铁观音茶末多糖的分离纯化和抗氧化活性

为实现废弃茶叶资源的再利用以及探究铁观音茶叶末活性多糖的抗氧化活性,以水提醇沉法提取铁观音茶末粗多糖,然后通过DEAE-52纤维素和Sephadex-100葡聚糖凝胶分级两次纯化,并进行纯度鉴定、红外光谱分析、分子量的测定以及体外抗氧化活性的测定等。结果表明,90%的乙醇终浓度得率最高,为1.97%;两次分级纯化后得到TPS-1A和TPS-4C,纯度分别为96.2%、95.1%;红外光谱图谱表明两种多糖均为β-型糖苷键多糖;分子量分别为15792、21722 Da;两种多糖组分抗氧化活性均随着组分浓度的增加而逐渐增强,当质量浓度为1.2 mg/mL时TPS-1A和TPS-4C,对DPPH自由基的清除率分别为95.41%、97.71%,羟自由基清除率分别为93.39%、94.21%,总还原力测得吸光度值为0.699、0.712。由此说明铁观音茶末多糖具有较强的抗氧化活性,且TPS-4C强于TPS-1A。     

化橘红多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

对化橘红粗多糖及其纯化组分的抗氧化活性进行研究。化橘红粉末经热水提取、乙醇沉淀、sevage法脱蛋白、透析得到粗多糖,粗多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱分离,得到2个纯化组份ECP1和ECP2。采用化学法分别测定了粗多糖及其纯化组分的体外清除自由基(DPPH.,.OH,ABTS.+)能力、还原能力。粗多糖的多糖含量为74.29%,经DEAE-52纯化的组分ECP1和ECP2的多糖含量分别为83.39%和85.77%。结果表明粗多糖及其两个纯化组分均具有较好的抗氧化清除自由基的能力,并且抗氧化能力与多糖浓度之间存在良好的相关性。其中ECP2的抗氧化清除自由基能力强于ECP和ECP1,但是低于对照VC。     

金针菇多糖制备过程中体外抗氧化活性研究

采用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白的方法对金针菇多糖进行提取及纯化,依次得到不同纯度的粗多糖,分别为金针菇多糖1(Flammulina velutipes polysaccharide1,FVP1)、金针菇多糖2(Flammulina velutipes polysaccharide2,FVP2)、金针菇多糖3(Flammulina velutipes polysaccharide3,FVP3),研究纯化过程中金针菇多糖的含量及抗氧化活性变化。采用苯酚硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)分别测定提取物中的总糖及还原糖含量,以总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及抑制羟基自由基能力为检测指标,对纯化过程中金针菇粗多糖的抗氧化能力进行评价。结果表明:FVP1、FVP2、FVP3中多糖的含量分别为10.35%、19.48%、55.21%;得率分别为54.9%、9.26%、1.52%。以上3种不同纯度金针菇粗多糖在0.5 mg/mL~2.0 mg/mL的浓度范围内抗氧化活性能力大小依次为:抑制羟基自由基能力清除DPPH自由基能力总抗氧化能力。FVP1、FVP2、FVP3抗氧化能力均随着浓度升高而增强,抗氧化能力的大小依次为FVP1FVP2FVP3,这表明分离纯化工艺有降低金针菇多糖体外抗氧化能力的趋势。     

铁棍山药多糖纯化及抗氧化活性

对铁棍山药粗多糖进行纯化分离获得单体组分,并对其抗氧化活性进行评价。利用AB-8大孔树脂对铁棍山药多糖进行富集纯化,再利用DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离多糖粗品,利用DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定评价分离得到的3种铁棍山药多糖组分的抗氧化活性。结果显示,AB-8大孔树脂可纯化铁棍山药粗多糖,使其纯度从53.13%提高到82.57%,获得多糖粗品,洗脱参数为:上样浓度为1.12 g/L,上样体积为4000 mL,上样流速为500 mL/h,洗脱液速度为750 mL/h,洗脱液体积为1000 mL,解吸率可达到95.62%。经过DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离得到3种铁棍山药多糖组分DOTP1、DOTP2和DOTP3,得率分别为0.34%、0.42%和0.36%,纯度分别为93.11%、91.22%和92.75%。DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定结果显示,铁棍山药多糖DOTP1的抗氧化活性优于DOTP2和DOTP3,而3种多糖组分的抗氧化活性都略优于阳性对照VE。研究所用纯化分离方案可实现铁棍山药多糖的分离纯化,得到的3种多糖组分具有较好的抗氧化活性。     

牡丹叶多糖的提取纯化、分级制备及抗氧化性能研究

以牡丹叶为实验对象,建立牡丹叶多糖的提取及分离纯化方法,再采用不同体积分数(25%、45%、65%、85%)乙醇分级沉淀,得牡丹叶多糖PW-25、PW-45、PW-65、PW-85,采用红外光谱分析各组分的光谱学特征,并通过DPPH自由基和羟自由基清除实验对各组分体外抗氧化活性进行研究。结果表明:采用ZTC1+1-Ⅱ型天然澄清剂法脱蛋白和过氧化氢脱色法联用进行牡丹叶粗多糖的分离纯化,在此方法下牡丹叶粗多糖中蛋白脱除率为89.66%,色素脱除率为79.35%,多糖保留率为61.41%,得到PW-25多糖纯度达91.23%,得率为1.29%;4种牡丹叶多糖组分均具有一定体外抗氧化能力,其中PW-25对DPPH自由基和羟自由基具有明显清除能力,且半数抑制浓度(IC50)分别为15.36、65.77μg/m L,但均略差于VC(IC50分别为7.89、46.46μg/m L)。研究结果为牡丹叶多糖开发和应用提供基础。     

雪樱子粗多糖提取、纯化工艺及抗氧化活性研究

以雪樱子为原料,优化雪樱子粗多糖水提醇沉提取法及AB-8型树脂纯化工艺。并以维生素C作为对比,以羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力作为指标,对雪樱子粗多糖进行了体外抗氧化活性的测定。结果表明,雪樱子粗多糖的优化提取工艺为:醇沉乙醇体积分数80%、料液比(g/mL)1∶20、提取温度95℃、提取时间6 h,粗多糖得率为(1.421±0.081) mg/g。雪樱子多糖优化纯化工艺为:上样液质量浓度1.00 mg/mL,上样液pH值5,吸附速率2 BV/h,乙醇洗脱剂体积分数25%,洗脱速率2 BV/h,回收率为44.99%±1.23%。雪樱子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性。研究结果为雪樱子多糖活性分析和功能性产品开发提供了技术支持。     

客家黄酒多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性研究

探究利用响应面法优化客家黄酒粗多糖的提取工艺参数以及其抗氧化活性。结果表明,浓缩比、乙醇体积分数、醇沉时间与客家黄酒粗多糖得率存在显著相关性。最佳提取参数为:浓缩比1/4;乙醇体积分数89%;醇沉时间22 h。验证试验条件下客家黄酒粗多糖最高得率为2.864%。此外,选取了还原能力、羟自由基和亚硝基清除能力对客家黄酒多糖进行体外抗氧化研究。结果得出,在试验浓度范围,客家黄酒多糖具有一定的抗氧化活性,且随着浓度的升高而增强。纯化多糖的抗氧化能力强于粗多糖。     

蝉花孢子粉分级多糖的体外抗氧化活性

采用醇沉法提取了自30%~90%乙醇浓度下的分级多糖,分别标记为CSP-1、CSP-2、CSP-3、CSP-4、CSP-5、CSP-6、CSP-7,并以DPPH自由基清除率、还原力和铁离子螯合能力为模型分析了蝉花孢子粉分级多糖的体外抗氧化活性。实验结果表明:蝉花孢子粉分级多糖均显示了体外抗氧化活性,且抗氧化活性与多糖样品浓度间存在一定的正相关性。分级多糖CSP-4、CSP-5和CSP-6在浓度为(0.1~0.3)mg/mL时,自由基清除活性较好,CSP-6在浓度高于0.3 mg/mL时显著高于其他多糖样品(p0.05),但与阳性对照Vc间存在明显差距;在还原能力上,CSP-6和CSP-5在浓度为(0.1~0.5)mg/mL时还原能力显著高于其他样品,但高于0.5 mg/mL时CSP-4的活性最为显著(p0.05);在铁离子螯合能力方面,CSP-5与CSP-6在各实验浓度下活性均显著高于其他多糖样品(p0.05)。综合评价3种抗氧化模型的实验结果,分级多糖CSP-5和CSP-6的体外抗氧化活性总体较为突出,值得对其进行进一步活性验证及纯化鉴定。     

绿茶多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化绿茶粗多糖的提取工艺,纯化多糖并分析其结构和抗氧化活性。方法:通过单因素实验结合响应面分析的方法,优化提取工艺,采用液相色谱、气相色谱和红外光谱分析多糖结构,并通过体外抗氧化实验研究其抗氧化活性。结果:多糖最佳提取条件为:液料比30:1 mL/g,提取温度60 ℃,提取时间70 min。此条件下,绿茶多糖的得率可达10.56%。多糖结构分析结果表明,其总糖、蛋白质和糖醛酸的比例分别为90.75%±3.69%、0.92%±0.09%和0.82%±0.07%,分子量约为7.3 kDa,主要由葡萄糖和半乳糖组成（摩尔比1.00:0.13）。体外抗氧化实验结果表明,在2 mg/mL浓度下,GTP对ABTS+自由基、DPPH自由基和羟基自由基（OH·）清除率分别为39.8%、72.2%和32.5%。结论:本工艺中,绿茶多糖得率高,分子量低,且具有较高的抗氧化活性。     

浒苔多糖的纯化及抗氧化活性研究

利用DEAE-Cellulose52离子交换层析和Sepharose4B凝胶过滤层析时浒苔粗多糖进行了纯化,并采用Fenton反应和邻苯三酚自氧化法研究了粗多糖和纯化多糖EP-Ⅱ的体外抗氧化活性.结果显示,利用热水浸提、sevag法除掉蛋白质和95%乙醇沉淀后得到的粗多糖,经两步层析后可得到纯化的多糖组分EP-Ⅱ.浒苔粗多糖和EP-Ⅱ都能有效地清除羟基自由基(·OH),且均呈现一定的量效关系,当浓度为0.6mg/mL时,对羟基自由基(·OH)的清除率分别达到44%和59%.两种多糖对超氧阴离子自由基(O2-·)清除作用较弱.     

低共熔溶剂提取的黄精多糖性质分析

为研究低共熔溶剂提取条件对黄精多糖性质及体外抗氧化活性的影响,以鸡头黄精为原料,对不同条件下低共熔溶剂提取得到的黄精多糖进行相对分子量、单糖组成等基本性质和体外抗氧化活性的测定。结果显示,相比于传统水提醇沉法,采用低共熔溶剂法提取黄精多糖,70 ℃时得率为18%,提高了36%,所得多糖的相对分子量变小且半乳糖含量升高;100 ℃提取的多糖相对分子量更小,且主要成分为葡萄糖。羟基自由基与DPPH自由基清除率、总抗氧化能力测定结果均表明,采用低共熔熔剂在70 ℃条件下提取的黄精多糖体外抗氧化能力明显高于传统水提醇沉法和低共熔溶剂法在100 ℃条件下提取的黄精多糖。当浓度为3.0 mg/mL时,采用低共熔熔剂在70 ℃提取的黄精多糖总抗氧化能力为4.5 U/mL,是水提多糖的4.3倍,是100 ℃条件提取黄精多糖的7.4倍。低共熔溶剂对黄精多糖具有降低分子量、提高抗氧化性等效果,研究结果可以为低共熔溶剂在多糖提取方面的应用提供参考。     

酸碱性和分子量对木耳多糖抗氧化活性及相关性的影响

为研究提取溶剂酸碱性和分子量对黑木耳多糖抗氧化活性的影响及其抗氧化相关性,本试验以野生黑木耳为原料制备黑木耳多糖,采用Labscale TFF System超滤系统对黑木耳多糖进行分子量分级,分别测定黑木耳多糖的得率、纯度和抗氧化活性,并使用SPSS软件分析黑木耳多糖分子量与抗氧化活性之间的相关性。结果表明,酸性未脱色黑木耳多糖的得率最高(12.48%),碱性脱色黑木耳多糖的纯度最高(68.78%),中性未脱色黑木耳多糖体外抗氧化活性最好。不同分子量中性未脱色黑木耳多糖抗氧化试验表明,分子量小于30 ku的黑木耳多糖(Sp3)抗氧化活性最好,抗氧化活性与Vc相近。其次是分子量为30 ku~100 ku的黑木耳多糖(Sp2),最差的是分子量大于100 ku的黑木耳多糖(Sp1),Sp3与抗氧化活性之间存在极显著相关(p0.01),本试验结果为深入开发黑木耳多糖抗氧化产品提供理论依据。     

不同体积分数乙醇沉淀桑黄胞内多糖的理化性质及抗氧化活性

研究桑黄胞内多糖醇沉过程中乙醇体积分数对多糖得率、纯度、理化性质和抗氧化活性等的影响。结果表明：随着乙醇体积分数的增加,沉淀粗多糖的得率增加,而粗多糖中多糖含量呈现不规则的变化;不同体积分数乙醇沉淀获得的桑黄多糖中均含有木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。扫描电镜图像显示,低体积分数（65%、75%、85%）乙醇沉淀的多糖呈现均匀球状,高体积分数（95%)乙醇沉淀的多糖连成大块片状。桑黄胞内多糖体外抗氧化能力存在明显的量-效关系,95%乙醇沉淀的多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基、2,2’-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）自由基的清除效果最好,对Fe3＋的还原能力最强,抗氧化活性最高。     

无机盐对湖北花楸叶多糖醇沉效率及其抗氧化性的影响

为了提高多糖的醇沉效率,本文探究了添加无机盐对多糖醇沉效率的影响。单因素实验考察了无机盐的种类及浓度、醇沉时间、乙醇体积倍数对湖北花楸叶中多糖醇沉效率的影响,最后通过正交试验对Na₂SO₄浓度、醇沉时间、乙醇体积三个主要因素进行了优化,并检测了湖北花楸叶多糖的红外光谱及其抗氧化活性。结果表明,当Na₂SO₄浓度为2.0%,添加5倍体积乙醇,醇沉12 h后,多糖得率为7.20%±0.12%,而不添加无机盐的多糖得率只有2.54%。红外光谱显示,无机盐的添加基本不影响湖北花楸叶多糖的结构。总抗氧化实验中,随着多糖浓度的增大,其对铁离子的还原性增强,当多糖浓度为2 mg/mL时,其对DPPH自由基、羟自由基的清除率分别达到了72.87%和68.39%,这说明所提多糖具有一定的抗氧化能力。以上结果表明,醇沉过程中添加一定量无机盐对湖北花楸叶提高多糖得率有明显的促进作用,并且花楸叶多糖可以作为潜在的抗氧化剂应用于食品中。     

芽球菊苣根粗多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性和相对分子量分析

目的:以印度芽球菊苣根为原料优化粗多糖的提取工艺,测定其抗氧化性及相对分子量。方法:考察料液比、水浴温度和水浴时间对菊苣根粗多糖得率的影响;采用Box-Behnken结合Matlab分析法优化粗多糖热水浸提法提取工艺;测定所提菊苣根粗多糖体外羟自由基清除能力和还原力;纯化后分析中性糖和酸性糖的平均相对分子量。结果:经过单因素和Box-Behnken设计优化试验,得到最佳提取工艺为:料液比2.74:100 g/mL,水浴温度72 ℃和水浴时间165 min,此时菊苣根粗多糖得率的理论预测值为40.32%,经验证实际值为39.99%±0.43%,与预测值差异不显著（P>0.05）;经Matlab分析,当提取时间取较高值（C=165 min）,料液比2.4:100～3.1:100 mL/g,水浴温度70～74 ℃,粗多糖得率可以取得较大值。按照上述最优工艺所提菊苣根粗多糖具备羟自由基清除能力（IC₅₀值为1.36 mg/mL）和Fe3+还原力（3 mg/mL对应吸光值0.21）,且与浓度呈现正相关。此外,采用高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）测得菊苣中性糖和酸性糖峰型良好,酸性糖峰高且窄表现出较高的纯度,中性糖和酸性糖平均相对分子量分别为10072.07和2388.13 Da。结论:Box-Behnken优化法结合Matlab分析法优化菊苣根粗多糖提取工艺切实可行,所提粗多糖不仅高得率,也兼具良好的体外抗氧化能力,其中,酸性糖纯度较高,中性糖分子量较大。     

芡实皮渣多糖的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

为了实现芡实加工副产物资源的高值化利用,优化芡实皮渣多糖的提取工艺参数,分析其理化性质,初步研究多糖的体外抗氧化活性。在单因素实验基础上,选择料液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为自变量,多糖得率为因变量,通过L₉(34)正交试验法优化芡实皮渣多糖的提取工艺。利用5种体外抗氧化活性测试方法,即总还原力,清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐,并与抗坏血酸进行对比,评价芡实皮渣多糖的抗氧化能力。结果表明:芡实皮渣多糖最佳提取工艺为料液比1:40、浸提温度55 ℃、浸提40 min、醇沉浓度80%,提取3次,得率45.94%,纯度82.67%。碘-碘化钾反应显示其属于非淀粉类多糖,HPLC分析显示该多糖的基本结构单元为葡萄糖。吸水性和吸油分别为(65.15±1.52)和(1.27±0.04) g/g,多糖凝胶质构特性结果显示其黏性很大,弹性较低,回复能力弱。多糖对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐具有一定的清除能力,当芡实皮渣多糖浓度为1.0 mg/mL时,对羟基自由基、超氧离子和亚硝酸盐的清除率分别为35.56%、34.88%和20.63%,对DPPH自由基清除率IC₅₀为(0.307±0.008) mg/mL;本研究优选的芡实皮渣多糖提取工艺稳定可靠,多糖具有一定的抗氧化能力,实验结果可为芡实加工副产物资源的综合开发利用提供理论基础。     

北沙参乙醇分级多糖的理化性质及抗氧化活性研究

采用水提醇沉法分级纯化得到4种北沙参多糖(GLP-30、GLP-50、GLP-70、GLP-剩余),采用傅里叶变换红外光谱、高效液相色谱、凝胶渗透色谱、扫描电镜以及差示扫描量热—热重分析等进行分析,并测定其抗氧化活性。结果表明:4种北沙参多糖均具有多糖的典型基团,但差示扫描量热结果相差较大;各多糖组分分子量随乙醇浓度的增加而降低;不同组分间的多糖得率及单糖含量有一定差异,其中GLP-50得率(5.43%)和半乳糖醛酸含量(2.03%)最高,蛋白含量(7.66%)较高,具有最高的保油性,在清除DPPH自由基和羟基自由基中表现出最高的抗氧化能力。乙醇分级沉淀的方法可用于分级纯化北沙参多糖组分,其中50%乙醇更适宜沉淀制备北沙参多糖,且所得多糖抗氧化性较强。     

不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化活性的影响。方法:采用热水提法、酶法和超声波法分别提取米邦塔仙人掌粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖纯度,以抗肝组织自发性脂质过氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基能力、总还原能力、总抗氧化能力6种方法作为体外抗氧化能力评价指标。结果:酶法提取的粗多糖得率最高,为10.14%;超声波法提取的粗多糖纯度最高,为47.62%;酶法和超声波法提取的粗多糖各项体外抗氧化指标的活性均高于热水提法。结论:米邦塔仙人掌粗多糖的体外抗氧化活性强弱与粗多糖的提取方法有关,酶法和超声波法提取的粗多糖具有较好的抗氧化活性。