灭活轮状病毒疫苗与灭活脊髓灰质炎病毒疫苗联合使用免疫效果评价

目的评价灭活轮状病毒疫苗(inactivated rotavirus vaccine,IRV)与灭活脊髓灰质炎病毒疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)免疫大鼠后,两种疫苗间免疫效果的相互作用。方法将Wistar大鼠随机分成联合免疫组、间隔免疫组和单疫苗免疫组:联合免疫组接种IPV后4周,经双侧腿同时免疫IPV和IRV,共2次,间隔4周;单疫苗免疫组2组,分别免疫3针IPV和2针IRV,每针均间隔4周;间隔免疫组免疫1针IPV后4周,开始进行IPV和IRV间隔免疫(每针间隔2周,共6周)。分别于每次免疫后4周经尾静脉采血,分离血清,采用微量中和试验结合免疫荧光抑制方法检测血清抗RV中和抗体水平,ELISA法检测血清抗RV特异性Ig G抗体水平,微量中和试验法检测血清抗脊髓灰质炎病毒中和抗体水平。结果大鼠经2针IRV免疫后,血清抗RV中和抗体和特异性Ig G抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)均明显上升,血清抗体阳转率均达100%;经3针IPV免疫后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体GMT均明显上升,抗体阳转率均达100%;联合免疫组、间隔免疫组和单疫苗免疫组间血清抗RV中和抗体水平、特异性Ig G抗体水平及抗脊髓灰质炎病毒中和抗体水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IRV和IPV免疫大鼠后均获得到良好的免疫效果,两种疫苗联合使用时,免疫效果无相互干扰作用。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗对大鼠的免疫效果

目的比较不同浓度Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin IPV)3针免疫大鼠的中和抗体效价,为确定Sabin IPV的最佳免疫方案提供参考。方法用不同浓度的Sabin IPV对52只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型的中和抗体效价。结果大鼠经3针Sabin IPV免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,2针免疫后抗体阳转率已经达到100%,且原倍疫苗与稀释疫苗免疫大鼠后,产生的中和抗体水平差异有显著意义。结论Sabin IPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体。     

吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗的免疫持久性

目的观察不同剂量配比及制备工艺的吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗(DTa P-Hep B-s IPV)免疫大鼠后的免疫持久性。方法以中、低剂量s IPV与铝佐剂相互配伍的不同配方设计4个DTa P-Hep B-s IPV实验组,即中剂量含铝佐剂s IPV组(A组)、中剂量不含铝佐剂s IPV组(B组)、低剂量含铝佐剂s IPV组(C组)、低剂量不含铝佐剂s IPV组(D组),并设各组分相应的对照组和上市联合疫苗的参考组。以已完成3剂DTa P-Hep B-s IPV全程基础免疫的Wistar大鼠为研究对象,在全程基础免疫后第1、2、4、7、10、12个月釆血,检测各组大鼠血清中各组分抗体阳性率及抗体水平(GMT值)。结果基础免疫后观察全程,A组各型别脊灰病毒中和抗体阳性率持续保持在100%,B组为90%~100%,C组为80%~100%,D组为55.6%~100%。A、C组所诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT均高于同等剂量不含铝佐剂的B、D组,且均达到或超过参考组;B、D组所诱导的Ⅰ型脊灰病毒中和抗体GMT均低于同等剂量的相应对照组,但Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体GMT均能达到同等剂量相应对照组的水平。各组百白破抗体阳性率在观察全程均为100%,GMT与对照组相比总体上差异无统计学意义(P0.05)。全程基础免疫后第12个月,乙肝抗体阳性率B组为70%、乙肝对照组为55.6%、A组为50%、C组为42.9%、D组和上市疫苗参考组均为30%,各组Anti-HBs Ag水平两两相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论 s IPV中剂量含铝佐剂的DTa P-Hep B-s IPV所诱导的各组分抗体水平较稳定持久,可作为未来疫苗配比的参考。     

脊髓灰质炎灭活疫苗在中国婴儿中的免疫持久性

目的评价脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒灭活疫苗(Inactivated poliovirus vaccine,IPV)在中国婴儿中的免疫持久性。方法选择广西壮族自治区平乐县11个乡(镇)的372名健康婴儿,随机分为2组:176名婴儿分别于2、3、4月龄接种1剂IPV疫苗,196名婴儿分别于2、3、4月龄口服1粒脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(Oral poliovirus vaccine,OPV)。两组均于基础免疫后1个月及18月龄时采集静脉血,采用微量中和试验检测血清中抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体(Neutralizing antibody,NA)滴度。结果两组婴儿接种疫苗后18月龄时血清抗脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型NA几何平均滴度(Geometric mean titer,GMT)均明显低于基础免疫后1个月。18月龄时IPV组血清抗脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型NA阳性率明显低于基础免疫后1个月,且差异均有统计学意义(P均<0.001);OPV组差异无统计学意义(P=0.111)。IPV组部分婴儿在18月龄时血清抗脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型NA滴度小于1︰8,比例分别为11.4%、17.1%和18.2%。结论 IPV基础免疫后至18月龄时,婴儿抗脊灰病毒抗体保护水平下降,需进行加强免疫。     

脊髓灰质炎灭活疫苗免疫效果观察

目的 了解脊髓灰质炎灭活疫苗（ＩＰＶ）的免疫效果。方法 对２－３月龄婴幼儿免疫ＩＰＶ，并采集 双份血样１１８份。来用特异性抗原抗体中和法，分别对血清中抗脊髓灰质炎病毒３个型的中和抗体进行测定。结 果 要幼儿免疫后其脊髓灰质炎 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒中和抗体阳转率分别为 １００％、９８．７３％和 ９７．９８％，几何平均滴度分别为２８２．４１、１５４．８８和３４０．８４。结论　ＩＰＶ在初免儿童中免疫效果良好。     

Sabin株和野毒株脊髓灰质炎灭活疫苗在恒河猴体内不同免疫方案的比较

目的评价Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)和野毒株脊髓灰质炎灭活疫苗(Wild strain inactivated poliovirus vaccine,wIPV)在恒河猴体内不同免疫方案的免疫原性。方法将25只恒河猴随机分为5组:sIPV组(免疫3剂sIPV)、sIPV/口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral attenuated poliovirus vaccine,OPV)组(免疫2剂sIPV后,再免疫2剂OPV)、wIPV组(免疫3剂wIPV)、wIPV/OPV组(免疫2剂wIPV后,再免疫2剂OPV)和对照组(免疫3次稀释液M199),每组5只。OPV口服接种,IPV和M199经上臂三角肌处肌肉注射,2剂间免疫间隔时间为1个月。首次免疫前和每剂免疫后1个月采血,分离血清,采用微量中和试验法测定血清中抗脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体效价。结果除对照组外的4个试验组全程免疫结束后,恒河猴血清中均可检出较高水平的中和抗体,且所有恒河猴血清中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体全部阳转。Ⅰ型和Ⅲ型抗体免疫应答中,接种sIPV的2个试验组中和抗体水平高于接种wIPV的2个试验组(P<0.05);Ⅱ型免疫应答中,接种wIPV的2个试验组中和抗体水平高于接种sIPV的2个试验组(P<0.05)。采用wIPV/OPV序贯免疫,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体免疫应答均可获得与单独接种wIPV同样的效果;而采用sIPV/OPV序贯免疫,Ⅰ型抗体免疫应答效果低于单独接种sIPV,Ⅱ型抗体水平差异无统计学意义(P>0.05),Ⅲ型抗体第4剂免疫后水平也有所上升。结论 sIPV和wIPV在恒河猴体内均可诱导良好的免疫应答,初步证实了IPV/OPV序贯免疫的可行性,为今后免疫策略的制定提供了一定的实验依据。     

百日咳毒素参考品的制备及鉴定

目的制备百日咳毒素(pertussis toxin,PT)参考品,并进行鉴定。方法将百日咳杆菌培养上清经珍珠岩和羟基磷灰石两步吸附层析纯化后获得PT,进行SDS-PAGE、ELISA、斑点免疫印迹及血凝效价检测。结果纯化后PT纯度可达99%以上;相同抗原含量的纯化后PT和NIBSC标准品与PT单克隆抗体均为阳性反应,与FHA单克隆抗体均为阴性反应;纯化后PT和NIBSC标准品均可与PT单克隆抗体产生明显的反应斑点,与FHA单克隆抗体无反应斑点,Sigma公司PT参考品与PT单克隆抗体有明显反应斑点,与FHA单克隆抗体有微弱反应斑点;纯化后PT和Sigma公司PT参考品的血凝效价分别为1∶32和1∶64。结论成功制备了较高纯度的PT,有望作为参考品用于PT抗原含量检测、抗PT血清抗体滴度检测及抗原纯度检测。     

血清抗百日咳毒素中和抗体检测方法的建立及应用

目的建立血清抗百日咳毒素(pertussis toxin,PT)中和抗体的检测方法,并进行应用。方法将不同浓度的PT蛋白(0.1~105.5 ng/mL)和105个/mL的CHO细胞悬浮液加入96孔板,均100μL/孔,37℃孵育24 h,显微镜下观察细胞簇集程度,确定中和试验中PT的最适终浓度。将待检血清(1∶4~1∶4 096)及最适终浓度的PT加入96孔板,均50μL/孔,37℃中和3 h;加入105个/mL的CHO细胞悬浮液,100μL/孔,继续培养24 h,镜下观察细胞簇集程度。用建立的方法检测8份健康人血清样品的中和抗体含量,重复检测4次,计算变异系数(CV)。采用PT-IgG抗体ELISA试剂盒及建立的方法分别检测109份20~39岁健康人群血清样本的PT-IgG抗体及PT中和抗体水平,并分析两者的分布情况及相关性。结果确定PT最适终浓度为0.84 ng/m L。8份血清样品重复检测4次的CV为0.00%~12.28%。109份健康人血清中和抗体效价分布范围为<4~256,中位数为32,几何平均效价(GMT)为27.12(95%CI:20.78~35.39);PT-IgG抗体分布范围为0.03~184.80 IU/mL,中位数为21.17 IU/mL,GMT为13.33 IU/mL(95%CI:9.95~17.87 IU/mL)。PT-IgG IU/mL抗体浓度与中和抗体效价呈明显相关性(r=0.77,P <0.01),部分血清存在抗体浓度高,中和抗体效价低的现象。结论成功建立了血清抗PT中和抗体的检测方法,该方法具有良好的重复性,可用于评价抗PT中和抗体的功能。     

吸附精制百白破混合制剂免疫持久性的观察

为了解由卫生部生物制品总公司协作组和长春生物制品研究所等单位研制的吸附精制百白破混合制剂（aPDT）的免疫持久性和加强免疫的时间，在浙江省余杭县选择了3～5月龄健康婴幼儿，按随机双盲分成两组，分别注射aPDT和吸附全菌体百白破混合制剂（aPDT）进行比较。每组IOO人左右，先进行基础免疫，臀部肌肉注射3次，每次0．sml，间隔4周，基免后回年再加强注射1次，剂量为0．sml。于全程基免前后1月以及1年后加强注射前后卫月和1年分别取手指末端血检测百日咳凝集素、抗PT、抗FHA及白喉、破伤风血凝抗体。结果证明：1．aPDT与wPDT…     

Al(OH)_3佐剂对不同抗原含量肠道病毒71型灭活疫苗免疫效果的影响

目的分析Al(OH)3佐剂对不同抗原含量肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗免疫效果的影响。方法将ICR小鼠随机分为9组,每组8只:常规剂量(160 EU/0.1 ml EV71)、1/2剂量(80 EU/0.1 ml EV71)、1/5剂量(32 EU/0.1 ml EV71)无佐剂及佐剂[Al(OH)31.0 mg/ml]疫苗组,并设佐剂、生理盐水及空白对照组,分别于0、28 d经肌肉免疫小鼠,分别于初免及加强免疫后28 d,经尾静脉采血,分离血清,采用体外微量中和试验法检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞仪检测IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-10、IFNγ及TNF水平。结果初免后28 d,1/2剂量疫苗组中佐剂组小鼠血清抗体阳性率明显高于无佐剂疫苗组,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05);加强免疫后28 d,常规剂量疫苗组中,佐剂及无佐剂组小鼠血清抗体阳性率均为100%,抗体GMT分别为1∶152.2和1∶139.6,1/2剂量疫苗组中,佐剂组小鼠血清中抗体GMT与无佐剂组相比,差异有统计学意义(P<0.05),其余组间抗体阳性率及抗体GMT差异均无统计学意义(P>0.05)。常规剂量、1/2剂量、1/5剂量疫苗组,均诱导产生IL-6、IL-10、IFNγ及TNF 4种细胞因子,与佐剂对照组和生理盐水对照组相比,差异有统计学意义(P﹤0.05),未检测到IL-2、IL-4、IL-17A。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生IL-6、IL-10、IFNγ、TNF 4种细胞因子及特异性的抗EV71抗体,加入佐剂后免疫效果更好。     

百日咳毒素兔多克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立和验证

目的 制备百日咳毒素（pertussis toxin,PT）兔多克隆抗体（简称多抗）,建立定量检测PT抗原含量的双抗体夹心ELISA法,并进行验证及应用。方法 采用传统方法,用PT免疫青紫蓝兔制备PT兔多抗。优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并进行特异性、线性、准确性、精密性、灵敏度验证。采用建立的方法对脱毒过程样品及其他百日咳抗原纯化过程样品菌毛蛋白（fimbriae proteins,FIM）原液中PT抗原含量进行检测。结果 PT抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的工作条件为PT兔多抗包被浓度为1μg/mL,酶标抗体稀释度为1∶8 000。此检测系统能与PT纯化蛋白发生特异性反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉类毒素、破伤风类毒素均未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA法线性检测范围在25～400 ng/mL之间;PT高、中、低浓度回收率分别为103.27%、91.48%、103.52%;酶标板内和板间的变异系数（CV）均小于10%;该方法的灵敏度为20.719 ng/mL,检测下限为41.438 ng/mL。检测5种不同脱毒工艺条件下、不同取...     

吸附无细胞百白破联合疫苗的免疫原性及免疫持久性

目的观察武汉生物制品研究所有限责任公司(以下简称武汉公司)吸附无细胞百白破联合疫苗(diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,DTaP)的免疫原性和免疫持久性。方法于2007年9月在成都地区选择670名未接种过百白破联合疫苗,无百日咳、白喉、破伤风疾病史的足月出生的健康婴儿,按2∶1比例随机接种3剂观察疫苗(武汉公司生产的DTaP)和对照疫苗(某厂家生产的DTaP),进行基础免疫,每剂间隔1个月,2009年3月进行加强免疫,接种剂量均为0.5 ml/(剂·人)。基础免疫接种前和全程接种后30⁵0 d、加强免疫前和加强免疫后1个月、1、2、3年分别采集静脉血,分离血清,经ELISA法测定百日咳毒素抗体(pertussis toxin antibody,PTAb)、丝状凝集素抗体(filamentous hemagglutinin antibody,FHA-Ab)、白喉抗体(diphtheria antibody,D-Ab)、破伤风抗体(tetanus antibody,T-Ab)GMT,若免疫前抗体为阳性,则计算4倍增长率。结果基础免疫试验组351例、对照组193例完成了全程接种,即544例受种者符合方案要求。DTaP基础免疫后,试验组与对照组的4种抗体阳转率及抗体4倍增长率差异均无统计学意义(P>0.05);试验组FHA-Ab GMT明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。加强免疫前,试验组与对照组4种抗体阳转率差异无统计学意义(P>0.05);加强免疫后1个月,试验组FHA-Ab阳转率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);加强免疫后1、2、3年,试验组与对照组4种抗体阳转率和抗体GMT差异均无统计学意义(P>0.05);加强免疫后1年,4种抗体GMT均高于有效保护水平,加强免疫后2年,PT-Ab和FHA-Ab GMT已降至保护水平以下,加强免疫后3年,D-Ab、T-Ab GMT仍高于保护水平。结论武汉公司生产的DTaP具有较好的免疫原性和免疫持久性。     

基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法的建立

目的建立基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法。方法将百日咳类毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)、百日咳杆菌黏附素(pertactin,PRN)、百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(fimbrial-2 and fimbrial-3,FIM 2,3)分别与4种不同型号的微球耦联,耦联的抗原在同一孔中与血清孵育,通过生物素标记抗体和链霉素标记藻红蛋白双重识别,用Luminex荧光检测得到荧光中位数值(MFI),进行效价分析,并通过百日咳标准血清建立五组分百日咳疫苗血清抗体检测的标准曲线。采用ELISA法检测同一组血清样品中的抗体效价,并对两种方法的检测结果进行比较。结果与ELISA法相比,Luminex法的线性范围更宽。两种方法检测五组分百日咳疫苗血清抗体效价的分布范围接近,Luminex法检测50份五组分百日咳疫苗免疫小鼠血清抗体效价的平均值分别为PT 65.365 IU/ml、FIM 15.052 IU/ml、FHA 545.236 IU/ml、PRN 7.876 IU/ml,ELISA法检测的平均值分别为PT 72.640 IU/ml、FIM 16.480 IU/ml、FHA 589.474 IU/ml、PRN 7.345 IU/ml,两种检测方法的检测结果具有良好的相关性,相关系数(R2)分别为:PT 0.905 8、FIM 0.979 1、FHA 0.930 9、PRN 0.997 6。结论与ELISA法相比,基于Luminex的多重分析物的检测方法具有减少样品消耗量、节省成本和测定时间、使多种目标分子之间相关性的分析更准确等优点,可用于五组分百日咳疫苗血清抗体效价的检测。     

中国莱姆病螺旋体PD91重组外膜蛋白A的动物免疫效果分析

目的观察重组中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型外膜蛋白A(rOspA)的动物免疫效果。方法采用纯化的rOspA作抗原,以新西兰家兔、绵羊和犬为试验动物,分不同剂量组和对照组进行免疫,用间接免疫荧光法(IFA)检测其血清特异性抗体(IgG),并进行体外中和试验。结果用rOspA免疫新西兰家兔、绵羊和犬后,其血清抗体(IgG)效价较免疫前均显著升高,其几何平均滴度为1∶169,体外中和试验表明,每毫升兔抗rOspA血清可杀灭1.0×105个莱姆病螺旋体;绵羊和犬的抗rOspA血清杀菌能力因免疫剂量的不同而不同,每毫升绵羊和犬抗rOspA血清最高可杀灭1.0×106个莱姆病螺旋体。结论rOspA有较好的免疫原性,可作为中国莱姆病rOspA亚单位疫苗的一种有效成分。     

人巨细胞病毒gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果。方法大量提取目的质粒,分3个剂量组进行多点肌肉注射免疫小鼠,利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,ELISA法检测小鼠血清中HCMV特异性抗体,中和试验检测小鼠血清中和抗体。结果ELISA检测结果表明,与空白对照、空载体对照组相比,3个剂量组pcD-NA3.1/gB质粒免疫后小鼠血浆中抗HCMV IgG抗体水平均明显增高(P<0.05),中和抗体水平为1∶20~1∶40,而对照组血清中无中和抗体存在。淋巴细胞增殖指数免疫小鼠与正常小鼠差异无显著意义。结论已构建的HCMV gB基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫,为核酸疫苗研究奠定了基础。     

CHO细胞簇集试验在无细胞百日咳疫苗质量控制中的应用

目的探讨CHO细胞簇集试验在无细胞百日咳疫苗质量控制中的应用。方法采用CHO细胞簇集试验比较分析不同来源的CHO细胞对百日咳毒素(pertussis toxin,PT)簇集活性。将豚鼠随机分为进口疫苗Lot 1~3实验组、国产疫苗Lot 4实验组、参考疫苗对照组,同时设未免疫对照组。分别于第0和21天,经豚鼠腹部皮下注射0.5 ml疫苗。于初免后第28天,经心脏采血,分离血清,采用ELISA法检测PT抗体滴度,CHO细胞簇集试验检测中和抗体滴度。结果 PT对不同来源的CHO细胞簇集能力存在一定差异,其中以来自ATCC的CHO细胞的簇集最敏感。各无细胞百日咳疫苗在豚鼠动物模型上均能诱导较好的PT抗体免疫反应,进口疫苗与参考疫苗及国产疫苗相比,差异均无统计学意义(P0.05);两种方法的检测结果具有一定的相关性,Spearman相关系数为0.474。结论证实了CHO细胞簇集试验用于百日咳疫苗纯化过程中质量控制和PT免疫原性分析的适用性,为加强和完善我国无细胞百日咳疫苗的质量控制奠定了基础。     

无细胞百白破疫苗加强免疫一年后的血清抗体水平

用无细胞百白破疫苗（DTPa）和全细胞百白破疫苗（DTPw）分别进行基础免疫，再用DTPa或DTPw加强免疫，一年后对免疫儿童进行了血清抗体检测。结果各类抗体均较加强免疫后一个月明显下降，3个组中抗—FHA虽有所下降，但均在保护水平以上（＞20EU／ml），抗—PT抗体只有DTPa组大于20EU／ml。3个组中的大多数儿童的百日咳凝集抗体均＜1：320，而抗白喉类毒素（抗—DT）、抗破伤风类毒素（抗—TT）抗体均在保护水平以上。     

汉坦病毒半微量直接免疫酶斑减少中和试验方法的建立及其 …

采用辣根过氧化物酶标记兔抗－ＨＴＮＶ ＩｇＧ （ＨＲＰ－抗－ＨＴＮＶ）染色的半微量直接免疫酶斑减少中和试验，作为检测灭活汉坦病毒疫苗和病毒中和抗体及血清学分型的方法。该方法简便、特异、敏感、稳定，结果与经典的空斑减少中和试验比较差异无显著差异（Ｐ〉０．０５），ＨＲＰ－抗－ＨＴＮＶ可识别ＨＴＮＶ和ＳＥＯＶ的共同抗原。灭活ＨＴＮＶ疫苗加强免疫和部分批次初次免疫诱导较好的交叉中和抗体应答，同型与异型中和     

炭疽疫苗A16R诱导小鼠的黏膜与系统免疫应答

目的 探索炭疽减毒活疫苗A16R诱导黏膜与系统免疫的规律。方法 将6～8周龄的BALB/c小鼠随机分为3组,每组5只,将炭疽疫苗A16R以5×10~7 cfu(相当于人用1/20剂量)和2×10~8 cfu(相当于人用1/5剂量)经皮下接种,每周采集尾血,采用ELISA间接法检测血清中特异性抗PA的IgG抗体;在免疫8周后,活杀小鼠,分离NALT、鼻通道、脾、小肠Peyer结及腹股沟淋巴细胞,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化;并收集肺灌洗液,采用ELISA法检测特异性抗PA的sIgA抗体。结果 1/5剂量组能诱导较高、较快血清IgG的增加,免疫8周后,血清抗体效价仍然持续在高水平,但1/5剂量组肺灌洗液中仅能检测到微弱的sIgA抗体,而1/20剂量组基本检测不到;NALT、NP、PP和腹股沟淋巴结中CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+和CD45R~+的细胞差异无显著意义,但是脾细胞中CD_3~+细胞构成比小于对照组,CD45R~+细胞构成比高于对照组,T/B比值低于对照组;1/20剂量与1/5剂量组差异无显著意义。其他部位的淋巴组织的细胞表型无显著变化。结论 炭疽疫苗A16R主要诱导系统免疫应答,而不能诱导有效的呼吸道和消化道黏膜免疫。     

吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗免疫原性分析

目的评价不同剂量配比及制备工艺的吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗(DTa P-Hep B-s IPV)的基础免疫效果。方法以中、低剂量s IPV与铝佐剂相互配伍的不同配方,设计4个DTa P-Hep B-s IPV联合疫苗实验组,即中剂量含铝佐剂s IPV组(A组)、中剂量不含铝佐剂s IPV组(B组)、低剂量含铝佐剂s IPV组(C组)、低剂量不含铝佐剂s IPV组(D组),并设相应各组分的对照组和上市的联合疫苗参考组。按0、1、2月基础免疫程序,经左右腿肌肉接种Wistar大鼠,于免前及每剂免后第30天釆血,检测各组大鼠血清中各组分抗体水平、GMT及阳转率。结果大鼠经全程基础免疫后,A、B组各型别脊灰病毒中和抗体阳转率均达到100%,C、D组为80%~100%;A、C组各剂次免后所诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT值均高于同等剂量不含铝佐剂的B、D组,且均达到或超过参考组;B、D组所诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT值均低于同等剂量的对照组。各组百白破抗体阳转率在首剂免后均达到100%,每剂免后,实验组百白破抗体GMT与对照组相比,差异均无统计学意义(P均0.05)。基础免疫完成后,实验组和参考组乙型肝炎表面抗体阳转率为40%~88.9%;各实验组乙型肝炎抗体水平与对照组、参考组相比,差异均无统计学意义(P均0.05)。结论 s IPV中剂量含铝佐剂的DTa P-Hep Bs IPV联合疫苗可诱导大鼠在基础免疫过程中产生良好且稳定的体液免疫反应。