58％;说明131I-SPECT诊断的灵敏度要优于131 I-WBS显像,两组数据比较差异有统计学意义(P＜0.05);此外131I-WBS显像、131I-SPECT/CT显像阳性的Tg水平与阴性患者比较明显升高,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SPECT/CT显像在诊断分化型甲状腺癌转移灶方面具有重要价值,值得临床广泛的应用.     

血清Tg检测联合131I-WBS在DTC术后的临床价值

目的 探讨分化型甲状腺癌（DTC）甲状腺清除术后血清甲状腺球蛋白（Tg）联合131I全身显像（131I-WBS）,为判定甲状腺癌的复发及转移提供参考依据.方法 56例DTC患者,甲状腺全切或次全切术后4～6周,均行131I清除残余甲状腺治疗,3～6个月后重复治疗,治疗前停用甲状腺激素3～6周,同时忌碘饮食,治疗中检测血清Tg和口服碘化钠（131I）治疗剂量3.70 ～ 7.40 GBq后5～7天行131I-WBS.结果 在首次清除残留甲状腺组织治疗时,显像发现淋巴结、肺及骨转移8例,其余转移灶于3～6个月后二次治疗时发现,有11例DTC患者（19.6％）Tg测定在正常范围,而131I-WBS出现转移灶;有7例患者（12.5％）Tg测定异常,而131 I-WBS正常.结论 Tg测定和131 I-WBS可作为诊断DTC术后复发及转移的重要指标,二者应联合应用、互相补充,具有重要的临床价值.     

DTC术后131I清甲治疗患者血清Tg及TgAb变化及其与病灶检出相关性分析

目的 探讨分化型甲状腺癌(DTC)患者在术后接受131I治疗后,血清甲状腺球蛋白(Tg)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)的变化及其与131I全身显像(Dx-WBS)结果的相关性,从而为DTC复发、转移的诊断提供依据.方法 入选我院DTC患者83例,均在行甲状腺全切或次全切手术4～6周后,给予131I治疗,半年后TSH刺激状态下(停用甲状腺素片并低碘饮食3周),检测血清Tg及TgAb,并对甲功各项指标进行复查,同时行131I全身显像检查.结果 TgAb阳性率随着Tg水平的变化而发生改变,对血清Tg的检出存在一定干扰性,将Tg与Dx-WBS二者联合进行判断,DTC复发及转移诊断准确率可达95％.结论 DTC术后131I清甲治疗半年后,Tg检测的准确性相对较高,但受TgAb干扰,存在假阴性,应与Dx-WBS进行联合作为DTC复发及转移的重要诊断指标.     

131I治疗分化型甲状腺癌术后肺转移的临床研究

目的:探讨放射性131I治疗分化型甲状腺癌(differentiated thyroid cancer,DTC)术后肺转移的临床疗效和不良反应。方法:回顾性统计分析我院10年来32例采用131I治疗的DTC术后肺转移患者,观察他们在治疗前后131I全身显像、颈胸CT、血清甲状腺球蛋白(Tg)的变化,同时观察他们的外周血以及肝肾功能在治疗前、后的变化。结果:应用131I治疗DTC术后肺转移的总有效率达到84.4%,且该方法对患者外周血的各类细胞、血红蛋白以及肝肾功能均无明显影响。结论:应用131I治疗DTC术后肺转移疗效好、不良反应小,是一种行之有效的临床治疗方法。     

甲状腺球蛋白和^131I全身显像在分化型甲状腺癌治疗中的应用

分化型甲状腺癌（DTC）占甲状腺癌的90％左右。DTC术后残留的甲状腺组织具有摄取^131I和合成、分泌甲状腺球蛋白（Tg）的功能,     

131I治疗老年分化型甲状腺癌淋巴结转移的疗效评价

目的 探讨131I治疗老年分化型甲状腺癌淋巴结转移（LMDTC）的疗效.方法 对33例老年分化型甲状腺癌术后合并淋巴结转移进行131I治疗,并采用B超、CT、131I显像及Tg变化综合判断疗效.结果 33例老年分化型LMDTC,131I治疗后有27例淋巴结消除或缩小,有效率为81.8％（27/33）.结论 131I治疗老年分化型甲状腺癌淋巴结转移有较好的疗效.     

高尔基体磷酸化蛋白2对人结直肠癌细胞放射敏感性的影响

目的观察人结直肠癌细胞的放射敏感性及辐射对其高尔基磷酸化蛋白2表达的影响。方法体外培养人结直肠癌细胞株HCT116、SW480及正常结直肠细胞株FHC,检测GOLPH2基因转录及蛋白表达。选取指数生长期人结直肠癌细胞进行0、2、4、6、8、10 Gy照射,计数细胞克隆形成率,制备细胞存活曲线。应用RT-PCR和Western blotting检测2种结直肠癌细胞株在不同剂量照射时GOLPH2基因mRNA转录水平及GOLPH2蛋白表达情况。应用Transwell侵袭实验观察不同照射剂量对人结直肠癌细胞株HCT116、SW480迁移能力的影响。结果随着照射剂量在一定范围内增高时,人结直肠癌细胞株HCT116、SW480克隆形成率逐渐下降,两种细胞株中GOLPH2基因mRNA转录水平及GOLPH2蛋白表达水平均逐渐下降。不同X射线照射剂量对人结直肠癌细胞株HCT116、SW480迁移有抑制作用,并且在8Gy、10Gy时对人结肠癌细胞株迁移能力抑制最明显。结论 X射线对人结直肠癌细胞株HCT116和SW480的增殖及迁移能力均有抑制作用,可降低人结直肠癌细胞株HCT116和SW480中GOLPH2基因mRNA转录水平及GOLPH2蛋白表达水平。