微粒体谷胱甘肽S-转移酶在移植性肿瘤生长过程中的变化

本文报道,在大鼠 AH-66移植性肝癌生长过程中,宿主肝脏微粒体、胞浆和血清中谷胱甘肽 S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)及 T-谷氨酰转肽酶(T-Glutamyltranspeptidase,γ-GT)活性的变化。在移植 AH-66的大鼠肝微粒体中,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-Dichloro-4-nitrobenzene,DCNB)为底物的 B 组 GST 及 T-GT 活性显著增高;然而,以1-氯-2,4-二硝基苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)为底物的 A-C 组GST 活性无显著变化。虽然胞浆中 GST 活性变化较小,但是血清中 GST 和γ-GT活性随肿瘤生长呈直线型上升。肝微粒体 GST 可做为移植性肿瘤较敏感的标志酶。     

大鼠正常肝脏和癌前病变肝脏微粒体谷胱甘肽 S-转移酶的纯化及其鉴定

本文通过 DE_(52)-纤维素和羟基磷灰石柱层析及 GSH-Sepharose-4B 亲和层析法,分离纯化了正常大鼠肝脏和癌前病变肝脏微粒体 GST,得到了三个微粒体 GST 同工酶组分,分别命名为A_1,A_2,A_3.用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其亚基分子量分别为25000D,26000D,43000D.以 CDNB 为底物按 Habig 方法测定 GST 活性,发现大鼠肝脏癌前病变微粒体同工酶 A_1和 A_2的活性显著增高,而同工酶 A_3在正常和癌前病变大鼠之间无显著差异.本实验结果表明,大鼠肝脏癌前病变组织的微粒体 GST 同工酶组分中 A_1和 A_2显著增高,可作为肝脏癌前病变的酶学指标.     

胎儿脏器亚细胞组分中谷胱甘肽S-转移酶活性分布

用差速离心法对胎龄4～7个月水囊引产胎儿的肝、肺、肾、心脏、脾、脑和胃组织的胞浆、线粒体和微粒体进行了分离,并以1.2-二氯-4-硝基苯(CDNB)为底物,测定了上述脏器亚细胞组分中谷胱甘肤S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)的活性。结果显示,在上述脏器亚细胞组分中,GST活性主要分布在胞浆,在微粒体和线粒体中亦有分布。以每克湿组织所含GST活性大小顺序排列上述各脏器,依次为脾、心、脑、胃和肝、肾、肺。     

苦杏仁提取物的抗癌作用及其对移植性肝癌小鼠肝脏细胞色素P-450含量和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

将长白山区苦杏仁中提取的抗癌有效成分(以下简称“ATE”)按300、400、600mg/kg剂量给移值性肝癌小鼠腹腔注射10天(或14天),其肿瘤抑制率分别为72％、60.8％、51.0％。移植性肝癌小鼠肝脏微粒体细胞色素P-450含量比正常小鼠显著下降。当用ATE给药10天,肿瘤生长被抑制的小鼠P-450含量达到正常水平,移植性肝癌小鼠肝胞浆中以1,2-二氯-4-硝基苯(DCNB)为底物的A-C组谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性高于正常小鼠,而ATE给药组小鼠的A-C组GST活性有进一步升高的倾向,但是以1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物的B组GST活性无显著变化。肝微粒体B组GST活性在移植性肝癌小鼠有增高倾向,ATE给药组小鼠中,则无显著变化。     

大鼠肝脏癌前病变组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶的纯化及其部分性质

本文分离纯化了正常大白鼠肝脏和癌前病变大白鼠肝脏组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶(GST),对其部分性质进行了探讨。经O-(二乙胺基乙基)-纤维素、羟基磷灰石,羧甲基-琼脂糖6B(CM-Sapharose 6B)柱层析以及等电聚焦电泳法,从正常肝组织和癌前病变肝组织中,分离纯化了两种不同性质的GST,暂命名为线粒体GST_1和线粒体GST_2。通过十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和等电聚焦电泳法测定的线粒体GST_1的分子量约为23000,等电点为6.2,线粒体CST_2的分子量约为45000,等电点为9.1。在正常组织和癌前病变组织中CST同工酶无质上的差异。但是,线粒体GST_1在癌前病变组织中的活性明显著高于正常对照组(P<0.01)。     

大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量分布

对大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定．结果，在大鼠血浆、腓肠肌和肝脏三者中，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏、肌肉、血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物歧化酶则以胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低．肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性．谷胱甘肽过氧化物酶在微粒体中的活性极低或无法测出．丙二醛含量在肝脏中的含量最高，肌肉中含量次之，最后为血浆．丙二醛含量在肝脏中的顺序依次为线粒体、微粒体和胞浆．在肌肉中丙二醛含量顺序为胞浆、微粒体和线粒体．     

大鼠血浆,肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物岐化酶,谷胱甘肽过氧…

对大鼠血浆，肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物岐化酶，谷胱革肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定，结果，在大鼠血浆，腓肠肌和肝脏三者中，超氧化岐化酶，谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏，肌肉，血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物岐化酶则胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低，肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性，     

黄磷引起肝脏损害机理及部位的研究

本研究利用黄磷急性、亚急性中毒动物模型发现:黄磷对大鼠急性、亚急性中毒均引起肝匀浆MDA含量显著升高,Schiff碱荧光强度显著增强,肝线粒体和微粒体MDA含量均显著升高,这四项LPO标在急性中毒24h均表现出显著的剂量—效应关系;并伴随肝匀浆TG含量显著升高,肝匀浆GDH含量显著降低,这两项肝脏损害指标的变化与LPO指标的变化存在平行关系或相关关系;肝线粒体标志酶SDHase活性和肝微粒体标志酶G-6-Pase活性均显著降低,且分别与各自亚细胞器的MDA含量升高存在平行关系或负相关关系。结果表明:黄磷急性、亚急性中毒引起肝脏损害的机理之一是LPO;黄磷急性、亚急性中毒引起肝细胞中的的线粒体和微粒体发生LPO损害作用。     

四氯化碳亚急性中毒引起肝脏损害机理及部位

利用CCl_4亚急性中毒动物模型发现:CCl_4对大鼠亚急性中毒引起肝匀浆MDA含量显著升高,Schiff碱荧光强度显著增强,并伴随肝匀浆GSH含量显著降低,肝匀浆TG含量显著升高,血清SGPT活性显著增高,这三项肝损害指标变化与LPO指标变化存在平行关系。肝线粒体和微粒体MDA含量均显著升高,肝线粒体标志酶SDHase活性和肝微粒体标志酶G-6-Pase活性均显著降低,且分别与各自亚细胞器MDA含量升高存在平行关系。结果表明:CCl_4亚急性中毒引起肝脏损害的机理之一是LPO;CCl_4亚急性中毒引起肝细胞中的线粒体和微粒体发生LPO损害作用。     

大鼠肾缺血再灌注损伤对肝脏功能和形态的影响

目的:探讨大鼠肾缺血再灌注损伤后对肝脏功能和形态的影响。方法:建立大鼠肾缺血2h再灌注损伤模型,测定再灌注1,4,8h及假手术组血清谷丙转氨酶(sALT)、谷草转氨酶(sAST)活性,肝匀浆还原性谷胱甘肽(GSH)含量,肝细胞胞浆谷胱甘肽S转移酶(GST)活性;光镜及电镜下观察肝组织细胞形态学变化。结果:与假手术(sham)组比较,大鼠肾缺血2h再灌注1,4,8h组sALT、sAST活性分别升高36%、37%,195%、104%,64%、86%(P<0.05,P<0.01);肝匀浆GSH含量、肝胞浆GST活性分别降低32%、17%,33%、36%,25%、16%(P<0.05,P<0.01);光镜:肝脏淤血,细胞脂肪变性及灶性坏死;电镜:细胞间连接消失,细胞融合,未见细胞膜结构。结论:大鼠肾缺血再灌注损伤对肝脏的功能和形态均有一定程度的损害。     

Effect of In Vivo and in Vitro Treatment with Arsenite on Rat Hepatic Mitochondrial and Microsomal Enzymes

ＥｆｆｅｃｔｏｆＩｎＶｉｖｏａｎｄｉｎＶｉｔｒｏＴｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈＡｒｓｅｎｉｔｅｏｎＲａｔＨｅｐａｔｉｃＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌａｎｄＭｉｃｒｏｓｏｍａｌＥｎｚｙｍｅｓＣＨＥＮＧＪｉｚｈｏｎｇ（程继忠）；ＷＵＨｕｉｑｉｏｎｇ（邬惠琼）；Ｓ...     

非坏死剂量二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌模型的研究

目的　为化学物致癌危险性评价提供合适的肝癌动物模型 ,并寻找其早期敏感指标。方法　应用本室早年已建立的以非坏死剂量的二乙基亚硝为启动剂 ,以苯巴比妥为促进剂诱发大鼠肝癌两阶段模型 ,进一步用 HE染色、胚胎型谷胱甘肽转移酶 (P- GST)和增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化染色为指标 ,在 3、6、12和 2 4个月末进行观察。结果　经启动剂与促进剂作用的实验组 ,可产生以嗜酸性细胞为主的癌前病变和肿瘤 ;以 P- GST为标识可显示许多单个肝细胞、转变灶及瘤性结节均呈阳性 ;以 HE染色所识别的转变灶及瘤性结节 PCNA表达较高 ,细胞核 /浆比例减小。而且瘤性结节表达较转变灶更显著。结论　肝细胞 PCNA表达强弱可作为大鼠肝癌诱发实验模型中一个预示癌前病变发展潜力的较理想的指标     

白芍总苷对NAFLD模型大鼠肝脏保护作用的抗氧化机制

目的研究白芍总苷对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠肝脏保护作用的抗氧化机制。方法SD大鼠54只,随机分为正常对照组(12只)和模型组(42只)。正常组给予普通饲料,模型组给予高脂饮食结合饮10%果糖水,饲养6周时,分别随机抽取2只大鼠,取肝脏做HE染色,观察肝细胞病理组织变化。模型组根据体质量随机分为模型对照组、二甲双胍组(200 mg·kg-1)、白芍总苷高、低剂量组(200、100 mg·kg-1)。连续灌胃给药4周后,测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性和肝脏指数;测定大鼠血清和肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、氧化亚氮合成酶(NOS)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、丙二醛(MDA)和氧化亚氮(NO)含量的变化;测定大鼠血清果糖胺(FMN)和晚期糖基化终末产物(AGEs)水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠ALT、AST和GST活性以及肝脏指数增高(P<0.01);SOD和GSH-PX活性降低(P<0.01),NOS活性增高(P<0.01),MDA、NO、FMN和AGEs含量升高(P<0.01)。药物治疗4周后,明显降低ALT、AST和GST活性以及肝脏指数(P<0.01,P<0.05),提高SOD和GSH-PX活性(P<0.01,P<0.05),并降低NOS活性(P<0.01,P<0.05)以及MDA、NO、FMN和AGEs含量(P<0.01或P<0.05)。结论白芍总苷具有保肝作用,其作用机制可能与增强抗氧化能力有关。     

Release of mitochondrial rather than cytosolic enzymes during liver regeneration in ethanol-intoxicated rats

BACKGROUND: Partial hepatectomy (PH) promoted rapid increase in serum of hepatic enzyme activities localized in mitochondria preferentially to increase enzyme activities from cytosol; low doses of ethanol (EtOH) administered to PH rats expedited return to normality of these elevated serum enzyme activities. The fate of released mitochondrial enzymes from liver was investigated in this study to advance knowledge of the role of mitochondria during priming phase of liver regeneration. METHODS: Catalytic activity of mitochondrial and cytosolic proteins was measured in remnant liver after PH and in elutes of perfused remnant livers from control and ethanol-intoxicated rats. RESULTS: During the first 24 h of liver regeneration (LR), mitochondrial enzymes--glutamate dehydrogenase, aspartate amino transferase, and malate dehydrogenase--diminished 33-58% in mitochondria, increased 17% in cytosol, and for two enzymes rose 68-86% in perfusates. Cytosolic lactate dehydrogenase decreased transiently in cytosol (24%) and increased only 13% in perfusates. Activity of cytochrome oxidase [corrected] (mitochondrial membrane-attached enzymes) was not modified. Ethanol intoxication after PH produced earlier and slightly higher extrusion of matrix mitochondrial enzyme activities. CONCLUSIONS: Selective increase of mitochondrial membrane permeability appeared as an important event during priming phase of LR after PH, thus sustaining preferential release of mitochondrial proteins outside the organelle in comparison with limited redistribution of cytosolic and mitochondrial membrane proteins. High doses of EtOH delayed LR and re-enforced mobilization of proteins produced by PH probably by enhancing greater mitochondrial membrane permeability.     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

线粒体-细胞色素C途径在非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡中的作用

目的 研究大鼠非酒精性脂肪肝形成中肝细胞凋亡以及线粒体-细胞色素C途径在其中的作用.方法 Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8和12周组(其中每组各8只);HE染色光镜观察肝脏组织病理改变;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)以及流式细胞仪检测肝细胞凋亡指数;激光共聚焦显微镜检测肝细胞线粒体膜电位;免疫组织化学检查caspase-3在肝脏表达分布,Western blotting检测细胞色素 C以及caspase-3含量变化.结果 高脂饮食组4～12周组肝细胞线粒体膜电位与对照组比较明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);高脂饮食组肝细胞凋亡指数与对照组比较明显增加,随着脂肪肝的加重逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.01);高脂饮食组细胞色素C含量以及caspase-3蛋白表达随着时间延长逐渐增高,以12周增加明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 大鼠非酒精性脂肪肝引起的肝细胞损伤与肝细胞凋亡密切相关,线粒体-细胞色素C途径参与了其调控过程.