吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究

对从自然界分离得到的Microbacterium sp．OU01进行发酵,制得粗酶液（壳聚糖酶和伊肛氨基葡萄糖苷酶混合液）,采用吸附交联法及包埋法对其进行固定,研究其固定化的最优条件和固定化酶的酶学性质。结果表明,游离混合酶液的最佳PH为5．6,最适反应温度为50℃。吸附交联法固定化酶的最佳条件为：戊二醛体积分数5．0％,加酶量15mL（49．51U／mL）,固定化时间6h。该条件下制得的固定化酶的最适pH为4．5,最适反应温度为60℃。包埋法固定化酶的最佳条件为：海藻酸钠质量浓度10g／L,CaCl。质量浓度15g／L,加酶量为1mL（50．35U／mL）／5mL质量浓度10g／L海藻酸钠,固定化时间20min。该条件下制得的固定化酶的最适PH为5．0,最适反应温度为50℃。固定化酶酶解壳聚糖所得产物中含D-氨基葡萄糖,说明粗酶液中的壳聚糖酶和外切-β-D-氨基葡萄糖苷酶被同时固定。通过对游离酶和固定化酶稳定性的研究,表明吸附交联固定化酶更适于工业化应用生产D-氨基葡萄糖。     

双歧杆菌与酸奶菌的混合发酵中菌种配比的研究

选用耐氧驯化过的双歧杆菌分别与不同来源的酸奶菌种进行混合发酵。比较了不同接种量对制作的发酵乳在保存期内所含双歧杆菌活菌的影响。实验表明：在双歧杆菌接种量不大（体积分数2％）的情况下,可在发酵乳中获得可观的双岐杆菌。在10天内,双歧杆菌活菌数达10^8cfu/mL,随着时间的延长,至15天,双歧杆菌活菌数仍可达10^7-8cfu/mL。     

双氯芬酸钠缓释微胶囊的制备与表征

以乙基纤维素为壁材,采用乳化-溶剂扩散技术制备双氯芬酸钠缓释微胶囊,通过考察包封率和载药量确定其制备工艺,并对微胶囊的形态和释放度等理化性能进行表征．结果表明,当有机相中乙基纤维素的质量浓度为3×10^-2g／mL,水相中乳化剂十二烷基硫酸钠的质量浓度为3×10^-3g／mL,双氯芬酸钠与乙基纤维素的投料比mEC：mDs为1：1,搅拌速度900r／min时制备出的微胶囊形态圆整,粒径范围6～24gm,药物包封率达25．12％,在人工肠液中可平稳缓释达8h．     

壳聚糖海藻酸钠微胶囊制备研究

对壳聚糖-海藻酸钠复凝聚法制备微胶囊的工艺进行了研究，考察了微胶囊在模拟胃液环境中的控制释放效果．单因素实验和正交实验得出：壳聚糖的浓度对微胶囊的包埋率和载药量影响最大．最佳制备条件：壳聚糖浓度为0．5％、海藻酸钠浓度为1．5％、氯化钙浓度为5％、壳聚糖溶液的pH为5．5。     

影响硫酸盐还原菌固定化小球还原性能的研究

研究硫酸盐还原菌（SRB）固定化小球还原性能的影响因素.采用海藻酸钙包埋法来固定硫酸盐还原菌株,分析不同因素对固定化SRB小球还原硫酸盐效率的影响.实验结果表明,SRB固定化最佳时间是菌株增殖64h;最佳包埋条件为：海藻酸钠4%、菌液浓度30%、CaCl2溶液浓度4%;小球在氯化钙溶液中的最佳凝胶化时间为4 h;小球的最佳颗粒粒径为1 mm;最佳环境因素是：温度35℃、pH6.5～7.0、球液配比量1∶10.不同因素下固定化SRB小球对硫酸盐的还原效率最高可达98.76%.     

固定化重组大肠杆菌细胞催化合成靛蓝

为提高表达黄素单加氧酶(FMO,E.C.1.14.13.8)的重组菌E.coli BL21(pET28a-fmo)转化吲哚的效率,采用包埋法对重组菌进行了固定化研究。采用常规的固定化方法,分别使用卡拉胶、明胶、聚乙烯醇、海藻酸钠对重组大肠杆菌进行包埋并分析各自对吲哚的转化效果,确定了海藻酸钠是较好的固定化载体。随后对海藻酸钠固定化条件进行研究,得到合适的条件是:海藻酸钠浓度为2.0%,CaCl2浓度为2.0%,固定化时间8h,细胞包埋量50g/L。采用该方法制备的固定化细胞靛蓝的转化率为58.6%,固定化后重组E.coli细胞的耐热性明显提高,且具有较好的操作稳定性,重复催化第8次的转化率为第1次的29.5%,说明固定化细胞转化法确实提高了重组细胞的转化吲哚合成靛蓝的效率。     

双歧杆菌微胶囊热稳定性研究

温度是影响双歧杆菌微胶囊稳定性的重要因素之一。本文采用了经典加速实验法和恒温储存实验法对双歧杆菌微胶囊的热稳定性进行考察,结果如下：受试双歧杆菌微胶囊经恒温37℃/RH60％－65％保存3个月（相当于常温下保存1年）,双歧菌存活率高达59．4％,37℃下保存5个月12天后,其活菌存活率仍能保持在10％,25℃下可保存超过1年9个月,热稳定性明显优于未经包囊菌粉。     

蜂胶对牛乳保鲜作用的研究

以蜂胶对牛乳的保鲜作用为基础,探讨了蜂胶的添加方式和浓度对牛乳的酸度和细菌总数的作用效果．将0．2％的蜂胶添加到经巴氏灭菌（65℃,30min）后的牛乳中,牛乳酸度变化最慢,在保质期内可控制到17．5。T,细菌总数可以控制在8．5×10^8个cfu／mL．该研究为蜂胶保鲜剂在牛乳中的应用提供了理论参考．     

双歧杆菌的胶囊化研究

本研究对双歧杆菌进行了胶囊化包埋,使其活体细胞固定在海藻酸钠形成的胶囊内;同时进行了保存过程中活菌数测定,4～8℃冰箱中保存的胶囊42d仍可达活菌数9.1×10~7cfu/g,对于工业化生产很有意义。     

响应面分析法优化固定化细胞转化DL-ATC生产L-半胱氨酸工艺条件

利用SAS软件的Plackett-Burman试验设计法及响应面分析法，对海藻酸钙固定化假单胞菌（Pseudomonassp．）HY1040转化DL-2-氨基-△^2-噻唑啉-4-羧酸（DL—ATC）生产L-半胱氨酸的工艺条件进行了优化，得到较佳的转化工艺条件：固定化细胞接种量为25．5mL，DL-ATC质量浓度为1．0％，固定化细胞增殖时间为12．9h．经5批次转化试验考察，固定化细胞比酶活力平均达934u／mL，较优化前提高38．9％．经连续转化4批次，底物转化率仍可保持在初始值的91．0%以上．     

正交法优化保加利亚乳杆菌冻干保护剂

通过单因素实验和正交试验设计,研究了乳糖、脱脂乳粉、蔗糖和抗坏血酸钠等4种物质对保加利亚乳杆菌的冻干存活率及菌粉活菌数的影响,确定了适合保加利亚乳杆菌的最佳冻干保护剂配方．结果表明,4种物质的保护效果依次为：蔗糖〉脱脂乳粉〉抗坏血酸钠〉乳糖;最佳保护剂的配方为：30％蔗糖＋209／6脱脂乳粉＋4．0％抗坏血酸钠＋20％乳糖．加入冻干保护剂后,保加利亚乳杆菌冻干后存活率可达94％,菌粉的活菌数达1．926×10^11 cfu／g．     

海藻酸钠固定化胰蛋白酶的研究

研究了以海藻酸钠为载体固定化胰蛋白酶的条件,并考察了固定化酶的最适pH、最适温度、储存时间及反复利用稳定性。结果表明:最适固定化条件为CaC12质量分数为3.0%,海藻酸钠质量分数为3.0%,酶液量与海藻酸钠体积比为1∶2,固定化时间为3.0 h;固定化胰蛋白酶最适pH为9.0,最适温度为60℃,较游离酶分别提高1.0和10℃;4℃下保存30 d,活性保留96%以上;连续反应6次,活性保留52%。     

兔肉发酵火腿的研制

以兔腿肉为原料,经腌制、发酵,采用L9（3）^4正交试验,研制兔肉发酵火腿,测定其pH值、游离氨基酸和三甲胺-氮含量,建立发酵菌株的最佳组合。结果表明当菌株L26、C18、Y163之间的比例为3：3：2,接种量为3×10^7cfu／g、3×10^7cfu／g、2×10^7cfu／g,发酵温度30～35℃时,火腿中的游离氨基酸含量高,品质最好。     

腐乳后酵过程中辐照处理对其微生物指标的影响

腐乳粗放式的手工生产致使成品中检出的微生物种类繁多,影响了腐乳的质量．本实验采用60Co—y射线对腐乳进行辐照处理,研究后酵时间和温度对其细菌总数、霉菌总数和大肠菌群数的影响．结果表明：后酵120d的腐乳经3k6y辐照3h后,在25℃下储藏60d,细菌总数为2．09×10^4g-1,霉菌总数为1．94×10^4g-1,且细菌总数和霉菌总数比来辐照腐乳的分别减少了26．77％～27．12％、25．11％-29．06％;证明辐照处理可作为控制腐乳中微生物指标的措施之一．有助于保持腐乳的品质．     

Influence of Lactobacillus E1 on the storage stability in emulsion immobilization

A coacervation method with double emulsion strategy (w/o/w) was used to prepare immobilized Lactobacillus E1. Diatomite was chosen as the carrier for bacteria. Sodium alginate, dextrin and gelatin were used as protective solutes for the preservation of Lactobacillus E1 and their effects on the storage viability during storage were discussed. The influence of storage temperature on the storage viability was also examined. The results show that high bacteria viable count over 10⁹ cfu/g for an extended shelf life of 37 d can be achieved with 2% sodium alginate, 5% dextrin and 4% gelatin as protective solutes, at 10°C of the storage temperature. This immobilized Lactobacillus E1 has potential use as functional food ingredient for both human dairy food and animal feedstuff. Funded by the National Natural Science Foundation of China (No. 30670566) and the ISTCP (No. 2006DFA33150)     

载花青素微胶囊的制备及其抗氧化性能

为了提高花青素（Cy）的稳定性，首先以紫甘蓝为原料，提取并纯化得到了高纯度Cy粉末，然后利用微胶囊技术制备了海藻酸钠/壳聚糖载花青素微胶囊（CyMCs）。研究结果表明:当海藻酸钠质量分数为1.0%，氯化钙质量分数为1.0%，壳聚糖质量分数为0.5%时，制备的CyMCs包封率可高达97.42%；CyMCs对羟基自由基清除率达50%时的质量浓度为84 μg/mL。将Cy微囊化不仅能充分发挥其抗氧化活性的特点，同时可延长食品的保质期。     

响应面法优化海洋枯草芽孢杆菌HS-A38增殖发酵培养基

在摇瓶培养条件下,优化提高海洋枯草芽孢杆菌菌体浓度的发酵培养基组分。采用Plackett-Burman法确定了影响菌体浓度的显著性因子,即葡萄糖和ZnSO4;通过最陡爬坡实验逼近这两个重要因子的最大响应稳定区域,采用中心组合实验确定显著性因子的最佳水平,并用Design expert 7.13软件进行回归分析。优化后培养基的组成为:葡萄糖8.49g/L,豆粕粉12.0g/L,尿素0.625g/L,酵母膏4.0g/L,K2HPO44.0g/L,ZnSO40.053g/L。优化后的活菌浓度达到1.64×109 cfu/mL,与优化前菌体浓度(7.22×108 cfu/mL)相比,提高了1倍多。通过统计优化培养基组分可有效提高海洋枯草芽孢杆菌HS-A38的发酵液菌体浓度。     

不同分子量超高脱乙酰度壳聚度糖的制备

将甲壳素分别在含硼氢化钠的氢氧化钠-正戊醇中和氢氧化钠-水中进行脱乙酰反应,再将得到的壳聚糖用过氧化氢-水反应体系降解,制得不同分子量的超高脱乙酰度壳聚糖.在氢氧化钠-正戊醇中制备的壳聚糖分子量介于24万和35万之间,在氢氧化钠-水中制备的壳聚糖分子量介于81万和100万之间.实验结果表明:在氢氧化钠-正戊醇体系中反应5 h或在氢氧化钠-水体系中反应6 h所制备壳聚糖的脱乙酰度均达98%以上,在脱乙酰反应中,延长反应时间脱乙酰度增大;采用过氧化氢-水反应体系降解壳聚糖时,影响壳聚糖分子量的因素包括过氧化氢与壳聚糖的投料比、反应温度及反应时间,而过氧化氢与壳聚糖的投料比是主要的影响因素.改变这些影响因素,可制备出分子量介于3.2万和56万之间的壳聚糖.