人结直肠癌中两种新分子生物标记物的筛选

为挖掘结直肠癌早期病变的生物标记物,通过对高通量组织芯片上进行优化的多重免疫组织化学染色,观察比对了TATA序列结合蛋白相关因子1 (TATA-box binding protein associated factor 1 like,TAF1L)和stomatin家族蛋白1 (stomatin-like protein 1,STOML1)在结直肠癌组织和相匹配的癌旁正常组织之间的表达差异,检测了其表达水平与癌组织的不同临床分期、病理分级和tumor-lymph node-metastasis(TNM)分期的关系.结果显示,相比癌旁正常组织,TAF1L蛋白质在癌组织中呈高表达,差异具有统计学显著性意义(P 0. 000 1),并可随原位病灶的恶化显现明显的表达改变; STOML1蛋白质的表达水平在癌组织中差异无明显统计学意义(P 0. 05).结果显示,TAF1L蛋白质的异常高表达与结直肠癌的发生发展可能存在直接的关联,有可能成为结直肠癌早期诊断、精准治疗和预后判定的新分子标记物.     

结直肠癌中原癌基因DEK与IMP3/Ezrin通路的相关性

前期研究表明:IMP3/Ezrin基因是上皮细胞-间质细胞转换(EMT)中的主要构成基因,DEK可以影响结直肠癌细胞的迁移、粘附和侵犯等生物学行为。为了进一步研究DEK与IMP3/Ezrin在结直肠癌中的相关性,首先分析检测了255例结直肠癌和120例癌旁组织蜡块中DEK与IMP3/Ezrin的蛋白水平表达及15例结直肠癌及其癌旁新鲜组织中DEK与IMP3/Ezrin的mRNA水平表达,继而检测结直肠癌细胞中DEK基因敲除前后DEK/IMP3/Ezrin蛋白和mRNA水平变化。结果显示:DEK、IMP3/Ezrin蛋白在255例结直肠癌组织与120例癌旁良性组织中的阳性表达率有明显差异,而15例结直肠癌及癌旁新鲜组织中三种基因mRNA水平以及结直肠癌细胞系中三种基因的蛋白水平也呈现相近的趋势。利用RNAi将DEK进行敲除结果显示:DEK敲除后4种结直肠癌细胞系中的IMP3 mRNA均明显下调,而Ezrin mRNA均明显上调。由此推测,DEK可能通过调节IMP3/Ezrin信号通路相关蛋白促进结直肠癌的演进。     

检测结直肠癌患者血清中长链非编码RNA-SchLAP1和DEK表达的临床意义

为了研究长链非编码RNA-Sch LAP1在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达及临床意义,收集CRC患者血清标本60例、健康人血清标本20例,利用RT-PCR方法检测Sch LAP1和DEK的表达情况,分析二者与CRC患者临床病理学参数及生存期的相关性。结果显示,Sch LAP1和DEK在CRC患者血清中的表达水平均明显高于健康人群;Sch LAP1高表达率与临床分期明显相关,而DEK高表达与组织分化程度及临床分期明显相关,两种基因的高表达率经Spearmans检验具有明显相关性;Sch LAP1和DEK同时高表达的患者5年生存率和无瘤生存率明显低于单独一种表达或两种均不表达者。因此,检测血清中Sch LAP1和DEK基因的表达对评估CRC预后均有一定的临床意义,二者同时检测时价值更明显。     

结直肠癌根治术患者预后影响因素

为了探讨分析结直肠癌根治术患者预后影响因素，对丹东地区行根治切除术的结直肠癌患者186例生存率以及影响生存率的相关因素进行统计学分析。结果显示，肿块大小、组织分化程度和血清CEA水平对结直肠癌的生存率影响显著；而浆膜侵犯、淋巴结检出率和临床分期是影响结直肠癌预后的独立风险因素。因此，提高术前上述因素的临床病理学判断能力、尽早进行有效治疗是提高结直肠癌患者生存率的关键。     

云南省结直肠癌患者BRAF V600E突变与高危临床病理特征和生存关系的研究

BRAF V600E是结直肠癌中常见的突变位点,约5%~15%的患者携带此位点的突变.本研究应用直接测序方法检测云南省术后经病理确诊的289例结直肠癌患者的正常和肿瘤组织DNA发生BRAF V600E突变情况,并结合临床资料统计分析BRAF V600E突变型患者与高危临床病理特征和预后之间的关系.结果显示,在云南本地结直肠癌289例患者中有10%携带BRAF V600E的突变,且突变型与高危临床病理特征有关.临床随访266例患者中,BRAF V600E突变型患者中位生存期、1年生存率和无疾病生存率低于野生型患者.提示BRAF V600E突变与结直肠癌患者高危临床病理特征和预后有关,可能作为评价结直肠癌患者预测不良预后的一个潜在的分子标志物.     

萤火虫荧光素酶标记结直肠癌模型的建立

针对小鼠结直肠癌细胞(CT26)构建能够稳定表达萤火虫荧光素酶Firefly luciferase(Fluc)以及具有嘌呤霉素抗性的CT26-Fluc细胞株,并建立其荷瘤鼠模型。采用同源重组技术将Firefly luciferase基因片段整合至转座子系统中得到质粒,将所得质粒转染进入CT26原始细胞株,使其在该细胞内表达。后通过细胞敏感性实验获得CT26最低致死浓度,筛选获得稳定表达荧光素酶的CT26-Fluc单克隆细胞系。流式细胞仪检测CT26-Fluc单克隆的纯度。同时利用显微观察等方法证实细胞增殖和细胞形态与CT26原始细胞系不存在显著差异。将构建成功的CT26-Fluc植入BALB/c小鼠右后侧背部皮下,通过小动物活体成像仪验证该细胞系能稳定表达荧光素酶,且能够用于小鼠结直肠癌成瘤模型。本实验成功构建了稳定表达Firefly luciferase的CT26-Fluc细胞系,为小鼠结直肠癌模型及其病灶转移机制的研究建立了技术基础。     

嗜乳脂蛋白基因在肺腺癌中的功能及预后作用:多组学融合与生存分析

肺腺癌是最常见的肺癌类型,具有侵袭性强、进展速度快和致命性强的特点,已成为世界范围内亟待解决的公共卫生问题。最新的研究显示,嗜乳脂蛋白(BTNs)基因家族在免疫调节过程中发挥着关键的作用,但其在肺腺癌中的功能尚未明确。该研究采用多组学融合与生存分析方法,对BTNs家族基因作为肺腺癌预后生物标志物的潜能进行了分析。研究结果显示,该基因家族中的BTN2A2和BTNL9在肺腺癌癌症组织中的表达水平均显著降低(P < 0.05),且分别与患者的总体生存时间显著相关(P<0.05)。另外,BTN2A2和BTNL9的表达水平分别与B细胞、巨噬细胞和调节性T细胞的浸润水平显著正相关(P<0.05),与BTN2A2共表达的基因在T细胞激活、细胞因子结合、MHC蛋白复合体结合等条目中显著富集,与BTNL9共表达的基因在细胞周期、DNA复制相关的条目中显著富集(adjust.P<0.05)。因此,BTN2A2和BTNL9的低表达分别与肺腺癌患者的总体生存率低密切相关,是肺腺癌患者潜在的预后生物标志物。     

养寿丹对AD模型大鼠脑内β-APP蛋白表达的影响

大鼠腹腔注射D-半乳糖,并同时注射鹅膏蕈胺酸（IBO）于双侧脑Meynert基底核建立AD动物模型,石杉碱甲作阳性药物对照组,用免疫组织化学染色法检测脑内β-APP蛋白的表达水平.手术阳性对照组、中药大剂量组和中药小剂量组大鼠脑内β-APP表达水平均低于AD模型组（P＜0.05）.中药剂量越大,β-APP蛋白表达越低.实验结果证明养寿丹可以降低脑内β-APP表达水平.     

晚期结直肠癌伴随诊断研究进展

我国结直肠癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势。目前,结直肠癌主要检测方法有直接测序法(Sanger测序和焦磷酸测序)、等位基因特异性PCR、高分辨率溶解曲线、下一代测序等,生物标志物有KRAS,BRAF,HER2和PIK3CA等,微卫星的稳定性也是结直肠癌的检测指标。液体活检等新检测方法的出现和应用为今后结直肠癌的研究提供新方法的同时也带来了挑战。     

戊型肝炎病毒感染调控TLR3信号通路的研究

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是导致急性戊肝的主要原因.通过建立基因IV型HEV感染A549细胞模型,研究病毒感染后TLR3信号通路相关因子表达的变化.病毒感染A549细胞后通过实时荧光定量PCR检测IFN-β的mRNA表达量,Western blot分析磷酸化IRF3(pIRF3)和IKKε蛋白表达水平的变化.结果表明:HEV感染A549细胞后细胞内IFN-β的相对表达水平显著下降,TLR3信号通路介导的pIRF3及IKKε蛋白在病毒感染后表达量显著下降.基因Ⅳ型HEV能够抑制TLR3信号通路介导的IRF3的磷酸化及IKKε蛋白的表达,从而抑制了IFN-β的表达,为进一步研究HEV复制机制和致病机理奠定基础.     

癌基因DEK蛋白表达判断肺鳞状细胞癌预后的临床价值

为了探讨癌基因DEK蛋白在肺鳞癌中的表达及预后评估价值,应用免疫组化染色检测96例肺鳞癌及其癌旁正常组织中DEK蛋白的表达,结合临床生物学指标及生存时间进行统计学分析。结果发现,肺鳞癌组织中DEK蛋白阳性表达率为45.83%,明显高于癌旁正常组织（15.73%,P=0.001）,DEK蛋白在肺鳞癌中的表达与肿瘤大小（P=0.008）、组织分化程度（P=0.004）及病理学分期（P=0.011）密切相关;癌组织中DEK蛋白的阳性率与患者总生存期明显相关,且与病理分期、CEA水平和转移共同影响患者预后;DEK是肺鳞癌不良预后的独立风险因子。得出结论：检测肺鳞癌组织中DEK蛋白的表达对其预后有一定的临床评估价值,有望成为肺鳞癌新的预后生物标志物。     

Ezrin低表达与肺鳞状细胞癌患者预后之间的关系

为了探讨癌基因Ezrin蛋白表达在肺鳞癌中的预后意义,应用免疫组化染色检测了96例肺鳞癌及其癌旁正常肺组织中Ezrin蛋白的表达,并结合临床生物学指标及生存时间进行统计学分析。结果显示:肺鳞癌、癌旁正常组织中Ezrin蛋白阳性表达率分别为41.67%和91.67%,癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.01),Ezrin蛋白在肺鳞癌中的阴性表达与肿瘤大小(P<0.05)、组织分化程度(P<0.05)、病理学分期(P<0.01)、是否有转移(P<0.01)密切相关,且癌组织中Ezrin蛋白的阴性率与患者5年生存率明显相关(P<0.01);Ezrin蛋白阴性表达(HR:0.292,95%CI:0.141～0.606,P=0.001)、病理学分期和转移是肺鳞癌预后不良的独立风险因素。得出结论:检测肺鳞癌组织中Ezrin蛋白的表达对其诊断及预后评估有重要价值,有望成为肺鳞癌新的生物标志物及靶向治疗的分子靶点。     

降雨循环条件下高切坡稳定性演化过程及预测方法

为进一步揭示降雨循环条件下基岩型台阶状高切坡的降雨入渗及稳定性演化过程,以乐西高速马边至昭觉段某粉质黏土覆盖层基岩型台阶状高切坡为研究对象,通过室内干湿循环试验建立土体抗剪强度参数劣化数学模型;利用Geo-studio数值模拟软件研究多工况降雨循环下高切坡降雨入渗过程,揭示不同降雨循环工况下及雨后高切坡内部渗流场及稳定性变化规律,建立降雨型高切坡稳定系数逐年劣化方程;结合室内试验及数值模拟结果,建立该类高切坡稳定系数预测方法。研究结果表明：降雨入渗过程中高切坡潜在滑移面形状及位置并不发生明显变化,且表现为高切坡深处圆弧面及基岩积水面的组合型滑面;相同降雨时间内,高切坡降雨入渗深度及稳定性劣化幅度与降雨强度成正相关;单次降雨循环周期内,高切坡稳定性劣化幅度与降雨循环次数成负相关;高切坡降雨入渗深度或入渗总量越大,雨后高切坡稳定系数回升越小;高切坡稳定系数劣化系数采用土体抗剪强度参数劣化系数平均值较为安全合理,所建降雨型高切坡稳定系数预测方法具有较高的精度。     

双基因溶瘤腺病毒联合5-FU抑制肺癌细胞增殖的研究

研究携带TRAIL和Smac的双基因溶瘤腺病毒（ZD55-TRAIL-IETD-Smac）联合化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）对肺癌细胞的体外杀伤作用。通过MTT法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot检测杀伤性基因表达与凋亡相关蛋白表达。结果显示ZD55-TRAIL-IETD-Smac与5-FU联合应用能有效地抑制肺癌细胞的增殖,并通过激活Caspase通路诱导肺癌细胞产生凋亡,表明,5-FU能够显著增强携带TRAIL和Smac的双基因溶瘤腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用,为肺癌的临床应用提供了参考。     

Notch1在宣威女性肺癌患者中的表达及临床意义

为研究宣威女性肺癌中Notch1的表达及其临床意义,采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌组织及远端正常肺组织中Notch1的表达,并结合患者临床资料,探讨Notch1在宣威女性肺癌患者中的作用.结果显示,Notch1蛋白主要表达于细胞质,在宣威女性肺癌中的阳性表达显著高于远端正常肺组织(P0.05);Notch1蛋白在不同临床分期、分化程度及淋巴结转移与否患者中的表达差异有统计学意义(P0.05).生存分析显示:Notch1蛋白阳性表达组的中位生存期为27个月,而阴性表达组为38个月(P0.05),无淋巴结转移患者的中位生存期较有淋巴结转移患者长,进展期患者的中位生存期短于早期患者(P0.05),多因素Cox风险回归模型显示:宣威女性肺癌预后判断的独立影响因素为病理分期.提示Notch1基因在宣威女性肺癌组织中存在异常表达升高,且Notch1蛋白阳性表达的患者中位生存时间相对较短.Notch1蛋白的表达水平对于判断宣威女性肺癌患者预后有一定的指导意义.     

肝切除和腹腔灌洗化疗治疗大肠癌肝转移

探讨术中腹腔灌洗温热低渗化疗药物对大肠癌肝转移术后生存率的影响。文章回顾性分析东港市中心医院收治的20例大肠癌的临床资料,得出结果:治疗组与对照组3年、5年生存率分别为41.7%、29.2%和25.0%、10.0%。最后得出术中灌洗化疗药物可以明显提高大肠癌患者生存率的结论。     

基于生物标志物响应指数的电子废弃物拆解区人群健康风险评价

以浙江台州某电子废弃物拆解区的帽岭、桐山、岭下周3个村人群为暴露组,以西焦湾人群为对照组,在对其8种内分泌指标（TSH、T4、FT4、T3、FT3、FSH、LH、T）检测并进行相关性分析基础上,运用综合生物标志物响应指数法开展了人群健康的影响评价。结果表明,3个村人群的FT4、FSH的浓度均低于西焦湾人群}除岭下周外,帽岭和桐山人群的TSH、T3、FT3和T的浓度均低于西焦湾人群,T4浓度仅在桐山低于西焦湾,而LH与T4相反。TSH水平与拆解和拆解时戴手套呈正相关,T3水平与拆解和拆解时戴口罩呈正相关,FT4水平仅和拆解具有相关性;FSH、LH水平与抽烟、饮酒和戴口罩有关,T水平和抽烟、饮酒呈负相关关系;4个村的Star值大小依次为桐山〈帽岭〈西焦湾〈岭下周。     

小麦胚乳中蛋白质组分分布及其对面团流变学特性影响的研究

在不同制粉生产线上,按系统制取不同小麦品种的面粉样品,对每个样品分别进行蛋白质组分测定与分析,并对9023样品进行了面团流变学特性的实验.结果表明:小麦胚乳由内向外,球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白组分含量呈现逐渐增大的分布趋势,清蛋白在接近皮层时增加的趋势才显现出来,而胚乳内心部分无明显规律;蛋白质组分对面团流变学特性的影响是:面团形成时间、稳定时间以及粉质质量指数与谷蛋白含量呈现显著或极显著正相关;面团延伸度与醇溶蛋白和谷蛋白含量呈现极显著正相关,面团的拉伸曲线面积与谷蛋白含量也呈现极为显著正相关.