青天葵中鼠李秦素在不同溶剂的紫外-可见吸收光谱测定

对青天葵中鼠李秦素不同溶剂的紫外-可见吸收光谱测定研究,考察其紫外-可见吸收光谱的特征。分别以甲醇溶液、甲醇钠甲醇溶液、三氯化铝甲醇溶液、三氯化铝盐酸甲醇溶液、醋酸钠甲醇溶液、醋酸钠硼酸甲醇溶液为溶剂,分别对其进行紫外-可见光谱测定。鼠李秦素在不同溶剂的紫外-可见吸收光谱图有所区别。本法可作为鼠李秦素紫外-可见吸收光谱特征鉴别的依据。     

青天葵有效成分与质量的研究概况

通过查找国内近几年更新的文献报道,对常报道青天葵的有效成分和质量的研究进行综合分析。青天葵有黄酮类及苷类化合物有效成分和甾体类化合物有效成分、萜类化合物有效成分、氨基酸类化合物有效成分、挥发油类化合物有效成分等。质量可根据青天葵的真伪鉴别、理化性质、含量测定等方面进行概述。青天葵有效成分与质量的研究仍需要进一步的探讨。     

腺苷对照品的制备

以天麻粉为原料,制备腺苷对照品。用质量分数为70%的乙醇对天麻粉进行提取,采用大孔树脂柱层析和硅胶柱层析等方法对其提取物进行分离纯化得到腺苷对照品,采用TLC和HPLC进行对照品纯度检测,通过UV、MS、NMR等对制备的腺苷对照品进行结构确证。该方法制备的腺苷对照品纯度高,符合中药化学对照品的相关技术要求,可作为天麻药材及其制剂质量控制用的化学对照品。     

人巨细胞病毒IgM抗体生物素-亲和素单克隆抗体捕获时间分辨荧光免疫法检测试剂盒的研制与评价

目的建立人巨细胞病毒IgM(human cytomegalovirus IgM,HCMV IgM)抗体生物素-亲和素单克隆抗体捕获时间分辨荧光免疫法(biotin-avidin monoclonal antibody capture time-resolved fluoroimmunoassay,BA Mac TrFIA)检测试剂盒,并对其性能进行评价。方法采用鼠抗IgMμ链单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)作为固相反应板的包被抗体,生物素(biotin)标记的HCMV基因重组抗原作为桥接抗原,链酶亲和素(SA)标记铕(Eu3+)作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,应用BA Mac TrFIA法进行HCMV IgM抗体的检测,对连续制备的3批试剂盒的最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、热稳定性进行评价,并与巨细胞病毒IgM抗体诊断试剂盒同时对1 020份血清或血浆样本进行临床研究比对试验,采用Kappa检验进行一致性分析。结果选择4μg/ml作为鼠抗IgMμ链McAb最佳包被浓度,1∶10 000稀释作为HCMV-Bio最佳工作浓度,1∶1 500稀释作为SA-Eu3+最佳工作浓度,试剂盒参考值建议为阴性对照品检测荧光值(negative control counter,NCx)×2.1;连续制备的3批试剂盒最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率均达到国家检定标准;于37℃恒温箱放置6 d后,检测性能无明显改变;临床研究比对试验Kappa指数为1,一致程度达100%。结论成功制备了HCMV IgM BA Mac TrFIA法检测试剂盒,该试剂盒灵敏度高,精密性较好,与同类产品检测结果相关性好,为临床HCMV lgM抗体的检测提供科学、可靠的诊断依据。     

山柰素对照品的制备研究

建立从高良姜中制备山柰素对照品的方法,结合吸附树脂和制备型高效液相色谱对高良姜乙醇提取物进行分离纯化,通过IR、MS和NMR进行结构鉴定,分析型HPLC面积归一化法进行纯度检查和含量测定,得山柰素对照品纯度符合国家药典要求,质量分数大于99.8%,建立的制备方法简单,对照品纯度高,可作为山柰素药效物质基础研究的标准对照品。     

印楝素类成分对照品的制备与鉴定

[目的]报道一种快速、高效制备印楝素类成分对照品的方法。[方法]采用反相制备高效液相色谱(RP-PHPLC),从印楝粗提物中分离得到10种化合物,并采用NMR和HPLC Q-TOF MS对分离产物进行结构鉴定,通过HPLC检测,外标法或面积归一化法定量。[结果]10种化合物分别是印楝素A(azadirachtin A,AZ-A)、印楝素B(azadirachtin B,AZ-B)、印楝素D(azadirachtin D,AZ-D)、印楝素H(azadirachtin H,AZ-H)、印楝素I(azadirachtin I,AZ-I)以及nimbin、salannin等,10种印楝素类成分对照品的纯度均98%。[结论]该方法操作简便,可重复进样,适用于制备高纯度印楝素类成分对照品;该对照品可用作印楝素相关产品、制剂质量控制及农产品农药残留检测等实践中的定性、定量依据。     

马来酸阿法替尼原料药降解杂质的制备与结构推测

在马来酸阿法替尼原料药稳定性实验的基础上,对其降解杂质进行了制备,所得样品在相同高效液相色谱条件下与降解杂质的保留时间一致。结合样品的ESI-MS、NMR图谱推测,该降解杂质为阿法替尼的水解、分子内环合产物。提供了马来酸阿法替尼原料药杂质研究的对照品,且为其质量控制和贮存条件的设立提供了依据。     

戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品的建立

目的制备戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品。方法从我国多省血液中心、采浆站收集血清、血浆样品300份,应用国内外5家HEV IgG抗体诊断试剂进行筛选,制备HEV IgG国家参考品,并对参考品的稳定性及适用性进行检测。结果制备了HEV IgG国家参考品,其中阴性参考品30份;阳性参考品10份;灵敏度参考品1份,依据HEV IgG国际标准品进行标化,定量为3 U/ml;精密性参考品1份。参考品经4℃及室温放置10 d,37℃放置7 d,以及反复冻融3次后,测定结果与-20℃放置参考品检测结果一致,稳定性良好。5个厂家试剂对参考品的检测结果显示该参考品具有较好的适用性。结论制备了戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品,为提高诊断试剂的质量奠定了基础。     

药用维生素D3中杂质的分离与结构鉴定

采用制备色谱从药用级维生素D3样品中制备分离出2个杂质,通过MS、NMR进行结构鉴定,确定2个杂质分别为光甾醇和速甾醇,为质量研究提供了杂质对照品。同时,根据鉴定出的杂质可针对性地优化工艺来降低杂质含量并提高收率和维生素D_3的品质。     

半边旗抗肿瘤活性成分5F对照品的制备和鉴定

制备并鉴定了半边旗抗肿瘤活性成分11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷-19-酸(5F)的对照品.采用二氧化碳超临界萃取、有机溶剂萃取、柱层析、重结晶方法进行分离、纯化以制备半边旗5F化合物单体;采用TLC、HPLC-MS检测杂质;采用HPLC峰面积归一化法测定纯度;采用理化性质、波谱特征鉴定其化学结构.结果表明,从半边旗地上部分的二氧化碳超临界萃取物中分离得到纯度为99.2%的5F对照品.该对照品可以作为半边旗药材以及主要成分为5F的药物制剂含量测定的对照物.     

UPLC/TOF MS用于头孢美唑钠系统适用性对照品的结构解析

鉴定头孢美唑钠系统适用性对照品。方法:以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相,结合正离子和负离子两种模式下检测的母离子及子离子谱,参考文献推测杂质的结构。结果:在液相条件下,检测到分离良好的8个明显的杂质,对其杂质进行结构解析。结论:建立的液质条件有效地分离了头孢美唑钠系统适用性对照品中各有关物质,为其质量控制提供参考。     

Folin-Ciocaileu比色法测定昭通四种天麻变型总酚含量

目的:测定云南昭通产四种天麻变型(乌天麻、红天麻、黄天麻、绿天麻)中的总酚含量,提供科学评价天麻质量的方法。方法:以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocaileu比色法测定总酚。结果:四种天麻变型的总酚含量差别较大,其中小草坝产乌天麻总酚含量最高。结论:Folin-Ciocaileu比色法为科学评价天麻质量提供一种简便快速的方法,也为天麻的合理种植和应用奠定了理论依据。     

金樱叶多糖的提取及其含量测定

选用适当的提取和脱色方法,利用D-葡萄糖为对照品,采用分光光度法对金樱叶多糖的含量进行了测定。实验证明金樱叶多糖的含量较高,精密度良好,回收率较高,为正确评价其药效,合理开发该药提供了参考依据。     

宁夏产茴茴蒜中总黄酮含量的测定

测定宁夏产茴茴蒜中总黄酮的含量,为质量标准的制定提供依据。采用55%乙醇提取茴茴蒜中的总黄酮,以芦丁为对照品,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量。茴茴蒜的总黄酮含量最高为1.69%,RSD%为1.57。该方法简便、准确,可用于茴茴蒜中总黄酮的含量测定。     

尿液HIV-1抗体室内质控品的制备及应用

目的制备尿液HIV-1抗体室内质控品(简称尿液室内质控品),并对其进行均一性、稳定性评价及应用,以保证实验室检测的精密度。方法用HIV-1抗体阴性尿液样本倍比稀释HIV-1抗体阳性尿液样本,采用HIV-1尿液抗体检测试剂盒(ELISA)进行检测,根据检测结果吸光度/临界值比值(S/CO)来确定呈弱反应性的尿液样本的稀释倍数,制备尿液室内质控品。采用HIV-1尿液检测试剂盒评价尿液室内质控品的均一性和稳定性。连续检测20次尿液室内质控品,建立Levy-Jennings质控图并进行分析。结果 HIV-1抗体阳性尿液样本按1∶4比例稀释后所得样本为尿液室内质控品。均一性评价中,随机抽取的20支尿液室内质控品检测结果的变异系数(CV)为15.89%;稳定性评价中,随机抽取的20支尿液室内质控品在37℃、室温、2~8℃、-20℃放置不同时间检测结果的CV分别为8.69%、17.47%、18.08%和23.04%。Levy-Jennings质控图的S/CO比值的平均值为5.54,标准差为0.48。在常规条件下,尿液室内质控品均在控;在不同反应条件下,尿液室内质控品出现告警或失控。结论制备的尿液HIV-1室内质控品的稳定性、均一性较好,可用于控制实验室尿液HIV-1抗体检测的质量。     

一种改善睡眠胶囊的制备及其质量标准研究

确定改善睡眠胶囊主要的提取工艺并对其质量标准进行研究。通过正交试验,以五味子醇甲含量为评价指标,优化最佳提取工艺条件,确立提取工艺;研究处方中五味子的定性鉴别及五味子醇甲的含量测定。提取工艺为提取2次,每次加水4倍量,提取2次;供试品薄层色谱中,在与五味子对照药材和五味子醇甲对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点;供试品高效液相色谱图中,在与五味子醇甲对照品色谱相应位置上色谱峰保留时间基本一致。该制备工艺合理、简便,建立的质量标准能准确地进行定性、定量检测,可作为改善睡眠胶囊的质量控制。     

HIV-1核酸血筛试剂国家参考品的研制

目的研制HIV-1RNA血筛试剂国家参考品。方法收集HIV-1病毒培养物、我国不同地区的HIV-1感染者血浆以及正常人样品,经HIV-1病毒载量试剂检测,对HIV-1RNA阳性的样品进行env基因型分析,从中筛选参考品的候选样品。结果共筛选8份HIV-1RNA阳性的样品作为阳性参考品,病毒载量均高于5000IU/ml;8份HIV、HBV、HCV均为阴性的血浆样品作为阴性参考品;以1份病毒培养样品作为灵敏度参考品的原始样品,经WHOHIV-1RNA标准品标定,其HIV-1病毒载量为3.79×104IU/ml;反复3次冻融对参考品的病毒载量无明显影响。结论已制备HIV-1RNA血筛试剂国家参考品,为我国HIV-1核酸血筛试剂的质量控制和标准化提供了依据。     

首批Vero细胞蛋白质对照品的研制

目的建立首批Vero细胞蛋白质国家对照品,用于人用狂犬病疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试验的验证。方法本对照品系采用狂犬病病毒固定株接种Vero细胞,经培养、收获、浓缩、灭活病毒、纯化后,加入适量的人血白蛋白、右旋糖酐40冻干制成。本对照品蛋白含量溯源于Vero细胞蛋白质标准品(250022-201901),应用Vero细胞分泌型蛋白检测试剂盒(ELISA)对其进行标定后赋值。随机选取16支标准品,测定其pH值,采用方差分析统计检验均匀性;随机选取对照品,分别在4、25和37℃放置不同时间(1、2、3和4周),不同时间点取3支,以Vero细胞蛋白质标准品(250022-201901)绘制标准曲线,ELISA法测定蛋白含量,采用方差分析统计检验稳定性。结果经协作标定,本对照品标示量值为7.7μg/mL,参考范围为(7.7±3.6)μg/mL,均匀性及稳定性良好。结论Vero细胞蛋白质对照品已获批使用,批号为250023-201901,该对照品的建立,对加强人用狂犬病疫苗的质量控制具有重要意义。     

丙型肝炎病毒核酸检测试剂国家参考品的制备

目的制备丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核酸检测试剂国家参考品。方法收集我国不同地区的献血员血浆,用核酸筛查试剂筛查HCV RNA情况,并通过PCR法对人细小病毒B19进行定性测定,筛选阳性参考品、阴性参考品和最低检出限参考品。对HCV RNA阳性样本进行基因分型;3家实验室以WHO HCV RNA国际标准品为对照品,对参考品进行协同标定;并检测参考品的稳定性和适用性。结果筛选出10份HCV阳性,而HBV、HIV、B19均为阴性的样本作为阳性参考品,其中有6份为1b型,1份为2a型,1份为3a型,1份为3b型,1份为6a型;10份HCV、HBV、HIV、B19均为阴性的样本作为阴性参考品;1份冻干的HCV RNA阳性,HBV、HIV、B19为阴性的样本作为最低检出限参考品,基因型为1b型。3个实验室经协作标定,阴性参考品的结果均为阴性,阳性参考品的HCV RNA浓度在104~105 IU/ml之间,最低检出限参考品的HCV RNA浓度为6.18×106 IU/ml。-20℃放置4周、4℃放置12 d、室温放置7 d以及反复冻融5次对参考品的HCV RNA含量无明显影响。参考品适用于目前国内市场上主要国产血液筛查和定量试剂的检测。结论制备了HCV核酸检测试剂国家参考品,可用于HCV核酸诊断试剂的质量评价和控制。     

柯萨奇病毒A16型核酸检测试剂国家参考品的建立

目的 建立柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CA16)核酸检测试剂国家参考品，并制定其质量标准。方法收集并筛选CA16核酸阳性和阴性样本，分装、冻干后，建立CA16核酸检测试剂国家参考品。采用不同企业的试剂对参考品进行协作标定，根据协作标定结果确定参考品的质量标准，并考察其均匀性和稳定性。结果 CA16核酸检测试剂国家参考品由9份阳性参考品，8份阴性参考品，1份检测限参考品和1份精密度参考品组成。其质量标准为：阳性参考品符合率≥8/9；阴性参考品符合率为8/8；最低检测限为稀释度不低于1∶103；精密度参考品稀释100倍后重复检测10次，结果均为阳性，且Ct值的CV≤5%。该参考品均匀性符合要求，室温(25℃)放置1 d、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性。结论 建立了首批CA16核酸检测试剂国家参考品，并制定了质量标准，为相关试剂的质量控制和评价提供了依据。