MGBG对苜蓿愈作组织生长,体细胞胚胎诱导及其乙烯生物合成的影响

在苜蓿（ＭｅｄｉｃａｇｏｓａｔｉｖａＬ．）愈伤组织继代之初加入不同浓度的甲基乙二醛－双（脒腙）（ＭＧＢＧ）（０．５,１,２ｍｍｏｌ／Ｌ）可不同程度地抑制愈伤组织及其后体胚胎诱导悬浮培养物的生长和体胚形成,若在体胚诱导阶段加入,同上述的抑制作用更为强烈,ＭＧＢＧ不但促进愈伤组织乙烯释放量,内源ＡＣＣ（１－氨基环丙烷－１羧酸）水平和ＡＣＣ合成酶活性,也促进体胚诱导悬浮培养物的ＡＣＣ水平及ＡＣＣ合成酶的     

杨和苹果离体茎尖培养和愈伤组织分化与内源IAA、ABA的关系

用杨和苹果的茎尖进行离体培养,在ＭＳ培养基中添加不同浓度的ＢＡ 、ＮＡＡ 或２ ,４Ｄ,诱导（１） 茎的增殖或根的分化,（２） 愈伤组织形成以及愈伤组织分化根、芽或体胚,再生完整植株。测定了不同发育状态器官和组织的内源ＩＡＡ 和ＡＢＡ,并计算了ＩＡＡ／ＡＢＡ 的比值。培养物中其比值较高者,易于诱导不定根分化或形成胚性的愈伤组织,也是木本植物离体培养幼化程度较高的例证。在试管内培养时,杨比苹果培养物易于幼化,因而器官分化、愈伤组织形成和分化、再生完整植株较容易,在ＭＳ 培养基中添加的外源ＢＡ、ＮＡＡ 和２ ,４Ｄ 的浓度也较低。     

红江橙体胚发生及影响因素的研究

红江橙花后４周的幼果,直径约１ｃｍ左右,这时期的胚珠最适于胚性愈伤组织的诱导。以ＭＴ为基本培养基,加上适当浓度的ＩＡＡ、ＢＡ和ＭＥ可显著提高胚性愈伤组织诱导率。体胚发生,以ＭＴ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ１－１＋ＢＡ（ＺＴ）１ｍｇ１－１培养基较好,能诱导产生正常体胚,且频率较高。胚性愈伤组织继代次数对体胚发生也有一定的影响,继代６次以内,胚性愈伤组织具有旺盛产生体胚能力;继代至第９次时,产生体胚的能力明显下降;至第１２代时,不能产生胚状体。成熟胚转换成小植株,以ＭＴ＋ＧＡ２ｍｇ１－１＋ＮＡＡ０．１ｍｇ１－１培养基成苗率最高。     

红江橙胚发生及影响因素的研究

红江橙花后４周的幼果,直径约１ｃｍ左右,这时期的胚珠最适于胚性愈伤组织的诱导。以ＭＴ为基本培养基,加上适当浓度的ＩＡＡ、ＢＡ和ＭＦ可显著提高胚性愈伤组织诱导率。体胚发生,以ＭＴ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ１＾－１＋ＢＡ（ＺＴ）１ｍｇ１＾－１培养基较好,涌诱导产生正常体胚,且频率较高。胚性愈伤组织继代次数对体胚发生也有一定的影响,继代６次以内,胚性愈伤组织具有旺盛产生体胚能力;继代至第９次时,产生体胚的能力明     

杨和苹果离体茎尖培养和愈伤组织分化与内源IAA,ABA的关系

用杨和苹果的茎尖进行离体培养,在ＭＳ培养基中添加不同浓度的ＢＡ,ＮＡＡ或２,４－Ｄ,诱导（１）茎的增殖或根的分化,（２）愈伤组织形成以及愈伤组织分化根,芽或体胚,再生完整植株。测定了不同发育状态器官和组织的内源ＩＡＡ和ＡＢＡ,并计算了ＩＡＡ／ＡＢＡ的比值。培养物中其比值较高者,易于诱导不定根分化或形成胚性的愈伤组织,也是木本植物离体培养幼化程序较高的例证。     

草木樨状黄芪单细胞培养再生植株及其影响因素的研究

从草木樨状黄芪的子叶和胚轴诱导的愈伤组织中选取结构松脆的颗粒状愈伤组织,用液体培养基Ｓ１２进行悬浮培养建立了悬浮细胞。取换液３天左右生长旺盛的悬浮系材料分离单细胞,用基本培养基Ｓ１２与不同浓度的植物血球凝集素组成的系列培养基ＭＣ１－ＭＣ６进行液体浅层静置暗培养;形成小愈伤组织后,经Ｍ３（ＭＳ＋２,４－Ｄ ２ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ,ＫＴ １ｍｇ／Ｌ）培养基增殖,ＭＲ２培养基诱导分化出苗,再     

在离体条件下拐芹（Angelica polymorpha）形成胚性愈伤组织和非…

以拐芹（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｐｌｏｙｍｏｒｐｈａ）的叶柄为外植体,在附加２,４－Ｄ（１ｍｇ／Ｌ）＋ＫＴ（０．５ｍｇ／Ｌ）ＭＳ培养基上诱导脱分化,４０天内可形成愈伤组织。在相同的培养基上经过继代培养,可在２０天内形成胚性愈伤组织（Ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ Ｃａｌｌｕｓ,ＥＣ）和非胚性愈伤组织（Ｎｏｎ－Ｅｍｂｒｙ－ｏｇｅｎｉｃ Ｃａｌｌｕｓ,ＮＥＣ）。将不同天数的培养物作为样品,提取其内源激素;气液相色谱     

蝴蝶兰根段的组织培养

１　植物名称　蝴蝶兰（ＰｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓＭｅｌｌｅｒＧｏｌｄ“ＮＦＳ”）。２　材料类别　根段。３　培养条件　（１）愈伤组织的诱导及分化培养基：Ｂ５＋ＮＡＡ１．５ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＫＴ０．２＋ＣＭ１５０ｍｌ·Ｌ－１＋３％蔗糖;（２）原球茎增殖培养基：Ｂ５＋ＧＡ０．０５＋ＣＨ１２０＋３％蔗糖;（３）小苗生长培养基：１／２ＭＳ＋２０％香蕉泥＋２％蔗糖;（４）诱导生根培养基：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３＋２％蔗糖。上述培养基均加０．２％活性炭,０．５８％琼脂粉,ｐＨ为５．５;培养基在１２１℃高…     

一品红离体培养诱导体细胞胚的研究（简报）

一品红的嫩茎离体培养在附加不同浓度的２,４－Ｄ和６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,２．４Ｄ浓度为１．０～２．０ ｍｇ· Ｌ~（－１）的愈伤组织生长量最大。这些愈伤组织转移到ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ·Ｌ~（－１）的分化培养基上后,产生了胚性愈伤组织,观察到大量不同时期体细胞胚。带有体细胞胚的愈伤组织进一步转移到无激素 ＭＳ培养基上,便发育成小植株。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织,内含许多有分生能力的细胞团。当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力丧失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力。ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其促进乙烯生成有关。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。     

茶（Camellia sinensis Kuntze）离体培养体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以茶树叶片为外植体．以ＭＳ培养基附加４ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ,２ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ．３ｍｇ·Ｌ－１ＧＡ３和０．２—０．３％活性碳诱导出愈伤组织和胚状体,进一步形成小植株．切片观察表明．茶叶愈伤组织胚状体的发生,起源于愈伤组织表层及其内部的单个细胞和细胞团,胚状体发育顺序与合子胚大致相似．经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段．但发育过程中常有畸形胚出现．     

激素对枸杞体细胞胚发生及可溶性蛋白质含量和组分的影响

以宁夏枸杞无菌苗叶片为材料,对体细胞胚发生过程中激素作用、可溶性蛋白质变化及体细胞胚发生频率进行了研究。发现不同激素处理、可溶性蛋白质含量、组分和体细胞胚发生频率均有一定的差异,三者之间存在着相关性。结果如下：（１）ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３三种培养基上继代的愈伤组织难以诱导形成体细胞胚,为非胚性愈伤组织;而从ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３分别转到ＭＳ＿０和ＭＳ＿４培养基上的愈伤组织体细胞胚发生频率高,属于胚性愈伤组织。其中以ＭＳ＿３转至ＭＳ＿０后的体细胞胚发生频率最高。（２）可溶性蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：非胚性愈伤组织有特异性蛋白质６７ｋＤ,胚性愈伤组织有特异性蛋白质３５ｋＤ和４４ｋＤ;蛋白质３３ｋＤ和６７ｋＤ受２,４－Ｄ调控,蛋白质４９ｋＤ、５７ｋＤ受６ＢＡ调控,而蛋白质３７ｋＤ、５１ｋＤ受２,４－Ｄ和６ＢＡ协同调控。     

硬粒小麦单倍体原生质体培养及植株再生

由硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）×玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）建立的单倍性胚性愈伤组织,在继代培养４ 个月后置于含２．０ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ液体培养基中进行悬浮培养,４ 个月后形成了生长迅速、由大小不同（０．５ ～５ ｍ ｍ ）的愈伤组织块组成的愈伤组织悬浮系。酶解试验表明,２．０％ 纤维素酶ＲＳ和０．５％ 的离析酶效果最好,而液体悬浮培养物和固体培养的愈伤组织（在酶解时用锋利的解剖刀片切成１ ｍ ｍ 左右的小块）都能释放出大量原生质体,但悬浮培养物释放出的原生质体状态较好,胞质更浓厚,用ＫＭ８ｐ 培养基以琼脂糖包埋培养方式培养时分裂频率可达５％ 左右。由原生质体再生的小愈伤组织经增殖、筛选后可获得胚性愈伤组织,将其转移至分化培养基Ⅰ（０．２ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／Ｌ ＢＡＰ、０．１ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ 水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ固体培养基）和Ⅱ（不含２,４－Ｄ,其它成分同Ⅰ）上进行分步分化培养可再生出完整植株,分化频率约为２０％     

不同基因型玉米的再生能力和胚性与非胚性愈伤组织DNA的差异

研究了细胞分裂素在玉米愈伤组织诱导和植株再生中的作用,结果表明低浓度（０ ．２ ｍｇ／Ｌ） 的细胞分裂素能促进玉米幼胚诱导的愈伤组织再生,６ＢＡ 的效果比ＫＴ更好。不同品种的玉米幼胚诱导的愈伤组织的再生能力差异显著,普甜１ 号和苏玉１ 号的再生频率高达７８ ％ 和７５ ％ ,糯玉米和掖单９ 号仅为１０ ％ 和８ ％ 。植株再生途径也有所不同,普甜１ 号以器官发生为主要途径,苏玉１号则以体胚发生途径为主。经长期继代的愈伤组织失去再生能力,通过ＲＡＰＤ 方法比较发现胚性与非胚性愈伤组织的基因组之间存在差异,说明组织培养过程中愈伤组织的ＤＮＡ 发生了变异。     

青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究

试验以青扦（Ｐｉｃｅａｗｉｌｓｏｎｉ）的胚性愈伤组织为材料,以改良５９基本成分附加２４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ及ＫＴ１ｍｇ／Ｌ为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明：液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为２６８％,是半固体培养的１２４倍;体细胞胚的分化率为９３％,是半固体培养的２２倍;悬浮培养较佳的培养条件为：初始细胞密度为２％（鲜重）,蔗糖浓度为２０ｇ／Ｌ,摇床转速为１００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ为５８。经过两个月悬浮培养,将培养物转至１／２改良５９附加ＡＢＡ１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上,３个月后每ｇ培养物上可获得２８５个正常的子叶期体细胞胚。     

外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用

金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径：直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素ＢＡ对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素２,４－Ｄ则诱导愈伤组织,ＢＡ与２,４－Ｄ配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。　ＬＰ’附加低浓度的ＢＡ或ＫＴ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）促进不定芽茎的伸长;　ＬＰ’附加浓度的ＩＢＡ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为　×ＬＰ’或１×ＬＰ’的分化培养基上不定芽诱导率相似。     

苦丁茶愈伤组织的诱导与褐变抑制

以叶片为材料,对苦丁茶愈伤组织的诱导,继代培养及褐变调控的研究表明：（１）苦丁茶愈伤组织的诱导及继代培养均以ＭＳ附加ＢＡ ２．０ｍｇＬ＾－１和ＮＡＡ ４．０ｍｇＬ＾－１的培养基效果最好;（２）０．１％的植酸可明显促进愈伤组织生长、抑制褐变,而硫代硫酸钠效果最差;（３）连续培养４０－５０ｄ愈伤组织增长倍数达到最大值;（４）继代２７次以后愈伤组织生长速度开始下降。这些条件为下一步细胞培养生产苦丁茶甙等     

荷兰芹胚性愈伤组织诱导及胚状体发生与内源ＩＡＡ和ＡＢＡ关系的初步研究

分析了荷兰芹胚性愈伤组织发生的条件,对Ｃo^2 作用下胚状体形成与培养物内源ＩＡＡ和ＡＢＡ的关系做了研究,结果表明,荷兰芹下胚轴胚性发生能力随其相对位置而异,自下而上逐渐提高,提高２,４－Ｄ浓度有利于胚性愈伤组织的诱导,水解酪蛋白对胚性能力的表达没有显影响。在胚状体发生过程中,添加Ｃo^2 显降低培养物内源ＩＡＡ和ＡＢＡ水平,并提高胚状体诱导率。其中对照组ＩＡＡ有一个峰值,ＡＢＡ有两个峰值;实验组ＡＢＡ水平,并提高胚状体诱导率。其中对照组ＩＡＡ有一个峰值,ＡＢＡ有两个峰值;实验组ＡＢＡ变化趋势与对照组相似,而ＩＡＡ始终凤有峰值出现,Ｃo^2 对ＩＡＡ和ＡＢＡ的抑制机制可能有所不同。     

麻体细胞胚胎发生研究初报

将苎麻“浏阳大叶绿”的子叶培养在附加０．５ｍｇ／ＬＣＰＡ、０．０５ｍｇ／ＬＢＲ的ＣＸＷ培养基上,可获得淡黄色或浅灰绿色的颗粒状愈伤组织。将愈伤组织转移至附加０．１ｍｇ／ＬＣＰＡ、０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ、１．５ｍｇ／ＬＺＴ的ＣＸＷ培养基上继代,颗粒状结构非常明显。继续培养在添加２ｍｇ／ＬＭｅｔ,３ｇ／ＬＹＥ的上述继代培养基上,可分化出一些相互独立的胚状体,继而发育成为胚状体幼苗。