牛乳中α-乳白蛋白的分离纯化工艺研究

本文以牛乳为原料,离心脱脂后采用酸沉法分离酪蛋白,微滤除菌后得到乳清蛋白溶液,结合膜分离法和离子交换色谱法分离纯化乳清蛋白溶液中的α-乳白蛋白,并利用高效液相色谱法检测其纯度。结果表明,分离酪蛋白沉淀得到的上清溶液,经0.45μm的陶瓷膜微滤除菌后,除菌率可达99%以上,微滤得到的乳清蛋白溶液蛋白质含量可以达到6.53±0.22 mg/m L。乳清蛋白溶液经卷式聚砜膜超滤,富集α-乳白蛋白,并优化超滤条件,在35℃、出口压力0.3 MPa的条件下,得到的溶液中α-乳白蛋白含量可达24.28±0.32%。使用DEAE Sepharose Fast Flow对蛋白粗品进一步纯化,所获得的α-乳白蛋白纯度为90.89±0.31%,乳清中α-乳白蛋白的回收率可达79.02±0.13%。     

预处理猪血清IgG料液的超滤浓缩研究

本实验对预处理猪血清IgG料液超滤浓缩进行了研究.选择螺旋卷式超滤设备,以截留液全循环错流方式对预处理IgG料液进行超滤浓缩.其最佳工艺参数为:样品pH值为7、温度50℃、超滤压力0.1MPa、浓缩倍数为10倍.浓缩后得到的样品中蛋白质含量为2.08%(W/V),IgG含量为1.42%(W/V),具有活性的IgG所占比例比超滤前略有下降,从91.3%降低到87.6%.     

高浓度IgG初乳粉的工业制备技术研究

本实验探讨了工业化生产高浓度IgG含量初乳粉的工艺条件.通过单因素实验研究了中空纤维超滤膜的超滤条件,确定最佳操作条件为:温度25℃、压力0.10MPa.为了能大规模生产更高浓度IgG含量的初乳粉,对超滤浓缩乳清进一步盐析,比较了两种方法,得出辛酸.硫酸铵法所得的冷冻干燥乳粉其IgG含量最高,达到85%左右,但饱和硫酸铵法更适宜大规模生产.     

超滤法回收大豆乳清蛋白前预处理的研究

为提取大豆乳清蛋白,文中分别用絮凝离心法和微滤法对乳清进行了预处理。并对利用CaCl2絮凝沉淀大豆乳清进行了探讨,确定了最佳的絮凝工艺条件为:pH8.0,1mol/LCaCl2的加入量为18mL/L时,50-60℃低速搅拌絮凝15min。然后研究了微滤压力及温度对微滤效果的影响,最后确定微滤压力为0.1MPa、微滤温度为40℃。在絮凝及微滤最佳条件下进行了小试,结果发现,经过预处理后的大豆乳清蛋白损失率只有10.2%,总糖几乎没有损失,脂肪去除率达到100%,透光率也有明显提高。     

陶瓷膜超滤技术浓缩乳清的工艺参数研究

采用孔径为20nm的无机陶瓷膜超滤干酪副产物乳清,浓缩乳清蛋白。通过对膜过滤压力、温度以及乳清pH三个因素进行单因素分析以及正交实验优化,得到最佳工艺条件:操作压力0.25MPa,温度51℃,pH6.1,此条件下超滤膜渗透通量达到169.37L/m2.h,乳清蛋白可浓缩至5.4%,经喷雾干燥制得WPC蛋白质含量为38.2%。     

超滤法分离免疫牛初乳中的IgG

本实验选用截留分子量为100kD的中孔纤维超滤膜从免疫牛初乳乳清中分离提取IgG,研究了操作压力和温度在超滤过程中对膜透过速率的影响,确立了最适操作压力为0.15MPa,最适操作温度为25℃;并采用分段超滤法对免疫牛初乳乳清中的IgG进行分离,从而使浓缩液中IgG纯度得到进一步提高。     

采用膜分离技术高效分离提取L-亮氨酸

为提高L-亮氨酸提取得率,文中采用微滤、离交、超滤和反渗透技术对亮氨酸发酵液进行处理,重点研究了有机膜分离提取亮氨酸的工艺。确定膜分离工艺为:进料温度控制在45℃,pH调节至4.0;微滤压力0.1MPa,超滤压力0.25MPa,反渗透压力1.5MPa;反渗透浓缩倍数3～4效果最好。应用有机膜技术提取亮氨酸,其收率可达86.75%,产品纯度达98.58%。     

膜浓缩技术制备黑果枸杞花青素的工艺研究

以黑果枸杞干果为原料制备黑果枸杞花青素浓缩汁,分析了影响黑果枸杞提取汁质量的因素。采用超滤、反渗透膜浓缩技术,根据浓缩前后黑果枸杞花青素及可溶性固形物含量的变化规律,确定最佳工艺条件。结果显示:最佳干果复水比为1∶6(g/mL);复水后,经酶解的黑果枸杞汁中可溶性固形物含量明显增加;果胶酶含量优选为0.06%,纤维素酶含量优选为0.01%,酶解最佳温度:30℃,酶解最优时间:90 min;超滤膜材料选用孔径为20 nm陶瓷膜,温度30℃～40℃,压力0.1 MPa条件时达到超滤最佳效果。反渗透温度40℃,压力4.0 MPa时达到最佳效果。超滤与反渗透浓缩连用黑果枸杞浓缩果汁除菌率可以达到5个对数值。     

干酪乳清澄清工艺研究

采用絮凝离心法、微滤法、絮凝微滤法澄清干酪乳清,对其理化指标进行分析,确立最佳澄清方法。经分析,3种方法均可有效降低乳清的浊度和脂肪含量,但用絮凝离心法澄清乳清时,蛋白质损失率最小。用单因素和正交试验法对澄清工艺中CaCl2添加量、pH、水浴温度进行研究,得到最佳澄清工艺条件为:pH7.5、CaCl2添加量14 mL/L、水浴温度55℃,此条件下乳清中蛋白质含量为0.599%,脂肪含量为0.117%,浊度为9.65 NTU,蛋白质损失率仅6.3%,浊度显著降低,为干酪乳清蛋白膜浓缩提供有力支撑。     

杏汁膜除菌工艺研究

杏汁对热敏感,为了减少因热处理导致的营养成分和风味物质的损失,采用无机陶瓷膜对杏汁进行微滤除菌。通过研究三种孔径膜的膜通量、微滤前后杏汁营养成分的变化及除菌效果,选择最适的膜孔径,并在此基础上选择最适的操作压力、进料温度及流速,从而确定最佳的微滤除菌工艺参数。结果表明:最佳的工艺参数为膜孔径操作压力为0.2MPa、料液温度为35℃、流速为17m/s。在此条件下杏汁仍具有原有的香气和风味,可溶性固形物含量10.3%;总酚含量62.2mg/100m L;黄酮含量61.92mg/100m L;维生素C 19mg/100g;透光率93.7%,酵母菌和霉菌、大肠菌群及菌落总数等各项指标均达到国家标准。     

超滤膜分离技术回收乳清蛋白工艺研究

研究利用超滤膜分离技术,从干酪素乳清废弃液中回收乳清蛋白,通过对不同超滤膜性能的比较,选择最佳的超滤膜材料、工艺流程以及运行参数,并测得分离效果。结果表明:采用PW2540型聚醚砜卷式超滤膜较好,其最佳工艺参数为操作温度35℃,操作压力0.5MPa,且超滤膜透液通量较高,运行稳定。乳清蛋白粉中蛋白质含量72.40%,灰分3.85%。经红外光谱检测证明乳清蛋白粉品质得到较大程度的提高。每吨乳清废弃液中可回收乳清蛋白粉5.13kg,具有较好的经济效益及减排环保效益。     

超滤法浓缩分离免疫初乳中的抗体

收集经大肠杆菌、沙门氏菌混合疫苗免疫处理的乳牛产后７天之内初乳,经去脂、去酪蛋白后所得免疫初乳乳清,用中空纤维超滤器（分子截留为１００ｋｕ（１００ｋｄ）进行浓缩分离,浓缩４．５～７倍、ＩｇＧ收率在９０％以上。为了制得高纯度ＩｇＧ分离物,可和３５％饱和度的硫胺进行盐析,然后再进行超滤脱盐、浓缩、制得的ＩｇＧ浓缩物纯度达８０％以上,这一工艺适合工业化生产。     

Influence of unit operations on immunoglobulins and thermal stability of colostrum fractions

Colostrum-based ingredients are gaining significance in the global nutraceutical market as dietary supplements, but compositional variation, bioactive heat sensitivity and lack of appropriate preservation technologies hamper commercial colostrum processing. The effect of commonly employed unit operations on the physicochemical and nutraceutical components of skim colostrum was determined, and effects of membrane processing on its thermal gelation temperature, key to further liquid processing, were monitored. Homogenisation and high-shear mixing did not alter immunoglobulin content. However, commercial thermal pasteurisation (72 °C, 15 s) and batch pasteurisation (63 °C, 30 min) led to 56.4% and 24.6% denaturation of IgG, respectively. Microfiltration eliminated microbial load of diluted skim colostrum to render it practically sterile, while ultrafiltration concentrated the proteins of colostrum fractions. Concentration of protein, particularly immunoglobulins, resulted in lowering of thermal gelation temperature. Skim colostrum and colostrum whey can, therefore, be preserved by employing microfiltration and concentrated with simultaneous purification by ultrafiltration.     

HPLC法检测牛初乳中lgG含量

建立了牛初乳中IgG的高效液相色谱检测法,并测定了 初乳中IgG的经时变化过程。结果显示,IgG浓度在0.2～ 15mg/mL的范围内峰面积与浓度呈现良好的线性关系, 回收率实验平均大于98.5％。采用本法测定了六头幽门螺 杆菌免疫牛初乳中IgG及两头正常牛初乳中IgG的经时 变化过程。母牛分娩后24h内,初乳中免疫球蛋白IgG平 均含量在40～70mg/mL之间;3d后,初乳中免疫球蛋白 总量下降较快;至第7d,初乳中免疫球蛋白含量平均在 1～5mg/mL之间。     

牛血清蛋白的超滤提取工艺研究

采用超滤技术提取牛血中的血清蛋白,主要研究了超滤液温度、超滤压力、超滤液pH和超滤时间对牛血清蛋白提取时膜通量、提取率和得率的影响。实验结果表明,超滤技术可应用于牛血清蛋白的提取,其最佳提取工艺参数为超滤液温度30℃,超滤压力0.1MPa,超滤液pH6.5,超滤时间20min,在此提取工艺参数条件下提取牛血清蛋白时,膜通量达54.58L/m2.h,牛血清蛋白提取率达98.13%,得率达24.09g/L。     

响应面法优化牛初乳免疫球蛋白热保护剂的配方

为筛选一种最佳的牛初乳免疫球蛋白（Immunoglobulin G,IgG）热保护剂,以牛初乳为原料对其IgG进行提取,在单因素实验基础上,以IgG活性保留率作为响应值,选取甘氨酸、麦芽糖醇和菊粉三种物质作为响应因子,采用Box-Behnken响应面法对IgG热保护剂配方进行优化,并通过傅里叶变换红外光谱和内源性荧光光谱表征不同方式处理的牛初乳IgG结构。结果表明,IgG热保护剂的最佳配方:甘氨酸0.48%,菊粉14.98%,麦芽糖醇12.50%,在75 ℃,5 min条件下热处理的IgG活性保留率为36.59%,各因素添加量对IgG活性保留率的影响主次顺序均为:麦芽糖醇>甘氨酸>菊粉。傅里叶变换红外光谱和内源性荧光光谱分析结果表示:与未添加复合热保护剂的牛初乳IgG相比,添加复合热保护剂后的牛初乳IgG,β-折叠含量显著下降（P<0.05）,无规则卷曲含量显著下降（P<0.05）,二级构象呈现较为有序的状态;荧光强度降低,IgG分子堆积更加紧密,结果表明添加复合热保护剂后的牛初乳IgG结构稳定性有所提高。本研究探索出一种新型牛初乳IgG的复合热保护剂配方,为牛初乳功能性食品的进一步开发和利用提供了参考。     

高静水压处理对牛初乳中IgG的影响

采取不同的高静水压条件（处理压强、施压温度、保压时间）处理产犊后48 h内的牛初乳,研究高静水压处理牛初乳对免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）活性的影响。将牛初乳离心去除酪蛋白、乳脂肪等,取上清液进行高静水压处理,采用高效液相色谱法和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（sodium dodecyl sulfatepolyacrylamidegel electrophoresis,SDS-PAGE）对处理后的样品进行检测。结果表明：高静水压处理后的样品,经高效液相色谱仪检测,其与亲和色谱柱发生特异性吸附的能力下降,IgG检出质量浓度降低;经SDS-PAGE检测和凝胶电泳成像仪扫描处理,不同处理条件下IgG的轻链和重链的质量变化不显著。因此,当牛初乳在200 MPa、30 ℃和20 min的高静水压处理条件下,IgG的活性最好,检出质量浓度为16.843 9 mg/mL。     

超滤法浓缩乳清蛋白前处理研究

为了提高乳清在进行超滤的通透性,从而提高超滤的效率,对利用CaCl2絮凝沉淀乳清的工艺条件进行研究,通过单因素和正交试验优化,综合考虑蛋白含量、脂肪含量和透光率3个指标,确定最佳的絮凝工艺条件为pH7.5、1mol/L CaCl2溶液添加量12mL/L、在60℃水浴缓慢搅拌絮凝15min。在最佳絮凝工艺条件下进行验证,结果表明：经过预处理后的乳清蛋白损失率只有13.6%,脂肪去除率达到86%以上,透光率也有显著提高。     

牛初乳中免疫球蛋白G双抗夹心ELISA检测方法的建立

将牛免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选获得分泌抗牛IgG单克隆抗体的细胞株。制备小鼠腹水抗体,进一步纯化获得抗牛IgG单克隆抗体。建立双抗夹心酶联免疫吸附法检测牛初乳中IgG质量浓度,该方法在7.8～1 000 ng/mL范围内有良好的线性关系,最低检出限为7.06 ng/mL,批内变异系数为4.52%,批间变异系数为4.94%,回收率为91.85%～102.45%。此法操作简便、准确度高、稳定性好,可用于实际牛初乳样品的快速检测。