发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

黄姜总皂苷的提取及其水解条件

以薯蓣皂苷元的得率为指标,采用高效液相色谱法测定其含量,通过单因素试验考察了影响黄姜总皂苷提取和水解的主要因素。结果表明,样品中薯蓣皂苷元适宜的色谱分析条件为色谱柱Hyper-sil ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相,体积流量1.0 mL/min,进样量20μL,柱温常温,检测波长208 nm,此时薯蓣皂苷元在0.05～2.0 mg/mL峰面积与其质量浓度具有很好的线性关系(r=0.999 4);黄姜总皂苷提取的最佳工艺条件为乙醇体积分数70%,料液比1∶8,回流提取3次,每次2 h;黄姜总皂苷水解的最佳工艺条件为硫酸浓度2 mol/L,硫酸用量为30 mL,水解时间4 h。本方法简便易行,适用于工业化生产。     

黄姜总皂苷的提取及其水解条件

以薯蓣皂苷元的得率为指标,采用高效液相色谱法测定其含量,通过单因素试验考察了影响黄姜总皂苷提取和水解的主要因素。结果表明,样品中薯蓣皂苷元适宜的色谱分析条件为色谱柱Hyper-sil ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相,体积流量1.0 mL/min,进样量20μL,柱温常温,检测波长208 nm,此时薯蓣皂苷元在0.05～2.0 mg/mL峰面积与其质量浓度具有很好的线性关系(r=0.999 4);黄姜总皂苷提取的最佳工艺条件为乙醇体积分数70%,料液比1∶8,回流提取3次,每次2 h;黄姜总皂苷水解的最佳工艺条件为硫酸浓度2 mol/L,硫酸用量为30 mL,水解时间4 h。本方法简便易行,适用于工业化生产。     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法分离纯化穿山龙薯蓣皂苷的酶解产物,硅胶柱中的流动相为氯仿与甲醇的不同比例,经硅胶柱分离得到薯蓣皂苷酶解产物的两种单体,为产物Ⅰ和产物Ⅱ,用薄层层析法和高效液相色谱法检测,得到产物Ⅰ为3-（O） -（β-D-吡喃葡萄糖基） -薯蓣皂苷元,得率为17.85%,纯度为69.41%.同时得到产物Ⅱ,得率为1.64%.产物2为反应副产物,其结构、性质及药理作用有待于进一步研究.     

齐墩果酸类似物合成及其体外抗肿瘤活性研究

采用计算机辅助设计,将尿激酶型纤溶酶原激活物受体与已知活性的化合物进行模拟分子对接,并采用对靶蛋白上具有活性作用的重要氨基酸残基进行解析的方法,确定能与活性位点结合的基团.以天然产物齐墩果酸为母体,在其2位上引入活性基团,同时对其C-28位羧基进行胍基化结构修饰,设计并合成一系列具有一定抗肿瘤活性的齐墩果酸类似物.采用MTT法进行初步的体外抗肿瘤活性筛选.采用FPIA法,对Ⅰ₁和Ⅰ₃进行尿激酶受体抑制试验.合成了5个新的齐墩果酸类似物,其结构经过NMR确证;活性测试表明化合物Ⅰ₁、Ⅰ₃与阳性对照药物相比表现更强的抑制作用.FPIA测试表明,化合物Ⅰ₃与尿激酶受体蛋白具有较好的结合能力.     

植物来源穿山龙皂苷酶的分离提纯及其酶性质

对从麦麸中提取的穿山龙薯蓣皂苷酶进行分离提纯并对其酶性质进行鉴定.结果表明,该酶的分子质量约为65 ku;该酶不仅能水解穿山龙薯蓣皂苷的α-鼠李糖基,也能水解人参皂苷Rc的20-O-α-阿拉伯糖基和3-O-β-葡萄糖基,酶反应的最佳温度为40℃,最适pH值为5.     

3种黄姜薯蓣皂苷定向转化为皂素方法的比较

比较了细菌直接发酵法、真菌直接发酵法以及传统的酶水解法转化黄姜薯蓣皂苷成为皂素。细菌直接发酵法转化率仅为20%,并且使薯蓣皂苷侧链糖基数量增加;真菌直接发酵法水解薯蓣皂苷侧链糖基效果不理想,转化率仅达到30%;酶水解法定向转化薯蓣皂苷成薯蓣皂素的效果最佳,转化效率高达95%,是一种高效的转化方法。     

3种黄姜薯蓣皂苷定向转化为皂素方法的比较

比较了细菌直接发酵法、真菌直接发酵法以及传统的酶水解法转化黄姜薯蓣皂苷成为皂素。细菌直接发酵法转化率仅为20%,并且使薯蓣皂苷侧链糖基数量增加;真菌直接发酵法水解薯蓣皂苷侧链糖基效果不理想,转化率仅达到30%;酶水解法定向转化薯蓣皂苷成薯蓣皂素的效果最佳,转化效率高达95%,是一种高效的转化方法。     

穿山龙薯蓣皂苷的分离提纯

研究穿山龙薯蓣总皂苷提取条件的确定及其分离提纯。实验中确定皂苷提取的最适酒精度、最适温度和最佳时间分别为95%、50℃和6h,总皂苷得率为2.4%。用柱层析对薯蓣皂苷单体进行分离提纯,得率为样品的19.6%。用TLC检测样品,确定得到样品为3 O {α L 鼠李糖 (1→4) [α L 鼠李糖 (1→2)] β D 葡萄糖} 薯蓣皂苷元。最后用HPLC法检测其纯度为90%左右。     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱),得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测,纯化的单体皂苷1为3 (O) (β D 吡喃葡萄糖基) 薯蓣皂苷,得率为样品的33.95%,用高效液相色谱法检测其纯度为93.82%。产物2的结构和特征有待进一步研究。     

菲并咪唑-水杨醛席夫碱分子探针对 Fe3+、Cr3+、Al3+的检测

基于菲并咪唑-水杨醛合成了分子探针SL,并用NMR、IR对其结构进行了确证。实验结果表明,探针SL对三价金属离子铁、铬、铝(Fe~(3+)、Cr~(3+)、Al~(3+))的识别具有较好的选择性和较高的灵敏度,并且几乎不受一价、二价离子的干扰。使用Job’s Plots法证明,探针SL与Fe~(3+)、Al~(3+)的结合比均为1:1,与Cr~(3+)的结合比为2:3,对Fe~(3+)、Cr~(3+)、Al~(3+)的检出限分别为3.09×10~(-8),4.82×10~(-8),2.89×10~(-8)mol/L。利用荧光光谱法探讨了探针SL对剧毒Cr~(3+)的检测行为,发现探针SL对Cr~(3+)离子有较好的选择性和灵敏度,是一种具有潜在应用价值的Cr~(3+)荧光探针。     

硫酸法提取黄姜中皂苷元的清洁生产研究

对提取黄姜中薯蓣皂苷元的清洁生产进行探讨,研究了水解最佳条件和水解液的循环利用.实验结果表明：在固定预发酵时间24 h,发酵温度40 ℃,水解时间4 h,萃取时间5 h的条件下,硫酸溶液浓度为1 mol/L、用量200 mL时,皂苷元收率最高为2.402%;水解液可以循环利用6次.采用此工艺,每生产1 t薯蓣皂苷元,可节约水246 m^3,节省硫酸（ρ=1.84 g.m3）11.6 m^3,少排放污水305 m^3.     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法分离纯化穿山龙薯蓣皂苷的酶解产物,硅胶柱中的流动相为氯仿与甲醇的不同比例,经硅胶柱分离得到薯蓣皂苷酶解产物的两种单体,为产物Ⅰ和产物Ⅱ,用薄层层析法和高效液相色谱法检测,得到产物Ⅰ为3-(O)-(-βD-吡喃葡萄糖基)-薯蓣皂苷元,得率为17.85%,纯度为69.41%。同时得到产物Ⅱ,得率为1.64%。产物2为反应副产物,其结构、性质及药理作用有待于进一步研究。     

植物来源穿山龙皂苷酶的分离提纯及其酶性质

对从麦麸中提取的穿山龙薯蓣皂苷酶进行分离提纯并对其酶性质进行鉴定．结果表明，该酶的分子质量约为65km该酶不仅能水解穿山龙薯蓣皂苷的α-鼠李糖基，也能水解人参皂苷Rc的20-O-α-阿拉伯糖基和3-O-β-葡萄糖基，酶反应的最佳温度为40℃，最适pH值为5．     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱)，得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测，纯化的单体皂苷1为3-(O)-(β-D-吡喃葡萄糖基)-薯蓣皂苷，得率为样品的33．95％，用高效液相色谱法检测其纯度为93．82％。产物2的结构和特征有待进一步研究。     

穿山龙薯蓣皂苷的分离提纯

研究穿山龙薯蓣总皂苷提取条件的确定及其分离提纯。实验中确定皂苷提取的最适酒精度、最适温度和最佳时间分别为95％、50℃和6h．总皂苷得率为2．4％。用柱层析对薯蓣皂苷单体进行分离提纯，得率为样品的19．6％。用TLC检测样品，确定得到样品为3．O-{α-L-鼠李糖-(1→4)-[α-L鼠李糖-(1-2)]-β-D葡萄糖}-薯蓣皂苷元。最后用HDLC法检测其纯度为90％左右。     

细菌发酵产黄姜薯蓣皂苷元的分离纯化

黄姜经细菌发酵水解其薯蓣皂苷糖基,产物皂苷用正丁醇萃取法收集;采用经硅胶柱层析法分离纯化转化的皂苷,得到两种转化的单体皂苷产物Ⅰ和产物Ⅱ。采用薄层层析法及高效液相色谱法进行检测,得知产物Ⅰ为目的产物薯蓣皂苷元,得率为20%,纯度为96.9%,产物Ⅱ的结构和特征有待进一步研究。     

细菌发酵产黄姜薯蓣皂苷元的分离纯化

黄姜经细菌发酵水解其薯蓣皂苷糖基,产物皂苷用正丁醇萃取法收集;采用经硅胶柱层析法分离纯化转化的皂苷,得到两种转化的单体皂苷产物Ⅰ和产物Ⅱ。采用薄层层析法及高效液相色谱法进行检测,得知产物Ⅰ为目的产物薯蓣皂苷元,得率为20%,纯度为96.9%,产物Ⅱ的结构和特征有待进一步研究。     

硫酸法提取黄姜中皂苷元的清洁生产研究

对提取黄姜中薯蓣皂苷元的清洁生产进行探讨,研究了水解最佳条件和水解液的循环利用。实验结果表明:在固定预发酵时间24 h,发酵温度40℃,水解时间4 h,萃取时间5 h的条件下,硫酸溶液浓度为1 mol/L、用量200 mL时,皂苷元收率最高为2.402%;水解液可以循环利用6次。采用此工艺,每生产1 t薯蓣皂苷元,可节约水246 m3,节省硫酸(ρ=1.84 g/m3)11.6 m3,少排放污水305 m3。