藤茶中二氢杨梅素的提取纯化工艺研究

对藤茶中二氢杨梅素的提取和纯化工艺进行了研究,通过单因素和正交实验确定了最佳工艺参数:提取温度95℃,提取时间120min,料液比1:25,原料粒度80目,在此条件下,二氢杨梅素得率为22.8%。将粗提物经丙酮回流提取、浓缩、加水沉淀后得到晶体,晶体经4次重结晶后,得到二氢杨梅素产品,其纯度可达91.3%,得率为4.2%。     

甲醇-乙醇分步沉淀法提取γ-聚谷氨酸

采用非单一有机溶剂即甲醇-乙醇分步沉淀法从发酵液中提取聚谷氨酸(γ-PGA),通过响应面法对聚谷氨酸(γ-PGA)提取条件进行优化。在初步考察单因素影响的基础上,以BBD(Box-Behnken design)法设计考察有机溶剂沉淀倍数、沉淀pH、沉淀时间3个因素对γ-PGA提取纯度的交互影响,用Design-Expert v8.0.6.1软件对BBD实验数据进行分析处理。试验得到的最佳提取条件为:有机溶剂沉淀倍数为3.48、沉淀pH为8.13、沉淀7.30 h,γ-PGA提取纯度为75.16%,提取率83.77%,预测精准度达99.02%。     

响应面法优化鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺

为了提高鳕鱼皮中酸溶性胶原蛋白的提取率,选取提取液浓度、提取时间和料液比为影响因素,以胶原蛋白提取率为响应值,在单因素实验基础上,根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理,对鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺进行优化。结果表明酸法提取胶原蛋白最佳工艺条件:醋酸浓度为0.47 mol/L、料液比为1∶33、提取时间为90.2 h。在此条件下提取所得酸溶性胶原蛋白提取率的理论值为37.92%,实验验证值为37.36%。相对误差为1.49%,说明采用响应面法优化得到的酸法提取鳕鱼皮胶原蛋白的工艺参数准确可靠,为鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取提供了一定的技术参考。     

荔枝皮原花青素提取、纯化及抗氧化活性研究

本实验对荔枝果皮内的原花青素提取、纯化和抗氧化活性进行了研究。通过单因素试验和正交试验得出荔枝皮原花青素提取的最佳工艺条件为：乙醇浓度80%、料液比1:20(W/V)、提取温度50℃、提取时间120min、pH6.0提取3次得到样品提取率95.9%。提取物浓缩后,采用AB-8填充柱对荔枝皮提取物中原花青素进行纯化,得率为1.3%,样品纯度为87.45%。通过对纯化后荔枝皮原花青素的抗氧化性能进行测定, 结果显示荔枝皮原花青素有较好的清除DPPH自由基的能力。     

壳聚糖沉淀米糠蛋白的工艺优化

与等电点、卡拉胶和海藻酸钠比较,壳聚糖可将超声波辅助双酶法提取的米糠蛋白有效沉淀。通过单因素试验和单因素方差分析,确定壳聚糖添加量、pH和静置时间为显著影响因素。以米糠蛋白的沉淀率为考核指标,通过正交试验确定沉淀条件为壳聚糖添加量40 mg/100 mL上清液、pH 3.5、处理时间40 min,此时米糠蛋白的沉淀率为83.29%。     

燕麦麸中β-葡聚糖的提取与纯化工艺研究

以燕麦麸为原料提取β-葡聚糖,系统研究了原料处理、去除淀粉、蛋白质及醇析等关键步骤对β-葡聚糖得率和纯度的影响,通过单因素实验及正交实验优化了β-葡聚糖提取工艺,料水比110,提取温度65℃,pH 9.0,提取时间2 h;提取中加入耐热α-淀粉酶去除淀粉,pH 4.5静置4 h去蛋白,60%的乙醇溶液醇析,时间9 h.采用该工艺条件下得到β-葡聚糖的得率和纯度分别为6.52%、75.56%,经过硫酸铵分级法进一步纯化,其产品纯度可达到90.66%.     

利用酸肿牛皮提取胶原及其表征

通过多种测试手段对酸肿牛皮中所提取胶原的性质进行了表征,并与脱灰牛皮中所提取的胶原进行了对比。傅里叶红外、紫外光谱及SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,酸肿皮提取的胶原与脱灰皮提取胶原的结构基本一致。微量热差示扫描量热结果显示,酸肿皮提取胶原的热稳定性几乎等同于脱灰皮的。不过,Zeta电位测定表明,酸肿皮提取胶原的等电点降低。扫描电镜观察发现其形貌也发生了变化,通透性变差。成纤维测试结果表明,酸肿牛皮提取胶原的成纤维能力有所下降。     

甘草总三萜酸的大孔树脂分离纯化

对6种商品化大孔树脂吸附纯化甘草总三萜酸的性能进行对比筛选,发现AB-8树脂最适合甘草总三萜酸的纯化.实验结果表明,洗脱剂乙醇的体积分数为70%,上样液pH为5时,产品的纯度可达72.85%.     

白鲢鱼皮明胶提取过程中脱脂工艺的优化

采用水剂脱脂法,考察pH值、料液比、温度、时间4个单因素对白鲢鱼皮脱脂效果的影响,并在单因素实验的基础上进行正交实验,确定水剂法对白鲢鱼皮脱脂的最优工艺。结果表明:温度对白鲢鱼皮脱脂率有显著影响,pH值、料液比、时间对白鲢鱼皮脱脂率有极显著影响,影响顺序为pH值时间料液比温度,最佳脱脂工艺为料液比1:11、p H=10、温度50℃、时间2 h。对比白鲢鱼皮脱脂前后提取得到的明胶,结果显示:脱脂后的白鲢鱼皮明胶脂肪含量由原有的(2.25±0.03)%降低到(1.40±0.23)%,羟脯氨酸含量由(6.77±0.09)%上升到(6.95±0.04)%。该脱脂方法在白鲢鱼皮明胶提取过程中安全有效、切实可行。     

干制大鲵皮胶原蛋白提取工艺优化

为高效利用大鲵加工副产物大鲵皮,研究干制大鲵皮制备胶原蛋白的工艺条件。以胶原蛋白提取率为评价指标,通过单因素试验法,分别研究胃蛋白酶添加量、酶解pH和酶解时间对大鲵皮胶原蛋白提取率的影响。在单因素试验基础上,通过正交试验法进一步优化大鲵皮制备胶原蛋白工艺,确定最适工艺条件,即胃蛋白酶添加量6 000 U/g、酶解pH 2.0、酶解时间6 h,在此工艺条件下,大鲵皮胶原蛋白提取率为86.7%。紫外光谱、红外光谱扫描结果分析表明,用该法提取的干制大鲵皮胶原蛋白保留胶原蛋白较为完整的三股螺旋结构。     

猕猴桃籽粕蛋白提取工艺研究

以猕猴桃籽粕为原料,研究碱提酸沉法提取猕猴桃籽粕蛋白的工艺条件,探讨猕猴桃籽粕粉碎度、料液比、浸提液pH值、提取时间、提取温度对蛋白提取率的影响并确定沉淀蛋白的等电点。采用正交实验优化工艺参数,实验结果表明:最佳工艺参数为浸提液pH10.0,提取温度50℃,籽粕粉碎度80目,料液比1∶12,浸提时间80min;提取液在pH4.3条件下沉淀蛋白效果最佳,蛋白提取率为63.7%,纯度为65.1%。     

重组菌BL21-HTa-cgkZ产κ-卡拉胶酶的分离纯化

研究了重组菌BL21-HTa-cgk Z产κ-卡拉胶酶的分离纯化技术。在发酵罐中制备粗酶液,将粗酶液沉淀、阴离子交换层析、超滤浓缩和葡聚糖凝胶过滤层析,得到高纯度的κ-卡拉胶酶。通过对沉淀剂、沉淀时间、沉淀pH的单因素试验确定κ-卡拉胶酶的最优沉淀条件,即:沉淀剂40%的乙醇,沉淀时间4 h,沉淀pH 6.0。通过各级分离纯化,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳分子质量为62 ku的条带,经LC-MS/MS鉴定,确定该条带为含有κ-卡拉胶酶的条带。测定纯化后的κ-卡拉胶酶酶活,结果显示,κ-卡拉胶酶的比活力为94.23 U/mg,纯化倍数12.33倍。重组菌BL21-HTa-cgk Z发酵产生的κ-卡拉胶酶,经各级分离纯化,得到高纯度的κ-卡拉胶酶,为卡拉胶酶的食品工业化应用奠定了基础。     

重组人源胶原蛋白的分离纯化及其结构表征

采用巴氏毕赤酵母基因工程菌GS115/p PIC9KG6进行高密度发酵,获得细胞外分泌型重组人源胶原蛋白(recombinant human-source collagen,RHSC)。SDS-PAGE电泳分析证明:RHSC具有确定的分子质量,分别约为56 k Da的蛋白单体与112 k Da的二聚体。实验中运用透析法、盐析与柱层析结合法对工程菌的发酵上清液进行纯化,结果如下:(1)透析法——最佳条件为4℃,透析24 h,RHSC单体与二聚体混合物回收率接近100%,纯度82.5%。(2)盐析-柱层析结合法——发酵上清液通过40%饱和度硫酸铵沉淀与Sephadex G100纯化后获得二聚体,达到了电泳纯。通过DSC、紫外光谱、红外光谱与核磁共振波谱对分离纯化得到的RHSC进行结构表征,与标准Ⅲ型胶原蛋白比对,确定RHSC具有Ⅲ型胶原蛋白的特征结构。     

高提取率成年牛皮酸溶胶原制备及其性能表征

以成年牛皮为原料提取胶原,在保证胶原纯度的同时提高了胶原提取率。成年牛皮经蛋白酶、硼氢化钠溶液预处理,然后在酸膨胀状态下被捣碎。胶原捣碎液经盐析纯化2次,得到酸溶牛皮胶原液,其提取率可达20%左右。对所得酸溶胶原液进行了纯度、形貌以及天然性的表征。氨基酸组成分析及凝胶电泳结果显示:该酸溶胶原液具有良好的纯度;原子力显微镜观察与粒径测试的结果共同揭示,所提取胶原液中的胶原具有多分散性,存在着从胶原分子到胶原纤维的多种形态;红外光谱及酶切结果显示所提取胶原没有变性,可作为进一步提纯胶原的原料。     

响应面法优化大孔树脂纯化阿魏酸粗提液工艺研究

利用响应面法对大孔树脂纯化阿魏酸粗提液工艺进行优化,在单因素试验基础上,根据中心组合设计原理,采用三因素三水平响应面分析法,依据回归分析确定最优纯化工艺条件,得出最优工艺为:吸附pH值6.2、洗脱剂乙醇浓度58.22%、洗脱剂pH值7.1;在该工艺条件下,阿魏酸回收率达97.036%,且经薄层层析法验证,纯度大大提高,可达75.65%。     

燕麦麸皮浓缩蛋白提取工艺研究

以燕麦麸皮为原料,采用碱提酸沉法制备燕麦浓缩蛋白。浸提过程在单因素实验基础上, 通过正交实验优化工艺参数,实验结果表明:温度50℃,料液比l∶18,pH 9．6,浸提时间30 min,提 取液在pH4．0条件下沉淀制备蛋白效果最佳;在此条件下,蛋白提取率达46．73％,产品纯度为 74．36％。     

玉米皮中阿魏酸超声辅助碱醇提取及大孔树脂纯化工艺优化

为探究玉米皮中阿魏酸的提取、纯化工艺。以玉米皮为原料,采用超声辅助碱醇法提取玉米皮中阿魏酸,通过单因素实验和响应面优化试验,以粗提液中阿魏酸的含量为指标得出最佳提取工艺条件。进一步采用大孔吸附树脂法对玉米阿魏酸进行纯化,通过静态吸附方法选出适合树脂进行实验。在动态吸附方法中确定最佳上样量,在通过单因素实验和响应面优化试验,以回收率为指标得出最佳纯化工艺条件。结果表明,玉米皮中阿魏酸最佳提取工艺条件为：料液比1:12 g/mL,碱液质量浓度4%,碱醇比2:1,超声时间30 min,超声温度59℃,超声功率229 W,此条件下阿魏酸的提取量可达22.31 mg/g。阿魏酸纯化部分采用HPD-100型大孔吸附树脂,最佳上样量为6倍床体积,最佳纯化工艺条件为：上样浓度0.3 mg/mL,上样流速3 mL/min,乙醇质量浓度75%,洗脱流速1 mL/min。此条件下玉米皮阿魏酸的回收率可达95.17%,阿魏酸纯度为81.56%。本实验增加了玉米皮附加值,为玉米皮深加工和阿魏酸开发提供理论依据和数据支持。     

响应面法优化酶法提取鳕鱼皮中胶原蛋白条件

利用响应分析法考察了酶浓度、酶解反应时间和酶解温度3个因素对提取鳕鱼皮中胶原蛋白提取率的影响。研究发现,胶原蛋白的最佳提取条件为水解时间10.43h、水解温度16.32℃、酶浓度0.054%,提取率27.53%,比单因素试验最高的提取率高22.3%。并通过对所提取的鳕鱼皮的胶原蛋白的SDS-PAGE电泳分析,确定了所提取的蛋白质制品是纯度较高的胶原蛋白,经电泳测定鳕鱼皮胶原蛋白α1与α2链的分子量分别为113kDa和110kDa。     

豆制品废水中蛋白质提取与纯化工艺研究

用碱溶酸沉法纯化蛋白质粗品,通过单因素试验和正交试验优化提取工艺。试验得到:在碱溶pH9.0,料液比1∶20(g/mL),提取温度40℃,提取时间1.5h,酸沉pH为3.7的条件下,以10 000 r/min离心蛋白质沉淀率达到89.8%。蛋白质得率为75.5%,纯化后蛋白质纯度达到90.5%,灰分含量为3.76%。     

大孔吸附树脂分离纯化洋葱皮黄酮的研究

以黄酮含量为指标,比较6种大孔吸附树脂对洋葱皮黄酮的吸附和解吸效果。通过静态吸附与解吸实验,筛选出效果较好的X-5树脂进行动态实验研究。结果表明:X-5树脂纯化洋葱皮黄酮的工艺条件为吸附流速2mL/min、上样溶液pH5.0、上样液质量浓度0.5mg/mL、50mL 80%乙醇作为洗脱液,洗脱流速lmL/min。经X-5树脂纯化后,洋葱皮黄酮纯度从7.95%提高到80.78%。三次重结晶后其纯度可达94.5%。该方法简单可行,纯化效果好,适合于工业化生产。