胸腺五肽固相合成及免疫增强作用的研究

目的　合成有生物活性的胸腺五肽并研究其免疫增强作用。方法　用Fmoc固相肽合成法合成胸腺五肽 ,用E玫瑰花实验检测生物活性。合成的胸腺五肽经小鼠腹腔注射后进行淋巴细胞转化实验、溶血空斑实验及IL 2活性实验 ,研究其免疫增强作用。结果　合成 2批胸腺五肽 ,精肽产量分别为 2 7mg和 3 4mg ,具有生物活性 ,实验组动物脾淋巴细胞的转化率、空斑形成细胞及IL 2活性皆明显高于空白对照组。结论　用Fmoc固相肽合成法可以成功地合成有生物活性的胸腺五肽 ,且具有免疫增强作用。     

Fmoc法固相合成胸腺五肽工艺

采用Fmoc法固相合成胸腺五肽(TP-5)。利用RP-HPLC和质谱对其进行鉴定,绘制胸腺五肽纯品的标准曲线,作为胸腺五肽的准确定量方法。考察不同的反应溶剂、缩合剂和切割条件对合成胸腺五肽纯度的影响,并由此确定最佳合成工艺条件:以DMF为反应溶剂,HATU为缩合剂,TFA、p-甲基苯酚、EDT和H2O体积比为97.00∶0.25∶0.25∶2.50溶液为切割条件。在此条件下,胸腺五肽的纯度达到80.34%。     

胸腺五肽的固相合成

采用哌啶脱Fmoc法固相合成胸腺五肽,通过采用Fmoc保护的Wang树脂,利用紫外-可见光分光光度法测量树脂上裸露氨基的含量,从而定量监测脱保护反应发生的程度以及树脂的取代率。目标产物经高效液相和质谱表征分析,该胸腺五肽产物产率为88.67%,纯度为98.54%。该研究采用的哌啶脱Fmoc法固相合成胸腺五肽取代率较高,且回收率也较高,可应用于工业批量生产。     

胸腺五肽的分离新工艺

胸腺五肽(TP5)能增进机体免疫力,已被用做抗感染、抗肿瘤和抗艾滋病的治疗药物.今以胸腺五肽(TP5)为研究对象,采用离子交换、纳滤和结晶相结合的新工艺分离制备TP5,有效地克服了传统工艺污染大、成本高的缺点.新工艺条件为:将TP5粗肽溶液以低流速通过NH-1树脂柱,采用NH4Cl与NaCl溶液洗涤杂质,选择氨水为洗脱剂,回收率为90.51%,TP5纯度为96.65%;采用SPT-100-150的纳滤膜对离子交换洗脱液进行浓缩脱盐,脱盐率为98.21%,TP5损失率为1.34%;建立乙醇/氯化钠协同作用的低温静态结晶工艺,TP5的一次循环结晶收率为48.35%,其纯度达到99.12%.     

胸腺五肽配合化疗治疗中晚期恶性肿瘤

目的观察胸腺五肽配合化疗治疗中晚期恶性肿瘤的疗效。方法将60例中晚期恶性肿瘤患者分成三组,两组使用化疗加每天不同剂量的胸腺五肽,另一组单纯化疗,观察用药前后的近期疗效,KPS评分和免疫指标。结果治疗组T细胞亚群指标明显高于对照组;近期疗效,KPS评分三组无明显差别;而使用不同剂量胸腺五肽的治疗组间差别不明显。结论胸腺五肽是一种能够较好提高恶性肿瘤患者生活质量的辅助用药。     

固相合成胸腺五肽的分离与纯化

胸腺五肽(TP5)是一种很有发展前景的药物,具有胸腺素的全部生理功能。固相合成法是胸腺五肽生产的主流技术,目前,对固相合成的五肽一般采用反相色谱技术纯化,但效率低、成本高,仅限于小规模制备。实验采用离子交换法纯化,并进行了方案优化,发现在pH4 4醋酸盐缓冲液平衡、盐梯度洗脱条件下纯化TP5,一步分离纯度可达98 23%。该法可以满足大规模制备的要求,且成本很低。     

固相合成胸腺五肽的研究进展

叙述了胸腺五肽TP5的药理、药代及毒副作用、市场状况和前景，分析了胸腺五肽各氨基酸的α－氨基保护基和侧链保护基的特点，并从固相载体、第一个氨基酸的连接、肽链延长等3个方面介绍了Merrifield法、Boc法、Fmoc法，3种方法合成胸腺五肽的过程。     

Fmoc法固相合成胸腺五肽的工艺研究

固相合成法是胸腺五肽生产的主流技术。本文采用对碱敏感的Fmoc保护Na-氨基。用二甲基甲酰胺为溶剂合成胸腺五肽。本文阐述了其基本原理、采用此法的原因、合成工艺及纯化方法。     

固-液结合法合成布舍瑞林

采用固-液结合法,通过4+5片段缩合合成九肽布舍瑞林。以2-Cl-Trt树脂为固相载体,分别合成四肽(p Glu-HisTrp-Ser-OH)和保护五肽(Fmoc-Tyr(Bzl)-D-Ser(But)-Leu-Arg(NO_2)-Pro-OH)。保护五肽与乙胺溶液在DCC/HOBt作用下得到Fmoc-Tyr(Bzl)-D-Ser(But)-Leu-Arg(NO_2)-Pro-NHEt,随后脱除Fmoc保护基和在pd/C催化作用下脱除侧链保护基得Tyr-DSer(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt,所得五肽与四肽在HBTU/HOBT作用下合成得到九肽布舍瑞林。所得粗品经高压制备液相分离纯化得纯度98%产品,经与标准品比对和质谱分析,确证产物为布舍瑞林。     

两个Galaxamide环五肽类似物的合成

以亮氨酸和苯丙氨酸为起始原料,改变其环合位点,优化其合成路线,合成了两个Galaxamide环五肽类似物,其环合收率近50%。使用反相HPLC进行分离纯化,通过1HNMR、13CNMR和MS对其结构进行表征。     

几种抗结核杆菌包合物的制备与活性研究

以β-环糊精为药物载体,采用饱和水溶液法制备了吡嗪酰胺-β-环糊精包合物、异烟肼-β-环糊精包合物、异烟肼利福霉素腙-β-环糊精包合物,采用冷冻干燥法制备了胸腺五肽-β-环糊精包合物。吡嗪酰胺与β-环糊精的最佳包合工艺条件为:吡嗪酰胺与β-环糊精物质的量比1.5∶1、包合温度70℃、包合时间1.03 h,此条件下的综合评价为96.18%。异烟肼与β-环糊精的最佳包合工艺条件为:异烟肼与β-环糊精物质的量比1.5∶1、包合温度30℃、包合时间0.5 h,此条件下的综合评价为87.80%。异烟肼利福霉素腙与β-环糊精的最佳包合工艺条件为:异烟肼利福霉素腙与β-环糊精物质的量比1.5∶1、包合温度70℃、包合时间1.08 h,此条件下的综合评价为90.83%。胸腺五肽与β-环糊精的最佳包合工艺条件为:胸腺五肽与β-环糊精物质的量比1.5∶1、包合温度70℃、包合时间1.15 h,此条件下的综合评价为90.03%。包合后药物的水溶解性和热稳定性得到明显改善,具有较好的抗结核杆菌活性。     

在硝酸-硝酸盐体系中DPT硝解反应的探索

本文主要在硝酸-硝酸锂,硝酸-硝酸锌,硝酸-硝酸钾,硝酸-硝酸铵-硝酸镁,硝酸-硝酸铵-硝酸钙等体系中,进行 DPT 硝解探索性试验。在硝酸-铵镁盐体系中,DPT 硝解成β-HMX 得率可达53%左右;硝酸-硝酸钾体系中,β-HMX得率可达46%左右;硝酸-硝酸钾-铵镁盐中,β-HMX 的得率可达50%左右,硝酸-硝酸铵及硝酸-硝酸钙铵复盐体系中,β-HMX 得率均达47%左右。     

胸腺五肽分子印迹聚合物磁性微球的制备及吸附性能研究

以胸腺五肽(Tp-5)为模板分子、丙烯酰胺(AM)为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂、羧基功能化Fe3O4磁性粒子为载体,采用乳液聚合法制备出胸腺五肽分子印迹聚合物磁性微球(Tp-5-MIPMMs)。通过研究交联剂用量、预聚合时间、聚合反应时间对Tp-5-MIPMMs吸附性能和印迹因子的影响,确定了最佳制备条件。扫描电镜(SEM)分析显示微球表面被多孔、均匀聚合物包覆,粒径40μm左右。静态和动态吸附研究表明Tp-5-MIPMMs在2.0 g·L-1的Tp-5溶液中吸附8 h达到饱和,最大吸附量达15.63 mg·g-1,印迹因子达1.51。以谷胱甘肽(GSH)作对比,用薄层色谱(TLC)研究了Tp-5-MIPMMs的选择吸附性能,结果表明Tp-5-MIPMMs对Tp-5分子具有特异选择能力。     

化学-酶法合成RGD三肽

采用化学法和酶法相结合的合成策略,合成具有高生物活性肽RGD。先采用DCC合成GD二肽(HCl·Gly Asp(oBzl)2),然后利用胰蛋白酶(trypsin)催化合成RGD三肽(Z Arg GlyAsp(oBzl)2)。实验结果表明,其中GD二肽在反应10h,两底物G与D的摩尔比为1 5∶1时,得率为77 7%;RGD三肽在微水-1,4-丁二醇反应体系中得率为41 9%。     

一种含多肽的保湿原料的制备及其在化妆品中的应用

研究一款名为水光肽的保湿剂的制备及其在化妆品中的保湿功效，水光肽的主要活性成分为甜菜碱、海藻糖、吡咯烷酮羧酸钠（PCA钠）、棕榈酰五肽-4、聚（三肽-6）。人体试验表明，在使用含质量分数5%水光肽的样品组后1、3、6 h，与使用不含水光肽的安慰剂组相比，角质层水分含量明显升高；体外试验发现，水光肽对人永生化角质细胞（HaCaT）的水通道蛋白3(AQP3)表达具有极其显著的上调作用，具有良好的保湿效果。     

纳米寡肽胶原的提取及其在嫩肤抗皱化妆品上的应用

从动物皮一步法直接酶解提取纳米寡肽胶原，获得小分子胶原。产物平均分子量约500D，分子量分布主要在100～1000D之间，为二肽到七肽的小分子组合，高斯分布峰值分子为三肽、四肽、五肽，产物胶原特征氨基酸组成为甘胺酸（glycine）24％、脯胺酸（proline）14％、羟脯胺酸（hdroxyproline）11％、谷氨酸9％、精氨酸8％。用本方法提取的纳米寡肽胶原具有突出的嫩肤、抗皱等效果，可以作为良好的医药、保健品、化妆品原料。     

枫香树材硫酸盐法蒸煮历程

研究了枫香树材硫酸盐法蒸煮过程中木素、戊聚糖和纸浆得率的变化。结果表明,枫香硫酸盐法蒸煮脱木素可分为以下三个阶段:第一阶段,升温到155℃,属于初始脱木素阶段,木素脱除率达到22.5%左右,戊聚糖溶出30.16%,得率为70.48%;第二阶段,从155℃开始到165℃保温60 min,属于大量脱木素阶段,木素脱除率达93.74%,戊聚糖溶出48.31%,得率为47.43%;第三阶段,从165℃保温60 min后到蒸煮末期,属于残余脱木素阶段,木素脱除率达到98%左右,戊聚糖溶出51.04%,得率为43.87%。     

关于抗氧化五肽的合成分析研究

近年来抗氧化肽以其在食品、化妆品、生物保健品及生物机体中良好应用的独特优势成为新的研究热点,本文以大黄鱼抗氧化五肽Ser-Arg-Cys-His-Val为目标肽,采用化学固相合成的方法,简单方便,避免了酶解法,水解法等传统方法操作繁琐、产率低下、难于分离鉴定的缺点,合成后的肽表现出较高的抗氧化活性,具有广泛的应用价值。     

香蕉皮水解工艺的初步研究

对香蕉皮的水解工艺进行了初步研究,采用了稀硫酸水解法和经过稀氨水预处理后的酶水解法,并得到了两种水解工艺的最佳条件:稀硫酸水解法为110℃、1%的硫酸体积分数下反应2 h,总还原糖得率24%左右;酶水解法为:在3%的稀氨水浸泡48 h后,在pH值4.8、45℃、底物浓度4%、酶量1%下反应24 h,总还原糖得率19%左右。     

艾塞那肽的合成研究

艾塞那肽是胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的类似物,由39个氨基酸组成,具有双激素靶向调控血糖的作用。本文对艾塞那肽的合成新方法进行了研究,将原肽拆分成六个全保护片段,分别经过独立的固相或液相方法合成,然后对片段进行组装,经切割、纯化,得到艾塞那肽产品0.98g,纯度﹥98%,总收率33.8%。切割时保留Fmoc-保护基可以使目标峰与杂峰有效分离。该方法结合了固相和液相合成的特点,与传统方法相比,是一种周期较短、纯化方便和收率较高的合成艾赛那肽的方法。