基于响应面优化青藏高原狭果茶藨子游离氨基酸纯化工艺

为建立狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺,提高青藏高原狭果茶藨子天然资源的利用价值。本研究通过静态吸附-解吸动力学试验对SA-2、201*7、001*7、D61、D152共5种不同类型的离子交换树脂进行筛选,并结合动态吸附-解吸动力学单因素试验和响应面设计优化狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺。结果表明,001*7离子交换树脂对狭果茶藨子鲜果氨基酸有较好的吸附和解吸效果,吸附率达(70.73±0.47)%,解吸率达(91.29±2.60)%。最优纯化条件为:狭果茶藨子氨基酸质量浓度0.025g/mL,上样液流速0.9mL/min,上样液pH4.66,氨水洗脱液体积分数1.54%,洗脱流速1.50mL/min,洗脱液体积61.67mL,此条件下狭果茶藨子氨基酸纯度从23.26%提高到77.50%,提高了54.24%。该研究可为青藏高原狭果茶藨子氨基酸成分的纯化提供技术支持。     

基于响应面优化青藏高原狭果茶藨子游离氨基酸纯化工艺

为建立狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺,提高青藏高原狭果茶藨子天然资源的利用价值。本研究通过静态吸附-解吸动力学试验对SA-2、201*7、001*7、D61、D152共5种不同类型的离子交换树脂进行筛选,并结合动态吸附-解吸动力学单因素试验和响应面设计优化狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺。结果表明,001*7离子交换树脂对狭果茶藨子鲜果氨基酸有较好的吸附和解吸效果,吸附率达(70.73±0.47)%,解吸率达(91.29±2.60)%。最优纯化条件为:狭果茶藨子氨基酸质量浓度0.025g/mL,上样液流速0.9mL/min,上样液pH4.66,氨水洗脱液体积分数1.54%,洗脱流速1.50mL/min,洗脱液体积61.67mL,此条件下狭果茶藨子氨基酸纯度从23.26%提高到77.50%,提高了54.24%。该研究可为青藏高原狭果茶藨子氨基酸成分的纯化提供技术支持。     

大孔树脂分离纯化迷迭香叶总黄酮及抗氧化活性研究

目的:探讨大孔树脂分离纯化迷迭香叶总黄酮及抗氧化活性。方法:选择6种类型大孔树脂,比较其吸附量、吸附率和解吸率,筛选最佳树脂,单因素分析最佳纯化工艺条件,检测迷迭香叶总黄酮体外抗氧化活性。结果:AB-8为最佳树脂,上样液浓度为2.25mg/mL,上样流速为3BV/h,pH为3.15,上样体积为1.5BV。以4BV 80%乙醇在流速2BV/h下洗脱,得黄酮的纯度为68.39%,精制倍数为3.37。迷迭香总黄酮对DPPH和ABTS自由基具有良好的清除能力。结论:AB-8树脂对迷迭香叶总黄酮具有良好的吸附和解吸效果,且迷迭香叶总黄酮具有良好的抗氧化作用。     

大孔树脂富集酸枣仁总黄酮工艺及其体外抗氧化性研究

研究大孔吸附树脂富集纯化酸枣仁总黄酮的最佳条件,并进行了总黄酮体外抗氧化能力的测定。利用静态吸附和动态吸附实验对5种不同极性的大孔吸附树脂进行筛选,并对上样液质量浓度、上样量、洗脱剂体积分数、洗脱剂体积以及洗脱剂流速等条件分别进行考察。采用DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率以及铁氰化钾的还原能力作为指标考察纯化后总黄酮的体外抗氧化能力。结果表明AB-8大孔吸附树脂为纯化酸枣仁总黄酮的最佳树脂,纯化工艺为上样液质量浓度1.99 mg/m L,上样量50 m L,洗脱剂体积分数50%乙醇,洗脱剂体积50 m L,洗脱剂流速1 m L/min。抗氧化结果显示总黄酮对DPPH和ABTS+自由基具有明显的清除能力(IC50值为0.70 mg/m L和0.15 mg/m L),并对铁氰化钾表现出了较强的还原能力。     

秋葵黄酮的纯化和体外抗氧化活性研究

研究通过静态吸附试验比较NKA-9、AB-8、HPD-400、D101等4种大孔树脂对秋葵中黄酮类物质的吸附与解吸性能,并以VC为对照,对其还原力及羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、DPPH自由基(DPPH·)、ABTS~+自由基(ABTS~+·)清除能力进行探讨。结果表明,最适合分离纯化秋葵黄酮的树脂类型为AB-8型,通过动态吸附-洗脱试验得出AB-8树脂分离纯化秋葵黄酮的最佳工艺为上样浓度0.60 mg/m L,上样流速0.70 m L/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速0.40 m L/min,纯化后秋葵黄酮纯度由39.2%提高到67.3%。抗氧化结果显示秋葵黄酮对秋葵黄酮总还原力高于VC,对·OH、O_2~-·、DPPH·、ABTS~+·的IC_(50)值分别为0.56、0.42、0.62、0.52 mg/m L,其最大清除率分别为90.4%、80.4%、77.6%、88.4%,具有良好的体外抗氧化活性。     

大孔树脂纯化胭脂萝卜花青素及抗氧化活性研究

以重庆市特色蔬菜胭脂萝卜为原材料提取花青素,以吸附率和解析率为指标考察6种大孔树脂对胭脂萝卜花青素的纯化效果,从中筛选出最佳大孔树脂并探讨其吸附性能和纯化工艺,分析最佳树脂纯化前后胭脂萝卜花青素的色价及抗氧化活性。结果表明,AB-8树脂在吸附和解析3h后其吸附率和解析率达到91.2%和96.6%。AB-8树脂的纯化工艺为:上样浓度为0.80 mg/mL,上样液pH 4,上样流速8 mL/min,洗脱流速6 mL/min。经AB-8树脂纯化后的胭脂萝卜花青素色价是粗提液的9倍。0.75mg/mL的胭脂萝卜花青素纯化液抗氧化活性显著高于同浓度的花青素粗提液及维生素C,经AB-8树脂纯化的胭脂萝卜花青素纯化液对羟自由基、DPPH自由基及油脂的清除能力显著提高。以上结果表明,AB-8树脂是胭脂萝卜花青素的最佳纯化树脂。     

大孔树脂纯化沉香叶黄酮工艺优化及纯化前后抗氧化性比较

研究沉香叶黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化性。通过静态和动态实验,考察树脂种类、粗提液浓度、洗脱剂、上样流速、洗脱流速对沉香叶黄酮吸附解吸性能的影响,确定最佳纯化工艺条件;采用羟自由基法、DPPH自由基和ABTS自由基法,比较纯化前后沉香叶黄酮的抗氧化性。结果表明,NKA-9大孔树脂纯化沉香叶黄酮效果最好,最佳条件为:以1.5 mL/min速度将5.0 mg/mL粗提液上柱,用70%(v/v)乙醇以2.0 mg/mL速度洗脱,此条件下沉香叶黄酮纯度提高至76.58%±3.46%。沉香叶黄酮纯化后清除羟自由基、DPPH自由基和ABTS自由基IC₅₀值分别为(0.120±0.008)、(0.016±0.009)、(0.042±0.002)mg/mL,远低于纯化前的(0.300±0.015)、(0.170±0.008)、(0.160±0.009)mg/mL,说明沉香叶黄酮纯化前后均具有较强的抗氧化性,纯化后抗氧化性明显增强。NKA-9大孔树脂适合分离纯化沉香叶黄酮。     

正交试验优化黑果悬钩子茎、叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化活性

利用单因素试验和正交试验优化了黑果悬钩子（Rubus caesius L.）茎和叶总黄酮的提取工艺,通过清除DPPH自由基、ABTS＋·的方法测定了黑果悬钩子茎和叶的抗氧化活性。优化的总黄酮提取工艺为：提取温度80 ℃、提取时间70 min、乙醇溶液体积分数60%、料液比1∶90（g/mL）。通过比较AB-8等14 种大孔树脂对黑果悬钩子茎、叶总黄酮的吸附分离效果,从中筛选出AB-8大孔树脂是理想的吸附剂。通过单因素试验,确定AB-8大孔树脂对黑果悬钩子总黄酮分离纯化的最优工艺为：上样流速1 mL/min、上样液总黄酮质量浓度0.32 mg/mL、上样体积80 mL,吸附饱和平衡后,以40 mL 60%乙醇溶液1.5 mL/min的流速动态洗脱。经AB-8大孔吸附树脂纯化后,提取液的总黄酮含量和抗氧化能力显著提高,叶和茎总黄酮含量为纯化前的1.4 倍和2.4 倍,叶和茎的的ABTS＋·清除能力分别为纯化前的1.7 倍和 2.5 倍,DPPH自由基清除能力分别为纯化前的1.7 倍和2.6 倍。这些结果表明：黑果悬钩子叶和茎均具有较高的总黄酮含量和明显的抗氧化活性,是潜在的天然抗氧化剂资源。     

大孔树脂纯化黄秋葵黄酮及其体外抗氧化活性研究

以黄秋葵为原料,以总黄酮为研究对象,开展了总黄酮提取、分离纯化及抗氧化活性的研究。采用静态和动态吸附-解吸实验对8种不同型号大孔树脂进行筛选,以吸附、解析效果为指标,考察大孔树脂纯化黄酮的工艺参数,并利用DPPH、ABTS、Fe3+法测定黄秋葵黄酮体外抗氧化活性。结果表明AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好,最佳工艺条件如下:上样液质量浓度为0.927 mg/m L,上样量为50 m L,用5 BV的30%乙醇作为解吸剂,以1.0 m L/min的洗脱速度进行解吸。抗氧化结果显示黄酮提取物对DPPH、ABTS自由基有明显的清除能力(IC50值分别为0.440 mg/m L和0.256 mg/m L),并对Fe3+表现出了较高的还原能力。     

橘叶黄酮的纯化及其体外抗氧化能力研究

优化大孔吸附树脂纯化橘叶总黄酮的工艺条件,对比考察纯化前后橘叶黄酮的体外抗氧化能力。在单因素试验的基础上,采用响应面法设计优化总黄酮吸附工艺,以吸附率为指标,考察上样液质量浓度、上样液pH值、上样液流速3个因素对吸附效果的影响。并对洗脱剂及其用量进行考察。对比研究橘叶黄酮纯化前后清除羟自由基、DPPH自由基的能力。D101型大孔树脂对橘叶总黄酮纯化的较佳工艺为:上样液质量浓度2 mg/mL,上样液流速1 BV/h,上样液pH 2.5;其他条件为上样液总黄酮量与树脂体积之比为7.7∶1(mg/mL),洗脱剂用量与树脂质量之比为5.6∶1(mL/g)。纯化后,总黄酮含量从4.8%提升至72.8%。同一黄酮浓度下,纯化后体外抗氧化能力均较纯化前强。大孔树脂纯化工艺对橘叶黄酮类成分具有良好的富集作用,且纯化后黄酮是总黄酮中发挥抗氧化能力的主要贡献成分。     

AB-8大孔树脂对红腰豆总黄酮纯化工艺的优化及其体外抗氧化活性研究

以红腰豆总黄酮粗提液为原料,研究大孔树脂对红腰豆黄酮的纯化工艺和效果,比较了8种树脂对红腰豆总黄酮的静态吸附和解吸性能,对AB-8型大孔树脂分离纯化红腰豆总黄酮进行了单因素、Box-Benhnken中心组合设计和响应面法优化试验,并考察了红腰豆总黄酮纯化前后体外抗氧效果。结果表明,AB-8树脂为纯化红腰豆总黄酮的最佳树脂,确定了其最佳的吸附工艺条件为：上样质量浓度4.0 mg/mL,上样液pH 6.3,上样流速2.0 mL/min,上样体积5.0 BV,在此条件下吸附率可达(98.03±0.30)%;最佳的解吸工艺条件为乙醇体积分数75%,洗脱流速3.0 mL/min,洗脱体积2.0 BV,在此条件下解吸率可达(94.52±0.24)%。纯化后红腰豆总黄酮纯度提高了约2.85倍,纯化前DPPH.、.OH和O_2-.的清除率IC₅₀值分别为1.18、1.40、6.51 mg/mL,纯化后分别为0.37、0.82、1.77 mg/mL,纯化后红腰豆总黄酮提取物的体外抗氧化活性明显增强。     

大孔树脂分离红花籽粕酶解产物制备抗氧化肽的工艺研究

为制备红花籽粕抗氧化活性肽,比较不同酶解工艺下产物的抗氧化性,研究AB-8大孔树脂分离工艺,对比分离前后多肽抗氧化性,结果表明:碱性蛋白酶Alcalase酶解产物抗氧化性最佳,测得还原力为1.755,DPPH自由基清除率39.84%,羟自由基清除率26.76%、超氧阴离子自由基清除率25.90%,多肽含量达到10.71 mg/mL;选择AB-8树脂分离,采用上样流速3 BV/h、上样量24 mL、80%乙醇洗脱、洗脱流速1.00 mL/min工艺分离,且AB-8分离后样品的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率均有增强。     

狭果茶藨子黄酮提取工艺优化及其体外降血脂活性

以青藏高原狭果茶藨子果实为原料,采用微波辅助提取法结合响应面设计试验优化狭果茶藨子黄酮提取工艺参数。以胰脂肪酶抑制率、不同胆酸盐结合率为指标,评价纯化前后狭果茶藨子黄酮体外降血脂活性。结果表明微波辅助提取狭果茶藨子黄酮最佳工艺条件为:微波功率500 W,料液比1∶30(g/mL),提取时间8 min,此条件下黄酮提取率为22.36%。纯化后狭果茶藨子黄酮体外降血脂活性更强,对胰脂肪酶的抑制率最高达91.6%,比纯化前提高了16.81%;对胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠IC50分别为3.301、1.499、1.847 mg/mL。表明狭果茶藨子具有开发天然降血脂功能性食品的前景,且黄酮类化合物是其发挥作用的主要活性成分。     

红枣核类黄酮清除DPPH自由基活性研究

将红枣核以60%乙醇提取后,经AB-8大孔吸附树脂吸附分离,首次研究了红枣核类黄酮对DPPH自由基的清除活性。结果表明,红枣核类黄酮对DPPH自由基有很强的清除活性,IC50为6.5μg/ml,对DPPH自由基的清除率有量效关系。     

景天三七总黄酮的纯化、自由基清除活性及初步鉴定

通过比较D-101、AB-8、X-5、DA-201 4种大孔吸附树脂对景天三七总黄酮的静态吸附和解吸附性能,筛选出最适合的树脂及最佳静态吸附-解吸附条件。对纯化后的总黄酮进行初步鉴定,并考察了纯化前后的体外抗氧化效果。结果表明,DA-201型大孔吸附树脂的吸附和解吸附效果最好,其最佳静态吸附分离工艺参数为:吸附时间为1 h,样液质量浓度为0.7 mg/mL,上样液pH为3.0,解吸附乙醇浓度为90%。在该条件下静态吸附率为81.05%,解吸附率为86.05%。纯化后,总黄酮的纯度由19.38%提高到43.78%,其羟自由基、DPPH自由基清除率的IC₅₀分别由69.47、44.02 μg/mL下降到43.25、30.16 μg/mL。另外初步判断纯化后的景天三七总黄酮可能含有水飞蓟素类、金丝桃苷类、山奈酚类、槲皮素类化合物。     

响应面优化人参花黄酮提取工艺及抗氧化活性

为了得到微波辅助提取人参花黄酮的最佳工艺,在单因素的基础上,以黄酮提取量为响应值,通过响应面法对其工艺进行优化。并对经大孔树脂D101纯化后的人参花黄酮进行了体外抗氧化活性研究。结果表明最佳工艺条件为:微波功率800 W,微波时间30 s,乙醇质量分数54%,料液比1 g:21 g,此时黄酮提取量为5.624 mg/g,与模型预测值接近,表明模型适用。当人参花黄酮浓度为0.24 mg/mL时,对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子3种自由基清除能力最好,自由基清除率分别为71.47%、49.91%和72.32%,IC₅₀分别为0.17、0.24、1.73 mg/mL,表明人参花黄酮具有较强的体外抗氧化活性,有很好的开发价值。