超声辅助复合酶法制备核桃油工艺研究

以核桃仁为原料,采用超声辅助复合酶(果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶)破壁,然后进行碱性蛋白酶酶解制备核桃油,对超声辅助酶解工艺条件及复合酶配比进行研究。结果表明:复合酶破壁的提油效果优于单一酶;最佳酶解破壁条件为超声功率90 W、复合酶添加量4%、酶解pH 4.5、酶解温度50℃、酶解时间40 min;在最佳的复合酶破壁条件下,利用混料试验对复合酶配比进行优化,确定最佳复合酶(果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶)配比为1∶1.46∶1.11,此时总油提取率最大,为89.73%。     

破壁方法对嗜热链球菌SP1.1胞内乳糖代谢关键酶活性的影响及其条件优化

通过超声波破壁法、溶菌酶破壁法、反复冻融法和机械破壁法4种不同破壁方式对嗜热链球菌SP1.1进行破壁处理,对菌体的破壁率、提取的β-半乳糖苷酶和乳酸脱氢酶两种胞内酶的活力进行分析比较,以确定适合于嗜热链球菌细胞破壁方法及其最佳条件。结果表明：这4种菌体细胞破壁效果存在很大差异,其中经溶菌酶处理胞内酶提取效果最好,破壁率可达99.87%,β-半乳糖苷酶酶活力为0.387U,乳酸脱氢酶酶活力为2.375U,与其他3种方法的破壁效果差异极显著(P＜0.01)。优化溶菌酶破壁条件,当处理8mL菌浓度为1.3×109CFU/mL的样品时,确定处理最佳温度为37℃,时间为30min,酶(20000U/mL)用量为1mL,此时破壁率可达99.99%,β-半乳糖苷酶酶活力为0.429U,乳酸脱氢酶酶活力为2.431U。     

长枝木霉原生质体制备及再生条件研究

研究优化了长枝木霉（Trichoderma longibrachiatum）JK-15菌株菌丝体制备原生质体细胞及再生的条件。通过单因素试验和正交试验对影响原生质体形成和再生的菌龄、破壁酶组成、酶解反应温度及时间、渗透压稳定剂等因素进行了筛选优化。结果表明,长枝木霉菌株JK-15的最适条件为菌丝体菌龄18 h,混合酶组成配比为1.5%蜗牛酶∶1.5%纤维素酶∶0.1%溶壁酶,酶解条件为30 ℃条件下酶解2.5 h,原生质体制备过程中渗透压稳定剂为0.7 mol/L山梨醇,原生质体再生培养基中渗透压稳定剂为0.7 mol/L蔗糖,实验结果为长枝木霉JK-15的育种工作奠定了良好的技术基础。     

酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA

该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）细胞壁,再使用总核糖核酸（RNA）提取试剂（TRIzol）法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件为加酶量37.5 μL,提取温度27 ℃,提取时间15 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1 079.05 ng/μL,A260 nm/A280 nm为2.10,A260 nm/ A230 nm为2.15;蜗牛酶的最佳提取条件为加酶量30 mg/mL,提取温度37 ℃,提取时间30 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1 673.39 ng/μL,A260 nm/A280 nm为1.99,A260 nm/A230 nm为1.81。结果显示,酵母破壁酶的提取效果优于蜗牛酶。     

油菜花粉的微生物破壁技术研究

本文以两种曲霉产生酶，用两种曲霉单独产生的酶液和二者的混合酶液，三种方法对比对油菜花粉进行破壁研究，结果发现：一定比例的混合酶液的破壁效果远远高于两种单独酶液，破壁率达97％以上，这为花粉需要多种酶协同进行高效破壁提供了依据，为花粉的食用，药用提供了安全可靠的途径。     

蛋白核小球藻酶法破壁优化及抗氧化活性研究

为了优化酶法对蛋白核小球藻破壁工艺,在单因素酶解p H、酶浓度和酶解时间对蛋白核小球藻破壁率影响的基础上,利用正交试验对这三个因素进行优化。研究结果表明,酶法的最优条件为:酶解p H 4.0,酶浓度2%,酶解时间4 h。在此条件下,蛋白核小球藻细胞破壁率可达82.25%。同时研究了酶法对蛋白核小球藻抗氧化活性的影响,研究结果表明酶法对蛋白核小球藻抗氧化活具有一定的促进作用,其对羟自由基、DPPH和超氧阴离子自由基清除能力均优于未经纤维素酶处理的提取液,清除率分别为96.5%,71.97%和93.68%。     

双亲灭活米曲霉原生质体融合中原生质体制备的研究

对双亲灭活米曲霉原生质体融合育种中原生质体制备的条件进行了研究,将菌丝的预处理与细胞壁的酶解合为一步,并讨论了DTT的加入量。结果表明,原生质体制备的最佳破壁酶为纤维素酶、溶壁酶、蜗牛酶3种酶混合浓度比为5:3:1;菌丝培养15h;酶解时加入3mol/L DTT;酶解2.5h;0.8mol/L NaCl作为渗压稳定剂。所得双亲菌株原生质体的融合率为3.31%。     

双亲灭活电融合技术选育酱油生产菌株

选择互补且各具优势的2株米曲霉A98和A33为出发菌株,研究了其原生质体制备和电融合条件.接种YPD液体培养基,30℃摇瓶培养11h获得菌丝.以0.6mol/L甘露醇为渗透压稳定剂,最佳破壁酶液为溶壁酶∶蜗牛酶∶纤维素酶=1∶1∶1,浓度为10mg/mL,28℃酶解2.5h时原生质体浓度达到108个/mL,再生率≥20％;最佳电融合条件为1MHz交流频率,交流场强300V/cm,直流场强6kV/cm,脉冲间隔60μs,脉冲个数3;在此条件下,电融合率达到10-5.对获得的融合子进行酱油发酵筛选,以原料收得率为关键考察指标,筛选获得了1株融合子F01-008,其原料收得率较亲本较高者提高了5.61％.     

油菜花粉中活性蛋白的最佳提取工艺研究

以陈放一年的油菜花粉为原料,比较了油菜花粉的两种破壁方法99温差破壁法和蒜汁酶破壁法,通过比较破壁前后各组分蛋白含量以及抗氧化活性确定了球蛋白为目的蛋白,并在此基础上确定了球蛋白的最佳提取条件。研究结果表明,目前条件下温差破壁法可达到实验目的,破壁脱脂后的油菜花粉中主要是球蛋白和谷蛋白;球蛋白的最佳提取条件是氯化钠浓度0.20mol/L,pH值为5,浸提时间6h,浸提次数3次,浸提温度保持4℃。     

莲花蜂花粉酶解破壁工艺条件优化

为研究莲花蜂花粉的最佳酶解破壁条件,通过单因素试验确定纤维素酶-果胶酶-木聚糖酶-木瓜蛋白酶4种酶制剂的比例,在酶解破壁条件的单因素试验基础上,采用二次回归正交旋转组合设计试验方法对酶解条件进行优化,建立酶解pH值、复合酶加入量、酶解温度、料水比与破壁率之间的经验数学模型。复合酶中各种酶制剂的最适配比为4:2:1:3。莲花蜂花粉酶解破壁的最佳条件为酶解pH4.0、复合酶加入量12‰、酶解温度45℃、料水比1:14(g/mL),破壁率89.21%。