携P-选择素单抗靶向超声微泡评价小鼠下肢缺血-再灌注损伤

目的 探讨自制的携P-选择素靶向微泡(MBp)结合对比超声在小鼠骨骼肌缺血-再灌注损伤(isehemia-reperfusion injury,I-R)中的诊断价值.方法 制备生物素化脂质微泡(MBb)及MBp.研究选用6只7～8周龄的昆明小鼠,以动脉夹夹闭-松开小鼠一侧股动脉制备下肢I-R模型,另一侧下肢作为对照组.分别注入等量(5×106)MBb及MBp后行对比超声检查,分析骨骼肌显影的声强度(video intensity,VI).结果 MBp的VI值在I-R组[(19.5±3.7)U]明显高于对照组[(4.1±0.7)U,P<0.053,MBb在I-R组的VI值[(8.5±2.1)U]较对照组有显著性差异[(3.7±0.7)U,P<0.053,但MBp在I-R组的VI值[(19.5±3.7)U]约为MBb组的2.3倍[(8.5±2.1)U,P<0.05].结论 MBp结合对比超声可有效评价骨骼肌I-R的炎症反应,将可用于评价微血管炎症或相关的血管内皮反应.     

平行板流动腔法评价生物素化脂质微泡制备效果

目的 制备生物素化脂质微泡,并应用平行板流动腔检测流体切应力对生物素化脂质微泡与链亲和素结合稳定性的影响,为进一步开展超声分子成像研究奠定基础.方法 采用声振法制备出表面携有生物素分子的脂质微泡,与普通脂质微泡对照,应用平行板流动腔模型,设置不同流体剪切应力,观察与链亲和素靶向结合的生物素化微泡的黏附效果.结果 在不同浓度链亲和素包被的平行板流动腔中均见生物素化微泡结合;随着链亲和素包被浓度的提高,靶向结合的生物素化脂质微泡抗流体剪切应力能力明显提高.结论 应用平行板流动腔模型能成功检测生物素化微泡的靶向黏附效果,该模型可推广应用于其他靶向微泡制备成功后靶向黏附能力的体外检测.     

携抗白细胞介素-2受体α单抗靶向超声微泡黏附效能的体内外评价

目的构建小鼠携抗白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)单抗靶向超声微泡(MB_(IL-2Rα))及体内外评价其靶向黏附效能。方法采用"亲和素-生物素"桥连法构建携带荧光FITC的MB_(IL-2Rα)和普通超声微泡(MB)。首先利用平行板流动腔体外评价在不同时间点、不同浓度小鼠IL-2Rα包被下MB_(IL-2Rα)结合数目。然后,分别随机经静脉将MB_(IL-2Rα)和MB弹丸式注入对照组(10只)和TNF-α处理组(10只)的小鼠提睾肌炎症模型。同时,200倍荧光显微镜直视下观察并记录5min内两组中不同微泡在提睾肌微血管中的黏附数量和黏附情况。结果体外结果显示,MB_(IL-2Rα)结合数量随着IL-2Rα包被浓度的增高而增加(P0.05),并与结合时间呈明显相关(P0.05);体内荧光显微镜下TNF-α处理组MB_(IL-2Rα)黏附数量[(4.6±1.1)个/200倍视野)]明显高于MB黏附数量[(3.0±0.7)个/200倍视野](P0.05);且TNF-α处理组MB_(IL-2Rα)黏附数量分别为对照组MB_(IL-2Rα)和MB黏附数量的(2.8±0.8)和(3.7±1.4)倍(P0.01)。结论 MB_(IL-2Rα)可与IL-2Rα特异、有效地结合,其高效黏附性能将有助于进一步对移植排斥反应的靶向超声分子显影。     

双靶向超声微泡造影剂评价小鼠缺血再灌注心肌

目的 制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果.方法 采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率.将24只健康昆明小鼠随机分成3组:结合双抗体选择素微泡组(MBd组)10只、结合P选择素单抗组(MBp组)10只,空白微泡组(MBc组)4只.结扎冠状动脉左前降支近左主干分支,制作心肌缺血再灌注模型,60 min后经尾静脉分别注射MBd、MBp及MBc,采集心肌对比造影图像.所有图像均采用Sonomath超声影像分析仪处理.结果 MBd组和MBp组对缺氧内皮细胞的黏附力以及对缺血再灌注区心肌显像增强程度显著高于MBc组(P均＜0.05),MBd组对缺血再灌注区心肌显像延迟时间高于MBp组(P＜0.05).结论 双靶向微泡联合超声造影是检测和评估小鼠缺血再灌注心肌的无创性手段.     

血管生成靶向微泡的鉴定及黏附实验

目的 体外评价"亲和素-生物素"法制备靶向整合素αvβ3的微泡(MBαvβ3)及其黏附人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的效能.方法 "亲和素-生物素"法桥连αvβ3抗体于磷脂微泡,体外荧光法鉴定其表面"生物素-亲和素-生物素"结构,应用平行平板流动腔(PPFC)技术评价MBαvβ3特异性黏附HUVECs的效能.结果 加入荧光标记的亲和素后,生物素化微泡(MBB)表面可见明亮荧光,普通微泡未见荧光;MBB加入荧光标记的蛋白A也未见荧光;MBB结合亲和素后,再加入荧光标记的生物素或蛋白A,前者表面可见明亮荧光,后者未见荧光.PPFC内,MBαvβ3组和普通微泡组结合数分别为(9.9±3.1)微泡/HUVEC和(0.8±0.3)微泡/HUVEC(P<0.05).结论 "生物素-亲和素"法能成功制备MBαvβ3,具有特异黏附血管内皮细胞的能力.

Abstract：

Objective To identify microbubbles targeted (MBt) to alpha(v)beta(3) (αvβ3) via biotin-avidin bridge and evaluate the adhesion to human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) in vitro.Methods MBt produced via biotin-avidin bridge were validated using fluorescence in vitro.Adhesion of αvβ3-integrin targeted MBt (MBαvβ3) to HUVECs was tested using the parallel plate flow chamber (PPFC) test.Results Bright green fluorescence was observed on the biotinylated microbubbles(MBB) incubated with fluorescein isothiocyanate labeled streptavidin (FITC-SA) and on MBB-SA incubated with FITC labeled biotin.There was no fluorescence seen on non-targeted control microbubbles,MBB incubated with FITC labeled protein A and MBB-SA incubated with FITC labeled protein A. The adherent rate of MBαvβ3 was significantly higher than MBt with non-specific antibody (MBN) in PPFC test,with 9.9±3.1 of MBαvβ3 and 0.8±0.3 of MBN adhered to HUVECs,respectively(P<0.05).Conclusions Avβ3 targeted microbubbles using biotin-avidin bridging method is highly efficient and reliable for HUVECs.     

靶向血管内皮生长因子受体2微泡造影剂评价肿瘤血管生成的实验研究

目的:探讨靶向血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)微泡造影剂用于肿瘤血管生成的超声分子成像。方法:用生物素-亲和素桥接法制备靶向VEGFR2超声微泡,免疫荧光法检测微泡与抗体的结合。建立裸鼠Hep G2肝癌皮下种植瘤模型,随机分成靶向组(n=5)和非靶向组(n=5),经尾静脉团注相同剂量靶向微泡或非靶向微泡,录像并绘制时间-强度曲线(time-intensity curve,TIC);注入造影剂5 min后利用高声压爆破技术清除肿瘤内部微泡,比较爆破前后两组造影图像灰阶强度的下降,估计靶向微泡在体内与靶点的结合能力。结果:靶向造影剂和非靶向造影剂均表现为裸鼠皮下瘤的显著增强,但TIC显示两组间曲线下面积差异有统计学意义[(3 940.4±200.9)dB·s vs.(2 796.8±452.3)dB·s,P=0.001];微泡爆破后靶向组灰阶强度降低显著大于非靶向组[(7.61±2.20)dB vs.(3.74±1.40)dB,P=0.010]。结论:靶向VEGFR2微泡造影剂在体内能显著增强肿瘤血管成像,可作为监测肿瘤血管生成的较可靠分子影像学探针。     

携重组体GPⅠba靶向脂质微泡与被激活假性血友病因子之间相互作用的实验研究

目的观察携重组体 GPⅠba靶向脂质微泡与被激活的假性血友病因子(VWF)之间的相互作用,并探讨两者间特异性的结合情况。方法采用声振法制备荧光标记的携重组体 GPⅠba 组靶向脂质微泡(靶向组)和携非特异性IgG 的脂质微泡(对照组),应用平板血流灌注腔模型,在应切速率为 300 s-1的条件下,观察两种不同微泡对纤维胶原蛋白的黏附作用。应用离体小鼠降主动脉损伤模型,比较两组微泡的显影效果。然后应用免疫组织化学分析以确定 VWF 的存在和血小板的黏附情况。结果在平板血流灌注腔实验中,注射荧光标记的微泡后,荧光显微镜显示靶向组微泡的黏附数目明显多于对照组[(530±49)mm-2和(56±12)mm-2,P﹤0.05];免疫组织化学分析显示血栓中存在 VWF。在离体小鼠降主动脉损伤模型实验中,注射不同微泡后,靶向组损伤处回声强度明显高于对照组[(66±34)AU 和(24±21)AU,P﹤0.05];免疫组织化学分析显示血管损伤处有丰富的血小板聚集。结论携重组体 GPⅠba 靶向微泡可特异性地与被激活的 VWF 结合,超声可检出相应部位的回声强度变化。     

超声联合一氧化氮微泡介导间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的 探讨超声联合一氧化氮(NO)微泡介导间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠心功能的影响,并探讨其可能作用机制.方法 选用冠状动脉左前降支结扎法制作心肌梗死模型大鼠28只,采用随机数字表法将其分为对照组(经尾静脉注入磷酸盐缓冲液)、MSCs组(经尾静脉注入MSCs)、普通微泡组(经尾静脉注入普通微泡,同时给予超声干预,然后经尾静脉注入MSCs)及NO微泡组(经尾静脉注入NO微泡,同时给予超声干预,然后经尾静脉注入MSCs),每组7只.各组大鼠分别经治疗4周后行M型心功能彩超检查,计数比较各组大鼠缺血心肌局部平均毛细血管密度,采用蛋白免疫印迹法及实时PCR检测各组大鼠心肌局部血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 治疗4周后发现NO微泡组射血分数[(56.27±3.66)％]较普通微泡组[(51.31±3.22)％]、MSCs组[(45.81±3.37)％]及对照组[(43.66±4.79)％]均显著提高(P＜0.05);NO微泡组心肌缺血区域平均毛细血管密度[(45.96±9.01)个/每高倍镜视野]较普通微泡组[(28.07±4.93)个/每高倍镜视野]、MSCs组[(21.41 ±5.27)个/每高倍镜视野]及对照组[(18.04±4.82)个/每高倍镜视野]均显著增加(P＜0.05).NO微泡组VEGF相对表达量(0.67 ±0.024)较普通微泡组(0.54 ±0.011)、MSCs组(0.44±0.020)及对照组(0.12±0.009)均显著增强(P＜0.05).结论 超声联合NO微泡介导MSCs移植治疗心肌梗死大鼠,能进一步提高模型大鼠心功能,其治疗机制可能与促进局部VEGF表达、加速梗死区域血管生成有关.     

制备结合链酶亲和素超声造影剂的实验研究

目的：探索制备一种结合链酶亲和素的脂膜超声微泡，以适用于亲和素－生物素法制备靶向超声造影剂，并评价其理化性质。方法：分4组于机械或超声振荡之前或之后，加入链酶亲和素完成超声造影剂的制备，采用浮选法洗涤。观察并检测洗涤前后各组微泡大小、形态、浓度、荧光亮度、微泡与链酶亲和素的结合情况。结果：机械或超声振荡制备的各组结合链酶亲和素的超声造影剂其浓度、形态与普通微泡比较无明显差异，但易静置分层。超声振荡法制备的微泡粒径稍大、浓度偏低。荧光显微镜观察：洗涤前各种不同方法所制备的微泡均能激发出明亮的红色荧光；洗涤后微泡浓度由1010左右降到107左右，微泡荧光亮度仍为“3级”。微泡与链酶亲和素的结合率，各种制备方法间比较差异无显著性意义（P>0.05），其结合率高达98%以上。结论：机械和超声振荡均可制备结合链酶亲和素的负电荷超声造影剂，微泡与其结合率高，为完成亲和素－生物素法制备靶向超声造影剂提供了重要基础。     

含生物素化脂膜超声造影剂的制备与初步评价

目的 制备一种含生物素化脂膜的超声造影剂,并对其功能进行初步评价.方法 以冷冻干燥法在自制＂脂氟显＂（对照微泡）的基础上制备含生物素化脂膜超声造影剂微泡,检测其理化性质和造影功能,同时应用激光共聚焦显微镜和平行板流动腔法观察含生物素化脂膜微泡与链亲和素的黏附性.结果 ①含生物素化脂膜微泡造影剂在理化性质与小鼠肝脏造影显像方面能力与对照微泡比较差异无统计学意义（P〉0.05）;②与异硫氰酸荧光素（FITC）标记的链亲和素孵育后,含生物素化脂膜微泡荧光检测呈阳性,对照微泡为阴性;③含生物素化脂膜微泡可结合于链亲和素包被的培养皿上,且随着链亲和素包被浓度的增加其结合稳定性也相应提高.结论 应用冷冻干燥法在制备＂脂氟显＂微泡造影剂的基础上,可成功制备含生物素化脂膜超声微泡造影剂,为今后制备靶向显影及载药（基因）超声造影剂奠定了基础.     

αv-整合素超声分子成像可视化评价基质胶血管新生

目的 探讨应用携带αv-整合素分子探针的分子成像可视化评价基质胶血管新生的可行性.方法 10只实验小鼠分别于腹部皮下注射添碱性成纤维细胞生长因子(FGF)-2的基质胶制备血管新生模型.于注射后第10 d所有小鼠经尾静脉随机先后(间隔30min)弹丸注射携抗小鼠αv-整合素单抗靶向微泡(MBα)、携同型抗体对照微泡(MBc),并分别于注入后6 min行基质胶超声造影检查,测量基质胶的显影强度(video intensity,VI).随后,所有小鼠均预先αMBcv-整合素单抗封闭10 min后再注入MBα和MBc行超声造影检查.最后进行基质胶组织学检查.结果 超声造影图像显示MBα组呈明显的超声显影,VI值高达(20.5±3.3)U,而MBc组仅见轻度的超声显影,其VI为(4.8±1.5)U,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05).预先单抗封闭αv-整合素后,MBα的VI值仅为封闭前的22.4%,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05);而MBα的VI值较封闭前无明显变化,两者之间差异无统计学意义(P＞0.05).病理学检查显示基质胶中有丰富的新生血管形成,新生血管中有大量αv-整合素表达.结论 应用携带αv-整合素分子探针的超声分子成像可有效特异地评价基质胶血管新生.     

NGAL对肾小管上皮HK-2细胞的缺氧与复氧损伤保护作用

目的 探究NGAL对肾小管上皮HK-2细胞缺氧与复氧损伤的作用及其机制.方法 以HK-2细胞为模型,体外模拟缺氧与复氧环境(缺氧时氧浓度＜0.1％).先用WB和实时定量RT-PCR检测正常对照组、缺氧与复氧组细胞内NGAL蛋白和基因水平.用噻唑蓝(MTT)法和磷脂结合蛋白V-异硫氰酸荧光素( Annexin V-FITC)/碘化丙啶双染法检测并比较缺氧与复氧同时加入不同浓度NGAL( 20、100、200、400、1 000 ng/ml)处理组、正常对照组、缺氧与复氧组细胞增殖和凋亡情况,确定加入重组NGAL的适宜浓度.用流式细胞术和实时定量RT-PCR检测并比较正常对照组、缺氧与复氧组、缺氧与复氧同时加适宜浓度NGAL组细胞周期及凋亡相关基因bax、bcl-2、caspase-3.平行实验重复3次,比较各组检测结果.结果 WB法检测细胞内NGAL蛋白/肌动蛋白缺氧与复氧组为5.88±0.08,与正常对照组(1.51±0.03)比较差异有统计学意义(t=96.89,P＜0.05).RT-PCR法检测NGAL/肌动蛋白基因水平缺氧与复氧组为12.32±1.27,正常对照组为1.00±0.00,两组差异有统计学意义(t=15.40,P＜0.05).MTT结果正常对照组吸光度(A)值为0.97±0.03,缺氧与复氧组为0.56±0.04,两组差异有统计学意义(=18.68,P＜0.05).缺氧与复氧同时加入不同浓度的NGAL(50、100、200、400、1 000 ng/ml)组A值分别为0.56 ±0.04、0.53±0.03、0.56±0.04、0.53±0.03、0.54±0.02,缺氧与复氧组和不同浓度NGAL处理组间A值水平相近,差异无统计学意义(F =0.978,P＞0.05),但其与正常对照组比较A值差异均有统计学意义(F=105.20,P＜0.05).Annexin VFITC/碘化丙啶双染检测细胞早期凋亡率(Annexin V阳性,碘化丙啶阴性的细胞群),正常对照组为(1.0±0.2)％、缺氧与复氧组为(27.6±1.4)％,两组细胞早期凋亡率差异有统计学意义(t=33.590,P＜0.05);加入重组NGAL50、100 ng/ml后分别为(27.8±1.1)％、(26.4±1.3)％,和缺氧与复氧组比较,其差异无统计学意义(t分别为0.250、1.520,p均＞0.05);加入NGAL 200 ng/ml组为(19.4±0.6)％,明显低于缺氧与复氧组,且早期凋亡率差异有统计学意义(t=10.350,P＜0.05);而NGAL400、1 000 ng/ml组为(19.3±1.1)％、(18.9±0.5)％,与NGAL 200 ng/ml组间早期凋亡率差异均无统计学意义(t分别为0.130、0.630,P均＞0.05);因此选取NGAL浓度为200 ng/ml.流式细胞术检测PI正常对照组为(30.2±0.4)％,而缺氧与复氧组下降至(22.1±2.7)％,两组PI差异有统计学意义(t=3.750,P＜0.05),而缺氧与复氧同时加入NGAL 200 ng/ml组PI为(23.2±3.7)％,和缺氧与复氧组比较,差异无统计学意义(t=0.510,P＞0.05).实时定量RT-PCR法检测各组细胞内bax/bcl-2、caspase-3基因水平,正常对照组分别为1.00±0.00、1.00±0.00,缺氧与复氧组为5.83±0.33、8.13±0.20,加入NGAL 200 ng/ml后为2.52 ±0.07、1.89±0.02,三组bax/bcl-2(f=485.30,P＜0.05)和caspase-3基因水平(F=3 456.78,P＜0.05)差异有统计学意义.结论 NGAL在缺氧与复氧损伤的肾小管上皮HK-2细胞中通过调节凋亡相关基因表达发挥抗凋亡作用,且为缺血再灌注致急性肾损伤治疗提供了新思路和实验室依据.     

白细胞介素-8、白三烯B4与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者白细胞介素-8(IL-8)及白细胞三烯B4(LTB4)水平的变化及在发病中的作用.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例COPD患者急性加重期和缓解期及20例健康成人的血清及痰液中IL-8及LTB4含量.结果 COPD患者急性加重期血清及痰液中IL-8含量分别为(181.41±18.49)ng/L和(74.03±20.64)ng/L,高于缓解期[(152.33±17.48)ng/L和(42.30±14.99)ng/L,均P＜0.05],缓解期显著高于健康对照组(52.75±13.79)ng/L和(17.15±5.36)ng/L,均P＜0.05);COPD患者急性加重期痰液LTB4含量[(2300.91±496.01)ng/L],显著高于缓解期[(1884.14±651.37)ng/L,P＜0.05],COPD患者急性加重期血清LTB4含量[(2044.12±309.43)ng/L]与缓解期及对照组比较差异均无统计学意义[(1941.30±301.62)、(1880.77±302.11)ng/L,均P＞0.05].结论 IL-8与LTB4共同参与了COPD气道炎症反应的过程.     

早发性卵巢功能不全患者血清ER，AMH 及Cathepsin B 表达水平及临床意义

目的　探究早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）血清抗苗勒管激素(anti-müller-hormon,AMH)、组织蛋白酶B(cathepsin B) 和雌激素受体(estrogen receptor,ER) 水平表达及临床意义。方法　选择2018 年12月～ 2019 年12 月延安大学附属医院收治的121 例POI 患者为病例组,同期体检健康女性50 例为对照组,比较两组血清ER,AMH 和Cathepsin B 水平,采用Spearman 检验分析血清ER,AMH 和Cathepsin B 水平与POI 的相关性,采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）分析血清ER,AMH 和Cathepsin B 水平对POI 的预测价值。结果　病例组血清AMH（0.88±0.13ng/ml）,ER（9.36±2.26ng/L）水平低于对照组（4.59±1.38ng/ml,23.11±7.48ng/L）,差异均有统计学意义（t=34.12,28.52,均P ＜ 0.05）;病例组血清Cathepsin B（3.49±1.23ng/ml）水平高于对照组（0.98±0.12ng/ml）,差异有统计学意义（t=25.89,P ＜ 0.05）;血清ER,AMH 水平与POI 呈负相关（r=-0.524,-0.755,均P ＜ 0.05）。Spearman 相关性分析显示,血清Cathepsin B 水平与POI 呈正相关（r=0.810,P ＜ 0.05）。ROC 分析显示,血清ER（AUC=0.743）,Cathepsin B（AUC=0.733）水平对POI 的预测价值差异无统计学意义（P ＞ 0.05）;血清AMH 水平对POI 的预测价值明显优于血清ER,Cathepsin B 水平（AUC=0.762,P ＜ 0.05）;血清ER,AMH 和Cathepsin B 水平联合检测对POI 的预测价值明显优于三项指标单独检测（AUC=0.848,P ＜ 0.05）。结论　血清Cathepsin B 在POI 患者中高表达,血清AMH 和ER 在POI 患者中低表达,血清ER,AMH 和Cathepsin B水平联合检测对POI 有较高的预测价值,有助于指导POI 的临床管理。     

气管插管病人3种胃管置入方法的临床效果比较

目的 探讨气管插管病人3种不同胃管置入方法 的临床效果.方法将 ICU 261例气管插管病人随机分为常规插管组(A组)、导丝导引组(B组)和牵拉气管组(C组)各87例.观察并比较一次插管成功率,置管时间,插管前后心率(HR)、经皮血氧饱和度(SpO2)及插管过程中恶心、呕吐、呛咳及鼻咽黏膜出血等不良反应发生率.结果一次插管成功率比较,B组为83.91%,高于A组的70.11%;C组为98.85%,高于A组、B组,差异均有统计学意义(P＜0.05).置管时间、操作总时间比较,C组较A组、B组缩短(均P＜0.01),B组较A组延长(P＜0.01).置管后HR、SpO2与各自置管前相比,C组无明显变化,A组、B组均明显降低(均P＜0.01).置管过程中恶心、呕吐、呛咳及鼻咽黏膜出血发生率,C组均低于A组、B组(P＜0.05).结论 对气管插管病人在镇静状态下牵拉气管的同时置入胃管,准确性高、不良反应少.     

体重超标对慢性阻塞性肺疾病患者运动耐量与生存质量的影响

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者中体重超标人群与体重正常人群运动耐量及生活质量的差异。方法将入选的113例COPD患者分为三组：正常体重组（43例）,超重组（34例）,肥胖组（36例）。对所有的受试对象进行静息肺功能检查,踏车实验,圣·乔治呼吸问卷评分。采用SPSS13．0统计软件进行分析。结果体重正常组的FEV。／FVC为（47．28±3．82）％,超重组为（52．50±8．23）％,肥胖组为（53．20±8．30）％,三组间比较差异有统计学意义（F=8．76,P〈0．01）;组间比较正常组与超重组、肥胖组间差异均有统计学意义（P〈0．01）,超重组与肥胖组间差异无统计学意义（P〉0．05）;心肺功能运动试验中三组的V02max／kg分别为体重正常组（21．80±3．67）ml·kg^-1·min^-1,超重组（20．19±4．14）ml·kg^-1·min^-1,肥胖组（18．98±3．22）ml·kg^-1·min^-1,差异有统计学意义（F=5．82,P〈0．01）,组问比较正常组与超重组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,超重组与肥胖组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,正常组与肥胖组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;三组间的圣·乔治呼吸问卷评分各项指标与总分差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论体重适度增加可提高静息肺通气功能,但明显超出正常水平则会影响患者的运动耐量与运动肺通气。     

阿尔茨海默病患者Aβ42测定与载脂蛋白E基因关系研究

目的 检测阿尔茨海默病(AD)患者血浆中Aβ42和栽脂蛋白E(ApoE)基因多态性,探讨AD患者体内Aβ42代谢异常情况.方法 随机选取AD患者55例、正常人70例,分别检测Aβ42和ApoE基因多态性,并两两进行比较.结果 AD级Aβ42(93.4±7.5)ng/L与对照组(90.5±6.3)ng/L比较,升高差异有统计学意义(P＜0.05);轻度AD组(94.7±8.5)ng/L与对照组相比,升高差异有统计学意义(P＜0.01).中重度AD组(87.6±6.9)ng/L与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AD患者Aβ42异常,与痰病的严重程度相关,与ApoE基因不相关.     

高血压心肌梗死与Th1／Th2类细胞因子变化

目的探讨高血压心肌梗死患者Th1／Th2类细胞因子变化。方法临床及冠状动脉造影确诊的高血压心肌梗死患者45例为A（病例1）组,非高血压心肌梗死患者42例为B（病例2）组,冠状动脉造影无心肌梗死的高血压患者48例为C（病例3）组,常规体验健康者20例为D（对照）组。采用放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）水平,ELISA法检测血清1干扰素（IFN-γ）和白细胞介素4（IL-4）水平。结果①病例1、2、3组Ang-Ⅱ[（94．3±35．4）、（74．4±31．2）ng／L和（63．4±28．9）ng／L]及IFN-γ[（24．3±5．4）、（19．4±3．9）ng／L和（12．1±3．8）]ng／L]较对照组Ang-Ⅱ[（43．4±11．2）ng／L]及IFN-γ[（4．1±1．4）ng／L]水平升高（P〈0．05,P〈0．01）;②病例1组IL-4水平[（14．4±10．7）ng／L与2组[（12．4±2．9）ng／L]、3组[（12．3±6．6）ng／L]及对照组[（11．4±3．9）ng／L]比较差异无统计学意义（P〉0．05）;③病例1、2和3组IFN-1与IL-4比值（0．77±0．33）、（0．62±0．24）和（0．58±0．26）较对照组（0．36±0．19）增大（P〈0．01,P〈0．05）;④Ang-Ⅱ水平与IFN-γ呈正相关（r=0．52,P〈0．01）,而与IL-4水平无相关性（r=0．19,P〉0．05）。结论高血压和非高血压心肌梗死均具有较高的Ang-Ⅱ、IFN—γ及IL-4水平,但高血压心肌梗死Ang-Ⅱ、IFN-γ及IL4水平更高,这是辅助性T细胞亚群Th1／Th2功能失衡的表现;高血压心肌梗死与Th1／Th2失衡,Th1细胞功能亢进密切相关,系统免疫状态和炎性内环境的改变可能对疾病的进展起重要作用。     

新生儿肺炎患者血清YKL-40，25(OH)D3 和HMGB1 表达水平与感染类型及病情评估的相关性研究

目的 探讨人软骨糖蛋白(human cartilage glycoprotein 39,YKL-40)、25 羟维生素D3[25-hydroxy vitamin D3,25(OH)D3] 和高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1) 水平在新生儿肺炎(neonatal pneumonia,NP)诊断及病情评估中的应用价值。方法 选取2020 年1 ～ 12 月深圳市龙华区人民医院新生儿科收治的105 例NP 患儿为研究对象,按照感染病原体的不同,分为细菌性肺炎组40 例和非细菌性肺炎组65 例;根据病情严重程度,可分为轻症肺炎组69 例和重症肺炎组36 例,另选取同期85 例健康新生儿为对照组。通过酶联免疫吸附试验法(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA) 检测血清YKL-40,25(OH)D3 和HMGB1 水平;ROC 曲线分析YKL-40,25(OH)D3 和HMGB1 单独或联合检测对NP 的诊断价值;Spearman 分析YKL-40,25(OH)D3 和HMGB1 水平与病情程度的相关性。结果 细菌性肺炎组与非细菌性肺炎组血清YKL-40(46.39±8.36 ng/ml,40.28±8.47 ng/ml)和HMGB1(23.38±5.66ng/ml,17.32±4.18 ng/ml)水平均显著高于对照组(30.49±6.35 ng/ml,12.56±3.22 ng/ml),差异有统计学意义(F=939.480,99.507,均P ＜ 0.05),血清25(OH)D3(12.76±3.57μg/L,18.33±4.21μg/L)水平显著低于对照组(19.76±4.87μg/L),差异有统计学意义(F=225.752,P ＜ 0.05)。重症组血清YKL-40(52.56±9.68 ng/ml)和HMGB1(26.74±4.57 ng/ml)水平显著高于轻症组(16.63±5.32 ng/ml,9.63±2.38 ng/ml)和对照组(11.63±3.32 ng/ml,6.34±2.06 ng/ml),差异均有统计学意义(F=265.331,55.426,均P ＜ 0.05),而重症组和轻症组血清25(OH)D3(9.76±3.54μg/L ,31.16±5.01μg/L)水平显著低于对照组(35.16±5.88μg/L),差异有统计学意义(F=55.426,P ＜ 0.05)。Spearman 秩相关性分析结果显示,患儿病情严重程度与血清YKL-40,HMGB1 水平呈正相关(r= 0.727,0.210,均P ＜ 0.05),而与25(OH)D3 水平呈负相关(r=-0.566,P ＜ 0.05)。ROC 曲线分析结果显示YKL-40,25(OH)D3 和HMGB1 联合检测诊断NP 效能最高,其AUC 为0.912(95%CI:0.864 ～ 0.932),敏感度和特异度分别为96.34%,85.72%,高于各指标单项检测,差异均有统计学意义(Z=0.746,2.843,3.662,均P ＜ 0.05);三者联合在新生儿细菌性与非细菌性肺炎的诊断效能最高,其AUC 为0.894(95%CI:0.832 ～ 0.941),敏感度和特异度分别为97.26%,80.66%,高于各指标单项检测,差异均有统计学意义(Z=1.573,3.228,2.689,均P ＜ 0.05)。结论 血清YKL-40,25(OH)D3 和HMGB1 水平在NP 感染类型诊断和反映患儿病情程度方面有重要的临床应用价值,三者联合检测临床诊断效能更优。     

携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管靶向效应的研究

目的 探讨携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管的靶向效应.方法 通过生物素桥接法制成携抗αvβ3-整合素单抗的靶向脂质微泡(MBa)、对照微泡携同型抗体脂质微泡(MBc);选取12只HepG2皮下移植瘤裸鼠模型(肿瘤组)和正常对照裸鼠(对照组),经尾静脉随机注射MBa、MBc和RGDfvV封闭10 min后再注射MBa(Blocking+MBa),并行对比超声检查,测量声强度(VI).分别取肿瘤组肿瘤组织和对照组正常骨骼肌组织行病理学和免疫组化检查.结果 肿瘤组中MBa的VI值(17.43±3.30)U,较MBc的VI值(5.88±1.04)U增大近3倍,差异有统计学意义(P <0.01),应用RGDfvV封闭αvβ3-整合素后MBa的VI值降至(6.14±2.25)U,与MBc及对照组的各VI值比较差异均无统计学意义.免疫组化检查显示:肿瘤组织的新生血管内皮有大量αvβ3-整合素显色,可被RGDfvV封闭;而骨骼肌中仅有少量αvβ3-整合素显色.结论 携抗αvβ3-整合素单抗的靶向微泡对肿瘤新生血管具有明显的靶向效应,有望用于肿瘤的诊断和疗效评估.