溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞I型胶原合成的影响

目的探讨溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）对人肺成纤维细胞（HFL-1）I型胶原（procollagentype I,PCOL I）合成的影响。方法将HFL-1培养后置于6孔板中,随机分为6组：对照组,LPAI、Ⅱ、Ⅲ组（用1umol．L-1。的LPA刺激6、12、24h后收集细胞）,IL-13组（用100ug·L-1的IL-13作用48h后收集细胞）,LPA＋IL-13组（用1umol·L-1的LPA刺激12h、100ug·L-1的IL-13刺激48h后收集细胞）,每组3孔。用RT—PCR方法检测PCOLImRNA的表达;用免疫组化方法检测PCOLI蛋白的表达。结果免疫组化与RT—PCR方法均显示LPA刺激后,PCOLI的表达降低,IL-13刺激后,PCOLI的表达增高,且LPA＋IL-13组PCOLI表达比LPA组较高,比IL-13组较低。结论LPA可以下调HFL-1PCOLI的合成。     

吡格列酮对2型糖尿病患者血清脂联素、内脂素水平的影响

目的观察吡格列酮对2型糖尿病（T2DM）患者血清脂联素、内脂素的影响。方法对新诊断的49例T2DM患者（T2DM组）和50例健康体检者（对照组）采用病例对照及治疗前后自身对照的方法,比较2组治疗前及T2DM组经吡格列酮治疗12周后空腹血清脂联素、内脂素的水平。结果 T2DM组治疗前与对照组相比,脂联素水平下降[（6.4±1.1）mg·L^-1vs（12.3±2.8）mg·L^-1,P〈0.01],内脂素水平升高[（36.2±10.6）μg·L^-1vs（13.5±9.2）μg·L^-1,P〈0.01];治疗后T2DM组与治疗前比较,脂联素明显升高[（9.1±1.4）mg·L^-1vs（6.4±1.1）mg·L^-1,P〈0.05],而内脂素无明显变化[（34.5±11.4）μg·L^-1vs（36.2±10.6）μg·L^-1,fquP〉0.05]。结论吡格列酮治疗可改善T2DM所导致的脂联素水平改变,而对内脂素水平无明显影响。     

PM2.5对儿童骨髓基质细胞增殖及细胞因子G-CSF、GM-CSF分泌的影响

目的:研究大气细颗粒物(PM2.5)对儿童骨髓基质细胞(BMSCs)增殖及细胞因子分泌的影响,探讨PM2.5对儿童骨髓造血微环境的影响。方法:采用不同浓度的PM2.5溶液染毒提取后培养的BMSCs,检测BMSCs增殖和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)分泌量及m RNA表达水平。结果:随着PM2.5溶液浓度增加,BMSCs增殖逐渐增强,溶液浓度达到50μg/m L后BMSCs增殖水平逐渐下降,20μg/m L时试验组BMSCs的OD值各时间段均高于对照组,而100μg/m L时均低于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。低浓度(10、20μg/m L)PM2.5显著促进BMSCs分泌G-CSF、GM-CSF及m RNA表达,高浓度(50、100、200μg/m L)PM2.5抑制BMSCs分泌G-CSF、GM-CSF及m RNA表达,且浓度达到100μg/m L以上时,抑制效果达到显著水平。结论:高浓度PM2.5对儿童BMSCs具有一定的毒性作用。     

动态血糖监测系统对血糖控制良好的老年2型糖尿病患者血糖漂移的观察

目的观察动态血糖监测系统（CGMS）在动态监测血糖控制良好[糖化血红蛋白（HbA1c）≤6.5%]的老年2型糖尿病患者血糖漂移中的应用。方法对60例HbA1c≤6.5%的老年2型糖尿病患者采用CGMS进行72 h的血糖监测,分析其血糖漂移变化的情况。结果 60例患者中,18例（30.0%）患者血糖漂移至〈3.9 mmol·L^-1（2.1～3.8 mmol·L^-1）,其中14例（23.33%）为无症状性低血糖,血糖值为3.0～3.8 mmol·L^-1;4例有症状性低血糖,血糖值为2.1～3.8 mmol·L^-1。31例（51.67%）患者血糖漂移至〉11.1 mmol·L^-1（11.2～14.7 mmol·L^-1）,其中7例（11.67%）早餐后高血糖,血糖值为11.2～14.3 mmol·L^-1;10例（16.67%）中餐后高血糖,血糖值为11.5～14.6 mmol·L^-1;9例（15.00%）晚餐后高血糖,血糖值为11.2～14.0 mmol·L^-1;5例（8.33%）夜间高血糖,血糖值为11.5～13.9 mmol·L^-1。6例（10.00%）患者清晨空腹高血糖（〉7.0 mmol·L^-1）,血糖值为8.7～10.00 mmol·L^-1。5例（8.33%）患者血糖正常,血糖值为5.1～6.1 mmol·L^-1。平均血糖漂移幅度（MAGE）为4.0±1.5。结论血糖控制良好的老年2型糖尿病患者仍存在血糖漂移。CGMS可较全面地了解2型糖尿病患者治疗后血糖控制的情况,评估治疗效果,指导临床治疗,从而制定更为合理的治疗方案。     

HPLC法测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度

目的建立一种同时测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度的方法。方法采用迪马Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为：甲醇∶水=70∶30（v/v）,流速为1.0 mL·min^-1,紫外检测波长为320 nm,米非司酮为内标。取大鼠血样90μL进行血浆样品的处理,测定大鼠血浆中蛇床子素和欧前胡素的色谱行为、标准曲线、提取回收率、精密度和准确度、稳定性等。结果蛇床子素、欧前胡素在大鼠血浆中质量浓度测定方法的线性范围分别为10.94～700.00μg·L^-1和15.63～1 000.00μg·L^-1,线性关系均良好（r=0.999 8、0.999 9,均P〈0.05）。大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素最低可定量的质量浓度分别为10.94、15.63μg·L^-1（以s/n〉4计）。大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素低、中、高质量浓度的提取回收率分别为98.96%、95.30%、94.88%和98.23%、98.94%、97.99%,大鼠血浆蛇床子素和欧前胡素低、中、高质量浓度的RSD均〈15%。结论建立HPLC法具有检测简便、灵敏度高等优点,可快速、可靠地检测大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度。     

系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体的检测及其临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者抗心磷脂抗体（anti-cardiopin antibody,ACA）的检测及其临床意义。方法采用ELISA法检测69例SLE患者（SLE组）和50例健康体检者（正常对照组）的血清ACA水平,同时对SLE组患者进行抗核抗体（anti-nuclear antibody,ANA）、抗双链DNA抗体（an-ti-double stranded DNAantibody,dsDNA）、尿蛋白定性、补体C3、血小板计数等测定。结果 SLE组血清ACA阳性23例,阴性46例。SLE组血清ACA抗体水平为（13.18±11.53）kRU·L^-1,显著高于正常对照组的（5.01±2.67）kRU·L^-1（P〈0.01）。ACA阳性组ANA平均滴度高于ACA阴性组（1∶2 549.2 vs 1∶1 324.0）,但差异无统计学意义（P〉0.05）。ACA阳性组抗dsDNA、尿蛋白定性阳性率分别为60.9%、65.2%,均显著高于ACA阴性组的34.8%、30.4%（P〈0.05或P〈0.01）。ACA阳性组补体C3、血小板计数分别为（0.43±0.17）g·L^-1、（91.42±16.19）×10^9·L^-1,均显著低于ACA阴性组的（0.59±0.19）g·L^-1、（108.24±22.05）×10^9·L^-1（均P〈0.01）。结论 ACA在SLE的发病及病情发展起了重要的作用。它对SLE的诊断、病情严重程度的评价、判断预后及疗效观察等均有重要的临床意义。     

线粒体 DNA 诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的实验研究简

目的：观察线粒体 DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）刺激肺泡巨噬细胞后炎症因子的动态变化,探讨mtDNA 对肺泡巨噬细胞的致炎效应。方法取 SD大鼠肝脏组织用改良的碱变性法进行 mtDNA 的提取、纯化。将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）分为mtDNA组（5μg·mL-1,A组）,mtDNA组（10μg·mL-1,B组）,空白对照组（C组）,分别在 A、B组中加入mtDNA 5μg·mL-1、10μg·mL-1,在0、3、6、12和24 h时相点收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和 IL-6的表达水平。结果 A组和B组在3、6、12和24 h TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量显著高于C组（P＜0．01）,且在3、6、12和24 h 时B组的表达量高于 A组（P＜0．05）。结论 mtDNA 能够诱导肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β和 IL-6等炎症因子的表达,且呈剂量依赖性,推测mtDNA 具有促炎作用。     

不同的钙浓度透析液对维持性血液透析合并难治性高血压的影响

目的探讨不同的钙浓度透析液对维持性血液透析（MHD）合并难治性高血压的影响。方法 34例MHD合并难治性高血压患者按钙浓度透析液的不同分为2组：观察组和对照组,每组17例。观察组采用钙浓度为1.25mmol·L^-1透析液行血液透析治疗,对照组采用钙浓度为1.50mmol·L^-1透析液行血液透析治疗。观察2组治疗前、治疗3个月后血压（SBP、DBP）、平均动脉压（MAP）及血清钙、磷和全段甲状旁腺激素（iPTH）水平的变化情况。结果对照组治疗前、治疗3个月后SBP、DBP、MAP和血清iPTH水平均无明显变化（均P〉0.05）;观察组治疗3个月后SBP、DBP和MAP水平均较治疗前、对照组显著下降（均P〈0.05）,血清iPTH水平较治疗前、对照组明显升高（P〈0.05）。2组治疗前、治疗3个月后血清钙、磷水平均无明显变化（均P〉0.05）。结论在充分血液透析、合理联合应用降压药等措施的基础上,低钙透析液透析有助于MHD患者高血压的控制,且低钙透析液透析是另一种有效的治疗措施。     

山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L~(-1)、100 g·L~(-1)、200 g·L~(-1),400 g·L~(-1)、600 g·L~(-1)、800 g·L~(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L~(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L~(-1)、300g·L~(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(<200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(>200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。     

紫草多糖对培养大鼠颗粒细胞生成甾体激素的影响

目的研究中药紫草的水溶成分——紫草多糖对体外培养颗粒细胞的直接作用。方法分离出大鼠双侧卵巢的颗粒细胞进行体外培养。选取健康未成年雌性SD大鼠160只,其中60只按随机数字表法分为基础组和hCG组,分别采用不同浓度（0.00、0.30、0.75、1.50、3.00、7.50 g·L^-1）紫草多糖培养,每组5只;另100只按随机数字表法分为空白对照组、紫草多糖组、hCG组和hCG-紫草多糖组,分别进行不同时间（0、1、2、3、4 h）的培养,每组5只,共计100只。采用放射免疫测定法（RIA）测定不同实验组颗粒细胞培养液中孕酮（Progesterone,P4）和雌二醇（Estradiol,E2）的浓度。结果紫草多糖呈剂量依赖性地抑制hCG刺激下颗粒细胞P4和E2的生成,大剂量（大于3.00 g·L^-1）也抑制基础P4和E2的生成,紫草多糖主要使培养液中的P4含量降低,但大剂量也可使细胞内的P4含量降低。紫草多糖作用于颗粒细胞1 h后明显抑制hCG促P4生成的作用,但细胞洗涤后再培养,对hCG的反应性与对照组比较无明显变化。结论紫草多糖可直接作用于体外培养的颗粒细胞,抑制hCG促甾体激素生成的作用,该抑制作用起效时间短,并且是可逆的。     

β-胡萝卜素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究β-胡萝卜素（β-C）对高糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法在血管内皮细胞长至80%以上融合时,将其分为5组：正常对照组、高糖损伤组及低、中和高剂量β-C组,每组6个复孔。正常对照组加入10%葡萄糖注射液5.5mmol·L^-1,高糖损伤组加入10%葡萄糖注射液33mmol·L^-1,低、中和高剂量β-C组分别加入β-C 10、20、40μmol·L^-1＋10%葡萄糖注射液33mmol·L^-1。各组放置5%CO2培养箱中培养48h后,收集细胞或培养液进行实验。使用酶联免疫检测仪、采用MTT比色法检测5组血管内皮细胞存活率,采用流式细胞仪检测血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中活性氧（ROS）水平,使用全自动生化仪、采用乳酸→丙酮酸连续监测法检测5组血管内皮细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性,使用全自动生化仪、采用硫代巴比妥酸比色定量法检测5组血管内皮细胞培养液中丙二醛（MDA）的水平;先参照NO检测试剂盒的使用说明书进行实验,后采用酶联免疫检测仪检测5组血管内皮细胞培养液中NO水平。结果与正常对照组比较,高糖损伤组的血管内皮细胞存活率、血管内皮细胞培养液中NO水平均明显降低,血管内皮细胞培养液中LDH活性、MDA水平,血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中ROS水平均明显升高（均P〈0.01）;与高糖损伤组比较,中、高剂量β-C组的血管内皮细胞存活率、血管内皮细胞培养液中NO水平均明显升高,血管内皮细胞培养液中LDH活性、MDA水平及低、中和高剂量β-C组的血管内皮细胞凋亡率、血管内皮细胞中ROS水平均明显降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论β-胡萝卜素对高糖诱导的脐静脉内皮细胞的损伤具有保护作用,其机制可能与增加NO水平和促进ROS的降解有关。     

熊果酸对顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨熊果酸对体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响。方法将熊果酸作用于体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,采用MTT法检测不同浓度的熊果酸（0、10、20、40、50、60、80μmol.L-1）对SKOV3/DDP细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术检测SKOV3/DDP的细胞凋亡和细胞周期。结果不同浓度的熊果酸对体外培养的SKOV3/DDP细胞均有明显的抑制增殖作用,并呈剂量、时间依赖效应（均P〈0.05）,熊果酸（60μmol.L-1）作用于SKOV3/DDP细胞48 h后,达到最大细胞凋亡率（31.22±1.98）%;熊果酸可影响SKOV3/DDP细胞增殖周期中的G0/G1期,使细胞在此期停滞,诱导其发生凋亡。结论熊果酸对体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。     

三氧化二砷对耐伊马替尼K562细胞株增殖、凋亡和bcr/abl基因表达的影响

目的观察三氧化二砷（ATO）对耐伊马替尼K562（K562G）细胞增殖、凋亡和bcr/abl融合基因（bcr/abl基因）表达的影响。方法用不同浓度的伊马替尼（STI571）（0.25、2.50、10.00μmol.L-1）、ATO（1.0、5.0、10.0μmol.L-1）以及两者联合作用于K562G细胞,用MTT比色法测定药物对K562G细胞生长抑制率的影响、PI单染色法流式细胞仪检测K562G细胞凋亡率、荧光定量PCR检测K562G细胞bcr/abl基因的表达水平。结果 STI571作用于K562G细胞的细胞生长抑制率、细胞凋亡率和bcr/abl基因水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,ATO作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）,bcr/abl基因表达水平明显降低（P〈0.05）;细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度5.0μmol.L-1时最明显。ATO＋STI571联合用药作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组以及单用ATO组比较差异有统计学意义（均P〈0.05）,细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度ATO（5.0μmol.L-1）＋STI571（2.50μmol.L-1）时最明显,bcr/abl基因水平降低比单用ATO组更明显（P〈0.05）。结论 K562G对≤10.0μmol.L-1浓度的STI571耐药;ATO能明显抑制K562G细胞生长和诱导K562G细胞凋亡,使K562G细胞bcr/abl基因表达水平降低;ATO与STI571联合用药作用于K562G细胞时,细胞抑制率和细胞凋亡率比单用ATO效果好,bcr/abl基因表达水平降低更明显,两者有协同作用。     

熊果酸对大鼠体内瑞舒伐他汀的药代动力学影响

目的：探讨熊果酸对大鼠体内瑞舒伐他汀的药代动力学影响。方法12只雄性 SD 大鼠（200～235 g）按随机数字表法分为2组,分别为单用瑞舒伐他汀组与瑞舒伐他汀合用熊果酸组,每组6只,以瑞舒伐他汀100 mg· kg^-1、熊果酸80 mg·kg^-1的剂量灌胃给药,两药合用时先熊果酸后瑞舒伐他汀相继灌胃。采用 LC-MS 测定血药浓度,比较2组间药代动力学参数。结果合用熊果酸后,瑞舒伐他汀药代动力学参数 Cmax、AUC0-t、AUC0-∞参数值分别增加163．02％、145．99％和157．55％,而 CLz/F 值降低了57．84％（P ＜0．05或 P ＜0．01）。结论熊果酸可影响大鼠体内瑞舒伐他汀的药代动力学特性。     

中和低剂量重组人凝血因子Ⅷ防治血友病A关节出血的疗效

目的 比较中、低剂量重组人凝血因子Ⅷ防治血友病A关节出血的临床疗效.方法将58 例血友病A患儿按预防剂量的大小分为2组：中剂量组（28例）和低剂量组（30例）.中剂量组采用重组人凝血因子Ⅷ15～25 ·kg-1静脉推注,3次周-1,连用4个月;低剂量组采用重组人凝血因子Ⅷ＜15 U·kg-1静脉推注,3次＆#183;周-1,连用4个月.观察2组防治前、防治4个月后关节出血次数的情况.结果 2组防治4个月后关节出血次数明显低于防治前（P＜0.05）,中剂量组防治4个月后关节出血次数明显低于低剂量组（P＜0.05）.结论 重组人凝血因子Ⅷ用于防治血友病A能明显改善关节出血症状,且中剂量防治优于低剂量.