基于体外化学与细胞模型评价鲍内脏肽粉的抗氧化活性

本文考察了鲍内脏肽粉对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2-·)的清除能力,结果发现,鲍内脏肽粉对DPPH·、·OH和O_2-·自由基具有一定的清除能力,其IC50值分别为0.87 mg/m L、7.53 mg/m L和19.41 mg/m L。采用H_2O_2建立体外培养人肝癌细胞(HepG2)氧化应激损伤模型,将细胞分为正常对照组,模型组、H_2O_2加低(1.6 mg/m L)、中(3.2mg/m L)、高(6.4 mg/m L)剂量组,检测各组细胞存活率、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果发现,1.6 mg/m L、3.2 mg/m L和6.4 mg/m L 3个剂量水平的鲍内脏肽粉能显著提高HepG2细胞的存活率、T-AOC和SOD活力,显著抑制细胞的MDA含量,且剂量-效应关系明显,对H_2O_2氧化损伤HepG2细胞均具有一定的修复作用。结果表明,鲍内脏肽粉具有较好的抗氧化活性。     

凤头姜醇溶和水溶黄酮的抗氧化作用

比较凤头姜水溶和醇溶黄酮对超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)自由基的清除能力和总抗氧化能力(铁离子还原能力法),同时用VC和2,6-二叔丁基对甲酚(butylated hydroxytoluene,BHT)作对照。结果表明:在DPPH自由基清除能力测定中,水溶黄酮的抗氧化效果强于醇溶黄酮和BHT,但弱于VC,水溶和醇溶黄酮的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为585.75μg/m L和1 013.45μg/m L;在ABTS+·、超氧阴离子自由基清除能力和总抗氧化能力测定中,醇溶黄酮的抗氧化效果均强于水溶黄酮、VC和BHT,醇溶和水溶黄酮对ABTS+·的IC_(50)分别为21.90μg/m L和87.54μg/m L;在超氧阴离子自由基清除能力测定中,水溶和醇溶黄酮的IC_(50)分别为26.56μg/m L和22.29μg/m L;在铁离子还原能力测定中,水溶黄酮和醇溶黄酮的TEAC1 000分别为45.78μg/m L和36.42μg/m L。综合研究发现,凤头姜水溶黄酮和醇溶黄酮在不同抗氧化体系中的抗氧化效果存在差异。     

定心藤醇提物不同极性部分的体外抗氧化活性研究

研究定心藤75%乙醇提取物不同极性部位的体外抗氧化活性,采用5种不同极性溶剂萃取(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水)得到5种萃取物,分别测定黄酮含量,并通过还原能力测定、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力4种测定方法,对各萃取物抗氧化能力进行研究。结果显示,各提取物对Fe3+均有一定的还原能力,乙酸乙酯萃取物还原效果最为明显;定心藤不同极性部位均具有一定的抗氧化活性,乙酸乙酯萃取物抗氧化能力最强,DPPH·的半数清除浓度IC50为0.28mg/m L,羟自由基半数清除浓度IC50为0.41mg/m L,在0.2mg/m L浓度下,对超氧阴离子自由基的清除率达到42.88%,而其黄酮含量最高,达到609.96mg/g,这也许与它具有较高的抗氧化活性有关。说明乙酸乙酯萃取物具有较好的开发天然抗氧化剂的前景。     

2种食用方式对番茄黄酮多酚含量及抗氧化活性的影响

对2种不同的食用方式影响番茄中多酚、黄酮类物质含量及其体外抗氧化活性进行了研究。以1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基、超氧阴离子(O_2~—·)、羟基自由基(·OH)、亚硝酸盐(NO_2~—)、总抗氧化能力、总还原力以及对人肝细胞株LO2氧化损伤的保护作用等抗氧化指标来评价不同食用方式对番茄提取物抗氧化能力的影响。结果表明,不同食用方式对番茄的抗氧化活性有明显影响,加热食用可显著增加番茄中抗氧化成分酚类和黄酮的释放,其含量分别比加热前增加了3.02 mg/L和10.78 mg/L;同时对DPPH·、O_2~—·、·OH、NO_2~—的清除作用也明显增强(P0.05),分别增加了2.39倍、3.65倍、0.77倍、8.76倍。另外,总抗氧化能力、还原能力以及对人肝细胞株LO_2氧化损伤的保护能力都明显增加。综合比较说明加热食用番茄更有利于其抗氧化成分的释放。     

麻疯树籽壳乙醇提取物的抗氧化活性研究

本实验以麻疯树籽壳乙醇提取物中黄酮质量浓度为内标,以维生素C(VC)和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)为对照,通过超氧阴离子(O-2·)、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH·)和亚硝酸盐(NO-2)的清除能力,以及还原力和总抗氧化能力的测定,评价了麻疯树籽壳乙醇提取物的抗氧化活性。实验结果表明,麻疯树籽壳乙醇提取物的O-2·清除率的半数抑制浓度(IC50)为0.502mg/m L,小于VC的0.654mg/m L;其DPPH·与NO-2清除率的IC50分别为0.185、0.494mg/m L,均小于BHT;麻疯树籽壳乙醇提取物中黄酮质量浓度在0.7~1.0mg/m L时,其还原力与同质量浓度VC相当,大于BHT;在测定范围时,其总抗氧化能力随质量浓度增加而增强,且大于同质量浓度的BHT,而小于VC。由此说明,麻疯树籽壳乙醇提取物具有较强的抗氧化活性。     

玉米须粗多糖体外抗氧化活性研究

采用1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、还原力4种模型研究玉米须粗多糖的抗氧化活性,试验结果表明玉米须粗多糖在浓度分别为0.1、1.0、2.0 mg/m L时对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的半抑制浓度IC50分别为0.141、1.429、2.891 mg/m L,具有一定的还原能力,存在着明显的量效关系,有进一步研究的价值。     

玉米须中黄酮类化合物的抗氧化活性研究

采用多个抗氧化能力评价体系,包括清除DPPH?自由基、羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2ˉ.)体系,评价玉米须中黄酮类化合物的抗氧化活性。结果表明:玉米须黄酮具有较强的抗氧化活性,对DPPH?自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的半清除率IC50分别为0.057 mg/mL、0.38 mg/mL和0.56 mg/mL。玉米须黄酮的浓度与其活性大小呈明显的量效关系。     

戊糖片球菌S44胞外多糖抗氧化活性分析

研究戊糖片球菌S44的胞外多糖体外抗氧化的能力。结果表明,戊糖片球菌S44的胞外多糖对1,1-二苯基苦基苯肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、羟自由基和超氧阴离子自由基均有较好的清除能力。能够缓解由过氧化氢诱导的HepG2细胞的氧化损伤,提高细胞中总抗氧化能力(total antioxidation capacity,T-AOC)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力,抑制丙二醛(malondialdehyde,MDA)的形成。     

羊肚菌菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

对羊肚菌菌丝体液体深层发酵富硒条件进行优化,考察培养基中硒浓度、温度、装液量和p H值对富硒率的影响。采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和DPPH(1,1-二苯基-2-苦基肼)还原法对羊肚菌菌丝体多糖的体外抗氧化活性进行了研究。羊肚菌菌丝体富硒的适宜培养条件为:亚硒酸钠质量浓度为10 mg/L,温度25℃,装液量100 m L/250 m L,初始p H值7。在此条件下,富硒率最大达9.10%。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体硒多糖清除羟自由基(·OH)IC50分别为:0.62 mg/m L和0.42 mg/m L;清除超氧阴离子(O2-·)IC50分别为:0.85mg/m L和0.59 mg/m L;清除DPPH自由基IC50分别为:0.66 mg/m L和0.49 mg/m L。羊肚菌菌丝体多糖具有较强的体外抗氧化活性,且随着多糖浓度的增大其抗氧化活性逐渐增强,羊肚菌菌丝体硒多糖抗氧化作用更强。     

骆驼蓬粗多糖抗氧化性的研究

采用分光光度法测定骆驼蓬粗多糖对羟基自由基、超氧自由基、亚硝酸根的清除能力及其还原能力。结果表明,骆驼蓬粗多糖对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、亚硝酸根(NO_2~-)都具有一定的清除作用,对O_2~-·(IC50=0.47mg/m L)的清除效果优于·OH(IC50=0.89mg/m L),骆驼蓬粗多糖的还原能力随着多糖浓度的增加而增加,说明骆驼蓬粗多糖具有一定的抗氧化能力。     

三种天然来源黄酮物质抗氧化活性和抑制胰脂肪酶活性的研究

以葛根黄酮、沙棘叶黄酮和山楂叶黄酮为研究对象,在不同体系中评价了总抗氧化能力、DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性及还原能力,同时评价了抑制胰脂肪酶活性的能力。结果表明:在不同体系中三种黄酮物质都呈现较强抗氧化活性,其中山楂叶黄酮总抗氧化能力最强,沙棘叶黄酮清除DPPH自由基(IC50 0.057±0.004)mg/m L和清除ABTS(IC50 0.096±0.014)mg/m L自由基活性最强,山楂叶黄酮与葛根黄酮呈现较强的还原能力,三种黄酮物质都呈现一定的抑制胰脂肪酶活性,沙棘叶黄酮活性最强。该研究为天然植物资源的综合利用提供了理论的支撑。     

林蛙卵黑色素的理化性质及其抗氧化活性研究

以林蛙卵为原料,采用木瓜蛋白酶酶解和碱液除蛋白的方法制备林蛙卵黑色素,研究其理化性质和抗氧化活性。采用紫外分光光度计、傅里叶红外光谱仪和元素分析仪对林蛙卵黑色素进行检测,并进行了溶解性试验、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力试验、超氧阴离子清除试验和羟自由基清除试验。林蛙卵黑色素在紫外区域都有强烈的吸收,并且伴随波长的逐渐增加,吸光度呈现下降的趋势;元素分析表明林蛙卵黑色素的S∶N为0.05;红外光谱表明林蛙卵黑色素含有OH、NH2、C=C、C=N、C=O、C-N和苯环。体外抗氧化试验表明林蛙卵黑色素对DPPH自由基的IC50为0.404 mg/m L,对超氧阴离子的IC50为1.250 mg/m L,对羟自由基的IC50为0.662 mg/m L。结果表明:林蛙卵黑色素是真黑色素,并且具有较强的抗氧化活性。     

超高压提取瓜蒌多糖体外抗氧化活性研究

以超高压提取的瓜蒌多糖为材料,对其紫外和红外光谱进行了表征,并通过其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、过氧化氢(H_2O_2)、羟基自由基(·OH)的清除能力及总还原能力的测定来评价瓜蒌多糖的体外抗氧化能力。结果表明,样品在260~280 nm处有一较小的紫外吸收峰,红外光谱1609 cm~(-1)处有N-H的弯曲振动,说明多糖中含有少量与糖相结合的蛋白。抗氧化实验显示,瓜蒌多糖抗氧化能力随浓度的升高而增强,其DPPH·、O_2~-·、H_2O_2和·OH自由基的抑制率IC50值分别为0.63、1.48、1.03、4.04 mg/m L,具有一定的抗氧化能力。     

桦树叶黄酮提取物对人脐静脉内皮细胞抗氧化活性的研究

本实验对白桦叶黄酮提取物是否具有体外抗氧化作用以及是否能够预防HUVEC(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,人脐静脉内皮细胞)细胞的氧化损伤进行了研究。通过测定白桦叶黄酮提取物清除DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基、还原能力以及培养细胞SOD、GSH-PX活力、T-AOC总抗氧化能力,研究白桦叶黄酮提取物的体外抗自由基作用和对细胞损伤的预防作用。实验结果表明:白桦叶黄酮提取物浓度为0.20 mg/m L时,DPPH自由基清除率为86.89%;浓度为0.18 mg/m L时,ABTS自由基清除率为96.26%;黄酮提取物浓度为1.9 mg/m L时,羟基自由基清除率为71.18%。当白桦叶黄酮提取物浓度为10μg/m L时可极显著增强细胞的SOD活力、GSH-PX活力以及提高细胞中活性氧水平和总的抗氧化能力(p0.01)。实验结果表明白桦叶黄酮提取物具有明显的抗自由基作用和预防细胞氧化损伤作用。     

香茅精油的超临界CO_2萃取及其抗氧化活性的研究

采用超临界CO_2萃取法提取香茅草中的精油,通过简单比较法优化萃取条件,并以香茅精油对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2-·)和羟基自由基(OH·)的清除能力来研究其抗氧化活性。结果:在萃取压力为15MPa、萃取温度为45℃、萃取时间为90min的超临界CO_2萃取条件下香茅精油的得率最高,可达_2.13%。香茅精油在一定的浓度范围内其浓度与DPPH·、O_2-·和OH·清除率呈良好的线性关系,量效关系明显,对DPPH·、O_2-·和OH·的半抑制浓度(IC50)分别为3._237mg/m L、0._27_24mg/m L和0.6615mg/m L。表明:香茅精油具有良好的抗氧化活性,是一种开发潜力较高的天然抗氧化剂。     

草果总黄酮的提取及DPPH自由基清除活性研究

采用超声波辅助法提取草果总黄酮,通过单因素试验和正交试验优化草果黄酮的最佳提取条件,同时以VC为对照,评价草果黄酮清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基的能力。结果表明草果黄酮的最佳提取条件为:乙醇体积分数60%、料液比1∶50(g/mL)、提取温度40℃、超声功率为160 W,提取时间60 min,此时草果黄酮提取量是24.2 mg/g。草果黄酮有较强的DPPH自由基清除力,且草果黄酮抗氧化性高于VC,其IC50分别为:IC50草果黄酮12.89 mg/L,IC50VC为6.94 mg/L,草果黄酮的DPPH自由基清除率为80.5%。     

鲍内脏多糖的抗氧化活性

为研究鲍内脏多糖的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同化学组成的鲍内脏多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和·OH的清除作用,并以人体肝细胞LO2建立过氧化氢损伤模型,探讨鲍内脏多糖在细胞水平的抗氧化能力。结果表明:鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2具有良好的清除体外自由基能力。多糖CAVP、AVP1、AVP2清除DPPH自由基的半抑制率浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为1.46、1.74、1.55 mg/m L。其清除·OH的IC50分别为7.14、15.27、8.11 mg/m L。另外,细胞模型法评价结果显示,鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2在质量浓度0.5~4.0 mg/m L条件下对肝细胞LO2的H2O2氧化损伤有保护作用,3种多糖样品均能显著提高LO2细胞存活率;CAVP(4.0 mg/m L)、AVP1(0.5 mg/m L)和AVP2(0.5 mg/m L)能极显著降低氧化损伤时乳酸脱氢酶的释放;CAVP能极显著提高LO2细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)(4.0 mg/m L)、过氧化氢酶(catalase,CAT)(0.5 mg/m L)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)(0.5 mg/m L)活力;AVP1质量浓度为4.0 mg/m L时,能极显著提高LO2细胞内GSH-Px、SOD活力,显著提高CAT活力;AVP2分别在质量浓度0.5、4.0 mg/m L时极显著提高LO2细胞内CAT活力;在质量浓度为4.0 mg/m L时,3种多糖样品对降低细胞氧化损伤产生的丙二醛(malondialdehyde,MDA)均有显著作用。因此,鲍内脏多糖是一类潜在的抗氧化物,可用于此类功能食品的开发。     

不同色泽花生衣抗氧化活性研究

为研究不同色泽花生衣的抗氧化能力,分别测定红色、粉红色、黑色花生衣的总酚、总黄酮含量,并建立二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系、羟基自由基(·OH)体系、三价铁还原力体系、亚铁离子螯合体系,测定并对比3种不同色泽花生衣的抗氧化能力。结果表明:红色花生衣的抗氧化活性最强,对羟自由基、DPPH自由基的半抑制浓度IC50分别为0.046 1、0.005 17 mg/m L;粉红色花生衣的抗氧化活性次之,对羟自由基、DPPH自由基的半抑制浓度IC50分别为0.098 4、0.006 43 mg/m L;而黑色花生衣的抗氧化活性相对稍差,对羟自由基、DPPH自由基的半抑制浓度IC50分别为0.161 7、0.006 78 mg/m L。3种不同色泽花生衣都具有较强的抗氧化活性,是效果较好的天然抗氧化剂。     

响应面优化超声波-微波协同提取凤眼莲黄酮工艺及其不同部位黄酮抗氧化活性分析

目的:采用Box-Behnken法优化超声波-微波协同提取凤眼莲黄酮工艺,并对其进行抗氧化活性分析。方法:以超声波功率、微波功率、料液比和提取时间为主要影响因素,在单因素实验基础上,以黄酮得率为响应值,利用响应面实验优化凤眼莲黄酮的提取条件。通过对凤眼莲不同部位提取的黄酮进行总还原能力、清除DPPH自由基和清除超氧阴离子自由基能力的测定,对凤眼莲黄酮的抗氧化能力进行评价。结果:最佳提取工艺为超声波功率600 W,微波功率400 W,料液比1∶22 (g/m L),提取时间21 min,在此工艺条件下得到凤眼莲黄酮得率为3.64%±0.07%,回归模型的预测值与真实值相近,模型拟合程度较好。不同部位的黄酮类化合物抗氧化活性大小依次为叶根茎,清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为:凤眼莲叶0.569、0.389 mg/m L,凤眼莲根0.754、0.555 mg/m L,凤眼莲茎0.837、0.646 mg/m L。结论:响应面优化超声波-微波协同提取凤眼莲黄酮的工艺条件合理,效率较高,得到的黄酮具有良好的抗氧化能力,可进一步开发利用。     

壳聚糖及其衍生物抗氧化活性的研究

以壳聚糖、羧甲基壳聚糖和盐酸壳聚糖为材料,研究3种壳聚糖及其衍生物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力以及还原能力和抗脂质氧化能力,并通化曲线拟合方法明确壳聚糖及其衍生物的IC50值。结果表明,随着浓度的增加,壳聚糖及其衍生物的抗氧化活性逐渐增强。3种壳聚糖及其衍生物中壳聚糖的抗氧化活性最强,其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的半清除率IC50值分别为0.91、4.87、0.28 mg/m L。