几种消毒剂对养殖刺参"腐皮综合征"主要致病菌杀灭试验的研究

刺参“腐皮综合征”（俗称化皮病）是当前养殖刺参的最主要疾病,死亡率可达90%以上,属急性死亡,越冬保苗期幼参和养成期海参均可被感染发病。经研究证实,灿烂弧菌Vibriosplendidus和假交替单胞菌Pseudoalteromonas nigrifaciens是该病的主要致病原。作者通过漂粉精、溴氯海因、PVP-I、过氧化氢、双链季铵盐络合碘和生石灰6种消毒剂对灿烂弧菌和假交替单胞菌的定性杀灭实验发现,上述6种药物对腐皮综合征的病原菌都有明显的杀灭作用。     

养殖刺参腐皮综合征病原菌的分离与鉴定

2003年春季，山东省青岛地区刺参养殖场暴发了较为严重的传染性疾病一“腐皮综合征”，该病引起的死亡造成约30％的损失。养殖刺参的发病症状表现为：厌食、摇头、肿嘴、排脏、身体萎缩、口部溃烂乃至体表大面积溃疡。从患病个体溃疡部位分离得到一种优势细菌KL-1，KL-1经人工回接感染实验证明对健康刺参具有较强的致病性，且感染病参的症状与自然发病海参的症状相同。通过形态学、生理生化和16S rDNA分子生物学方法对该菌进行的分类鉴定表明，导致养成刺参“腐皮综合征”的致病菌是灿烂弧菌（Vibrio splendidus）。本文首次揭示了该地区“腐皮综合征”导致养成刺参大规模死亡的致病原因，对刺参病害防治和健康养殖具有重要的指导意义。     

养殖刺参保苗期重大疾病“腐皮综合征”病原及其感染源分析

2003～2005年冬、春季,山东省和辽宁省众多养殖区域的保苗期刺参(Apostichopus japonicus)暴发了较为严重的传染性疾病-"腐皮综合征".该病波及面广,传染性强,死亡率常高达90%以上.发病症状主要表现为厌食、摇头、肿嘴、排脏、身体萎缩、口部溃烂乃至体表大面积溃疡.本研究对症状较为典型的3家海参保苗期的发病幼参进行了详细的病原学分析,从所有病参的病灶组织分离得到了1种占有绝对优势的菌株,经人工感染实验证明它对健康刺参具有较强的致病性,且感染病参的症状与自然发病海参的症状相同.通过形态学、生理生化和16S rDNA分子生物学方法对该菌进行的分类鉴定表明,导致保苗期刺参"腐皮综合征"的致病菌是假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens).同时也对3家养殖场刺参保苗养殖系统进行了分析研究.结果表明,水源中细菌含量不高,为(0.8×102)～(1.2×102)cells/mL,其特征与病灶处优势菌不同;而饵料中细菌含量最高可达3.2×106 cells/mL.饵料、池水和池底污物的优势菌与病灶处优势菌基本一致,说明饵料可能是病原菌的主要来源.本研究首次揭示了"腐皮综合征"导致保苗期刺参大规模死亡的原因及其致病原,对刺参健康养殖和病害防治具有重要的指导意义.     

海参池塘养殖中的常见疾病

<正>刺参(Apostichopus japonicus Selenka),在分类上属棘皮动物门、海参纲、楯手目、刺参科、仿刺参属。随着刺参养殖业的快速发展,不正确的养殖造成病害问题日趋突出,出现了多种明显病症和大规模死亡现象,部分养殖区相继出现了刺参腐皮综合征、后口虫病、气泡病、不摄食等病征,且具有一定的传染性,给刺参养殖业者造成了惨重的经济损失,阻止了海参养殖业的快速发展。本次调查统计了池塘养殖海参常见疾病,通过实践案例分析了疾病暴发的致病     

刺参腐皮综合征重要病原灿烂弧菌DNA的探针制备及应用

腐皮综合征是近年来刺参养殖最重要的疾病，导致刺参大批死亡和惨重的经济损失。以其主要致病原灿烂弧菌（Vibrio splendidus）DNA为模板，PCR扩增出16s-23s间隔区序列，将该片段克隆进pMD19-T Vector，转化大肠杆菌DH5a，获得重组质粒转化菌并进行测序。根据序列、设计引物，合成177bp的地高辛标记DNA探针。该探针对灿烂弧菌的DNA呈现特异性，而对其它细菌Vibrio fluvialis、Vibrio anguillarum、Vibrio alginolyticus、Aeromonas hydrophila、Vibrio harveyi、Vibrio parahaemolyticus、Vibrio vulnificus的核酸均呈阴性；探针对灿烂弧菌DNA的检出极限为6.25pg, 具有较高敏感度。应用该探针对人工感染以及从青岛、烟台、威海获取的腐皮综合征发病海参和养殖水体进行斑点杂交探针检测，其检出率均为100%。研究结果表明，该探针具有良好的特异性和敏感性，可成功用于快速检测养殖刺参“腐皮综合征”重要病原灿烂弧菌。该方法应用于刺参腐皮综合征的检测尚属首次，它将为刺参腐皮综合征的快速诊断、疾病防治和养殖生产提供技术支撑和参考。     

池塘养殖刺参的清淤与消毒

随着我国刺参池塘大规模人工养殖的快速发展．病害问题日趋严重。自2003年以来．部分海参养殖区。相继出现了海参肿嘴、烂皮、排脏、不摄食、形体萎缩乃至死亡等病害(经专家确定为刺参腐皮综合症)。特别是今年入春以来，该病呈暴发趋势。几乎波及所有刺参养殖区域，发生了大规模死亡现象。并造成惨重的经济损失。该病死亡率可达到90％以上。     

福建海区网箱养殖刺参“腐皮综合症”病原分析与鉴定

2011年冬季,福建省宁德市霞浦县海区网箱养殖刺参发生"腐皮综合症",并伴有死亡现象出现。刺参的发病症状表现为:厌食、排脏、身体萎缩、体表局部溃烂乃至大面积溃烂。从患病刺参病灶处分离得到两种优势细菌CS1和CS2。经人工回接感染实验证明两种菌对健康刺参都具有较强的感染性,且感染病参的症状与自然发病刺参的症状相同。通过生理生化试验、16S rDNA序列分析及系统进化树分析,结果表明两株菌分别与灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)相似。菌株CS1与灿烂弧菌的亲缘关系最近,相似率达到99%,菌株CS2与假交替单胞菌的亲缘关系最近,相似率达到95%。菌株CS1可鉴定为灿烂弧菌,菌株CS2可鉴定为假交替单胞菌。另外,在患病刺参呼吸树膜和腔体内发现大量后口虫(Boveria sp.)。所以导致本次刺参"腐皮综合症"的原因可能是致病性细菌和寄生虫共同作用的结果。本文首次揭示了该地区"腐皮综合症"导致养成刺参大规模死亡的致病原因,对刺参病害防治和健康养殖具有重要的指导意义。     

我国刺参养殖存在的主要问题与疾病综合防治技术要点

从养殖设施、养殖工艺、生态环境、种参和种质等多方面进行了全面的分析和讨论，深入剖析了目前刺参养殖业中存在的主要问题，并根据我国养殖刺参的发病特点和发展趋势，提出了相应的对策，阐明了海参疾病综合防治技术的要点。     

刺参腐皮综合征病原灿烂弧菌检测探针的制备及应用

腐皮综合征是近年来养殖刺参发生的严重疾病.发病时,刺参大批死亡,经济损失惨重.以其主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)DNA为模板,PCR扩增出16S-23S核糖体RNA基因间隔区序列,插入pMD19-T,转化大肠杆菌DH5α并测序.根据该间隔区序列,设计引物扩增177 bp的地高辛标记的探针.该探针对灿烂弧菌呈现特异性,而对其它细菌V. Fluvialis,V. Anguillarum,V. Alginolyticus,Aeromonas hydrophila,V. Harveyi,V. Parahaemolyticus,V. Vulnificus均呈阴性.探针对灿烂弧菌DNA的检出限为6.25 pg, 具有较高敏感度.用该探针对人工感染以及从青岛、烟台、威海获取的腐皮综合征发病海参和养殖水体进行斑点杂交,灿烂弧菌检出率达100%.结果表明,该探针具有良好的特异性和敏感性,可用于快速检测养殖刺参腐皮综合征的病原灿烂弧菌.用该方法检测刺参腐皮综合征尚属首次,为刺参腐皮综合征的快速诊断和防治提供技术支撑.     

刺参腐皮综合征防治措施

<正>21世纪以来，刺参养殖在我国蓬勃发展，现已成为我国北方沿海地区的重要经济养殖品种之一。但随着刺参养殖业的快速发展，各种病害频繁发生^[1]。刺参养殖主要的病害有腐皮综合征、化板症、烂胃病、盾纤毛虫病等，其中腐皮综合征发生频率较高，危害较大。腐皮综合征又称“溃烂病”“烂皮病”“化皮病”，多发生在1—4月，其中2—3月为发病高峰。幼参到成参均可发病，幼参发病率更高，     

刺参杂交新品系的建立及杂交苗种推广应用

刺参（Stiehopusjaponieus）通常称作海参，在分类上隶属于棘皮动物门、刺参纲、楣手目、刺参科、仿刺参属。山东省烟台市本地刺参是一种寒温带品种，水温变化对其生理活动影响显著，一般来讲，稚参和幼参对高温的耐受能力较强，而成参对较高温度的适应能力明显降低，具有夏眠和冬眠的特性，因而一年中的适温生长期较短，导致养成期过长，不仅增加了养殖成本，也大大增加了刺参养殖的风险。     

应用PCR方法检测刺参腐皮综合征病原——灿烂弧菌

腐皮综合征是近年来刺参养殖最主要的疾病,导致刺参大批死亡和惨重的经济损失.根据其主要致病原灿烂弧菌(VibrioQQQsplendidus)的16S～23S间隔区序列,设计特异性引物,利用PCR技术,从纯化的V.splendidus DNA中成功地扩增出产物大小为177bp的DNA片断,并对此方法的灵敏度和特异性进行了研究.结果表明,PCR技术对V.splendidus DNA的检测灵敏度为0.5pg,并且对灿烂弧菌的DNA呈现特异性,而与其他细菌V.Fluvialis、V.Anguillarum、V.Alginolyticus、Aeromonas hydrophila、V.Harveyi、V.Parahaemolyticus、V.Vulnificus的DNA均无交叉反应.应用PCR技术对人工感染的以及取自青岛、烟台和威海的腐皮综合征发病海参进行检测,其检出率均为100%.研究结果表明,PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可成功用于快速检测养殖刺参腐皮综合征原灿烂弧菌.在国内,该方法应用于刺参腐皮综合征的检测尚属首次,它将为刺参腐皮综合征的快速诊断及防治提供又一新的方法.     

刺参烂皮病的防治

近年来,由于刺参营养价值高,抗逆性强,繁养殖技术比较成熟,很快成为北方沿海的主要繁养殖品种之一。但在刺参养殖业迅猛发展的同时,各种病害也逐渐显现,其中以烂皮病较为突出,成为影响刺参成活率的主要因素之一。尤其是在今年上半年刺参育苗过程中,大面积暴发烂皮病,附着稚参死亡率达70％以上。总结几年的养殖经验,防治烂皮病应从以下几方面入手:     

池塘养殖刺参的清淤与消毒

随着我国刺参池塘大规模人工养殖的快速发展，病害问题日趋严重。自2003年以来，部分海参养殖区，相继出现了海参肿嘴、烂皮、排脏、不摄食、形体萎缩乃至死亡等病害(经专家确定为刺参腐皮综合症)。特别是去年入春以来，该病呈暴发趋势，几乎波及所有刺参养殖区域，发生了大规模死亡现象，并造成惨重的经济损失。该病死亡率可达到90％以上。笔者根据调查分析认为，     

刺参南方海上筏式养殖技术研究

刺参（Stichopus,japonicus）属棘皮动物门,海参纲,刺参属,是海参种类中营养价值最高、最受市场喜爱的一种。在我国,海参主要产自山东、辽宁等地。刺参养殖方式有池塘养殖、沉箱养殖、室内控温养殖、围网养殖、浅海筏式养殖等。 随着“北参南养”技术上的突破,刺参养殖在我国南方海域也逐步兴起。福建省福州市连江县的养殖户引进北方的刺参在海上进行海参筏式养殖。2010年11月10Et投苗10万只,苗平均体长12cm,     

刺参工厂化养殖生产性试验

<正>刺参属棘皮动物门、海参纲、楯手目、刺参科、仿刺参属,俗称海参。刺参具有极高的食用和保健价值,市场需求量大,销售价位高,养殖效益极为可观[1]。刺参工厂化养殖虽始于近几年[2、3],但发展迅速,日照市2006年开发深水井大棚工厂化养参3000m2,2007年养殖规模猛增至70000m2[4]。为了探索刺参在江苏省赣榆县沿海的生长情况,笔者于     

刺参浅海筏式养殖技术

刺参通常称作海参,在分类上属于棘皮动物门、海参纲、楣手目、刺参科、仿刺参属。在我国,刺参主要盛产于辽宁、山东、河北等地。刺参养殖方式有池塘养殖、工厂化养殖、围网养殖、浅海筏式养殖等。近些年,随着“北参南养”技术上的突破,刺参浅海筏式养殖在我省尤其在闽东地区海域悄然兴起,取得了良好的经济效益（最好的投入产出比超过1：2）,促进了刺参养殖产业的迅猛发展,有望成为福建省继鲍鱼之后又一大海水养殖产业。现将刺参浅海筏式养殖技术要点总结如下：     

关于对改革虾池养殖刺参模式的探讨

1 虾池养参现状 近几年,随着我国虾池筑礁养殖刺参的快速发展,病害问题日趋突出.自2003年春部分参池发生"腐皮综合症"以来,其病害逐年呈上升暴发之势,现已遍及全国所有虾池养参区域,并发生了规模较大的死亡,这给养殖海参者带来了较大的经济损失.许多养参户收效甚微甚至有转产、转包甚至有退出刺参养殖业的想法.     

刺参度夏前后体重消长的研究

刺参养殖生产中,收获时间的确定,影响着经济效益。适时的收获不但能保证商品参的品质,还能最大程度获得养殖效益。但是目前若干养殖企业,不论是在刺参生长的旺季,还是在夏眠期或者是冬季,都在收获海参。在生长旺季收获海参,影响了海参的产量和商品质量,高温与低温季节海参的价格与一年中其它季节尽管有差别,但价格     

热带海参糙刺参野外网箱养殖的初步研究

糙刺参(Stichopus horrens)是一种具有较高经济价值的热带海参,广泛分布于中国南海海域。近年来,由于不合理开发,野生糙刺参资源量不断下滑,对其进行人工繁育与养殖迫在眉睫。目前,糙刺参的人工育苗技术已经取得了突破,而其人工养殖技术尚待完善。为研究热带海参人工养殖及放流的可行性,2010年~2011年通过在西沙群岛3个不同海区[港池内(A区)、港池外(B区)、泻湖(C区)]进行了糙刺参的幼参和成参的网笼养殖试验,定期监测笼内幼参及成参的成活率、生长情况,研究热带海参野外人工养殖及放流的可行性。结果表明,热带经济海参糙刺参幼参和成参均可以实现野外网箱养殖。成参在低密度下7个月网笼中成活率100%,体质量少量下降,其中在A区网箱养殖成参的效果明显优于C区;低密度下大规格幼参a(3 cm左右)比小规格幼参a(1.5 cm左右)生长率更快和成活率更高;而A和B海区由于营养盐、底质有机质含量相对较高,幼参和成参的养殖效果要优于C区。因此,利用网笼在野外养殖糙刺参是可行的,但是必须对海参规格和养殖地点进行合理选择。