响应面试验优化超声辅助提取连钱草多糖工艺及其体外抗氧化活性

通过中心复合试验优化超声辅助提取连钱草多糖的工艺,以1,1-二苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）自由基（2,2’--azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical,ABTS＋•）清除能力、Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducingantioxidant power,FRAP）和N,N-二甲基-对苯二胺（N,N-dimethyl-p-phenylenediamine,DMPD）自由基清除能力为指标,研究连钱草多糖的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助提取连钱草多糖的最优工艺为pH 7.2、液固比32∶1（mL/g）、超声功率270 W、超声时间8 min,此条件下多糖提取率在4.95%～5.12%范围内。体外抗氧化活性结果显示,连钱草多糖DPPH自由基清除能力为（0.51±0.04）μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.69±0.04）μmolTrolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.51±0.29）μmol EDTA/mg,FRAP值为（3.45±0.03）μmol Trolox/mg,DMPD自由基清除能力为（0.17±0.01）μmol Trolox/mg。     

五倍子制备没食子酸丙酯的抗氧化活性研究

对天然植物五倍子浸提物没食子酸（GA）进行改性,得到没食子酸丙酯（PG）,并采用亚铁还原能力法（FRAP）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基法、2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基法对其抗氧化活性进行评价。结果显示,FRAP值由大到小排序为：PG（FRAP值0.506）＞TBHQ（FRAP值0.412）＞BHA（FRAP值0.409）＞BHT（FRAP值0.067）;DPPH自由基清除能力由强到弱的顺序为：PG（IC50值4.2 μmol/L）＞BHT（IC50值53 μmol/L）＞TBHQ（IC50值87 μmol/L）＞BHA（IC50值816 μmol/L）;ABTS自由基清除能力由强到弱的顺序为：PG（IC50值 4.2 μmol/L）＞BHA（IC50值44 μmol/L）＞BHAT（IC50值45 μmol/L）＞TBHQ（IC50为50 μmol/L）。结果表明,PG的抗氧化活性均强于其他三种抗氧化剂,可作为新兴食品抗氧化剂应用。     

短瓣金莲花不同提取部位的抗氧化活性

目的：研究短瓣金莲花的抗氧化活性部位。方法：将短瓣金莲花药材依次用石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇、60%乙醇、30%乙醇和去离子水提取,采用紫外-可见分光光度法对不同溶剂提取部位的黄色素、总黄酮和总酚含量进行分析,并测试各提取部位对羟自由基（•OH）和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除作用以对其抗氧化活性进行研究。结果：短瓣金莲花石油醚提取部位的黄色素含量最高,为（11.37±0.07 ）mg/g;而60%乙醇提取部位总黄酮和总酚含量最高,分别为（213.21±1.12）mg/g和（121.75±0.58） mg/g,95%乙醇提取部位次之,分别为（200.47±0.65）mg/g和（105.19±0.61）mg/g。石油醚提取部位清除•OH能力最强,半抑制浓度（50% inhibiting concentration,IC50）为92.77 mg/L;95%乙醇提取部位清除DPPH自由基能力最强,IC50为10.14 mg/L,60%乙醇提取部位次之,IC50为10.70 mg/L。结论：短瓣金莲花清除•OH能力与黄色素含量呈正相关性,而清除DPPH自由基能力与黄酮和多酚含量呈正相关性;短瓣金莲花的石油醚和95%乙醇提取部位是最佳的抗氧化活性部位,有待进一步深入研究。     

响应面试验优化超声波辅助提取蓝靛果多酚工艺及其抗氧化活性

选用长白山的蓝靛果忍冬冻果作为原料,以蓝靛果多酚提取量为指标,在单因素试验的基础上,通过三因素三水平的响应面优化试验,得出了蓝靛果多酚最佳的提取工艺条件为：料液比1∶25（g/mL）、提取温度40 ℃、乙醇体积分数50%、超声功率500 W、提取时间90 min。在此条件下,蓝靛果多酚提取量达7.52 mg/g。此外,通过体外抗氧化能力评价方法得出：蓝靛果多酚具有较强的清除超氧阴离子自由基、2,2’-联氨-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐自由基（2,2’-azino-bis(3-ehtylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt radical,ABTS＋•）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的能力。由相关性分析结果可知,蓝靛果多酚含量与超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力之间呈极显著正相关（P＜0.01）,与ABTS＋•清除能力间呈显著正相关（P＜0.05）。     

微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的工艺优化及抗氧化性评价

优化微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的提取工艺,并测定其多糖的抗氧化性。在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,通过L9（33）正交试验优化其多糖的提取工艺参数,并通过澳洲坚果壳多糖对•OH、1,1-苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和O2－•的清除来评价其抗氧化能力。结果表明,最佳提取工艺参数为微波功率200 W、微波时间2.5 min、料液比1∶50 （g/mL）,在该条件下多糖的平均提取率为0.70%;多糖质量浓度为0.027 5 mg/mL时,对• OH、DPPH自由基和O2－•的清除率可分别达到63.11%、61.90%和80.09%,说明提取的澳洲坚果壳多糖对• OH、DPPH自由基和O2－•有较好的清除能力。     

不同食用菌菌糠多糖的组分分析与抗氧化活性评价

目的：比较茶树菇、香菇、白玉菇、平菇和蛹虫草菌糠多糖的组成与抗氧化性。方法：通过酶解水提、乙醇沉淀和Sevag法脱蛋白步骤获得5 种菌糠多糖,进一步对其组成和抗氧化性进行分析评价。结果：5 种菌糠多糖均具有不同程度的抗氧化性,其中茶树菇菌糠多糖的氧自由基清除能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）值和铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）值最佳,分别达到了1 215 μmol Trolox/g和281 μmol Fe2+/g;而白玉菇与平菇的菌糠多糖对2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid）diammonium salt,ABTS）自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力较强。     

干燥方式对金银花多酚组分及其抗氧化活性的影响

研究传统热风干燥、自然阴干以及真空干燥、真空冷冻干燥等不同干燥方式对金银花多酚类物质含量及抗氧化活性的影响。采用Folin-酚比色法及高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）法分别检测4 种干燥方式下的金银花总酚及多酚类组分含量,并比较其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（•OH）和2,2’-二氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）铵盐（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate acid) diammonium salt,ABTS）自由基的能力。结果表明：4 种干燥方式对金银花总酚含量及多酚类组分均有一定影响,其中真空冷冻干燥处理时金银花总酚及多酚类组分损失最小;不同干燥方式对金银花的抗氧化能力影响显著（P＜0.05）,真空冷冻干燥样品清除DPPH自由基、•OH和ABTS＋•的半抑制浓度（IC50）分别为5.43、17.64、44.32 μg/mL;而自然阴干、真空干燥和热风干燥处理的样品清除DPPH自由基、•OH及ABTS＋•的IC50高于真空冷冻干燥金银花相应的IC50。相关性分析显示,金银花酚酸类组分与其抗氧化活性显著相关（P＜0.05）。因此,真空冷冻干燥能较好地保留金银花多酚类物质,且具有较强的抗氧化活性,适宜用于金银花的干燥。     

老山芹全株及其不同部位酚类物质含量及抗氧化能力分析

比较老山芹及其不同部位（嫩叶、茎）甲醇提取物总多酚、总黄酮含量,测定5 种抗氧化指标（铁还原能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基清除能力）,研究其体外抗氧化活性间的差异。结果表明：老山芹嫩叶总多酚含量为30.51 mg/g,分别为全株植物与嫩茎的1.25、1.78 倍;老山芹嫩叶总黄酮含量为28.92 mg/g,分别为全株植物与嫩茎的1.34、4.00 倍。在抗氧化能力测定实验中,铁还原能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力排序均为嫩叶＞全株植物＞嫩茎＞对照组（VC）;ABTS阳离子自由基清除能力排序为嫩叶＞全株植物＞对照组（Trolox）＞嫩茎;DPPH自由基清除能力排序为嫩叶＞嫩茎＞对照组（VC）＞全株植物。老山芹及不同部位甲醇提取物对超氧阴离子自由基、羟自由基清除能力较强,对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除能力次之,铁还原能力较弱。     

黔产皂角米多糖提取动力学及抗氧化活性研究

目的:以皂角米为原料,研究皂角米多糖的提取动力学及其抗氧化活性。方法:以Fick第一定律为基础,建立皂角米多糖的提取动力学模型,采用红外光谱对皂角米多糖进行结构分析,通过测定皂角米多糖对ABTS自由基、羟基自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基的清除能力来评价其抗氧化活性。结果:建立的皂角米多糖提取动力学模型计算值与实际测得数据吻合良好,符合一级提取动力学模型,其活化能为15.023 kJ/mol;红外图谱显示皂角米多糖含有甘露糖,为β-型吡喃多糖。抗氧化结果表明,皂角米多糖的抗氧化活性随着浓度的增大而增强。当浓度为5 mg/mL时,皂角米多糖对ABTS阳离子自由基清除率为71.82%,对羟基自由基清除率为83.36%,对DPPH清除率为84.00%,对超氧阴离子自由基清除率为86.11%。结论:建立了皂角米多糖提取的动力学模型,皂角米多糖具有较好的抗氧化活性。     

昆仑雪菊结合型黄酮类化合物的分离与鉴定

昆仑雪菊结合型黄酮类化合物因与细胞壁以共价键结合,难以直接用溶剂萃取出来。本研究采用碱降解法使结合型化合物释放出来并优化降解条件,在此基础上,利用不同溶剂对降解产物进行提取筛选出最佳的溶剂得到粗提物,利用常压硅胶柱层析和SepdexLH-20凝胶柱层析对粗提物中的黄酮类化合物进行分离纯化得到单体化合物,采用Fe3+还原/抗氧化能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）法及2,2’-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2’-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）,ABTS）法对单体化合物进行抗氧化活性评价。结果表明：最佳的碱降解时间2 h、温度50 ℃、NaOH浓度2 mol/L,最佳提取溶剂为正丁醇;从粗提物中分离得到2 个单体化合物,采用核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）和电喷雾质谱（electrosprayionization mass spectra,ESIMS）鉴定其化学结构分别为金鸡菊查尔酮-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖（化合物1）、3’,4’,7,8-四羟基二氢黄酮（化合物2）;活性测定结果表明两个化合物的总抗氧化能力均强于阳性对照VE,化合物1与化合物2对DPPH自由基的半数抑制率IC50分别为（17.29±0.17）μmol/L和（70.09±0.09）μmol/L、对ABTS＋·半数抑制率IC50分别为（22.86±0.21）μmol/L和（33.4±0.18）μmol/L,远低于阳性对照VE的IC50值（分别为（78.08±1.63）μmol/L和（38.54±0.42）μmol/L）,说明两个化合物均有很强的抗氧化活性。     

老黑谷米色素的提取工艺优化及体外抗氧化活性分析

以老黑谷米为对象,在单因素试验的基础上,利用二次通用旋转试验设计,对老黑谷米色素的提取工艺进行了优化,并对色素的体外抗氧化活性进行了评价。结果表明:老黑谷米色素的最佳提取溶剂为乙醇,在282 nm和342 nm处有最大吸收波长,初步定性为黄酮醇类物质;该色素的最佳提取条件为提取温度30℃、液料比20∶1(m L/g)、提取时间40 min;该色素具有较好的抗氧化活性,DPPH自由基清除能力为(3 512.56±26.28)μg阿魏酸/g,铁离子还原/抗氧化能力为(44.04±6.60)mmol Fe~(2+)/L,还原能力为(203.47±23.75)μg抗坏血酸/g,H_2O_2清除活性为(3 676.60±114.32)μg阿魏酸/g,ABTS~+·清除能力为(2 778.70±262.90)μg Trolox/g。     

响应面优化鱿鱼须脱皮液胶原肽酶解工艺及抗氧化活性

目的：研究秘鲁鱿鱼须脱皮液胶原肽酶解工艺及抗氧化活性。方法：以水解度和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,利用单因素试验和响应面法对其酶解工艺进行优化,并采用2,2’-联氮-二（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt,ABTS）自由基与•OH清除率及亚铁还原能力评价其酶解产物抗氧化活性以及通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和凝胶排阻色谱分析其分子质量分布。结果：最适酶解工艺为酶解温度50 ℃、初始pH 7.4、底物蛋白质质量分数3.2%、酶解时间3.7 h、酶添加量3 000 U/g。在此条件下,水解度和酶解产物DPPH自由基清除率分别为（37.23±0.08）%和（43.61±0.09）%,对ABTS＋•和•OH清除率的IC50分别为0.37 mg/mL和0.41 mg/mL,且表现出较强的亚铁还原能力;SDS-PAGE显示最适酶解工艺下,蛋白质基本被水解为小分子多肽;凝胶排阻色谱分析可知,酶解产物分子质量在1～5 kD之间。结论：酶解产物具备较强的抗氧化活性,可作为抗氧化活性物质基料,充分开发利用。     

野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力

本实验研究了野生桃金娘（Rhodomyrtus tomentosa）的抗氧化能力、总多酚含量、总黄酮含量、抗坏血酸含量和花青素类成分。采用超高效液相串联光电二极管阵列（photo-diode array,PDA）检测器和离子肼质谱法（ultra performance liquid chromatography coupled to photo-diode array and ion-trap mass spectrometry,UPLC-PDAIT-MS）鉴定花青素类化合物,通过高通量的自由基清除方法测定抗氧化能力。结果表明：野生桃金娘具有较高的抗氧化能力。每克桃金娘的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力相当于67.2 μmol的抗坏血酸和28.5 μmol没食子酸;过氧化氢自由基清除能力（PSC单位）相当于23.2 μmol的抗坏血酸和14.3 μmol没食子酸;2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid） ammonium salt,ABTS）自由基（ABTS+·）清除能力相当于30.4 μmol的抗坏血酸和7.8 μmol没食子酸;对三价铁的还原能力相当于28.7 μmol的抗坏血酸和3.1 μmol没食子酸。野生桃金娘的总多酚含量和总黄酮含量分别是4 976 mg 没食子酸/100 g（以干质量计）和49.7 mg儿茶酚/100 g（以干质量计）,总抗坏血酸含量是9 mg/100 g（以鲜质量计）。总花青素含量相当于414 mg矢车菊素/100 g（以干质量计）,共有飞燕草素3-O-葡萄糖苷等7 种花青素类化合物被鉴别出来。     

不同产地尖顶羊肚菌多酚组成及抗氧化活性研究

为研究不同产地羊肚菌多酚的抗氧化活性及组成,以3 种不同产地（云南、西藏、新疆）尖顶羊肚菌为原料,提取羊肚菌游离酚和结合酚,测定其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、还原力、2,2’-联苯-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）,ABTS）自由基清除能力和抗氧化能力指数（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）值,并通过高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）分析其组分。结果表明,3 种尖顶羊肚菌平均总酚含量为5.958 mg GAE/g,游离酚约为结合酚的25 倍;云南尖顶羊肚菌游离酚、结合酚含量最高（（6.157±0.192）、（0.250±0.018） mg GAE/g）,西藏尖顶羊肚菌游离酚、结合酚含量最低（（4.928±0.045）、（0.188±0.026） mg GAE/g）。3 种尖顶羊肚菌多酚组分主要为酚酸和黄酮,组成较一致,但含量差异显著。体外抗氧化结果表明：3 种尖顶羊肚菌多酚均具有一定的抗氧化活性,其中对DPPH自由基的清除能力最强;西藏尖顶羊肚菌多酚的DPPH自由基清除能力和还原力最强;新疆尖顶羊肚菌多酚的ABTS＋·清除能力最强,ORAC值也最高。     

宁夏枸杞体外抗氧化机理研究

目的：研究宁夏枸杞中主要的4种抗氧化物质（枸杞多糖、黄酮、类胡萝卜素和VC）的抗氧化能力,分析它们对枸杞果实总抗氧化能力的贡献率,探索宁夏枸杞果实的体外抗氧化机理。方法：采用FRAP法、DPPH法、ABTS法和清除羟自由基法4种体外抗氧化方法来评价枸杞鲜果的总抗氧化能力。结果：4种方法测得枸杞黄酮对枸杞果实总抗氧化能力的贡献率均大于96%,VC对枸杞果实总抗氧化能力的贡献率均小于4%,高质量浓度的枸杞多糖（642.7170 mg/L）和类胡萝卜素（109.9280 mg/L）检测不到抗氧化能力。结论：枸杞黄酮的抗氧化能力决定着枸杞果实的体外抗氧化能力。     

重庆地方名柚果肉酚类物质含量及其抗氧化活性分析

通过紫外分光光度计法和高效液相色谱法分别测定10 种重庆地方名柚成熟果实囊衣、汁胞2 个部位的总酚、总黄酮含量及类黄酮、酚酸组分和含量,并采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）、铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）测定、2,2’-联氮-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS）3 种方法对其抗氧化活性进行评价。结果表明：囊衣的总黄酮含量和类黄酮含量较高,‘琯溪蜜柚’总黄酮含量最高达10.97 mg/g,类黄酮中地奥司明含量最高,均值为1 000.72 μg/g,其含量最高为‘五布柚’,达到2 366.77 μg/g;汁胞的总酚含量和酚酸含量较高,‘真龙柚3号’总酚含量最高达8.84 mg/g,酚酸中没食子酸含量最高,均值为1 040.16 μg/g,其含量最高为‘长寿沙田柚’,达到1 325.89 μg/g。利用DPPH法和FRAP法测定2 个部位抗氧化活性,汁胞高于囊衣,ABTS法则囊衣高于汁胞。综合抗氧化能力指数表明,‘琯溪蜜柚’囊衣、‘梁平柚78-8’汁胞的抗氧化活性最强。通过本研究,不仅能够了解重庆地方名柚果实囊衣、汁胞部位酚类物质组分和含量,同时为柑橘酚类物质的应用选择提供了一定的理论依据,促进了柑橘果品营养学的发展。