钙离子在大鼠结肠平滑肌运动中作用机制的研究

目的 应用束缚应激大鼠实验模型,研究离体结肠平滑肌的收缩运动及其影响因素,探讨鸟苷素在结肠运动中的作用。方法 建立束缚应激大鼠动物模型,制备离体结肠平滑肌环行肌及纵行肌肌条,应用张力换能器,测定其肌张力。应用放射配基法测定结肠组织及血浆中鸟苷素含量。结果 束缚应激刺激可诱发大鼠排便增加,该动物模型是较好的模拟人ＩＢＳ的实验动物模型。束缚应激大鼠离体结肠平滑肌的张力升高,对Ｋ＾＋、Ｃａ＾２＋、乙酰胆     

钙稳态失衡在致结肠平滑肌收缩性改变中的作用

目的　探讨应激大鼠结肠平滑肌收缩时细胞内外钙离子 (Ca2 +)利用异常、细胞内钙稳态失衡在导致其收缩性改变中的作用。方法　建立寒冷 束缚应激大鼠排便异常的动物模型 ;测定离体结肠环形平滑肌收缩张力 ;差速离心制备结肠平滑肌肌浆网 ,测定肌浆网Ca2 + ATP酶活性。结果　应激大鼠结肠平滑肌收缩活性明显增强 ,并受Ca2 +通道阻滞剂显著抑制。应激大鼠结肠平滑肌肌浆网Ca2 + ATP酶活性降低 5 6 % (P <0 .0 5 )。结论　应激大鼠结肠环形平滑肌收缩活性显著增强 ,可能和肌细胞收缩时细胞外Ca2 +内流增加 ,肌浆网贮存Ca2 +释放减少、Ca2 + ATP酶活性降低等因素导致细胞内钙稳态失衡有关     

马来酸曲美布汀对束缚应激大鼠离体结肠平滑肌张力的调节作用机制

目的 研究曲美布汀对离体结肠平滑肌收缩及舒张运动的作用机制。方法 建立束缚应激诱发排便异常大鼠动物模型，制备离体结肠平滑肌环行肌及纵行肌肌条，应用张力换能器测定其肌张力。结果 束缚应激大鼠平滑肌肌条在基础状态时，曲美布汀可增加环行肌肌条张力，且随着浓度的递增平滑肌肌条张力有增加倾向。低于10^-7g／ml曲美布汀可增加纵行肌肌条张力，但高于10^-6g／ml时则降低肌条张力。曲美布汀可降低K^ 及乙酰胆碱作用下的束缚应激大鼠环行肌及纵行肌肌条张力，随着浓度的递增曲美布汀舒张平滑肌的作用有增加倾向。在Ca^2 作用下，10^-8g／ml曲美布汀增加束缚应激大鼠纵行肌及环行肌肌条张力，但高于10^-7g／ml时降低肌条的张力。结论 曲美布汀具有抑制和兴奋平滑肌双重作用，作用特点是调节平滑肌收缩与舒张运动，纠正肠管平滑肌运动异常。     

急性应激诱导肠功能紊乱后大鼠肠道协同刺激分子的表达

目的应用冷-束缚应激方法 ,诱导建立大鼠肠功能紊乱动物模型,了解与应激有关的肠功能紊乱时,肠道协同刺激分子CD80、CD86以及炎症因子VIP、IL-1β的表达,探讨大鼠肠道免疫耐受的变化。方法将60只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,建立冷-束缚应激动物模型。应用Bristol分型进行评分、于应激第6天利用直结肠扩张实验测定内脏敏感性,第7天行肠道黏膜病理检查。免疫组化法检测肠道CD80、CD86以及VIP、IL-1β表达。结果实验组大鼠在应激后第6天大便性状发生改变,肠道感觉阈值比对照组明显下降(P0.05),组织病理学检查无异常改变。免疫组化显示:在回肠末端,与正常对照组比较,实验组大鼠CD80和CD86的表达差异无统计学意义(P0.05);实验组大鼠VIP、IL-1β表达均较对照组明显增加,差异有统计学意义(P0.05),并且VIP的表达与IL-1β呈正相关(r=0.78,P0.01)。在远端结肠,实验组大鼠CD80、CD86以及VIP的表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P0.05);而IL-1β表达较对照组差异无统计学意义(P0.05);并且CD80的表达与VIP呈正相关性(r=0.70,P0.01),CD86的表达与VIP的表达呈正相关性(r=0.34,P0.05)。结论冷-束缚应激后肠功能紊乱大鼠中,末端回肠和远端结肠黏膜存在轻度的炎症反应,CD80和CD86分子在远端结肠的免疫调节过程中发挥了重要作用。     

急性束缚应激对大鼠结肠敏感性的影响

背景:内脏高敏感性是肠易激综合征(IBS)重要的病理生理特征,而应激事件能诱发或加重IBS患者的症状。目的:了解急性束缚应激对大鼠结肠敏感性的影响和持续时间,以及对单个平滑肌细胞收缩活动的影响。方法:建立急性部分束缚应激大鼠动物模型,于0天(应激前1天)、1天(应激当天)、2天(应激后1天)行结直肠气囊扩张．并行腹壁回撤反射(AWR)评分;分离平滑肌细胞,测定结肠平滑肌细胞的收缩百分率。结果:20 mm Hg和40 mm Hg扩张压力下,束缚组1天的AWR评分显著高于对照组(1．68±0．79对0．81±0．42、2．45±0．72对1．58±0．60,P<0．05);束缚组大鼠1天时AWR评分在20 mm Hg(P1=0．001;P3=0．006)和40 mm Hg(P2=0．012,P4=0．033)扩张压力下与0天、 2天相比显著增加,但在60 mm Hg和80 mm Hg扩张压力下以及对照组在每天的评分均无显著差异;束缚组结肠平滑肌细胞的收缩百分率与对照组无显著差异(P=0．523)。结论:急性束缚应激使大鼠结肠对低压力球囊扩张的敏感性呈一过性增加,对大鼠单个平滑肌细胞的收缩活动没有影响。     

以内脏高敏感为靶点的肠易激综合征大鼠模型评价研究

目的以内脏敏感性为靶点,评价比较慢性母婴分离和急性冷束缚应激肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)动物模型。方法分别采用慢性母婴分离和急性冷束缚应激方法建立动物模型,通过腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)、结肠黏膜超微特征、肥大细胞活化程度及结肠促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing factor,CRF)表达评价内脏敏感性及致敏因素。结果慢性母婴分离和急性冷束缚应激方法均能模拟IBS内脏高敏感和结肠动力特征,而慢性母婴分离应激组在高容量AWR评分、结肠黏膜超微特征改变、肥大细胞活化及结肠CRF表达中较急性冷束缚应激组更具有显著性差异。结论在以内脏敏感性为靶点研究的IBS动物模型中,慢性母婴分离造模方法更具有优势。     

降钙素基因相关肽在大鼠胃应激性溃疡发生过程中的作用

目的:观察降钙素基因相关肽(calcitoningene-related peptide,CGRP)在大鼠冷束缚应激过程中的动态改变及作用;观察阻断环氧化酶及一氧化氧合酶对应激大鼠血浆CGRP含量的影响。方法:制作大鼠冷束缚应激动物模型,用放免法检测大鼠冷束缚应激前及应激后2、4、6、8小时血浆CGRP含量。不同实验组大鼠,应激前分别用消炎     

柴胡疏肝散对慢性束缚应激性肝郁证大鼠的影响

目的:研究柴胡疏肝散对慢性束缚应激性肝郁证大鼠的影响.方法:应用慢性束缚应激方法建立肝郁证动物模型,观察大鼠体重、1%蔗糖水摄取量,放射免疫法测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)水平.结果:柴胡疏肝散能部分对抗应激导致的大鼠体重增长缓慢和高促ACTH,能增加应激大鼠的蔗糖水摄取量.结论:柴胡疏肝散可调节慢性束缚应激模型大鼠的功能紊乱.     

Ucn3及其受体CRFR2在肠易激综合征大鼠模型肠神经系统中的表达

目的:探讨尿皮质素3(Urocotin3,Ucn3)及其受体促肾上腺皮质释放因子受体2(corticotrophin releasing factor receptor2,CRFR2)在肠易激综合征中的表达.方法:将36只180-220g的Wistar大鼠随机分为对照组(N)、急性应激组(A,急性束缚1h)、慢性应激组(C,28d不可预知轻度应激)、急慢性联合应激组(AC,在慢性应激基础上给予急性束缚)4组建模.采用排便粒数、敞箱行为评分和蔗糖水偏嗜度评价动物模型.建成后留取大鼠结肠组织,采用Real-timePCR方法检测各组大鼠结肠中Ucn3及其受体CRFR2表达水平的变化.结果:Ucn3在各组大鼠结肠中的表达:N组1.108±0.293,A组3.594±1.839,C组1.852±0.674,AC组3.989±1.591,各应激组Ucn3的表达均高于对照组(P<0.05),各应激组间A组vsC组(P<0.017),C组vsAC组(P<0.002),表达有统计学差异.CRFR2在各组大鼠结肠中的表达:N组1.042±0.217,A组2.119±0.468,C组1.568±0.507,AC组2.392±0.840,各应激组CRFR2的表达均高于对照组(P<0.05).各应激组之间没有统计学差异.结论:慢性应激、慢急性联合应激建立肠易激综合征大鼠模型重复性好.Ucn3及其受体CRFR2在肠易激综合征中表达升高,且Ucn3在急性应激后升高比慢性应激后更明显.     

羟基红花黄色素A对大鼠避水应激所致结肠高动力的抑制作用及其机制

目的通过体内和体外研究探讨羟基红花黄色素(hydroxy safflower yellow A,HSYA)在大鼠应激性结肠高动力中的作用及其可能的作用机制。方法将15只雄性Wistar大鼠分为3组,分别为:SWAS(假性避水应激)组、WAS(避水应激)组、WAS+HSYA组,每组5只。WAS组和SWAS组大鼠连续10 d每天分别暴露于避水应激和假性避水应激中1 h,建立大鼠模型;WAS+HSYA组大鼠于每天进行避水应激前半小时,以60 mg/kg的HSYA灌胃,而WAS组以相同的生理盐水灌胃,SWAS组则不做处理。整个实验期间,分别记录各组大鼠的每天粪球排出量。于实验第11天,大鼠处死后取近端结肠制备肌条,以张力换能器测定结肠平滑肌肌张力变化。另取正常大鼠离体近端结肠制备肌条,以张力换能器测定结肠平滑肌肌张力变化,当出现一段规律收缩信号后,分别进行其他的相关处理:(1)加入浓度梯度的HSYA溶液(终浓度分别为0.6、1.2、1.8 mol/L),观察并记录其自发性收缩活性变化;(2)用1μmol/L TTX孵育肌条10 min,再以浓度梯度的HSYA溶液处理肌条,观察并记录其自发性收缩活性变化;(3)用30μmol/L Tak-242孵育肌条15 min,再以浓度梯度的HSYA溶液处理肌条,观察并记录其自发性收缩活性的变化。采用SPSS 26.0统计软件、Graphpad 8.0软件对实验所得数据进行分析。结果避水应激诱发大鼠结肠动力亢进。HSYA明显抑制结肠肌条收缩活性,这种作用未被TTX阻断,而TLR4受体拮抗剂Tak-242能显著阻断HSYA对结肠肌条收缩活性的抑制作用。结论 HSYA能逆转应激性结肠动力亢进,这种效应可能与TLR4受体通路有关。     

肠易激综合征模型大鼠5-羟色胺7受体的表达及作用

目的 观察5-羟色胺7受体在肠易激综合征(IBS)不同亚型模型大鼠大脑和消化道组织中表达和分布的差异,探讨其在IBS发病中的作用.方法 45只成年SD大鼠分均为对照组、腹泻型IBS(IBS-D)组和便秘型IBS(IB-C)组.乙酸加束缚应激法制备IBS-D模型,冰水灌胃法制备IBS-C模型.免疫组化法和实时定量PCR法检测各组大鼠大脑、空肠、回肠、近端结肠、远端结肠中5-HT7受体的分布及表达差异.放射免疫法测定以上各组织中环磷酸腺苷(cAMP)含量.结果 免疫组化结果 显示,IBS-C组和IBS-D组海马及下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠、远端结肠5-HT7受体表达强于对照组(P＜0.05).实时定量PCR结果 显示,IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠及远端结肠5-HT7受体mRNA明显高于对照组(P＜0.05).IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组近端结肠和远端结肠cAMP含量显著高于对照组(P＜0.05).结论 两组大鼠脑组织及IBS-C大鼠结肠5-HT7受体表达及cAMP水平明显增高,可能与IBS-C胃肠动力障碍和内脏感觉异常有关.     

应激对大鼠结肠神经系统nNOS表达的影响

目的:探讨应激对大鼠结肠神经系统nNOS表达的影响. 方法:SD大鼠30只随机分为对照组,应激组和L-NAME 组,采用水浸-束缚应激(WRS)动物模型,用免疫组织化学ABC法检测nNOS在大鼠结肠黏膜下神经丛和肌间神经丛的表达,应用计算机图像分析系统对其表达进行定量分析．结果:与对照组比较,应激组黏膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元的灰度值明显减少(P=0．02或P =0．005),阳性神经元细胞数的平均密度增加(P=0．04 或P=0．01),表达增强,且在黏膜上皮细胞、固有层淋巴细胞也有nNOS表达．L-NAME组黏膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元的灰度值较应激组增加 (P=0．04),平均密度下降(P=0．04或P=0．03),表达减弱,而与对照组比较均无明显差异(P>0．05)．结论:应激可引起大鼠结肠神经系统nNOS表达增强, 提示一氧化氮(NO)在应激所致的结肠功能失调中可能起重要作用．     

白细胞介素-6介导抑郁模型大鼠结肠变化的机制研究

目的 研究慢性应激抑郁模型大鼠结肠动力变化、血清白细胞介素(IL)-6与抑郁的关系及对离体结肠肌条收缩的影响.方法 健康成年Wistar大鼠30只,其中15只建立慢性应激抑郁模型,其余15只为对照组.以糖水偏爱实验检测两组大鼠的糖水消耗与体质量比、糖水偏爱百分比.以旷场实验检测两组大鼠的行为学变化.以模拟粪便排出实验评价结肠动力.以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清IL-6水平.逆转录(RT)-PCR检测结肠组织中IL-6 mRNA水平.检测大鼠离体结肠肌条的收缩功能.用不同浓度的IL-6处理对照组结肠肌条,检测IL-6对正常结肠肌条的影响及其对乙酰胆碱(Ach)的反应.结果 模型组大鼠糖水消耗与体质量比为0.12±0.03、糖水偏爱百分比为(16.17±2.61)％、总行程为(741.54±341.10)cm、直立次数为(15.69±8.00)次,均显著低于对照组[0.18±0.02、(25.54±2.32)％、(1336.20±698.80)cm、(24.87±7.90)次,P值分别=0.041、0.044、0.002、0.001].模型组大鼠粪便排出时间为(109.78±48.00)min,较对照组明显延长[(28.00±11.10) min,P=0.002].模型组大鼠血清和结肠组织IL-6水平均较高.模型组离体结肠肌条对Ach反应弱于对照组(P=0.035).对照组离体结肠肌条对200、500、1000 pg/mlIL-6的反应差异均无统计学意义(P值分别=0.935、0.825和0.766),再加入Ach后,500和1000pg/ml IL-6组对Ach的反应(R值分别为1.15±0.10和1.14±0.15)与对照组单加Ach时的R值(1.61±0.45)比较,差异均有统计学意义(P值分别=0.000、0.004).结论 慢性应激抑郁模型大鼠血清及结肠组织IL-6水平上升,并通过降低肠道对Ach的敏感性而导致平滑肌收缩障碍.     

防风对大鼠结肠平滑肌收缩的抑制作用及其机制

目的: 观察防风(RS)对离体大鼠结肠平滑肌的影响,并探讨其机制.方法: 制备大鼠结肠平滑肌肌条,以9 g/LNaCl溶液为对照,观察防风对肌条自发收缩以及对乙酰胆碱(Ach)引起的肌每收缩的影响.并观察防风对用3种工具药,即纳络酮(NLT)、心得安(XDA)和酚妥拉明(FTLM)充分孵育后的平滑肌肌条的抑制作用.结果: RS各组较NS组均对离体大鼠结肠平滑肌收缩有一定程度的抑制(振幅:F=8.388,P<0.01;面积:F=33.390,P<0.01),在10-40 g/L范围内随浓度的增大而增强.RS可以抑制Ach引起的离体大鼠结肠平滑肌收缩,加入Ach后加入不同浓度的RS平滑肌收缩振幅和面积均可部分抑制(F=6.093,P<0.0l:F=15.383,P<0.01).与对照组(NS RS)比较,FTLM组对平滑肌收缩的振幅(88.92%±9.93%)和面积(91.5%±12.59%)均可抑制(均P<0.01),NIT RS组面积有差异(72.6%±15.26%,P<0.05),而XDA组振幅和面积均无统计学意义.结论: 防风能够抑制离体大鼠结肠平滑肌收缩,其机制与肾上腺素能α-受体、M胆碱受体有关.     

眼针与体针对腹泻型肠易激综合征大鼠下丘脑及结肠组织P物质及神经激肽Ⅰ型受体表达的影响

目的观察比较眼针及体针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠下丘脑及结肠组织P物质(SP)及神经激肽Ⅰ型受体(NK-1)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、眼针组、体针组4组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。眼针组取下焦区、大肠区、肝区、脾区进行针刺,治疗7 d。用免疫组化方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP和NK-1蛋白的表达;用RT-PCR方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP m RNA的表达。结果与模型组比较,眼针组大鼠下丘脑和结肠组织SP和NK-1蛋白的表达以及SP m RNA的表达均明显减少(P0.01)。结论眼针疗法优于体针,对D-IBS有治疗作用。     

眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠水通道蛋白3表达的影响

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组10只.采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS大鼠模型.采...     

匹维溴铵对大鼠结肠平滑肌收缩性的调节作用

目的:肠易激综合征(IBS)患者症状的产生与肠道动力异常密切相关,调节肠道动力及平滑肌收缩性常成为治疗该病的主要手段。本研究利用寒冷-束缚应激导致大鼠功能性肠动力紊乱的模型模拟人IBS,探讨匹维溴铵对结肠平滑肌收缩性的调节作用及其机制,为临床应用提供理论基础。方     

孤啡肽对大鼠体内外结肠动力的影响

目的:探讨孤啡肽受体在结肠运动中的作用. 方法:采用大鼠离体结肠肌条张力测定法、在体结肠肌电测定、炭末推进试验等研究了孤啡肽受体的内源性配基——孤啡肽对大鼠结肠动力的影响．结果:孤啡肽(1-1000 nmol／L)剂量依赖性地引起离体结肠肌条的强直性收缩;孤啡肽(1 μg／ kg)iv诱导在体近端结肠的相位性收缩和基础张力的增加(t=2．41,P=0．02);孤啡肽(3 nmol／ kg)sc加速活性炭悬液通过结肠的转运(48．0± 1．24 vs 43．5±2．63,t=-4．5,P=0．008)．结论:孤啡肽通过一个神经性的非阿片受体介导的机制加速大鼠结肠的收缩和转运,孤啡肽在结肠生理功能中起了一定的作用．     

传统束缚应激动物模型内脏感觉的新评价

目的检测与探讨传统束缚应激动物模型的内脏感觉的变化。方法建立束缚应激动物模型并在大鼠腹壁埋置电极后,经肛门直肠内气囊插入,依次给予不同容量( 0m1、0 .4ml、0 .8m1、1.2m1) ,通过大鼠腹壁外斜肌收缩次数改变来反映其内脏感觉变化。结果束缚应激后,各个容量级别( 0ml、0 .4m1、0 .8m1、1.2m1)大鼠腹部收缩次数分别为3 .75±1.17、5 .0 0±1.2 0、6.2 5±1.49、5 .2 5±1.83 ,均较对照组( 0 .13±0 .64、0 .13±0 .64、0 .2 5±0 .89、0 .13±0 .83 )明显增多,P <0 .0 1;对照组和应激组大鼠腹部收缩次数均随气囊容量增加而增加。结论束缚应激模型除可用于动力研究外,还可进行内脏敏感性研究。     

肥大细胞在应激所致大鼠直肠高敏感性中的作用

目的　内脏高敏感性是肠易激综合征 (IBS)最重要的特征之一 ,精神因素可能与IBS发生有关。本研究旨在探讨急性精神应激对大鼠直肠敏感性的效应以及肥大细胞的可能作用。方法　通过对大鼠施加 2h的轻度束缚建立应激模型 ,以腹壁肌电活动评估它对直肠内气囊扩张的反应性 ,并取结肠标本进行肥大细胞计数 ,通过P物质刺激结肠体外释放组胺 ,研究肥大细胞的活化情况。此外 ,还进行了急性应激对躯体感觉和结肠转运效应的研究。结果　与假应激组相比 ,在 0 .5、0 .8及 1.2ml扩张容量下 ,轻度束缚应激使大鼠对直肠扩张的敏感性显著增强 (P <0 .0 1)。与假应激组相比 ,应激组大鼠P物质体外诱导的组胺释放明显增加 [分别为 (6 .4 5± 2 .6 9)和 (10 .71± 3.91)nmol/g组织 ,P <0 .0 5 ],而结肠肥大细胞计数无明显差异 [分别为 (2 .6 8± 0 .90 )和 (2 .79± 0 .75 ) /高倍视野 ,P >0 .0 5 ]。急性应激也加速结肠转运 ,并引起躯体痛觉缺失。结论　应激可显著增强大鼠直肠敏感性 ,肥大细胞活化可能在外周参与了这一致敏过程