胶体金快速检测条法测定玉米油中玉米赤霉烯酮含量

目的建立胶体金快速检测条法测定玉米油中玉米赤霉烯酮含量的分析方法,并与高效液相色谱法作比对。方法分别运用胶体金快速检测条法和免疫亲和层析净化高效液相色谱检测法对14个玉米油中玉米赤霉烯酮的含量进行检测。结果对实验结果进行成对样本t-检验,发现2种实验方法所得出的结果在95%的置信水平上无显著差异。同时运用胶体金快速检测条法对每个样品进行6次重复实验,分析其变异系数范围在2.9%～6.3%,说明此种方法的重复性较好。结论胶体金检测条法可以作为玉米油中玉米赤霉烯酮的快速检测方法。     

玉米赤霉烯酮胶体金试纸条质量验证试验

目的验证玉米赤霉烯酮胶体金试纸条对玉米基质、小麦基质样品中玉米赤霉烯酮检测的准确性。方法根据试纸条说明书方法,将不同浓度系列的玉米基体和小麦基体质控样品进行前处理后,用试纸条测定其浓度。结果检测样品为玉米基体时试纸条间无显著性差异,相对准确率为99.5%,检测结果准确;小麦基体时,试纸条显著性差异为39.03(自由度df=1),相对准确率为80.5%,检测结果差异较大。结论该方法基本可行,适合对玉米中玉米赤霉烯酮的含量进行定性检测,不适合对小麦中玉米赤霉烯酮含量进行定性检测。     

谷物中玉米赤霉烯酮残留的胶体金免疫层析法测定

建立一种快速、简便、针对谷物中玉米赤霉烯酮残留的检测方法。应用竞争抑制免疫层析原理,研制出玉米赤霉烯酮胶体金试纸条,并对其性能进行了鉴定。结果表明,该试纸条对谷物中玉米赤霉烯酮的检测限为100μg/kg,灵敏度为99%,特异性为94%,假阴性率为1%,假阳性率为6%,检测时间为10 min。该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,适用于现场快速检测谷物中的玉米赤霉烯酮。     

原料乳中玉米赤霉烯酮胶体金免疫试纸条检测方法的建立

采用柠檬酸三钠法合成胶体金,与抗玉米赤霉烯酮单抗(ZEA-m Ab)制成抗体-胶体金标记物,包被于胶体金结合垫上。玉米赤霉烯酮半抗原和蛋白的偶联物(ZEA-BSA)和羊抗鼠Ig G分别喷涂于硝酸纤维素膜作为检测线(T线)和质控线(C线),建立原料乳中玉米赤霉烯酮(ZEA)的胶体金免疫试纸条检测法。结果显示,试纸条的灵敏度为30n g/m L,与其他毒素无交叉反应,10 min内即可肉眼观察结果。检测添加有玉米赤霉烯酮的原料乳样品,该试纸条的检测限为50 ng/m L。方法可用于原料乳中玉米赤霉烯酮的快速检测。     

玉米毛油中玉米赤霉烯酮脱除技术研究

以玉米赤霉烯酮含量高的玉米胚芽及玉米毛油为原料,以玉米赤霉烯酮含量及脱除率为实验验证指标,研究碱液处理玉米胚芽原料后ZEN的的脱除效果,利用物理吸附剂蒙脱石脱除玉米毛油中的玉米赤霉烯酮。实验结果表明:用pH9~10的碱液处理玉米油原料玉米胚芽时,玉米油中的赤霉烯酮能够从201.6μg/kg降到79.6μg/kg,采用蒙脱石吸附添加量在0.6%时,玉米油中的赤霉烯酮能够从213.4μg/kg降到47.5μg/kg并且对有效降低了玉米油的酸价,不影响玉米油的过氧化值和风味。两种工艺都能有效脱除赤霉烯酮,其中蒙脱石吸咐工艺相对简单,在工业化应用中前景广阔。     

鸡饲料及原料中玉米赤霉烯酮污染的检测及分布研究

对污染鸡饲料及原料的有毒物质玉米赤霉烯酮的检测方法和分布进行了研究。建立了饲料及不同种类原料中玉米赤霉烯酮的高效液相色谱-荧光检测方法,采用免疫亲和柱进行净化处理,优化了样品提取和净化条件,获得了较好的色谱条件,能满足检测分析的需要。同时采用该方法分析了118批饲料和83批原料中玉米赤霉烯酮的含量。结果显示,该方法检出限为0.005mg/kg,回收率为87.2%~91.0%,精密度为1.2%~2.1%,能快速、准确地分析鸡饲料及原料中玉米赤霉烯酮的含量。玉米赤霉烯酮在原料中的总的检出率为8.4%,在原料干酒糟、蛋白粉、高粱、玉米中有检出,超出允许限量的原料占总数的10%。鸡饲料中玉米赤霉烯酮总的检出率为30.51%,超标率为5.08%。原料和饲料中玉米赤霉烯酮的最高含量分别为976.24、2042.44μg/kg,分别达到标准允许限量的2倍和4倍。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测玉米油中的 黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法准确、快速检测玉米油中黄曲霉毒素(aflatoxins B_1、B_2、G_1、G_2)和玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的含量,了解市售玉米油中B_1、B_2、G_1、G_2、ZEN污染状况。方法样品经乙腈:水(84:16,V:V)溶液超声离心提取后,通过多功能固相萃取柱进行净化处理,采用液相色谱-串联质谱法进行检测。结果 B_1、B_2、G_1、G_2的线性范围为0.1～20μg/L,ZEN的线性范围为3.0～200μg/L;方法回收率为74.4%～98.6%,相对标准偏差为3.9%～6.9%;B_1、B_2、G_1、G_2定量限为0.2μg/L,ZEN的定量限为6.0μg/L。市售的33份样品中,均没有检出B_1、B2、G_1、G_2;玉米赤霉烯酮检出32份,检出率为97.0%。结论该方法操作简单快速、重现性好,可用于玉米油中黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的检测。     

2012—2019年烟台市食品中玉米赤霉烯酮污染状况及暴露评估

目的了解烟台市食品中玉米赤霉烯酮的污染状况,评估烟台市居民膳食来源玉米赤霉烯酮的暴露量。方法2012-2019年随机采集烟台市13个县市区食品样品405份,包括谷物及其制品、玉米油和焙烤食品。采用高效液相色谱法检测玉米赤霉烯酮,结合粮油食品的膳食消费量进行暴露量点评估。结果食品中玉米赤霉烯酮总检出率为8.15%(33/405),总超标率为0.99%(4/405),平均值为7.85μg/kg。玉米及其制品中玉米赤霉烯酮检出率和平均值最高,分别为22.96%(31/135)和15.07μg/kg。玉米油中玉米赤霉烯酮检出率和均值分别为10%(2/20)和6.17μg/kg。小麦及其制品、小米、焙烤食品中玉米赤霉烯酮均未检出。散装样品比定型包装样品更容易受到污染。在平均值、P50、P75和P90污染水平下,谷物及其制品和玉米油食品安全指数(food safety index,IFS)<1,处于安全水平。高污染水平(P95)的谷物及其制品的IFS>1,膳食风险处于不可接受水平。但高污染水平的(P95)玉米油的IFS<1,处于安全水平。结论玉米相关制品中玉米赤霉烯酮污染较其他食品种类高。消费者通过摄入谷物及其制品和玉米油造成玉米赤霉烯酮的膳食暴露风险较小,除高污染水平(P95)的谷物及其制品外,其余均处于安全水平。     

粮食加工品中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染 情况调查

目的初步了解粮食加工品中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的污染情况。方法对北京地区和网购的200批次样品进行随机抽检,分别采用液相色谱法、免疫亲和层析净化高效液相色谱法对粮食加工品中的玉米赤霉烯酮和呕吐毒素进行了检测。结果初步调查发现玉米碾磨加工品中的玉米赤霉烯酮和小麦粉中的呕吐毒素检出率较高,分别达34%和74%;散装样品中玉米赤霉烯酮含量不合格率和检出率明显高于预包装样品。结论建议监管部门加强对散装玉米碾磨加工品和小麦粉等粮食加工品中毒素指标的监控力度和监测频次,同时针对我国特殊敏感人群加快设定合理限值。     

小麦中真菌毒素的快速检测方法的研究

对小麦中黄曲霉毒素总量、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的快速检测方法进行了研究.先采用胶体金快速检测卡法、免疫亲和柱层析净化荧光光度法进行快速检测,再用免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法国标方法进行验证,从而根据实验室检测项目需要,快速对样品进行检测,既保证了准确度,又提高了检测效率.     

胶体金免疫层析法快速测定玉米和小麦中玉米赤霉烯酮

采用高效液相色谱法对玉米赤霉烯酮阳性样品进行定值,将阳性样品制备为不同毒素含量的验证样品,对胶体金免疫层析法的准确性、重复性、稳定性、最低检出限、误差范围进行了验证试验,并且完成了对实际样品的检测,同时采用酶联免疫法（ELISA）进行对比,试验结果为：最低检出限为60μg/kg,其检测结果与酶联免疫法基本一致,方法具有...     

胶体金试纸与气相色谱法检测毒死蜱结果相符率比较

目的通过研究胶体金法与气相色谱法在检测毒死蜱中的应用,证实胶体金试纸条在检测蔬菜中毒死蜱残留的可靠性。方法对比胶体金试纸半定量法和气相色谱定量法检测毒死蜱的结果。结果胶体金试纸条检测阴性样品得出的结果与气相色谱的结果符合率为100%,添加的阳性样品符合率也达到100%。添加的界限值样品的回收率达到96%。结论与气相色谱法相比较,胶体金试纸检测毒死蜱操作简便、观察直观、快速、省时,其特异性、敏感性较高,可作为蔬菜采摘前毒死蜱农药残留自我检测的手段。并可以此为基础建立一个不同于以前的毒死蜱监管模式。     

检测霜霉威的两种方法的比较

目的比较胶体金法与液相色谱-质谱质谱联用法(LC-MS/MS)在霜霉威检测中的应用。证实胶体金试纸检测蔬菜中霜霉威残留的可靠性,并以此为基础建立一个新的检测手段。方法通过胶体金试纸条半定量方法检测的试样,再用液/质谱法联用定量检测试样中的霜霉威。结果胶体金试纸检测为阴性的100个试样,经液/质谱法联用检测结果为未检出,符合率为100%。添加霜霉威的胶体金试纸检测阳性的试样经液/质谱法联用检测,符合率为100%,添加的Cutoff值样品回收率达到93%。结论与液/质联用检测法相比较,胶体金法检测霜霉威具有操作简便、观察直观、快速、省时的特点,特异性强、敏感性较高,从而为检测霜霉威提供了一种快速的检测方法。     

烟叶中多菌灵胶体金定量试纸条的研制及应用

为了建立烟叶中残留的多菌灵的快速定量检测方法,利用胶体金免疫层析技术并配套胶体金读数仪,确定更适用于现场检测的多菌灵试纸条的产品形式,明确温度对胶体金试纸条定量结果的影响,用恒温孵育器控制检测温度,基于胶体金读数仪绘制标准曲线。结果表明:①研制的定量胶体金试纸条检测限为0.017 mg/kg,检测范围为0.020~2.0 mg/kg,定量范围为0.020~0.50 mg/kg,加标回收率为95.6%~128.9%,批内变异系数为6.2%~11.2%;②与高效液相色谱-串联质谱法的检测结果相比,阴性样品检测结果准确率大于95%,阳性样品的检测结果在定量范围0.020~0.50 mg/kg内线性关系良好;③对于与多菌灵结构相似的药物,试纸条与其无交叉反应,可特异性定量检测烟叶中残留的多菌灵。本研究中研制的多菌灵定量试纸条具有操作简便、检测速度快、准确性高、稳定性好等优点,适用于基层实验室的大批量样品检测及现场快速检测。      

高灵敏度磁荧光免疫层析试纸模式构建及在呕吐毒素检测中的应用

构建基于磁荧光纳米材料的免疫层析试纸模式,弥补现在免疫层析技术的不足,为更灵敏的免疫学快速检测提供技术支撑。以呕吐毒素（deoxynivalenol,DON）为靶标,采用溶剂热法制备羧基修饰的超顺磁颗粒,碳二亚胺法将磁颗粒、绿色荧光蛋白及DON单克隆抗体进行偶联,一步法制备磁荧光抗体探针,以DON人工抗原（DON-BSA）为检测线建立磁荧光免疫层析试纸。同时用胶体金标记DON单克隆抗体,以DON-BSA为检测线建立胶体金免疫层析试纸;制备的磁荧光抗体探针具有很好的磁性、荧光特性及抗体反应性,基于该探针成功制备了DON磁荧光免疫层析试纸,该试纸回归方程为y=－0.562x＋0.921,R2=0.990,IC50为5.611 ng/mL,检出限为1.089 ng/mL;制备了DON胶体金免疫层析试纸,该试纸裸眼检测灵敏度为500 ng/mL;定量检测回归方程为y=－0.543x＋1.485,R2=0.991,IC50为65.16 ng/mL,检出限为11.94 ng/mL。DON磁荧光免疫层析试纸的灵敏度是胶体金免疫层析试纸的10.96 倍。本实验建立的磁荧光免疫层析试纸模式可以同时实现样品的富集及荧光信号检测,提高检测灵敏度,并成功用于DON的检测,为磁荧光纳米颗粒广泛应用于免疫层析领域提供参考。     

免疫磁珠高通量自动净化-超高效液相色谱法测定粮食中玉米赤霉烯酮

基于免疫磁珠高通量自动净化的前处理方法,使用超高效液相色谱仪对粮食中玉米赤霉烯酮的含量进行测定。首先将免疫磁珠与玉米赤霉烯酮的反应时间、样品提取液和不同粮食基质的净化效果进行优化。经方法验证,超高效液相色谱的检出限和定量限分别为3.5 μg/kg和12.0 μg/kg。在优化条件下,全麦粉和玉米全粉阴性样品的3 个添加水平的加标回收率在99.04%～109.26%之间,变异系数不大于6.88%。玉米全粉、全麦粉、糙米粉、小麦粉等粮食基质中玉米赤霉烯酮成分的国家有证标准物质或质控样品的测定结果在标准值及其扩展不确定度范围内,变异系数不大于3.54%,测定结果较为满意。采用Bland-Altman法对免疫磁珠净化法和免疫亲和柱净化法之间的差异进行分析,结果显示这2 种净化方法的差异在可接受范围内,因此,这2 种方法在净化和富集粮食中玉米赤霉烯酮时可互相代替使用。免疫磁珠净化方法配套使用的真菌毒素全自动净化仪可同时净化10～24 个样品,平均每个样品的净化时间约为2～3 min,实现粮食中玉米赤霉烯酮的高通量自动净化。超高效液相色谱分析速度快、灵敏度高、准确性高,可用于检测粮食中玉米赤霉烯酮的含量。     

侧向层析免疫试纸法快速检测蔬菜中的腐霉利

目的建立基于胶体金标记的侧向层析免疫试纸快速检测新技术检测多种蔬菜中腐霉利的分析方法。方法利用喷膜仪以0.5μL/cm的喷速将1 mg/mL的羊抗鼠抗体、1 mg/mL的腐霉利包被原喷到NC膜上。再通过静电吸附的方式将腐霉利单克隆抗体标记到胶体金表面,制备成偶联物滴加到标记垫上。最后依次将样品垫,标记垫、划好的NC膜以及吸水垫粘贴到底板上,两者之间均有2 mm的重叠,使标记垫处于样品垫之下、NC膜之上的位置,组装好完整的试纸条,测试过程中在样品垫上滴加样品,观察C、T线位置显线情况进行判定。结果该方法不受蔬菜中本身复杂成分以及背景颜色的影响,能够对蔬菜中腐霉利进行特异性识别鉴定, 10 min便可获得检测结果。结论该方法测试的结果与仪器法检测结果一致,检测灵敏度满足国标限量要求。     

同时检测玉米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制

研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1,AFB1)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条.采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB1和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠Ig...