莴笋多酚氧化酶的主要特性及其酶促褐变的抑制

研究了莴笋中多酚氧化酶的酶反应进程、最适温度、最适pH值和底物浓度对酶活性的影响.通过L9(34)正交试验,筛选出以抗坏血酸、亚硫酸氢钠、氯化钙和柠檬酸为主要褐变抑制剂的最佳配方,并对化学试剂的抑制机理进行了探讨.当抑制效果最好时,各化学试剂的最佳组合为:0.5%氯化钙 0.2%柠檬酸 0.25%抗坏血酸 0.3%亚硫酸氢钠.     

人参果多酚氧化酶的酶学特性及纯化

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法测定了人参果果肉多酚氧化酶的活性,研究了温度、pH对其活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程。人参果果肉多酚氧化酶的最适反应pH为6.8,最适反应温度为30℃;在pH 6.4~7.2、20~40℃酶活力比较稳定;其酶促褐变反应动力学方程为V=2 000[S]/(4.4+[S])。分别采用丙酮沉淀法和硫酸铵沉淀法对人参果果肉多酚氧化酶进行初步纯化结果表明,丙酮和硫酸铵均在饱和度为50%时对人参果果肉多酚氧化酶的纯化效果最好。丙酮沉淀法的纯化倍数为3.49,得率为2.26%,硫酸铵沉淀法的纯化倍数为4.26,得率为8.92%。     

基于响应面法优化鲜切莴笋复合涂膜保鲜剂

以鲜切莴笋为研究对象,根据12种化学物质对多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性的抑制作用,选择3种酶活抑制效果显著的化学物质(茶多酚、抗坏血酸和L-半胱氨酸)和4种涂膜剂(羧甲基纤维素钠、黄原胶、海藻酸钠和葡甘露聚糖),考察不同保鲜剂浓度对鲜切莴笋4 ℃贮藏4 d后外观和色泽的影响. 以此单因素实验为基础,进行响应面分析,结果显示复合涂膜最佳组合为0.38%抗坏血酸+0.85%L-半胱氨酸+0.67%羧甲基纤维素钠,在此条件下,鲜切莴笋在4 ℃贮藏6 d后红绿色差Δa^*值为0.170,与回归方程预测值0.166相近,且货架寿命可延长至12 d以上,表明优化后的复合涂膜保鲜剂具有良好的实际保鲜效果.     

高温厌氧菌产纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的活性

高温厌氧菌Clostridium thermocoprius sp.nov．JT3-3具有较高的纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶活性。实验研究表明，纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶均为胞外酶，相对分子质量分别为52000和48000。纤维素内切酶的最适反应温度是80℃，β-葡萄糖苷酶的最适反应温度是40℃，两者的最适pH为6．5。低浓度的Ca^2 和Mg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力没有影响，高浓度的Ca^2 和Mg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力有较弱的抑制作用，Hg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力都有很强的抑制作用。     

木薯醇腈酶部分酶学性质研究

对利用基因重组技术获得的木薯醇腈酶（HNL）的酶学特异性进行研究，确定了其部分酶学性质。重组木薯HNL的最适温度为50℃，最适pH值为5．5。重组木薯HNL在60℃条件下，保温30min后仍具有90％的酶活力，说明温度稳定性较好；在pH4．0～6．0的条件下，获得的相对酶活仍大于80％。     

新仓小茄子中酶性质与质构的关系

研究了新仓小茄子中的果胶酯酶和多酚氧化酶的最适温度、pH、热稳定性以及钙离子和氯化钠对酶性质的影响。利用茄子中酶的性质，在保证色泽和风味的前提下，激活果胶酯酶以改善热烫杀青后茄子的质构，提高其硬度。实验表明，采用含0.244mol/L的NaCl、pH9.2、0.1mol/L的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液，于52.6℃下低温浸泡18.9min后再热烫杀青，可以较好地提高茄子的质构。     

抑制苹果梨汁酶促褐变的研究

以色度、褐变率、总酚含量、多酚氧化酶活性及苹果梨汁的感官评价等5个指标作为评价标准,考察了3种处理方法(水浴处理法、抗坏血酸处理法和硫代硫酸钠处理法)对苹果梨汁酶促褐变的抑制效果.结果表明, 3种处理方法均可有效抑制酶促褐变,且均对苹果梨汁的感官品质无明显影响.经对比上述3种处理方法在处理苹果梨汁后放置不同时间的各指标显示,添加体积分数为0.075%的抗坏血酸时其抑制酶促褐变的效果优于其他2种方法.本文研究结果可为解决苹果梨深加工中出现的酶促褐变现象提供参考.     

高温厌氧菌产纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的活性

高温厌氧菌Clostridiumthermocopriaesp.nov.JT3 3具有较高的纤维素内切酶和β葡萄糖苷酶活性。实验研究表明,纤维素内切酶和β葡萄糖苷酶均为胞外酶,相对分子质量分别为52000和48000。纤维素内切酶的最适反应温度是80℃,β葡萄糖苷酶的最适反应温度是40℃,两者的最适pH为6.5。低浓度的Ca2+和Mg2+对纤维素内切酶和β葡萄糖苷酶的酶活力没有影响,高浓度的Ca2+和Mg2+对纤维素内切酶和β葡萄糖苷酶的酶活力有较弱的抑制作用,Hg2+对纤维素内切酶和β葡萄糖苷酶的酶活力都有很强的抑制作用。     

鲜切莲藕的酶促褐变及贮藏中褐变生理的研究

以鲜切莲藕为研究对象,试验探讨多酚氧化酶(PPO)活性测定的最佳条件、抑制剂对多酚氧化酶的影响,并研究鲜切莲藕在贮藏期间相关指标的变化规律。结果表明:邻苯二酚为底物时,最适波长为410 nm、pH值为7.0、温度为35℃、底物浓度0.09 mol/L及抑制剂组合为Vc浓度0.20%、亚硫酸钠浓度0.10%、柠檬酸浓度0.20%、EDTA浓度0.25%。鲜切莲藕在贮藏期间,褐变度呈上升趋势,水分含量、可溶性蛋白质含量、PPO活性呈先上升后下降的趋势。     

沙门氏菌产草酸盐降解酶的性质及其酶作用条件

沙门氏菌产草酸盐降解酶，能够降解草酸或草酸钙。对草酸盐降解酶性质作了分析，结果表明，酶作用的最适温度为40℃，最适pH值为7.0，最适底物浓度为30％，金属离子Na^ 、Mg^2 、K^ 、Cu^2 、NH^4 对酶无明显的激活抑制作用。     

一株来源于酒曲的纤溶酶产生茵的鉴定及其酶学性质

从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉（Rhizopus microsporusvar．tuberosus）．酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37℃,最适作用pH为7．0．在37℃保温4h酶活力仍保存95％,57℃下保温4h后仍有一定酶活．该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH〈3．4时仍残留部分活性;最稳定的pH范围是6～8．Zn2＋、Cu2＋对酶活有抑制作用,Na2＋、Ca2＋、Mn2＋对酶活具有明显的促进作用．该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4h后残余酶活仍然保持在80％以上,有望制成注射剂应用于临床。     

pH及添加剂对丹酚酸B水溶液稳定性的影响

利用高效液相色谱法考察了pH对丹酚酸B水溶液稳定性的影响,并考察了几种添加剂对提高丹酚酸B水溶液稳定性的作用。结果表明,弱酸性环境有利于丹酚酸B的稳定,强酸及碱性环境中,丹酚酸B均发生分解。抗坏血酸的加入有利于提高丹酚酸B的稳定性,而亚硫酸氢钠和硫代硫酸钠反而加速了丹酚酸B的分解。     

pH及添加剂对丹酚酸B水溶液稳定性的影响

利用高效液相色谱法考察了pH对丹酚酸B水溶液稳定性的影响,并考察了几种添加剂对提高丹酚酸B水溶液稳定性的作用。结果表明,弱酸性环境有利于丹酚酸B的稳定,强酸及碱性环境中,丹酚酸B均发生分解。抗坏血酸的加入有利于提高丹酚酸B的稳定性,而亚硫酸氢钠和硫代硫酸钠反而加速了丹酚酸B的分解。     

NaHSO_4·SiO_2催化制备生物柴油的研究

以NaHSO4·H2O、正硅酸乙酯和异丙醇为原料,经溶胶—凝胶法制备固体酸催化剂（NaHSO4·SiO2）,进行了利用此催化剂催化油酸与甲醇的酯化反应制备生物柴油的实验,研究了催化剂焙烧温度、NaHSO4负载量、反应时间、催化剂质量分数、甲醇与油酸物质的量比等对油酸转化率的影响。实验结果表明：固体酸催化剂NaHSO4·SiO2在油酸与甲醇的酯化反应中具有很高的催化活性,当催化剂焙烧温度为200℃、NaHSO4负载量为15%、n（甲醇）∶n（油酸）=10∶1、催化剂质量占油酸质量的10%、反应时间5h时,酯化反应转化率可达95.19%。     

NaHSO4·SiO2催化制备生物柴油的研究

以NaHSO4·H2O、正硅酸乙酯和异丙醇为原料,经溶胶—凝胶法制备固体酸催化剂(NaHSO4·SiO2),进行了利用此催化剂催化油酸与甲醇的酯化反应制备生物柴油的实验,研究了催化剂焙烧温度、NaHSO4负载量、反应时间、催化剂质量分数、甲醇与油酸物质的量比等对油酸转化率的影响。实验结果表明:固体酸催化剂NaHSO4·SiO2在油酸与甲醇的酯化反应中具有很高的催化活性,当催化剂焙烧温度为200℃、NaHSO4负载量为15%、n(甲醇)∶n(油酸)=10∶1、催化剂质量占油酸质量的10%、反应时间5h时,酯化反应转化率可达95.19%。     

两种菌产皂苷糖苷酶的性质比较

对微生物Absidiasp.D0d菌产的薯蓣皂苷糖苷酶(RhaD)和微生物Absidiasp.A3r菌产的黄芪皂苷糖苷酶(RhaA)进行了分离纯化,并对它们的酶性质做了比较。RhaD的分子质量是59 ku,最适反应pH是5.0,pH稳定范围是3.0~8.0;最适反应温度是40℃,在60℃以下稳定。金属离子Na+、K+对酶反应基本没有影响,Mg2+、Zn2+、Ca2+、Cu2+、Fe3+对酶反应有抑制作用。酶反应动力学参数Km为19.26 mmol/L,Vmax为1.23 mmol/(L.h)。RhaA的分子质量是54 ku,最适反应pH是5.0,pH稳定范围是3.0~6.0;最适反应温度是40℃,在60℃以下稳定,Mg2+和Ca2+对RhaA的酶反应没有影响,Fe3+、Cu2+的抑制作用较为明显。酶反应动力学参数Km为17.86 mmol/L,Vmax为1.18 mmol/(L.h)。RhaD只能水解与穿山龙薯蓣皂苷母环结构相似的异螺甾烷醇型的皂苷上的α-鼠李糖,不能水解pNP--αL-Rha。RhaA仅水解四环三萜环阿屯烷型的黄芪皂苷16上的α-鼠李糖,不能水解pNP--αL-Rha。     

3-甲氧基丙酸甲酯的催化合成工艺研究

以甲醇和丙烯酸甲酯为原料,氢氧化钠为催化剂,硫酸氢钠为中和剂,合成3-甲氧基丙酸甲酯.用单因素调优方法确定了优化工艺条件:甲醇:丙烯酸甲酯=1.5:1,氢氧化钠用量10%,反应温度55℃,反应时间6 h,MMP的总收率可达97%以上,产品纯度在99.5%以上.     

产黄青霉苯乙酰CoA连接酶基因phl的克隆表达及其纯化酶的性质分析

苯乙酸与CoA反应,生成苯乙酰CoA,利用RT-PCR方法成功地从产黄青霉中扩增得到1737 bp不含内含子的phl基因,并将其克隆到pET30a原核表达载体,在大肠杆菌BL21（DE3）中低温诱导表达。经SDS-PAGE检测分析,获得与预期大小（62.1 kDa）一致的蛋白表达特异条带。通过Ni-NTA亲和层析柱纯化了重组酶,经检测苯乙酸的吸收,表明纯化酶对苯乙酸和CoA有明显的催化活性,酶活为1 680 U/mL。研究表明,纯化酶PCL最适宜温度为30℃,有一定的热稳定性,最适宜pH值为8.0,pH值为7.0~8.5时酶比较稳定。     

茴香脑臭氧化制备茴香醛

以茴香脑为原料,乙酸和环己烷的混合物做溶剂,臭氧化法制备茴香醛。考察了溶剂、臭氧化时间、还原剂用量、还原分解时间和还原温度对反应结果的影响,初步探讨了臭氧化反应级数。优化的工艺条件为,m(乙酸)∶m(环己烷)=1∶4,臭氧化时间为100min,n(NaHSO3)/n(茴香脑)=1.1,还原分解时间60 min,还原温度80℃。在此条件下,产品收率≥84%,纯度≥98%。     

利用苯胺检测过氧化物酶活力的方法

以过氧化物酶催化苯胺发生氧化聚合反应，利用分光光度法测定反应液的吸光度，以吸光度的变化速率来表征过氧化物酶活力。确定了苯胺-乙醇溶液的最佳体积分数为11．1％及反应液的最佳吸收波长为415nm。讨论了苯胺的体积分数、H2O2的体积分数、pH、温度对过氧化物酶活力的影响。同时，通过重复实验、方差分析确定了该方法的可靠性。