花生种子总RNA提取的一种有效方法

从植物中提取RNA的方法有多种,由于花生种子富含脂肪、蛋白质、多糖和酚类化合物,有些方法并不适于花生种子RNA的提取.本文设计了一种从花生种子中分离高质量总RNA的方法,并提取了花生的根、茎、叶、种子等不同器官的RNA.结果证明,利用该方法提取的花生种子总RNA质量较高,完全能满足后续的分子生物学研究.同样也适于花生根、茎、叶总RNA的提取.     

玉米RNA提取方法的比较研究

以玉米嫩单10为材料,比较TRIzol法、CTAB法和SDS法改进法提取总RNA的效果。结果表明,SDS法改进法能有效去除多糖和蛋白,提取的RNA中28S rRNA亮度约为18S rRNA的两倍,OD₂₆₀/OD₂₈₀值介于1.7～2.2;CTAB法提取的RNA 28S rRNA明显缺失,泳道模糊不清,杂质多;TRIzol法RNA降解严重,沉淀方法以无水乙醇配合LiCl沉淀RNA节省时间,反转录和RT-PCR效果好。改良的SDS酸酚法适合玉米总RNA的提取。     

2种提取椰子树RNA方法的比较研究

椰子树组织中富含多糖和酚类化合物，为了获取高质量的RNA，笔者以椰子树叶片和根部为材料，比较分析CTAB法和SDS法提取RNA的效果。结果表明：CTAB法提取椰子树组织的总RNA效果较好，能有效克服酚类物质和多糖对RNA提取的影响。经OD值检测和电泳检测，总RNA的28 S和18 S条带清晰可见，纯度较高，完整性好，无明显降解，以此RNA为模板进行RT-PCR反应，能获得特异条带，表明该RNA完全可以用于后续的分子生物学操作。     

2种微藻总RNA提取方法的比较

以微茫藻和莱茵衣藻为材料，比较Trizol试剂法和SDS-LiCl沉淀法提取2种微藻总RNA的效果，以期筛选出适合微藻RNA的提取方法。结果表明，SDS-LiCl沉淀法能从微茫藻中提取高质量的RNA，而Trizol法和SDS-LiCl沉淀法均能从莱茵衣藻中获得高质量的RNA，但Trizol法更为简单有效。RT-PCR结果表明，SDS-LiCl沉淀法提取的微茫藻总RNA和Trizol法提取的莱茵衣藻总RNA都能直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。     

影响植物组织总RNA质量的因素

随着大量生物领域科研人员进入植物RNA研究领域，开展RNA研究，使得以RNA为终产物的基因组研究取得突破性进展，新的RNA基因不断增加，RNA的新功能不断被发现。但由于RNA的不稳定性，使得RNA操作远比DNA操作困难，且尚有大量未知的RNA及其功能等待人们去探索、研究．而这些研究又都基于高质量RNA的提取。因此，根据笔者自身实验经验，及在查阅大量相关文献的基础上。针对植物总RNA提取的一些关键影响因素、消除对策、RNA检测方法及RNA保存方法上进行了系统的阐述，旨在为高质量植物组织总RNA的制备提供理论参考，为RNA分子生物学实验后续研究提供理论支撑。     

一种快速大量提取禾谷类作物幼苗期总RNA的方法

为探索一种快速、大量提取禾谷类作物总RNA的方法,利用改良的热酚法提取禾谷类作物(玉米、水稻和小麦)幼苗期不同组织的总RNA,该方法在2.5 mL的离心管中进行,在提取缓冲液中增加了巯基乙醇,对传统的操作步骤进行了优化.提取的RNA质量较高,纯度检测表明RNA样品OD260/OD280在1.8～2.1之间,含量约为10 μg/μL.RT-PCR和Northern杂交结果表明RNA可以满足进一步分子操作的需要.     

白茶与茶树非绿色器官的总RNA提取

常规TRIzol法适用于一般茶树品种绿色叶片和芽的总RNA提取,但对于白茶品种芽叶和茶树非绿色组织的多糖和其它次生代谢物质含量高,常规TRIzol法提取总RNA存在一定困难.本文尝试利用改良热酚法提取白茶和非绿色组织的总RNA.结果表明,该法对于白茶、胚根和胚芽总RNA提取效果良好,可以用于cDNA的制备和RT-PCR反应的研究.     

一种改良的茶树高质量RNA快速提取方法

为了从富含多酚与多糖的茶树叶片中制备高质量的总RNA，作者在通用Tri-Reagent法的基础上进行改良，即在操作进行到沉淀RNA这一步时先加入1／2倍体积的高盐，再加入1／2倍体积的异丙醇，以除去茶多糖的干扰；同时使整个操作过程在低温环境下迅速连贯地进行，以防止褐化效应并减少RNA酶的污染。利用改良的方法所提取的茶树总RNA，经琼脂糖电泳鉴定，可见2条清晰的28sRNA和18sRNA谱带。且前者明显强于后者，表明RNA完整性好，无明显降解现象。     

甘蔗原生质体RNA提取条件和方法的优化

为了获得高产量和高纯度的甘蔗原生质体RNA,本研究以新台糖22号（ROC22）和桂糖28号（GT28）甘蔗原生质体为材料,探究了渗透压和原生质体活力对甘蔗原生质体RNA提取效果的影响,并比较了Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法、试剂盒法4种RNA提取方法。结果表明：原生质体渗透压与RNase活性呈显著正相关,原生质体活力与RNase活性呈极显著负相关;RNase活性越高,RNA提取效果越差;使用0.5 mol/L的甘露醇作为渗透压调节剂可获取活力最高的甘蔗原生质体;原生质体活力为70%和90%时所提的RNA完整性好且纯度高,符合后续分子实验的需求,原生质体活力为90%时,RNA产量最高。因此,需要提取甘蔗原生质RNA时,至少需要保证原生质体的活力在70%以上,且原生质体活力越高,RNA的产量越高;采用改良Trizol法,可以大量制备能满足后续分子实验的完整性好且纯度高的RNA,利用该条件和方法,可以确保获得大量高质量的甘蔗原生质体RNA。本研究结果为甘蔗体细胞融合育种过程中的分子生物学研究提供了方法和技术支撑。     

一种简单高效的真菌总RNA提取方法

介绍一种真菌总RNA的提取方法,此法无需特殊试剂和贵重仪器设备,可有效地排除真菌中大量存在的RNase以及多糖的干扰。此方法在变性剂存在的条件下,用酚/氯仿/异戊醇抽提,除去DNA和蛋白质,再用醋酸钠和无水乙醇沉淀RNA,去除多糖。用该方法提取的RNA样品,经核酸蛋白测定仪检测和1%琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的均一性和完整性很好。     

大豆不同器官中的RNA的提取分析

从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础.同种植物不同器官的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点.本文分别采用异硫氰酸胍法、改进的异硫氰酸胍法提取了大豆的根、茎、叶、胚芽等不同器官的RNA,结果发现异硫氰酸胍法适合根和茎的RNA提取,改进的异硫氰酸胍法不仅适合根与茎的RNA提取,还适于胚芽RNA的提取.而两种方法对从叶中提取RNA则均不是很理想.     

大豆E3连接酶基因GmPLR-2 的克隆及抗旱功能鉴定

PEG模拟干旱胁迫条件下E3连接酶GmPLR-2 基因在大豆根茎叶中呈上调表达，推测其可能参与大豆抗 旱调节。本研究克隆GmPLR-2 基因，构建植物过表达载体pCAMBIA3301-GmPLR-2、RNA干扰表达载体pCAM⁃ BIA3301-GmPLR-2-RNAi并转化到吉农38中，对T2转基因植株进行分子检测，连续7 d不浇水后测定转基因叶片 中相关生理生化指标。结果表明：共获得T2过表达阳性植株12株，RNA干扰阳性植株11株。干旱胁迫7 d后过表 达植株中相对含水率、POD活性、SOD活性、Pro含量均高于未转化植株，而RNA干扰植株中则低于未转化植株；另 一方面过表达植株中相对电导率、MDA含量均低于未转化植株而RNA干扰植株中含量则高于未转化植株，且差异 极显著，说明GmPLR-2 基因的表达与大豆中相关抗旱指标的变化有关。     

Non-Traditional Muesli Mixtures Supplemented by Edible Flowers: Analysis of Nutritional Composition,Phenolic acids,Flavonoids and Anthocyanins

Plant Foods for Human Nutrition - In this study, the effect of using medicinal plants on nutrition composition and biologically active substances in cereal mixtures were investigated. In order to...     

利用转基因技术初步鉴定香蕉RNA解旋酶基因功能

本研究利用前期抑制差减杂交技术筛选获得的香蕉果实上调表达的基因片段,经NCBI比对,表明该基因片段属于香蕉ATP依赖的RNA解旋酶(Helicase)基因家族成员,含有完整的RNA解旋酶超家族C-末端结构域HELICc结构。经Southern杂交证实,此RNA解旋酶基因在香蕉基因组中只有一个拷贝。构建RNA解旋酶基因的反义基因植物表达载体PBIPC86,转化番茄获得6株转基因番茄植株。转基因番茄植株的叶、花和生长形态均有变异,部分转基因番茄生长势弱。该研究结果对鉴定香蕉RNA解旋酶基因功能奠定了初步基础。     

Influence of seed quality on seedling growth of white clover (Trifolium repens L.)

The influence of seed quality on seedling growth of white clover cv Makibashiro plants was examined in a controlled environment. The average dry matter (DM) yield of 70-day-old seedlings from a poor-quality seed lot was significantly less than that from a high-quality seed lot. In both seed lots, a linear relationship between the DM yield and time from sowing was observed. The slope of regression of DM yield against time from sowing for the poor-quality seed lot was less than the equivalent slope of the high-quality seed lot, suggesting that possible avenues for increased DM accumulation in a high-quality seed lot are somewhat indirect (time of emergence, uniform emergence etc.); a direct effect of seed quality on the photosynthetic ability of plant tissue seems less likely to occur. The root: shoot ratios declined in both groups of plants with increasing age. Seedlings from the high-quality seed lot reached a stable root:shoot ratio (equilibrium state) much earlier than those from the poor quality seed lot. The seed quality had no influence on the proportion of DM partitioned to various organs. The results of this study are discussed in relation to field establishment.     

RNAi技术在植物改良中的应用

RNA干扰是一种高效的、序列特异的基因沉默现象。文章介绍RNAi技术的研究简史及作用机制，以及在改良植物的体系结构、培育不育系、调控植物的颜色和香味、延长果实的货架期和在无核果实中的研究进展供这一领域的研究者作参考。     

Molecular- and chemo-systematics: do they have a role in agrochemical discovery?

The use of chemosystematics and molecular data for the selection of plants for screening for new agrochemicals are discussed. The paper shows how the use of systematic data for selecting plants for limonoids, diterpenoids and polyhydroxy alkaloids has resulted in the isolation of many biologically active compounds.