基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路探讨二十五味珊瑚丸对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的作用研究北大核心CSCD

该研究基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究藏族药二十五味珊瑚丸(Ershiwuwei Shanhu Pills,ESP)改善东莨菪碱(scopolamine,scop)致小鼠学习记忆障碍的作用机制。将ICR小鼠随机分为空白组、模型组、二十五味珊瑚丸低(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、高(800 mg·kg^(-1))剂量组和盐酸多奈哌齐组,采用腹腔注射东莨菪碱的方法建立学习记忆障碍模型。通过Morris水迷宫行为学实验检测小鼠学习和记忆能力,Nissl染色检测小鼠海马和皮质神经元损伤情况,免疫荧光检测小鼠海马和皮质中神经元特异核蛋白(NeuN)表达,采用生化试剂盒检测小鼠海马中乙酰胆碱(Ach)含量和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)含量,Western blot法检测海马中细胞质Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白含量。结果显示,与模型组相比,二十五味珊瑚丸给药组小鼠在Morris水迷宫行为学实验中潜伏期显著减少;Nissl染色结果显示,神经元数量显著增加;免疫荧光检测NeuN结果显示,NeuN表达显著提高;AchE活力和MDA水平显著降低,Ach含量和SOD、CAT、T-AOC水平显著提高;Western blot法检测结果显示,模型组小鼠Keap1表达显著提高,二十五味珊瑚丸给药组表达差异无统计学意义,与模型组小鼠相比,二十五味珊瑚丸给药组Nrf2和HO-1表达显著提高。结果表明,二十五味珊瑚丸对东莨菪碱导致的小鼠学习记忆障碍有保护作用,其作用机制可能是通过调节Keap1/Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化作用。     

槲皮素对鹅膏蕈氨酸致痴呆大鼠模型海马神经元的保护作用及机制

目的探讨槲皮素对鹅膏蕈氨酸(IBO)致痴呆大鼠模型海马神经元的保护作用及机制。方法采用Meynert基底核注射IBO建立痴呆大鼠模型。将90只SD雌性大鼠随机分为对照组,模型组,盐酸多奈哌齐组(阳性药组,3 mg·kg-1),槲皮素高、中、低剂量组(100,30,10 mg·kg-1),连续给药4周。采用Morris水迷宫检测大鼠行为学变化;HE染色观察脑组织病理改变;检测大鼠海马组织中乙酰胆碱(Ach)含量与乙酰胆碱转移酶(Ch AT)活性。结果与对照组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P0.05);大鼠在原平台象限停留时间缩短,站台穿越次数明显减少(P0.05);大鼠海马区神经元损伤明显;海马组织ACh含量、Ch AT活性均明显降低(P0.05,P0.01)。与模型组比较,槲皮素高剂量组的逃避潜伏期明显缩短(P0.01);槲皮素各给药组对神经元损伤具有一定改善作用,其中槲皮素高剂量组对神经元形态结构改善作用较明显;各给药组的ACh含量、Ch AT活性均有上升趋势,其中槲皮素中剂量组的ACh含量明显升高(P0.05),槲皮素高剂量组的Ch AT活性显著提升(P0.01)。结论槲皮素能显著改善IBO致痴呆大鼠模型的认知功能障碍及病理损伤,其作用机制可能与其增加海马区中Ach含量及Ch AT活性有关。     

益智安神液对记忆获得性障碍小鼠学习记忆能力和脑内胆碱能系统的影响

目的:观察益智安神液对东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠学习记忆能力及脑内胆碱能系统的影响。方法:将60只小鼠随机分为空白对照组、东莨菪碱模型组、盐酸多奈哌齐组(2.05×10-3g/kg)、益智安神液15.2 g/kg、7.6 g/kg、3.8 g/kg剂量组,连续灌服受试药物7天后,除空白对照组腹腔注射生理盐水外,其余5组小鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱注射液(3mg/kg)建立记忆获得性障碍模型,30 min后进行Morris水迷宫和跳台测试,测试结束后立即处死,迅速取出脑组织,取大脑皮层、海马进行匀浆,离心取上清液,采用比色法检测乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性、胆碱乙酰转移酶(Ch AT)活性、乙酰胆碱(Ach)含量。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠Morris水迷宫测试潜伏期延长,有效区域停留时间、有效区游泳路程减少、穿越平台次数减少;模型组小鼠跳台测试5min内错误次数增多,潜伏期缩短,提示小鼠获得性记忆障碍模型复制成功;与模型组比较,益智安神液15.2 g/kg、7.6 g/kg、3.8g/kg组均可缩短小鼠逃避潜伏期,延长有效区域停留时间及游泳路程,增加穿越平台次数;并延长跳台实验的潜伏期,减少错误次数;益智安神液15.2 g/kg、7.6 g/kg、3.8 g/kg组均可提高小鼠脑组织中Ch AT活性,抑制Ach E活性,增加脑内Ach含量;与阳性药盐酸多奈哌齐组比较,益智安神液各组之间无差异。最小有效剂量是3.8 g/kg。结论:益智安神液可改善东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠的学习记忆能力,有较好的益智作用,其机制可能与调节脑内胆碱能系统的作用有关。     

益智醒脑颗粒对血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统的影响

目的观察益智醒脑颗粒对血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统的影响。方法双侧颈总动脉结扎法制备模型,将大鼠随机分为假手术组,模型组,吡拉西坦组(378 mg/kg),益智醒脑颗粒高、中、低剂量组(1 260、630、315 mg/kg)。然后,进行Morris水迷宫实验,检测血浆Ach含有量、Ach E、GSH-Px活性,以及海马MDA含有量、SOD、MAO-B活性。结果与模型组比较,益智醒脑颗粒高、中剂量组可显著缩短大鼠逃避潜伏期(P0.05),Ach含有量升高、GSH-Px、SOD活性显著升高(P0.05,P0.01),MDA含有量降低、Ach E、MAO-B活性显著降低(P0.05),但低剂量组无明显变化(P0.05)。结论益智醒脑颗粒可改善血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统,在中、高剂量下作用更明显。     

Aβ1-40脑内注射对大鼠海马超氧化物歧化酶丙二醛的影响及通络救脑口服液的干预作用

目的 观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1 - 40 (Aβ1-40 )诱导的AD模型大鼠海马SOD活性和MDA蛋白表达的影响.方法 选用140只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组、通络救脑口服液各剂量组(12,24,48 mg·kg-1·d-1)共7组,每组20只.采用海马立体定向注射凝聚态Aβ1 - 40建立老年性痴呆(Alzheimer's disease, AD)动物模型.药物干预4周,第5周应用分光光度法检测大鼠大脑海马组织SOD、MDA蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,模型组SOD活性明显降低(P<0.05),而MDA含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,盐酸多萘哌齐组、通络救脑口服液各剂量组SOD活性明显升高(P<0.05),而MDA含量明显降低(P<0.05).结论 通络救脑口服液通过上调SOD的活性和抑制MDA的表达而发挥其抗氧化治疗老年性痴呆的作用.     

6首开心散类方对阿尔兹海默病模型小鼠的药理作用及机制研究

该文研究组方相同配比不同的6个开心散类方对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的改善作用,以及对阿尔茨海默病模型小鼠海马中的海马中脑源性神经营养因子(BDNF),Tau蛋白,p-Tau蛋白,Aβ,乙酰胆碱(Ach),乙酰胆碱酯酶(Ach E)及血清中N端前脑钠肽前体(NT-pro BNP)的影响,选用昆明小鼠,腹腔注射D-半乳糖和亚硝酸钠,建立阿尔茨海默小鼠模型后,连续灌胃35 d,其中阳性药为石杉碱甲(0.05 mg·kg-1),各开心散类方给药组高、中、低剂量分别为3.570,1.785,0.892 g·kg-1,采用Morris水迷宫评价各组动物学习记忆能力;Western blot方法检测各组小鼠海马中BDNF的含量;Elisa方法检测各组小鼠海马中Tau蛋白,p-Tau蛋白,Aβ,Ach,Ach E及血清中NT-pro BNP的含量。结果显示,《千金要方·卷十四》之开心散显著改善AD模型小鼠学习记忆能力,明显升高其海马中BDNF,Ach含量,显著降低其海马中Ach E,Aβ,Tau蛋白,p-Tau蛋白,NT-pro BNP含量,作用最为全面,在Tau蛋白方面作用较突出;《医心方》之开心散、《医门方》之开心丸、《备急千金要方》之定志小丸和《古今录验》之定志丸对AD模型小鼠各指标的影响各有侧重,部分剂量显著优化了评价学习记忆能力的各项指标,明显升高AD模型小鼠海马中BDNF,Ach含量,显著降低AD模型小鼠海马中Aβ,Tau蛋白,p-Tau蛋白含量及Ach E活性,明显降低AD模型小鼠血清中NT-pro BNP含量,作用较为显著;《千金翼》之补心汤的高、中、低剂量均基本未见其对阿尔茨海默病模型动物的影响。结果表明,《千金要方·卷十四》之开心散对阿尔茨海默病模型小鼠的作用最为全面,且在Tau蛋白方面的作用较为突出。     

枇杷叶紫珠苯乙醇苷对学习记忆功能障碍的影响

目的:研究枇杷叶紫珠苯乙醇苷对化学物质所致动物记忆障碍模型的影响。方法:采用避暗和跳台实验研究枇杷叶紫珠苯乙醇苷对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固障碍及30%乙醇所致小鼠记忆再现障碍的影响;用生化法测定东莨菪碱所致记忆获得障碍小鼠大脑皮层中的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、单胺氧化酶(MAO-B)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:避暗试验结果显示,与东莨菪碱所致记忆获得障碍、亚硝酸钠所致记忆巩固障碍及30%乙醇所致记忆再现障碍模型组比较,100和200 mg/kg的苯乙醇苷均明显减少5 min内的错误次数,并显著延长潜伏期。跳台试验结果显示,与模型组相比,100和200 mg/kg的苯乙醇苷均明显减少3 min内小鼠学习记忆的错误次数,延长潜伏期,显著提高学习记忆保持能力。与东莨菪碱所致记忆获得障碍模型组相比,100和200 mg/kg的苯乙醇苷均显著降低AchE活性、MDA的含量及MAO-B活性。结论:枇杷叶紫珠苯乙醇苷能改善记忆损伤模型动物的学习记忆功能,其机制可能与降低脑组织AchE活性,降低脑组织中丙二醛和单胺氧化酶活力等有关。     

红景天苷对血管性痴呆大鼠空间记忆及海马区COX-2、NF-κB表达的影响

目的:探讨红景天苷对血管性痴呆大鼠空间记忆及海马区环氧化酶2(COX-2)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:选择血管性痴呆大鼠45只为研究对象,分成假手术组、模型组、红景天苷组,各15只。通过Morris实验比较各组大鼠上台潜伏期、上台总路程、站台象限停留时间、穿越站台次数的水平。行为学实验结束后,测定各组大鼠的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)、乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(ACh E)水平。Western blot检测各组海马组织COX-2、NF-κB蛋白表达。结果:干预后,红景天苷组大鼠上台总路程、大鼠上台潜伏期都少于模型组,而红景天苷组大鼠穿越站台次数都多于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。红景天苷组大鼠的血清MDA含量及脑组织MAO活力低于模型组,而红景天苷组大鼠的SOD活力则高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。红景天苷组大鼠的Ach水平低于模型组,而红景天苷组大鼠的Ach E水平则高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠脑海马组织内COX-2、NF-κB水平显著增高,经过红景天苷治疗后,COX-2、NF-κB水平则显著降低(P<0.05)。结论:红景天苷通过抑制NF-κB及COX-2表达,进而改善血管性痴呆大鼠的认知能力障碍,产生脑保护作用。     

柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位抗抑郁作用机制研究

目的:研究柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位(CLMAF)抗抑郁作用机制。方法:小鼠分为正常对照组,模型组,CLMAF组(20,40,80 mg·kg-1),阿米替林(20 mg.kg-1)组,连续ig 7 d通过测定强迫游泳小鼠脑内单胺氧化酶(MAO)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量以及大鼠海马原代细胞培养初步探讨其抗抑郁作用机制。结果:CLMAF可显著抑制强迫游泳应激小鼠脑内MAO-A活力,并显著降低MDA含量,SOD活力也相应降低。同时,能够抵抗皮质酮(CORT)诱导的大鼠海马神经元损伤,使存活细胞数量增加。结论:CLMAF抗抑郁作用主要与抑制MAO-A活力,降低MDA含量和保护海马神经元等作用有关。     

骨碎补对东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨骨碎补改善东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力的作用机制。方法 昆明小鼠分为空白组、东莨菪碱模型组、骨碎补组、盐酸多奈哌齐组、抗脑衰胶囊组、ER阻断剂组。行为学测试小鼠学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马形态;免疫组化法检测小鼠海马中雌激素受体ERα、ERβ、FSHR、LHR表达;ELISA测定小鼠海马中ACh含量、AChE、ChAT活性。结果与模型组对比,行为学测试各给药组小鼠学习记忆能力明显改善(P 0.01);海马神经元结构清晰、排列紧密;ERα、ERβ、FSHR、LHR表达增加(P 0.05或P 0.01);ACh含量增加(P 0.01)、ChAT的活性增加(P 0.01)、AChE活性减弱(P 0.01),且均被ER阻断剂逆转。结论 ER通路介导骨碎补改善东莨菪碱模型小鼠胆碱能系统,增强学习记忆能力。     

醒脑益智胶囊对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍模型的影响

目的: 研究醒脑益智胶囊对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍模型的影响。 方法: 昆明种小鼠60只随机分为空白对照组,模型组,阳性对照组（石杉碱甲0.05 mg·kg^-1）,醒脑益智胶囊高、中、低剂量组（179.2,89.6,44.8 mg·kg^-1）,每组10只。每天ig给药2次,连续15 d进行预防性给药。给药后一次性腹腔注射东莨菪碱（5 mg·kg^-1）复制小鼠学习记忆获得障碍模型,避暗法、跳台法测定学习记忆能力,测定脑组织中超氧化物岐化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）的含量。 结果: 与模型组比较,高剂量组（179.2 mg·kg^-1）能在一定程度上延长小鼠潜伏期,减少5 min内错误次数,提高SOD活力,降低MDA的含量,差异具有显著性（P<0.05）。 结论: 醒脑益智胶囊有促进记忆和改善东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的作用。     

复方颐神养脑胶囊对多发性脑梗死痴呆大鼠的影响

目的：观察中药复方颐神养脑胶囊（YSYN）对大鼠多发性脑梗死痴呆（MID）的疗效及作用机制。方法：3月龄SD大鼠90只,于左侧颈外动脉注入复合血栓诱导剂,复制多发性脑梗死痴呆模型,动物随机分为模型组、YSYN高剂量组（960 mg·kg^-1）、YSYN中剂量组（480 mg·kg^-1）、YSYN低剂量组（240 mg·kg^-1）、西药阳性组（易倍申）（0.5 mg·kg^-1）以及YSYN合西药阳性药组（480 mg·kg^-1＋0.5 mg·kg^-1）,另设10只动物为假手术组,造模后第3天,各组均以10 mL·kg^-1灌胃给药,1次/d,连续4周,模型组和假手术组给予等量蒸馏水。采用Morris水迷宫法进行学习记忆测试;采用酶联免疫法测定海马组织去甲肾上腺素（NE）水平;采用比色法测定海马组织乙酰胆碱酯酶（AchE）、乙酰胆碱转移酶（CHAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果：与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低（P<0.05,P<0.01）,海马组织AchE含量显著升高（P<0.05）,海马组织CHAT、NE以及GSH-Px含量显著降低（P<0.01）;与模型组比较,YSYN能够显著提高多发性脑梗死痴呆大鼠学习记忆能力（P<0.05）;显著降低多发性脑梗死痴呆大鼠海马组织AchE含量,提高多发性脑梗死痴呆大鼠海马组织CHAT、NE及GSH-Px含量（P<0.05,P<0.01）。结论：YSYN对MID具有良好的保护作用,其作用机制可能是通过调节海马组织内去甲肾上腺素、乙酰胆碱及谷胱甘肽的活性来实现的。     

覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠 学习记忆作用机制研究

目的: 考察覆盆子有效部位对D-半乳糖联合氢化可的松造成肾阳虚型痴呆大鼠的影响,初步阐明覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆的作用机制。方法: 大鼠ip D-半乳糖125 mg·kg^-1,连续6周,后2周im 氢化可的松混悬液25 mg·kg^-1,造成肾阳虚痴呆模型,空白组和模型组灌胃生理盐水,其余各组每天均预防性灌胃覆盆子氯仿部位或乙酸乙酯部位高、低剂量(均按生药量计为24,12 g·kg^-1),连续4周。进行历时5 d的Morris水迷宫实验后,取大鼠皮层进行乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AchE)和胆碱乙酰化转移酶(choline acyltransferase, ChAT)活性检测、取海马CA1区进行HE染色和tau蛋白免疫组织化学检测。结果: 与空白组相比,模型组学习记忆能力下降,皮层AchE活性显著升高,ChAT活性显著降低,海马CA1区Pser404-tau阳性细胞明显增加;与模型组比较,覆盆子氯仿部位高、低剂量组、覆盆子乙酸乙酯部位高、低剂量组均能不同程度改善痴呆大鼠学习记忆能力,降低皮层AchE活性,升高ChAT活性;增加海马CA1区细胞总数,减少坏死细胞数,降低细胞坏死率;减少海马CA1区Pser404-tau阳性细胞数。结论: 覆盆子有效部位可能通过降低AchE活性,升高ChAT活性,保护海马CA1区神经元,减少tau蛋白表达而起到改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆。     

甘草酸铵联合苦参素抗大鼠肝纤维化作用及初步机制探讨

目的:研究甘草酸铵联合苦参素对四氯化碳(CCl_4)导致的大鼠肝纤维化的抑制作用,并探讨其相关机制。方法:SD大鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常组,模型组,秋水仙碱阳性药组(2 mg·kg~(-1)),甘草酸铵组(15 mg·kg~(-1)),苦参素组(30 mg·kg~(-1)),甘草酸铵联合苦参素(15 mg·kg~(-1)+30 mg·kg~(-1))组,除正常组外,其余各组均采用CCl_4诱导的大鼠肝纤维化模型,治疗组分别给予等同于临床剂量的相应药物,正常组和模型组给予生理盐水进行对照。通过检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)和观察肝组织病理切片来评价肝纤维化程度,检测血清中白细胞介素6(IL-6),乙酰胆碱酯酶(Ach E),高迁移率族蛋白1(HMGB1),内毒素(LPS)变化趋势。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,AST,IL-6,Ach E,LPS,HMGB1水平及肝组织Hyp含量明显升高(P0.01),模型组肝组织病变较为明显;与正常组比较模型组胶原面积显著增加;与模型组比较,治疗组明显降低大鼠血清中ALT,AST,IL-6,Ach E,LPS,HMGB1水平及肝组织Hyp含量(P0.05),肝组织病变明显减轻,胶原面积明显降低;同时苦参素组与模型组比Ach E显著降低(P0.05),联合用药与苦参素组比Ach E显著升高(P0.05)。结论:甘草酸铵联合苦参素可抗由CCl_4诱导的大鼠肝纤维化,抗肝纤维化主要可能是通过减少大鼠体内LPS的含量和降低IL-6,HMGB1的表达来实现的,并且联合用药可改善临床上单独使用苦参素降低乙酰胆碱酯酶下降的情况。     

南天竹不同药用部位对三氧化二砷肝毒与肾毒的保护作用

目的:比较南天竹的不同药用部位对抗肿瘤药三氧化二砷的减毒作用,为南天竹的深度开发应用提供科学依据。方法:采用大鼠慢性三氧化二砷中毒模型,将56只SD大鼠随机分为空白组;模型组(信石40 mg·kg~(-1));2,3-二巯基丙磺酸钠组(2,3-二巯基丙磺酸钠25 mg·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹根组(南天竹根20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹茎组(南天竹茎20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹叶组(南天竹叶20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹果实组(南天竹果实20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1))。连续灌胃给药10 d。末次给药后,收集24 h内尿液,手术后收集血清、肾组织及肝组织样本,测定血肌酐(serum creatinine,SCr)及尿肌酐(urine creatinine,UCr)水平,计算内生肌酐清除率(creatinine clearance,CCr),同时检测各组大鼠肝脏、肾脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA),总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT)水平,肾脏及肝脏苏木精-伊红染色后显微镜下观察组织病理形态学变化。结果:与模型组比较,南天竹根、茎、果实联合给药组大鼠体质量显著增加(P 0. 01),肾脏系数显著降低(P 0. 01),大鼠UCr和CCr水平显著升高(P 0. 01),肾组织中MDA含量显著下降(P 0. 01),肝组织中MDA水平明显降低(P 0. 05),肝、肾组织中SOD和CAT活性显著升高(P 0. 01),大鼠肝、肾损害病理损伤减轻;南天竹叶联合给药组除肝脏中SOD活性与模型组无明显差异外,其余指标与以上3组变化一致。结论:南天竹根、茎、果实对三氧化二砷氧化应激所致肝、肾毒性有显著的保护作用,南天竹叶效果稍差。     

温胆汤对精神分裂症模型鼠海马PKC,p38MAPK及P-Cx43的影响

目的:研究温胆汤对精神分裂症模型鼠大脑蛋白激酶C(PKC),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及磷酸化连接蛋白Cx43(P-Cx43)蛋白表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机平均分为6组:正常组(A,生理盐水20 m L·kg-1),模型组(B,生理盐水20 m L·kg-1),氯氮平组(C,20 mg·kg-1),温胆汤高剂量组(D,40 g·kg-1),温胆汤中剂量组(E,20g·kg-1),温胆汤低剂量组(F,10 g·kg-1)。A,B组ig生理盐水;C组ig氯氮平;D,E,F组分别ig温胆汤,1次/d,21 d后,B,C,D,E,F组一次性ip地卓西平马来酸盐(MK-801)0.6 mg·kg-1,建立精神分裂症模型,行为学观察3 d后,处死大鼠,取海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western bloting)法检测海马组织中PKC,p38 MAPK及P-Cx43蛋白的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠出现刻板行为;海马组织PKC,p38 MAPK及P-Cx43含量明显升高(P0.05)。与模型组比较,温胆汤各组及氯氮平组均不同程度改善了模型鼠的一般状况;明显降低海马组织PKC,p38 MAPK及P-Cx43的含量(P0.05)。Cx43的磷酸化程度也有统计学意义(P0.05),且模型组磷酸化水平最高。结论:温胆汤可明显降低PKC,p38 MAPK及P-Cx43蛋白的浓度,进而调节缝隙连接通讯(GJIC)的功能。     

芍药内酯苷和芍药苷对慢性束缚应激大鼠神经营养因子以及一氧化氮影响的研究

研究芍药内酯苷、芍药苷对慢性束缚应激肝郁大鼠的作用及机制。以氟西汀及逍遥丸为对照,检测体重,糖水消耗量,并进行旷场行为学实验;格瑞斯比色法检测海马一氧化氮(NO)的含量;酶免法(ELISA)检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)的含量;RT-q PCR法检测海马神经元一氧化氮合酶(n NOS)m RNA表达;Western blot法检测海马中n NOS以及BDNF的蛋白表达。与模型组相比,30 mg·kg~(-1)芍药苷、30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高穿行次数(P0.05;P0.01);芍药苷、芍药内酯苷明显降低NO水平(P0.05,P0.01;P0.05,P0.05);30 mg·kg~(-1)芍药苷与30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高BDNF水平(P0.05)。与模型组相比,芍药苷、芍药内酯苷明显降低n NOS m RNA表达(P0.01;P0.05);30 mg·kg~(-1)芍药苷、30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高BDNF蛋白表达(P0.05)。芍药内酯苷、芍药苷为白芍柔肝解郁功效的有效成分,其作用机制与调节海马NO含量以及BDNF的表达有关。     

肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老模型小鼠CREB表达的影响

目的:观察肉苁蓉多糖(CDPS)对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆的影响及可能的机制。方法:昆明种小鼠90只,随机分为6组,即正常对照组,模型组,CDPS低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg-1),阳性对照组,每组15只。模型组、CDPS组及阳性对照组皮下注射150 mg·kg-1的D-半乳糖建立衰老小鼠模型,正常对照组给予等量生理盐水;同时,CDPS各组灌胃给予相应浓度的CDPS药液,阳性对照组给予10 mg·kg-1吡拉西坦,正常对照组及模型组给予等量蒸馏水。连续给药6周后,采用水迷宫、跳台实验测定小鼠学习记忆能力;试剂盒检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察脑组织海马区神经元细胞形态学变化;免疫组织化学染色检测cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的表达水平。结果:在水迷宫实验中,各给药组与模型组比较,逃避潜伏期和第1次到达站台时间均明显缩短且穿越站台次数增加(P<0.05)。在跳台实验中,与模型组比较,各给药组小鼠下台潜伏期显著延长,错误次数减少(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠脑组织SOD活性增加,MDA含量下降(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠脑组织海马CA1区神经元数量增加,病理改变减轻;各给药组小鼠海马区CREB表达水平与模型组比较显著增加(P<0.05)。结论:肉苁蓉多糖可以改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与上调CREB表达有关。     

补阴益智汤配方颗粒对东莨菪碱所致小鼠学习记忆损伤的保护作用

目的:考察给予东莨菪碱造模后,补阴益智汤配方颗粒对小鼠学习记忆损伤的保护作用,并通过神经递质和突触可塑性相关蛋白考察其可能的机制。方法:雄性昆明种小鼠50只,通过腹腔注射东莨菪碱(3.0 mg·kg~(-1))建立小鼠学习记忆损伤模型。随机分为正常组、模型组和补阴益智汤高、中、低(18,6,2 g·kg~(-1)),造模后,连续给药2周,通过小鼠跳台实验,Morris水迷宫实验和新物体辨别实验,考察小鼠学习记忆的能力。采用高效液相色谱法测定小鼠前额叶皮层和海马内氨基酸类神经递质的水平,通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马区内突触核蛋白(Syn),突触后密度蛋白-95(PSD-95)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠跳台实验、水迷宫实验潜伏期显著缩短(P0.01),触电次数显著增加(P0.01),对新物体的探索时间显著缩短(P0.01),海马及前额叶皮层内γ-氨基丁酸(GABA)含量增多,而谷氨酸(Glu)含量均显著降低(P0.01),海马内Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量均明显增多(P0.05,P0.01);与模型组比较,中、高剂量给药组潜伏期明显延长(P0.05,P0.01),其中高剂量组触电次数明显减少(P0.05);对新物体的探索时间显著延长(P0.01),GABA含量明显降低(P0.05,P0.01),Glu含量以及Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量明显升高(P0.05,P0.01)。结论:补阴益智汤配方颗粒可以改善东莨菪碱所致的小鼠学习记忆损伤,其机制可能与改变海马及前额叶皮层内Glu/GABA以及调节小鼠海马脑区内Syn和PSD-95蛋白的表达有关。     

藜芦配伍人参对未成熟小鼠雌激素样作用的影响

目的:观察藜芦配伍人参对未成熟小鼠子宫系数、性激素水平、靶器官子宫和阴道的病理学变化的影响。方法:昆明种雌性小鼠120只,随机分为正常组、特异性雌激素受体拮抗剂ICI组(5 mg·kg-1)、藜芦组(0.045 g·kg-1)、人参低、中、高剂量组(12,18,24 g·kg-1)、ICI和人参低剂量混合组(混合低剂量组)、ICI和人参中剂量混合组(混合中剂量组)、ICI和人参高剂量混合组(混合高剂量组)、藜芦和人参低剂量配伍组(配伍低剂量组)、藜芦和人参中剂量配伍组(配伍中剂量组)、藜芦和人参高剂量配伍组(配伍高剂量组),每组10只,给药5 d后分别观察小鼠子宫系数,血清中雌二醇(E2),黄体生成素(LH),促卵泡生成素(FSH)的水平及子宫、阴道的病理学变化。结果:与正常组比较,人参各剂量组能使未成熟小鼠的子宫系数显著增加(P0.05),E2含量明显升高(P0.05,P0.01),LH,FSH的水平显著降低(P0.05,P0.01),还能明显促进靶器官子宫、阴道的生长发育。配伍藜芦后,人参各剂量组的子宫系数明显降低(P0.05,P0.01),血清E2,LH和FSH水平明显升高(P0.05,P0.01),子宫和阴道的促生长发育作用减弱。结论:藜芦与特定剂量的人参配伍能够妨害人参的雌激素样作用。