超声波—大孔树脂联用提取富集追风七总黄酮及其清除自由基活性研究

采用超声波法提取、大孔树脂富集纯化追风七总黄酮,并测试其清除自由基活性能力。以液料比、乙醇浓度、超声功率、超声温度、超声时间为自变量,总黄酮提取量为因变量,采用单因素试验和响应面设计优化提取工艺;以总黄酮的吸附量和解析率为评价指标,考察纯化追风七总黄酮大孔树脂的吸附性和洗脱参数;采用清除DPPH自由基活性评价追风七中总黄酮的抗氧化能力。结果表明:超声提取追风七总黄酮的最佳工艺为:超声功率300 W、乙醇浓度45%、液料比161(mL/g)、超声时间102min,超声温度73℃,在该条件下总黄酮提取量为17.02mg/g;AB-8树脂富集纯化追风七总黄酮最佳工艺条件为:树脂柱径高比16,上样质量浓度为0.5g/mL,上样量为20mL(2BV),乙醇体积分数40%,洗脱液用量60mL(6BV)。纯化后总黄酮保留率达83.3%,精制倍数达4.5倍,总黄酮含量达61%。清除自由基试验结果表明:总黄酮纯化物的IC50明显小于总黄酮提取物,略大于VC,其DPPH自由基清除IC50值为57.4μg/mL,其IC50大小顺序为VC总黄酮纯化物总黄酮提取物。     

柠檬桉果实单宁的提取纯化及抗氧化活性

采用超声波辅助提取法对柠檬桉果实中的单宁进行提取,比较溶剂提取法和超声波辅助提取法的得率。用溶剂法、大孔吸附树脂法及两种方法联用纯化粗提物,并考察了单宁的总抗氧化性、对DPPH·和·OH自由基的清除能力。结果表明,柠檬桉果实单宁的超声辅助提取得率为9.43%。大孔吸附树脂纯化的最佳工艺参数为:以X-5树脂为吸附树脂,上样流速1.0 mg/mL、上样质量浓度0.6 mg/mL、洗脱流速1.5 mg/mL、乙醇洗脱剂体积分数60%。乙酸乙酯萃取物、大孔树脂纯化物、乙酸乙酯萃余经大孔树脂纯化物、乙酸乙酯萃取经大孔树脂纯化物大孔吸附树脂的纯度分别为32.05%、58.52%、83.07%、85.31%,大孔树脂纯化物的总抗氧化性最大,为单宁酸的135.47%;在浓度为0.01 mg/mL时,粗提物和上述样品对DPPH·清除率达到最大,分别为66.09%、52.48%、92.18%、44.10%、44.09%;而在浓度1.0 mg/mL时,对·OH自由基的清除率分别为67.92%、58.17%、68.12%、61.68%、74.61%。     

小麦麸皮总黄酮清除DPPH自由基活性的研究

以小麦麸皮为原料,乙醇为提取溶剂,超声波辅助提取总黄酮。考察了12种大孔吸附树脂对没食子酸的吸附量,选用LSA-21大孔吸附树脂对小麦麸皮总黄酮进行吸附,60%乙醇溶液解吸。分别考察了不同浓度的Vc、小麦麸皮总黄酮粗提物和纯化物对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)的清除效果。结果表明:LSA-21大孔吸附树脂对没食子酸的吸附能力较强,吸附量达0.21 mg/g。Vc、小麦麸皮总黄酮粗提物和纯化物对DPPH·均有清除作用,其清除能力大小顺序为:小麦麸皮总黄酮纯化物小麦麸皮总黄酮粗提物Vc。     

柿叶黄酮超声辅助提取工艺及其抗氧化性研究

研究超声波辅助提取柿叶总黄酮的工艺条件及其抗氧化活性。采用单因素试验与正交试验,考察乙醇浓度、固液比、超声功率、浸提温度及提取时间等因素对柿叶总黄酮提取率的影响,并以柿叶总黄酮体外清除DPPH自由基能力为指标,评价其抗氧化活性。结果表明,超声波辅助提取柿叶总黄酮最佳工艺条件为乙醇浓度为70%,固液比1∶20(g/mL),超声功率350 W,超声时间40 min,浸提温度55℃,提取2次,柿叶总黄酮得率约为0.70%(以干柿叶计);在0~100μg/mL范围内,柿叶总黄酮抗氧化能力高于VC,对DPPH自由基的体外清除率达85.96%;超过100μg/mL时,清除作用基本稳定不变,浓度和清除率不显示量效关系。通过拟合线性方程计算柿叶总黄酮的IC_(50)值为5.45μg/mL,表明柿叶黄酮是良好的抗氧化剂。     

麻椒总黄酮的纯化工艺及其抗氧化性研究

对麻椒总黄酮的纯化工艺条件及其体外抗氧化活性进行了研究。以总黄酮的比吸附量、吸附率及比解吸量、解吸率为考察指标,采用单因素实验对麻椒总黄酮的纯化工艺进行考察;采用分光光度法探索了麻椒总黄酮对羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除活性。结果表明:LSA-21型大孔吸附树脂对麻椒总黄酮纯化的较佳工艺为:控制麻椒提取液总黄酮质量浓度0.96mg/mL左右,然后用石油醚脱脂,脱脂后麻椒提取液的上样体积与树脂质量之比(mL/mg)为6∶1,吸附流速控制在1.5mL/min,解吸液pH 8.0的90%乙醇水溶液,解吸流速控制在1.5mL/min,解吸液体积与树脂质量之比(mL/mg)为10∶1。在此纯化条件下,LSA-21型树脂对麻椒总黄酮的比吸附量平均为5.248mg/g、吸附率平均为90.79%,比解吸量平均为5.032mg/g、解吸率平均为95.88%,干浸膏中总黄酮含量由12.12%提高到36.65%。体外抗氧化活性的研究表明:麻椒总黄酮对羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除能力较强,均呈现出量效关系,其清除羟基自由基、超氧阴离子自由基的IC50分别为0.1946,0.1336mg/mL。麻椒总黄酮的抗氧化活性与其浓度呈正相关,具有质量浓度依赖性的体外抗氧化活性,其清除自由基能力强于维生素C,表明麻椒总黄酮具有较强的体外抗氧化活性。研究结果为麻椒的进一步开发利用提供了依据。     

正交试验优化黑果悬钩子茎、叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化活性

利用单因素试验和正交试验优化了黑果悬钩子（Rubus caesius L.）茎和叶总黄酮的提取工艺,通过清除DPPH自由基、ABTS＋·的方法测定了黑果悬钩子茎和叶的抗氧化活性。优化的总黄酮提取工艺为：提取温度80 ℃、提取时间70 min、乙醇溶液体积分数60%、料液比1∶90（g/mL）。通过比较AB-8等14 种大孔树脂对黑果悬钩子茎、叶总黄酮的吸附分离效果,从中筛选出AB-8大孔树脂是理想的吸附剂。通过单因素试验,确定AB-8大孔树脂对黑果悬钩子总黄酮分离纯化的最优工艺为：上样流速1 mL/min、上样液总黄酮质量浓度0.32 mg/mL、上样体积80 mL,吸附饱和平衡后,以40 mL 60%乙醇溶液1.5 mL/min的流速动态洗脱。经AB-8大孔吸附树脂纯化后,提取液的总黄酮含量和抗氧化能力显著提高,叶和茎总黄酮含量为纯化前的1.4 倍和2.4 倍,叶和茎的的ABTS＋·清除能力分别为纯化前的1.7 倍和 2.5 倍,DPPH自由基清除能力分别为纯化前的1.7 倍和2.6 倍。这些结果表明：黑果悬钩子叶和茎均具有较高的总黄酮含量和明显的抗氧化活性,是潜在的天然抗氧化剂资源。     

豆腐柴叶总黄酮的提取、纯化及抗氧化活性研究

在单因素实验基础上,采用响应面法优化豆腐柴叶总黄酮提取工艺,并筛选适合于纯化总黄酮的大孔吸附树脂,最后进行初步鉴定和自由基清除活性分析。结果表明:乙醇浸提总黄酮最佳工艺条件为:乙醇浓度84%、料液比1∶37(g/m L)、温度81℃、时间3.4 h,该条件下总黄酮得率为7.29%。X-5型大孔吸附树脂适用于提取豆腐柴叶总黄酮。紫外-可见光谱分析和显色反应初步鉴定其可能为二氢黄酮。豆腐柴叶总黄酮DPPH自由基和羟基自由基的清除率随浓度的增加而增大,半数抑制浓度值分别为0.10 mg/m L和0.13 mg/m L。当浓度为0.2 mg/m L和0.4 mg/m L时,DPPH自由基和羟基自由基清除率分别为83.75%和80.08%,均接近于叔丁基羟基茴香醚。因此,豆腐柴总黄酮具有较好的抗氧活性,可作为抗氧化剂或者健康食品原料开发。     

银杏叶黄酮的富集及抗氧化活性的研究

采用醇提法,按固液比1 g∶18 m L、体积浓度65%乙醇、温度70℃、时间3 h的提取条件所得银杏叶提取液黄酮质量浓度为0.735 mg/mL。比较D101、HZ816、HPD450、AB-8大孔吸附树脂、聚丙烯酰胺树脂对银杏叶黄酮的静态吸附、洗脱性能,确定HPD450为适宜树脂,吸附率为98.87%,解吸率为71.52%。进一步考察大孔树脂HPD450的动态吸附洗脱能力,得出其的适宜工艺参数为:常温2 BV/h上柱吸附,提取液按体积稀释1倍(黄酮质量浓度为0.367 5 mg/mL)上柱吸附,洗脱流速为3 BV/h,用50 mL体积浓度80%乙醇洗脱。在此条件下,得到总黄酮得率86.1%,纯度为34. 2 g/100g。抗氧化活性结果显示,银杏叶黄酮具有明显的清除自由基能力,能延长小鼠常压缺氧条件下的存活时间。     

D-101大孔吸附树脂纯化玉米须总黄酮工艺研究

通过超声波提取玉米须总黄酮,采用D-101大孔树脂进行分离纯化,得到最佳工艺参数：5 g大孔吸附树脂,玉米须总黄酮上样液质量浓度7 mg/mL,体积1 mL,以HCl调节pH=3,体积分数60%乙醇洗脱,洗脱体积5 BV,流速1.0 mL/min。在此条件下,玉米须总黄酮的纯度由41.35%提高到69.20%。     

沙棘果渣总黄酮提取工艺及抗氧化活性分析

利用超声波辅助提取技术对河西走廊沙棘榨汁提油后的果渣下脚料总黄酮提取工艺进行优化,同时考察果渣黄酮提取液的还原力和清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力。通过单因素试验和L9（34）正交试验,得到影响黄酮得率的主要因素及其影响力大小为乙醇体积分数＞提取时间＞料液比;确定最佳提取条件为乙醇体积分数60%、提取时间40 min、料液比1∶50（g/mL）;此条件下,河西走廊沙棘果渣中总黄酮提取率为2.55%,果皮渣中总黄酮提取率为0.651%,沙棘籽粕中总黄酮提取率为1.901%。当质量浓度大于0.151 4 mg/mL时,沙棘果渣黄酮提取液的还原力大于VC的还原力;沙棘果渣黄酮提取液对羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除作用,其对羟自由基的清除率为39.07%～42.01%,大于同等质量浓度VC的清除作用,而对超氧阴离子自由基的清除率为47.17%～60.38%,小于同等质量浓度VC的清除作用,说明沙棘果渣黄酮提取液对羟自由基有更强的清除能力。     

无花果叶中黄酮的提取及其抗氧化活性测定

采用正交试验设计研究超声波辅助提取无花果叶中总黄酮的工艺条件,并对无花果叶中总黄酮的抗氧化活性进行测定。结果表明：无花果叶中总黄酮的最佳超声提取工艺为体积分数40% 乙醇溶液、料液比1:60(g/mL)、超声功率400W、超声温度60℃条件下提取50min,其提取量为25.04mg/g,影响无花果叶中总黄酮提取效果的主次因素为：超声温度＞超声时间＞料液比＞乙醇体积分数。无花果叶黄酮提取物具有清除羟自由基、超氧阴离子自由基的作用,其清除效果在一定范围内随着总黄酮质量浓度的增加而增强。     

委陵菜黄酮提取及大孔树脂纯化研究

研究委陵菜黄酮的提取及大孔树脂纯化条件。结果表明：委陵菜黄酮的最佳提取条件为溶剂采用60% 乙醇、料液比1:40(m/V)、提取时间75min、超声温度80℃,各因素均对提取率有显著(p ＜ 0.05)影响,此条件下,提取量可达39.329mg/g;HPD600 型树脂对委陵菜中的黄酮有较好的吸附和洗脱效果,柱体积为50ml,其纯化条件为40BV,流速2BV/h,水洗,然后用5BV、60% 乙醇洗脱。经纯化后委陵菜黄酮纯度为60.28%;最终产品中黄酮得率为2.29%。     

酶解结合超声波辅助技术提取纯化菊米总黄酮

采用纤维素酶酶解结合超声波辅助提取,通过大孔树脂分离、纯化菊米中的黄酮类化合物,并通过单因素试验和正交试验进行工艺优化。结果表明：纤维素酶最佳酶解条件为料液比1:10(g/mL)、酶用量1.5%、酶解温度40℃、pH6.0、酶解时间6h;超声波辅助最佳提取条件为乙醇体积分数70%、提取时间0.5h。以自然流速过大孔树脂D-101 柱,经水洗除杂、60% 乙醇溶液洗脱,获得菊米提取物得率达7%,黄酮类物质含量50% 以上。     

响应面法优化薄荷叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性

目的：确定薄荷叶中总黄酮超声辅助提取最佳工艺条件,并对其抗氧化活性进行评价。方法：在单因素试验基础上,以总黄酮的提取率为指标,响应面法优化其超声提取条件;并通过其总黄酮对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用来研究其抗氧化活性。结果：薄荷叶总黄酮的最佳提取条件：乙醇体积分数80%、液料比40:1、提取时间118min、提取温度62℃,此条件下,薄荷叶总黄酮得率达6.11%。薄荷叶总黄酮对羟自由基和超氧阴离子自由基有较强的清除作用,并与总黄酮质量浓度呈一定的正相关关系。结论：利用响应面法分析结果可靠,得到了薄荷叶总黄酮超声辅助提取的最佳工艺条件,且实验结果还表明薄荷叶具有较强的抗氧化活性。     

超声波辅助双水相提取条斑紫菜黄酮类物质及其抗氧化活性研究

利用超声波辅助丙醇-硫酸铵双水相体系提取紫菜中总黄酮,并优化提取条件,测定总黄酮提取物对羟自由基(·OH)的抑制活性。结果表明：本方法可有效地从紫菜中提取总黄酮,紫菜总黄酮提取率为0.148%,明显高于乙醇-水回流提取法。最优提取条件为醇水比为0.6、硫酸铵质量浓度0.30g/mL、超声时间20min、料液比0.04。紫菜中含有较丰富的黄酮类物质,提取物对·OH具有良好的抑制作用,是一种有效的天然自由基清除剂,具有很大的开发利用前景。     

绿豆皮黄酮的超声波辅助水提工艺优化及抗氧化活性

对绿豆皮黄酮的超声波辅助水提工艺及其体外抗氧化活性进行研究。在单因素试验的基础上,以超声提取时间、超声功率、超声温度和液料比为自变量,以绿豆皮黄酮提取量为响应值,采用四因素五水平的中心组合试验设计进行响应面回归分析。通过分析各因素的显著性和交互作用,优化得到绿豆皮黄酮的超声波辅助水提最佳工艺条件为：超声功率419 W（实际采用400 W）、超声温度70 ℃、超声时间75 min、液料比45∶1（mL/g）,在此条件下绿豆皮总黄酮提取量可达（10.18±0.03） mg/g。在对绿豆皮水提黄酮的体外抗氧化活性研究中,发现经HPD100大孔吸附树脂初步纯化的绿豆皮水提黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除能力和VC相当,而其对羟自由基清除能力低于VC,绿豆皮水提黄酮对2 种自由基清除的IC50分别为6.57 μg/mL和54.21 μg/mL,VC的IC50值分别为6.12 μg/mL和16.58 μg/mL。     

响应面优化人参花黄酮提取工艺及抗氧化活性

为了得到微波辅助提取人参花黄酮的最佳工艺,在单因素的基础上,以黄酮提取量为响应值,通过响应面法对其工艺进行优化。并对经大孔树脂D101纯化后的人参花黄酮进行了体外抗氧化活性研究。结果表明最佳工艺条件为:微波功率800 W,微波时间30 s,乙醇质量分数54%,料液比1 g:21 g,此时黄酮提取量为5.624 mg/g,与模型预测值接近,表明模型适用。当人参花黄酮浓度为0.24 mg/mL时,对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子3种自由基清除能力最好,自由基清除率分别为71.47%、49.91%和72.32%,IC₅₀分别为0.17、0.24、1.73 mg/mL,表明人参花黄酮具有较强的体外抗氧化活性,有很好的开发价值。     

大孔树脂纯化沉香叶黄酮工艺优化及纯化前后抗氧化性比较

研究沉香叶黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化性。通过静态和动态实验,考察树脂种类、粗提液浓度、洗脱剂、上样流速、洗脱流速对沉香叶黄酮吸附解吸性能的影响,确定最佳纯化工艺条件;采用羟自由基法、DPPH自由基和ABTS自由基法,比较纯化前后沉香叶黄酮的抗氧化性。结果表明,NKA-9大孔树脂纯化沉香叶黄酮效果最好,最佳条件为:以1.5 mL/min速度将5.0 mg/mL粗提液上柱,用70%(v/v)乙醇以2.0 mg/mL速度洗脱,此条件下沉香叶黄酮纯度提高至76.58%±3.46%。沉香叶黄酮纯化后清除羟自由基、DPPH自由基和ABTS自由基IC₅₀值分别为(0.120±0.008)、(0.016±0.009)、(0.042±0.002)mg/mL,远低于纯化前的(0.300±0.015)、(0.170±0.008)、(0.160±0.009)mg/mL,说明沉香叶黄酮纯化前后均具有较强的抗氧化性,纯化后抗氧化性明显增强。NKA-9大孔树脂适合分离纯化沉香叶黄酮。     

青藏高原狭果茶藨子黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究

以青藏高原产的狭果茶藨子为原料,研究其黄酮纯化工艺及抗氧化活性。通过静态吸附试验对D101、D218、D315、HPD-600、AB-8这5种大孔树脂进行筛选,考察上样浓度、上样量、上样流速以及洗脱剂浓度、洗脱流速对狭果茶藨子黄酮吸附和解吸性能的影响,确定最佳树脂类型和纯化工艺条件;以羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除率和金属螯合能力为考察指标,评价纯化前后狭果茶藨子黄酮的抗氧化能力。黄酮纯化工艺研究结果表明:AB-8大孔树脂对狭果茶藨子黄酮的纯化效果较好,其对黄酮吸附率达93.01%,解吸率达73.54%;在上样浓度12 mg/mL、上样量40 mL、上样流速2.0 mL/min以及洗脱液乙醇浓度60%、洗脱流速2.0 mL/min条件下,狭果茶藨子黄酮纯度从6.09%提高到46.43%。抗氧化试验结果表明:狭果茶藨子黄酮有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及金属螯合能力,经过AB-8大孔树脂纯化后其抗氧化活性显著增强,其中对DPPH自由基、羟自由基清除能力及金属螯合能力尤为突出,作用效果甚至强于同浓度下传统抗氧化剂Vc,其对DPPH自由基的清除率最高可达94.08%,金属螯合率最高达81.27%,说明狭果茶藨子黄酮具备开发成新型天然抗氧化剂的潜力。     

红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究

本实验以红薯叶为原料,研究了黄酮类化合物分离纯化工艺,并研究了粗提物与纯化产物对羟基自由基、1,1- 二苯基-2- 苦基肼自由基(OPPH·)的清除作用。结果表明,红薯叶黄酮最佳提取工艺为60% 乙醇水溶液90℃回流提取60min,料液比1:40,粗提物中总黄酮含量为101.3mg/g。提取液用HPD500 大孔树脂进行纯化效果好,最佳纯化工艺为：吸附条件：上样原料液黄酮含量1.8mg/ml,pH3 上样流速为3BV/h;洗脱条件：50% 乙醇、流速3BV/h,流量4BV,在此条件下,纯化产品黄酮含量为488.7mg/g;粗提物与纯化产物均具有对自由基的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂新资源。