基于丝网印刷电极和乙酰胆碱酯酶安培生物传感器的黄曲霉毒素检测方法

为实现黄曲霉毒素B1的快速、实时检测,利用制作成本低、响应速度快、重复性好、样品用量少的丝网印刷电极,和对黄曲霉毒素B1具有抑制作用的乙酰胆碱酯酶,构建检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器。利用石墨烯、普鲁士蓝、壳聚糖和纳米金作为丝网印刷电极的修饰材料,采用循环伏安法,优化传感器的反应条件,分别选取反应pH 7.5、负载酶量0.25 U、抑制时间14 min作为该传感器测定黄曲霉毒素B1的最优条件。以乙酰胆碱酯酶作为黄曲霉毒素B1的抑制剂,构建的电化学传感器对黄曲霉毒素B1的线性检测范围为1~64 μg/mL,相关系数为0.9948, 检出限0.05 μg/mL。对花生样品中进行检测,其加标回收率为82.5%~114.1%,具有良好的重现性和稳定性,选择性好。该检出限低于我国花生中黄曲霉毒素的限量标准,可用于花生中的黄曲霉毒素B1的检测。     

基于还原氧化石墨烯的电化学适配体传感器对黄曲霉毒素M1的检测

本实验基于还原氧化石墨烯（RGO）构建了一种用于黄曲霉毒素M₁（AFM₁）检测的电化学适配体传感器。采用红枣汁还原氧化石墨烯（GO）制备RGO,RGO通过滴涂法修饰在玻碳电极（GCE）表面,利用电沉积法将纳米金修饰在RGO/GCE上,AFM₁的适配体（Apt）通过Au-S键固定在AuNPs/RGO/GCE电极表面用于靶标AFM₁的捕获。当AFM₁存在时,AFM₁与适配体特异性结合形成AFM₁-Apt复合物,该复合物阻碍了电子的传递,导致电化学信号减弱。对RGO的制备条件进行优化,利用差示脉冲伏安法（DPV）监测电极表面的电化学信号,并对不同类型的毒素（黄曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₂、赭曲霉毒素A和伏马毒素B₁）、不同浓度的AFM₁（1×10?7~5×10?4 ng/mL）以及羊乳样品进行检测以确定电化学适配体传感器的特异性、灵敏性和实用性。结果表明,GO:红枣汁=2:1（V:V）,pH=11时所制备的RGO的导电能力最强。传感器的电信号与AFM₁浓度的对数呈线性关系,检测范围为1×10?7~5×10?4 ng/mL,检测限为3.3×10?5 pg/mL,同时所建立的方法仅对AFM₁的检测有响应,而对干扰毒素无响应,说明电化学适配体传感器的特异性良好。使用建立的AFM₁电化学适配体传感器对羊奶中的AFM₁含量进行测定,发现所构建的传感器具有很高的灵敏性和良好的选择性,有望应用于食品工业中真菌毒素的快速、准确检测当中。     

生物传感器法检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量

建立了一种基于酶电极技术快速检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的方法。将样品用75%甲醇溶液溶解,60Hz超声提取15min,在以黄曲霉毒素酶电极为核心元件,在pH7.2、0.2mol/L的磷酸盐缓冲液和300ug/kg的黄曲霉毒素B_1标准溶液反应体系中直接进行检测。结果表明:生物传感器法在黄曲霉毒素B_1浓度为1～300ug/kg的范围内检测线性良好,线性方程为y=1.0042x-3.4714,R~2=0.9999;稳定性好,连续测定十次,标准偏差为1.63%;加标回收率为99.1%～101.8%之间;只对黄曲霉毒素B_1进行测定,专一性强。将结果与酶联免疫法、高效液相色谱法测定结果进行比较,该方法测定奶粉中黄曲霉毒素B_1含量具有专一性好、准确度高、分析速度快、样品处理简单等特点,可用于奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的检测。     

柏实中黄曲霉毒素的HPLC-FD法测定

建立高效液相色谱测定柏实中黄曲霉毒素的方法,样品提取液经免疫亲和柱净化和光化学柱后衍生化,荧光检测器检测,黄曲霉毒素G_2、B_2在1.25 pg~50 pg范围内,黄曲霉毒素G_1、B_1在5 pg~200 pg范围内线性关系良好,回收率79.29%~102.53%。     

基于金掺杂的锆基金属有机框架电化学适配体传感器检测玉米中黄曲霉毒素B1

目的 基于金掺杂的锆基金属有机框架(Gold-doped zirconium-based metal-organic framework, Au@Zr-MOF)的电化学适配体传感器建立检测玉米中黄曲霉毒素B1 (Aflatoxin B1,AFB1)的方法。方法 利用具有高比表面积、介孔结构的Zr-MOF作为骨架,通过原位还原生长的方法掺杂金纳米粒子(Au NPs),得到导电性良好、分散均匀的Au@Zr-MOF。并基于Au-S键共价结合黄曲霉毒素B1 适配体,构建电化学阻抗型适配体传感器,当AFB1存在时,适配体对其进行识别结合,引起电极表面电化学传质电阻增加,随着AFB1浓度的增大,阻抗值也随之增加,并根据阻抗值的变化实现对AFB1的定量检测。结果 在最佳的实验条件下,该传感器对AFB1检测的线性范围为10-4-10 ng/mL,检出限为0.19 pg/mL,对玉米样品的回收率为96-112%。结论 本研究建立的电化学适配体传感器可以实现对AFB1的定量检测,且具有良好的特异性和重现性,为准确、快速检测食品中的AFB1提供思路。     

高效液相色谱-串联质谱法测定花生中的黄曲霉毒素B1

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法样品经乙腈水溶液提取,三氯甲烷反提取后,正己烷净化,以水(D)和乙腈(A)作为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多离子检测模式对黄曲霉毒素B_1的定量离子和定性离子进行检测。结果在0.5～10 ng/mL范围内线性良好(线性方程:Y=8.57×10~3X+312, r0.999),黄曲霉毒素B_1在1、5、10μg/kg 3个水平上进行加标回收试验,平均回收率为93.2%～100.2%,相对标准偏差为2.8%～6.9%,方法检出限为0.1μg/kg。结论该方法经济、快速、准确,适合测定花生中黄曲霉毒素B_1的含量。     

基于纳米材料构建免疫传感器快速测定粮油食品中的黄曲霉毒素B_1

以改性壳聚糖和纳米金复合物为电极修饰材料,包埋固定黄曲霉毒素B_1抗体制备信号放大型免疫传感器。以K_3[Fe(CN)_6]为探针,利用循环伏安法和差分脉冲伏安法研究其免疫反应对传感器响应电流的影响,结果表明,免疫响应电流与溶液中AFB_1的浓度在0.1~1.1 ng/m L范围内成线性关系,最低检测限为0.05 ng/m L(S/N=3);免疫传感器的特异性、稳定性和重现性较好。利用该法对花生、花生油等实际样品中的黄曲霉毒素B_1进行检测,回收率在87.8~98.2%,检测精确度优于ELISA试剂盒,可用于食品中黄曲霉毒素B_1的快速检测。     

高效液相色谱-质谱联用法测定薏苡仁药材中黄曲霉毒素

目的建立高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-masss pectrometer,HPLC-MS)测定薏苡仁中药饮片中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的方法,并对比不同产地薏苡仁中黄曲霉毒素含量。方法样品经过免疫亲合柱处理后,采用HPLC-MS进行测定。分析柱为C18柱(50 mm×2.1 mm, 1.8μm),流动相为10 mmol/L醋酸铵溶液-甲醇溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为25℃。结果黄曲霉毒素B_1在0.26～10.4ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9995),平均加样回收率为75.4%～123.9%,黄曲霉毒素B2在0.0875～3.5 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9996),平均加样回收率为71.1%～124.2%,黄曲霉毒素G_1在0.295～11.89 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9995),平均加样回收率为78.9%～112.2%,黄曲霉毒素G2在0.1475～5.9 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9992),平均加样回收率为73.8%～123.9%。结论该方法准确、可靠、专属性强,通过精确化合物离子监测,可准确的测定薏苡仁中黄曲霉毒素含量。     

基于金纳米花标记的免疫层析法检测牛奶中黄曲霉毒素M1

研究金纳米花作为信号放大用于黄曲霉毒素M_1高灵敏检测。用粒径为(91.8±0.8)nm、分支数多的金纳米花(gold nanoflowers,AuNFs)标记黄曲霉毒素M_1(aflatoxin M_1,AFM_1)单克隆抗体(monoclonal antibody,Mab),制备用于检测牛奶中AFM_1的金纳米花免疫层析检测卡(aflatoxin M_1-gold nanoflower immunochromatographic test card,AFM_1-GFICT)。纳米金免疫分析读数仪被用于读取AFM_1系列浓度(20 pg/mL～1 000 pg/mL)的信号值。以AFM_1浓度为横坐标,信号值为纵坐标绘制非线性四参数拟合曲线。非线性四参数拟合曲线相关系数R~2=0.999 3,检测限为12.3 pg/mL。检测在空白牛奶样品加入AFM_1标准品浓度为0.1、0.3、0.5μg/kg的回收率为80.4%～118.2%,变异系数(n=10)为4.27%～9.43%。15份牛奶样品的AFM_1-GFICT和商业化AFM_1-ELISA检测结果相比,线性拟合相关系数R~2=0.976 8。     

海洋巨大芽孢杆菌在培养基和花生中对黄曲霉产毒的抑制

目的 研究海洋巨大芽孢杆菌在PDA、MM培养基和花生中对黄曲霉产毒的抑制。方法 采用酶联免疫吸附法和高压液相色谱荧光检测法测定培养基和花生中黄曲霉毒素B1含量。结果 PDA、MM培养基培养的黄曲霉通过酶联免疫吸附法检测后, 实验组黄曲霉毒素B1含量分别在5.5158.1 pg/mL和2.210.3 pg/mL, 对照组毒素B1含量分别在2407.22986.3 pg/mL和4.42755.6 pg/mL。通过高压液相色谱检测28 ℃和37 ℃培养的被黄曲霉侵染的花生, 实验组黄曲霉毒素B1含量均未检出, 对照组28 ℃下, 黄曲霉毒素B1含量为(8.588?0.322)μg/kg, 37 ℃下黄曲霉毒素未检出。结论 不同培养基中, 海洋巨大芽孢杆菌对黄曲霉产黄曲霉毒素均有抑制作用。黄曲霉在28 ℃比37 ℃更容易在花生上产毒, 海洋巨大芽孢杆菌对花生上黄曲霉产毒素有显著抑制作用。     

Zur Untersuchung von Milch und Milchprodukten auf die Aflatoxine B1, B2, G1, G2 und M1

Zusammenfassung Der vom Bundesgesundheitsamt vorgelegte Entwurf zur Bestimmung der Aflatoxine B₁, B₂, G₁ und G₂ wurde auf die zusätzliche Erfassung des Aflatoxins M₁ überpruft. Es wurde Wert darauf gelegt, die ursprüngliche Methode nur wenig zu ändern, um die zahlreichen Vorschläge zur Aflatoxin-Analytik nicht noch weiter zu vermehren. Mit verhältnisäßig geringen Änderungen können alle Aflatoxine, also B₁, B₂, G₁, G₂ and M₁ in flüissiger Milch, Milchpulver, Butter, Käse, Quark, Saline, Joghurt und Fruchtjoghurt quantitativ erfaßt werden.

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Investigations of aflatoxin B₁, B₂, G₁, G₂, and M₁ in milk and milk products

Summary The method proposed by the Federal Department of Health for the determination of aflatoxin B₁, B₂, G₁, and G₂ was tested for additional determination of aflatoxin M₁. With relatively small changes of the original method, all aflatoxins including. B₁, B₂, G₁, G₂, and M₁ can be determined quantitatively in milk, milk powder, butter, cheese, quark, cream, yoghurt and fruit yoghurt.

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37. Mitteilung: Zur Aflatoxinbildung in Milch und Milchprodukten.     

Zur Untersuchung von Milch und Milchprodukten auf die Aflatoxine B1, B2, G1, G2 und M1

Der vom Bundesgesundheitsamt vorgelegte Entwurf zur Bestimmung der Aflatoxine B₁, B₂, G₁ und G₂ wurde auf die zusätzliche Erfassung des Aflatoxins M₁ überpruft. Es wurde Wert darauf gelegt, die ursprüngliche Methode nur wenig zu ändern, um die zahlreichen Vorschläge zur Aflatoxin-Analytik nicht noch weiter zu vermehren. Mit verhältnisäßig geringen Änderungen können alle Aflatoxine, also B₁, B₂, G₁, G₂ and M₁ in flüissiger Milch, Milchpulver, Butter, Käse, Quark, Saline, Joghurt und Fruchtjoghurt quantitativ erfaßt werden.     

免疫亲和层析净化-高效液相色谱法同时测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2

建立牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的免疫亲和层析净化和柱后衍生高效液相色谱测定方法。样品经溶解、离心、过滤后,通过免疫亲和柱,黄曲霉毒素特异性抗体选择性地与存在的黄曲霉毒素抗原键合,形成抗体-抗原复合体。甲醇-乙腈混合溶液(4:5,v:v)洗脱,带荧光检测器的高效液相色谱仪经柱后衍生测定,外标法定量。标准曲线线性良好,添加回收率在57.0%～88.7%,相对标准偏差在3.37%～16.9%,牛奶中各黄曲霉毒素检出限:B1为2ng/kg,B2为1ng/kg,G1、G2为3ng/kg,M1、M2为5ng/kg;奶粉中B1为20ng/kg,B2为10ng/kg,G1、G2为30ng/kg,M1、M2为50ng/kg,检测低限能够满足各国对牛奶和奶粉中黄曲霉毒素的限量要求。该方法准确、快速、灵敏度高,适用于牛奶和奶粉中黄曲霉毒素的测定。     

纳米Ag@TiO2、Fe@TiO2和Zn@TiO2的抑菌活性比较研究

探索常见金属离子掺杂对抑菌片的抑菌性能的影响,为新型纳米TiO₂抑菌片的制备与改善提供技术基础。选择固定质量分数的Ag⁺、Zn²⁺和Fe³⁺掺杂TiO₂,通过抑菌圈、MIC与MBC方法综合评价其抑菌性能,对微观结构进行表征分析,探讨抑菌性能差异的原因。结果表明:抑菌性能大小顺序为Ag@TiO₂> Zn@TiO₂> Fe@TiO₂,Zn@TiO2 的抑菌活性较好但抑菌稳定性差Ag@TiO2对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC、MBC均是10、20 mg/L,Zn@TiO₂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC、MBC均是30、50 mg/L。表征发现抑菌活性强弱主要归因于纳米TiO₂表面与金属离子共同产生的活性位点数量及稳定性,与孔结构或表面宫能团的关联不大。     

CaO-CeO2 @LiFe5 O8磁性固体碱催化剂的表征及性能评价

首先采用溶胶凝胶法制备了LiFe_5O_8磁核,并用共沉淀法制备了CaO-CeO_2@LiFe_5O_8磁性固体碱催化剂。通过XRD、SEM、TEM和CO_2-TPD对催化剂进行表征,并对其性能进行评价。结果表明:成功地制备了CaO-CeO_2@LiFe_5O_8磁性固体碱催化剂,并且CaO-CeO_2也成功地被吸附在LiFe_5O_8磁核表面,催化剂具备十分优良的铁磁性; CO_2-TPD表征结果说明,制备的催化剂具备较强的碱性,用于棕榈油酯交换反应体系中,生物柴油收率可达到95. 37%;制备的催化剂具有很好的耐酸、耐水性,重复使用5次后仍然保持较好的催化活性,且在外加磁场中易分离。     

稳定型双组份SO2-ClO2保鲜剂的研究及应用

采用亚硫酸盐释放出SO₂气体还原氯酸盐产生ClO₂气体的发生方法,研制出稳定型双组份SO₂-ClO₂保鲜剂。研究了不同比例的SO₂发生剂与ClO₂发生剂,并添加和丰膨润土制成片剂,对甜瓜、葡萄、杏子常见致病菌（青霉、黑曲霉）进行抑菌实验。结果表明:双组份SO₂-ClO₂最优配方SO₂发生剂与ClO₂发生剂质量比为1:0.3时,其保鲜效果优于单一使用SO₂和ClO₂。     

呋喃氟尿嘧啶衍生物M1、M2的合成

目的探索高效低毒的抗肿瘤药物。方法替加氟(FT-207)为先导化合物,经取代反应、水解反应制得N1-(四氢-2-呋喃基)-N3-乙酸基-5-Fu,在N,N,-二环己基碳酰亚胺(DCC)作用下分别与2-氨基-1,3,4-噻二唑及2-氨基-5-甲基-1,3,4-噻二唑反应,生成目标化合物M1及M2。结果 M1及M2结构经红外光谱、质谱、元素分析和核磁共振氢谱确证。结论合成路线合理,操作简便,值得进一步研究。     

钼酸盐对桉木KP浆H2O2漂白的改善效果

研究了钼酸盐对桉木硫酸盐氧漂浆酸性H2O2漂白的改善效果,探讨了各种影响因素（钼酸盐用量、漂液pH值、H2O2用量、氧强化的碱抽提和洗涤方式）对酸性H2O2漂白结果的影响。结果表明：添加少量的钼要到盐能有效地促进酸性H2O2的脱木素反应,提高脱木素效率,增加纸浆的白度。当钼酸盐用量为0.1%,脱木素程度比单纯的H2O2漂段提高27.8%漂段提高27.8%,白度增加4.3%（ISO）,而粘度的损失不大。     

Vitamins B1 and B2 contents in cultivated mushrooms

Mushrooms have long been treated as a delicacy. Nowadays however, many researchers consider them to be nutraceutical foods, which has stimulated new and existing Brazilian producers to search for more productive techniques and to introduce other species. The objective of this study was to determine the vitamin B₁ and B₂ contents in mushrooms. The main species of mushroom cultivated in Brazil and analysed in this study are: Agaricus bisporus (white button mushroom and portobello), Lentinula edodes (shiitake) and Pleorotus spp. (shimeji and oyster mushroom). The methodology employed used acid hydrolysis followed by enzymatic hydrolysis and separation of the vitamins by high performance liquid chromatography using a C₁₈ reverse phase column and fluorescence detector. The results obtained for thiamine (vitamin B₁) were from 0.004 to 0.08 mg/100 g and for riboflavin (vitamin B₂), from 0.04 to 0.3 mg/100 g.