氢氯噻嗪在Caco-2细胞模型中的体外转运研究

采用体外培养的人小肠上皮细胞模型Caco-2考察浓度、时间、P-糖蛋白(P-glyprotein,P-gp)抑制剂维拉帕米(verapamil)以及pH对氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide)跨膜转运的影响.氢氯噻嗪双向转运的Papp比值即Papp B→A/Papp A→B均大于1.5.在加入P-gp抑制剂维拉帕米后,氢氯噻嗪PappA→B极显著增大,Papp B→A降低,且Papp B→A/Papp A→B从2.87下降到0.67,加入前后有极显著差异(P0.01),且氢氯噻嗪的吸收转运随pH值的降低而显著增加.结果表明,氢氯噻嗪在Caco-2细胞模型中的吸收可能存在由载体介导的主动转运,同时它还受到P-糖蛋白的外排作用.     

Caco-2细胞单层模型构建及3种药物吸收机制评价

目的:研究3种不同特性药物体外Caco-2细胞转运及其机制.方法:构建Caco-2细胞单层模型,选择酚酸类药物丹参总酚酸,生物碱类药物盐酸小檗碱和皂苷类药物三七皂苷R1为模型药物,研究3种不同特性药物经Caco-2细胞单层膜转运特点,分析其转运机制.结果:丹参总酚酸在酸性条件下经Caco-2细胞单层膜转运较高,无外排机制.盐酸小檗碱外排机制较强,不受pH的影响.三七皂苷R1经Caco-2细胞转运较差,但无外排机制,不受pH的影响.结论:3种药物口服吸收均较差,但机制不同.提高3种药物口服吸收的措施:提高丹参总酚酸在胃中滞留时间;消除盐酸小檗碱的外排影响;改善三七皂苷R1的膜透性.     

转运葡萄糖苷类化合物的Caco-2细胞模型建立

建立转运葡萄糖苷类化合物的Caco-2细胞模型,为葡萄糖及葡萄糖苷类化合物肠道吸收研究提供基础。通过对Caco-2细胞最适培养基的选择、单层致密性的测定、单层通透性和细胞两侧碱性磷酸酶活性比的测定、单层亚显微结构的观察、细胞葡萄糖转运蛋白SGLT1和GLUT2的mRNA及蛋白表达水平的分析,建立可靠的细胞模型。研究表明:Caco-2细胞的最适培养基为添加体积分数15%血清的DMEM低糖培养基;Caco-2细胞在14～17d的跨膜电阻趋于稳定,苯酚红的表观渗透系数达到0.49×10-6~0.51×10-6cm·s-1,微绒毛分化成熟,细胞两侧碱性磷酸酶比值达到2.0以上。葡萄糖转运载体SGLT1的mRNA表达在14d时显著高于17d和21d,葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2的蛋白表达在14、17、21d无显著差异(P<0.05)。Caco-2细胞培养14～17d即可建立可靠的肠细胞吸收模型,用于葡萄糖及葡萄糖苷类化合物吸收的体外研究。     

Caco-2细胞模型建立及其在纳米脂质体包裹胰岛素体外吸收研究中的应用

为建立Caco-2细胞模型，并用于纳米脂质体包裹胰岛素的体外吸收特性研究．通过Caco-2细胞培养于Transwell上，培养20余天，使其生长分化成单层小肠上皮样细胞，然后以单层细胞电阻，电镜观察小肠上皮结构的形成，碱性磷酸酶反应测定单层细胞极性以及对葡聚糖的通透特性等指标对该模型进行评估，并运用Caco-2细胞模型，对胰岛素和纳米脂质体胰岛素进行通透特性研究．结果表明，Caco-2细胞形成刷状缘及紧密连接结构，碱性磷酸酶活性集中在刷状缘侧，单层细胞电阻达到300～500Ω／cm^2，类似小肠上皮．纳米脂质体包裹后，胰岛素的通透量显著增加．说明纳米脂质体包裹可提高胰岛素的通透性，可以作为胰岛素口服用药的有效方法．     

土壤-植物系统重金属镉、锌生物有效性的数学模型评价

植物对土壤中重金属的吸收是一个非线性的过程.由于土壤和植物参数测定具有相当难度,经验模型而非理论模型常被用于评价和预测土壤—植物系统中重金属的生物有效性.在已发表的文献中,弗兰德利希模型(Freundlich typemodel)已被一些学者实际应用于预测和评价植物对土壤中重金属的吸收.重金属的生物有效性与土壤中重金属的总量、pH和有机质含量具有极为密切的关系.然而,对同时建立于上述3个参数的重金属生物有效性的数学评价模型的实际应用还未得到验证.为此,在对已发表文献的数据进行分析的基础上,采用多元回归的方法,建立了基于土壤重金属全量、pH和有机质含量为参数的重金属生物有效性评价模型.实际分析表明,虽然模型中各参数的系数因土壤类型、气候和作物种类而不同,两模型均能很好地评价和预测作物对土壤重金属镉的吸收.与弗兰德利希模型相比较,所建数学模型能更精确地评价土壤—植物系统中重金属锌的生物有效性.     

八珍汤中芍药苷、阿魏酸肠吸收影响因素研究

考察药物质量浓度、肠段、pH值及P-gp对八珍汤中芍药苷、阿魏酸肠吸收的影响规律.采用大鼠在体循环灌流法,应用HPLC测定肠吸收循环液中芍药苷、阿魏酸的质量浓度,UV法测定肠吸收循环液中即时酚红质量浓度.芍药苷、阿魏酸分别在0.08~0.64 mg/mL和0.008~0.064 mg/mL范围内,各浓度的吸收量与药物浓度呈良好线性关系(r0.999),且吸收速率常数(Ka)、累积吸收百分率(A)及t1/2无显著性差异;pH值在7.8~5.8范围内对芍药苷无显著影响,而阿魏酸的吸收量、Ka、A,随着pH值的减小而增加(P0.05);在消化系统中,芍药苷各参数无显著性差异,而阿魏酸在胃中的吸收量、Ka、A显著增大(P0.05);此外,P-gp抑制剂维拉帕米对芍药苷、阿魏酸的吸收有明显促进作用(P0.05),P-gp诱导剂利福平对芍药苷、阿魏酸的吸收有明显的抑制作用(P0.05).芍药苷、阿魏酸在肠道的吸收均呈一级动力学过程,推断为被动扩散;芍药苷无特定的吸收部位,阿魏酸在胃中显显著被吸收;芍药苷、阿魏酸为P-gp底物,可通过与P-gp抑制剂合用提高其生物利用度,而与P-gp诱导剂合用则降低其生物利用度.     

FeⅡ(EDTA)溶液吸收NO的工艺参数影响

在双驱动磁力搅拌釜中,对FeⅡ(EDTA)(乙二胺四乙酸亚铁)溶液络合吸收NO进行研究,考察溶液pH值、O2体积分数、SO32-浓度等对NO吸收效果的影响.结果表明,在pH值小于4的酸性条件下,溶液吸收能力很差;当pH值大于4时,吸收容量随着pH值的增加而快速增加,而在pH值大于6以后,吸收容量基本相等.由于FeⅡ(EDTA)中的亚铁很容易被O2氧化而失效,溶液对NO的吸收能力随着O2体积分数的增加而下降.经测定,当O2的体积分数为5%和8%时,FeⅡ(EDTA)溶液对NO的吸收容量分别为没有氧气作用时的50%和31%;SO32-可部分还原失效的络合吸收剂,加入1 mmol.L-1的SO32-可使溶液对NO的吸收容量增加50%.     

山药多糖对体外培养大鼠胰岛细胞活性及胰岛素分泌的影响

为评价山药多糖对胰岛细胞功能的影响,以不同质量浓度葡萄糖刺激胰岛素释放,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛β细胞活性,同时以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达,研究山药多糖与大鼠胰岛细胞共培养对胰岛细胞活性与胰岛素分泌水平的影响,并对其影响机制进行探讨.结果发现,1600 mg/L组胰岛细胞活性稍有下降,但是与对照组没有显著差异(p0.05);其余各组随培养液中山药多糖质量浓度的增加,胰岛细胞活性增加.低糖或高糖质量浓度环境中实验组与对照组的胰岛素分泌没有显著差异(p0.05),RT-PCR发现实验组的bcl-2表达显著高于对照组(p0.05).800 mg/L山药多糖明显提高胰岛细胞的存活率,改善胰岛功能.     

过氧化氢诱导前列腺癌PC3细胞HSP60表达和Akt蛋白磷酸化的研究

以不同浓度H_2O_2刺激PC3细胞24h,应用MTT法分析细胞活力变化,并采用蛋白印迹方法检测HSP60蛋白、Akt蛋白(总Akt蛋白)和磷酸化Akt蛋白的表达水平.结果表明,15.625μmol/L的H2O2可诱导PC3细胞内HSP60表达显著升高(p0.05),7.312μmol/L和15.625μmol/L的H_2O_2均会导致磷酸化Akt蛋白的量显著下降(p0.01),但该两种浓度的刺激对细胞内总Akt蛋白量并无显著影响(p0.05).     

冰片对胰岛素透粘膜吸收的促进作用研究

考察冰片对胰岛素透口腔粘膜吸收的促进作用.以SD大鼠为对象,以血糖浓度为指标,研究不同浓度的冰片对胰岛素透口腔粘膜吸收的促进作用.研究发现,一定浓度的冰片(0.12%)能显著促进胰岛素透口腔粘膜的吸收(P<0.05),但由于冰片水溶性极差,其剂量依赖性不很明显,即增加冰片的量不一定能成比例地促进药物的吸收.冰片对胰岛素透口腔粘膜吸收有显著促进作用.     

小肠粘膜细胞铁吸收机制

缺铁性贫血和运动性低铁状态在运动员中发生率高于一般人群，运动员补铁效果不理想。寻求有效的补铁措施的关键问题是要阐明小肠粘膜上皮细胞究竟如何吸收铁，然而有关铁吸收的机制一直不清楚。近几年研究发现小肠粘膜上皮细胞存在DMT1、Dcytb、Fp1和Hp等铁转运蛋白TfR-1和TfR-2在隐窝细胞和绒毛细胞基底侧膜具有相对特异性分布。本根据这些发现以及对其转运机制、转运特性和调节机制的研究进展勾画出小肠粘膜上皮细胞铁吸收过程和调节机制模型。     

Availability and toxicity of Fe(II) and Fe(III) in Caco-2 cells

The objective of the present study was to compare the toxicity and availability of Fe(II) and Fe(III) to Caco-2 cells. Cellular damage was studied by measuring cell proliferation and lactate dehydrogenase (LDH) release. The activities of two major antioxidative enzymes [superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx)] and differentiation marker (alkaline phosphatase) were determined after the cells were exposed to different levels of iron salts. The cellular iron concentration was investigated to evaluate iron bioavailability. The results show that iron uptake of the cells treated with Fe(II) is significantly higher than that of the cells treated with Fe(III) (P<0.05). Fe(II) at a concentration >1.5 mmol/L was found to be more effective in reducing cellular viability than Fe(III). LDH release investigation suggests that Fe(II) can reduce stability of the cell membrane. The activities of SOD and GPx of the cells treated with Fe(II) were higher than those of the cells treated with Fe(III), although both of them increased with raising iron supply levels. The results indicate that both Fe(II) and Fe(III) could reduce the cellular antioxidase gene expression at high levels.     

Comparison of intestinal absorption of two insulinmimic vanadyl complexes using Caco-2 monolayers as model system

Intestinal absorption of two oxovanadium complexes, vanadyl acetylacetonate (VO(acac)2) and bis-(maltolato)-oxovanadium (VO(ma)2), has been compared using Caco-2 monolayers as a model system. The two compounds are similar in chemical structures but different in glucose-lowering effects. Our experimental results show that they are both transported via passive diffusion with apparent permeabilty coefficients (apical→basolateral) of (82.0 ± 6.7) ×10-7 and (14.6 ± 0.7) ×10-7 cm·s-1, respectively. This suggests that absorptivity of VO(acac)2 is much higher than that of VO(ma)2. This difference may be related to the metabolism of either compound, or its ligand, or both in the course of the transport. However, This difference in absorption will cause the great difference in bioavailability, which might account for better efficacy of VO(acac)2 than VO(ma)2 as the insulin-mimic agent.     

基于数字高程模型(DEM)的可可西里地貌及区划研究

基于数字高程模型(DEM)数据,应用地理信息系统(GIS)方法,对可可西里地区地貌要素进行定量分析,并对其地貌区划进行研究。可可西里地区海拔分为中海拔、高海拔和极高海拔三级,其中高海拔地区占据69.38%的区域。研究区夷平面广泛发育,根据地势起伏度可划分为丘陵、平原和台地3种类型。除东部三江源地区外,研究区主体未受到青藏高原强烈隆升造成的河流溯源侵蚀影响,坡度类型以小于15的微斜坡、缓斜坡和斜坡为主,地势平坦。依据地貌形态特征定量分析、地貌类型组合和地貌成因的差异性原则,可可西里地区可划分为4个地貌区:羌塘高原地貌区(Ⅰ)、东昆仑山山地地貌区(Ⅱ)、三江源丘状山原地貌区(Ⅲ)和柴达木高原盆地区(Ⅳ)。其中,羌塘高原地貌区又可划分为可可西里高原地貌亚区(Ⅰ_1)和唐古拉山高山地貌亚区(Ⅰ_2),东昆仑山地地貌区可划分东昆仑南部极高山地貌亚区(Ⅱ_1)和东昆仑北部高山地貌亚区(Ⅱ_2)。地貌要素研究可以直观、量化地反映可可西里地区海拔、地势起伏度及坡度特征,地貌区划研究可以反映可可西里地区高原、山地、山原、盆地的地貌格局和水平分异,对研究地貌特征、地貌类型及开发保护具有重要意义。     

金属—邻菲罗啉—四苯硼酸根三元离子缔合配合物的沉淀性质研究

本文研究了Fe(Ⅲ)、Zn(Ⅱ)、Ag(Ⅰ)的邻菲罗啉配离子与四苯硼酸根生成三元离子缔合配合物沉淀的pH条件,实验验证了金属—邻菲罗啉配离子与四苯硼酸根的缔合比。用系数比率法测定了Fe(Ⅲ)、Fe(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Cu(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)、Ag(Ⅰ)的邻菲罗啉—四苯硼酸根三元配合物沉淀的溶度积Ksp,并对有关缔合性质进行了探讨。     

Permeation of vanadium（Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ）-dipicolinate complexes across MDCK cell monolayer and comparison with Caco-2 cells

The permeation and eytotoxicity of three insulin-mimetic vanadium（Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ）-dipicolinate complexes were studied using the MDCK cell monolayer in comparison with the Caeo-2 cells. On MDCK cell monolayer, the apparent permeation coefficients （Papp） were estimated to be （7.5±1.0）×10^-6, （1.0±0.2）×10^-6, （1.7±0.4）× 10^-6cm/s for V（Ⅴ）, V（Ⅵ）, and V（Ⅲ）-dipie complexes, respectively. The permeability of V（Ⅴ）-dipie complexes is much better than the others, which is in agreement with its better hypoglycemie effect in animal tests. On Caeo-2 cell monolayer, Papp were found to be in the range of 1-3×10^-6 ends and not to be affected by excessive amounts of dipieolinate ligand. By contrast, the permeability in the AP→BL direction across the MDCK monolayer increased greatly in the presence of free ligands, suggesting existence of active transport mechanism of vanadium complex anions on the MDCK cells. The eytotoxieity of the three complexes was found similar and the IC50 were measured in the range of 0.6-0.9 mmol/L for MDCK cells and 1.6--2 mmol/L for Caco-2 cells. The cytotoxicity of three vanadium complexes was conceivably in consistence with their permeability, suggesting that the toxicity, permeation and cellular metabolism of vanadium complexes are closely related.     

不同初始pH值酸性土壤净矿化、净硝化和酸度变化分析

采集了4个不同初始pH值酸性土壤,在60%土壤持水量和25 ℃条件下对土壤矿化、净硝化和酸度变化进行了研究.结果表明,Ⅰ号土壤(pH=4.03,茶园土)矿化作用不明显,Ⅱ号(pH=4.81,玉米地)、Ⅳ号(pH=6.02,菜地)土壤矿化模式为Logistic 方程,Ⅲ号土壤(pH=5.41,菜地)为指数方程.不加NH+4条件下Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号土壤净硝化模式为一级反应方程,加NH+4后净硝化速率增加一个数量级.培养结束后不加NH+4条件下Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号土壤pH值没有变化,加NH+4处理后pH值显著降低,同时交换性Al3+显著增加.加NH+4促进酸性土壤(pH=4.81~6.02)硝化和酸化,但pH值过低的土壤(pH=4.03)NO-3-N、pH值和交换性Al3+无显著变化.     

铁蛋白反应器储存有毒金属离子的初步研究

探讨铁蛋白反应器在模拟流动海水体系中储存有毒金属离子的能力及规律.在体外,脱铁核铁蛋白能重新构建新的铁核且核中多数铁组分经含有5% 氯化钠的海水处理后仍可稳定于蛋白壳中,只有少量对H 或OH- 较敏感的铁组分随反应体系的pH值增加或减少而被直接释放于介质中.此外,铁蛋白还能储存Co2 、Ni2 、Mn2 和Zn2 等有毒金属离子,并释放相对应的铁量,其储存离子量和释放Fe3 量的摩尔比为1:1,该储存量及能力与环境介质的pH值有关,与Na 、K 、Ca2 等非过渡金属离子无关.经改造后的铁蛋白反应器预计可用于监测流动水域的有毒金属离子.     

C、细胞色素P450药物代谢酶3A亚型抑制剂甲

谢与CYP450药物代谢酶有关。Characteristics of uptake, transport and efflux of Z-and E-ajoenes in Caco-2 cell monolayers in vitroTIAN Li, YANG Xiu