伽玛刀照射对正常老龄猫额叶皮质组织形态及超微结构的影响

目的研究不同伽玛刀照射剂量对正常猫额叶皮质组织形态及超微结构的影响方法。方法选用健康老龄猫18只,随机分为正常对照组、伽玛刀30 Gy照射组和伽玛刀100 Gy照射组,以猫右侧额叶为照射靶点,照射后14 d,核磁共振仪(MR I)观察靶区脑组织影像学变化,苏木素-伊红(HE)染色及透射电镜观察伽玛刀照射对靶区脑组织形态及超微结构的影响。结果 30 Gy和100 Gy照射组动物于照射后14 d时MR I扫描,均未发现明显的坏死病灶;HE染色显示,30 Gy照射组未见到神经元变性及坏死改变,100 Gy照射组观察到神经元变性,出现噬神经细胞现象;透射电镜显示,30 Gy照射组电镜下神经元细胞核形态正常,内质网及高尔基复合体轻度扩张;100 Gy照射组观察到神经元细胞核固缩,胞浆浓缩,胞质中内质网及高尔基复合体扩张,毛细血管周围胶质细胞终足水肿。结论高剂量照射主要是引起神经细胞核和细胞质损伤,低剂量主要引起胞浆内质网等膜性结构的损伤,伽玛刀照射后引起放射性脑损伤的机制可能与细胞凋亡密切相关。     

甲泼尼龙对放射性脑水肿大鼠脑组织AQP4 mRNA水平的影响

目的探讨甲泼尼龙治疗伽玛刀照射致大鼠放射性脑水肿后对脑组织水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达的影响。方法单次50 Gy伽玛刀照射大鼠大脑半球中线左侧2 mm(中心点在双耳外耳道连线上)建立伽玛刀照射后放射性脑水肿模型。在照射完成后。随机分为甲泼尼龙组及生理盐水对照组,甲泼尼龙组给予甲泼尼龙30 mg/kg,单次尾静脉注射;生理盐水对照组给予等体积生理盐水。按给药后12 h、1 d、2 d、3 d、5 d分别分为5个亚组,分别按时间点断头取脑。用干湿重法测脑组织含水量,取脑组织行RT-PCR检测AQP4 mRNA含量。结果甲泼尼龙治疗后大鼠脑组织含水量较对照组少,甲泼尼龙组靶部位脑组织AQP4 mRNA含量较对照组少。结论甲泼尼龙可以有效减少大鼠放射性脑组织中AQP4mRNA的含量,可以有效治疗放射性脑水肿。     

氟桂利嗪阻滞小鼠皮质神经元胞浆钙离子内流的实验研究

目的　研究缺血状态下神经元胞浆内游离钙离子的变化及氟桂利嗪阻滞钙离子内流的作用。方法　用Flu 3 AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的小鼠皮质神经元标记物 ,应用激光共聚焦技术检测缺血条件和加用氟桂利嗪后细胞内荧光强度 (△FI)的变化。结果　给予缺血处理 10min后 ,神经元胞浆内钙离子△FI明显升高(17.5 2± 3.16 ) ;经氟桂利嗪预处理后 ,可以明显抑制钙离子的△FI(9.5 5± 2 .10 ) ,差异具有显著性意义 (P <0 .0 1) ,氟桂利嗪对无钙培养液缺血神经元胞浆内的钙离子浓度亦有抑制作用。结论　缺血状态下 ,神经元内钙离子明显升高 ,氟桂利嗪抑制胞浆内钙离子的升高 ,除通过阻断胞膜的电压敏感性钙通道外 ,可能还影响细胞内钙池的钙释放功能。     

低剂量伽玛刀照射治疗对功能区癫痫动物行为及其皮层神经元显微结构的影响

目的观察低剂量伽玛刀照射治疗对功能区癫痫猫的行为及其脑额叶功能区皮层神经元显微结构的影响,并探讨其意义。方法将80只猫随机分为A、B、C组。A组24只不做任何处理;B、C组各28只,均用猫额功能区皮质多次注射青霉素法制作点燃癫痫模型,c组造模成功后即予伽玛刀照射治疗。分别于治疗后4、8、12周,三组采用Smialowki6级评分法进行猫行为学观察,采用苏木精-伊红染色和光镜技术观察猫脑额叶功能区皮层神经元的显微结构。结果A组各时点均未出现痫性发作,B组造模成功后4、8、12周重度发作率分别为90％、80％、80％,而c组重度发作率分别为70％、60％、30％。在12周时,C组癫痫重度发作率与B组比较,P〈0．05。从第8周开始,与A组比较,B组脑额叶功能区皮层神经元数目明显减少（P〈0．05）;与B组比较,12周时C组脑皮层神经元数目显著增多（P〈0．05）。结论低剂量伽玛刀照射对功能区癫痫猫模型有明显的抗癫痫作用,其机制可能与降低额叶脑功能区皮质细胞凋亡有关。     

小鼠神经元类缺血/再灌注后钙离子浓度和细胞活性的变化

目的 研究小鼠类缺血／再灌注状态下神经细胞质内游离钙离子及细胞活性变化,探讨氟桂利嗪对缺血／再灌注损伤神经元的治疗意义。 方法 采用原代神经元培养法,建立类缺血／再灌注小鼠皮质神经元模型,将培养的小鼠脑细胞分为实验组(给予类缺血／再灌注处理),药物干预组(类缺血／再灌注处理+氟桂利嗪预处理),分别于再灌注30min、1h、2h、3h检测细胞质内钙离子浓度和细胞活性变化。结果再灌注30 min至2 h检测钙离子浓度,实验组与药物干预组差异有显著意义(P<0.01),至再灌注3 h,两者差异无显著意义;再灌注30min至2 h检测细胞吸光度,两组差异有显著性意义(P<0.01),到再灌注3 h,两组差异无显著性意义。 结论 氟桂利嗪可明显抑制类缺血／再灌注后小鼠皮质神经细胞质内钙离子的升高,减轻由此引发的神经元损伤。     

动物实验性脑出血后血肿内红细胞管涌现象研究

目的探索脑出血后血肿内红细胞通过"管涌现象"的分布特征。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为实验组30只和对照组30只,每组分为5个不同观察时间点:1h、6h、24h、3d、7d,每个时间点5只。采用异硫氰酸荧光素(FITC)标记血液中红细胞,建立大鼠自体动脉血脑出血模型,分别于不同时间点进行大鼠脑组织、颈深淋巴结组织病理切片,荧光显微镜下观察以及HE染色后显微镜下观察,对比分析红细胞的分布特征。结果实验组血肿形成1h后,病灶以及血肿周围可见到FITC-RBC和游离FITC分布,双侧大脑半球和脑干的维乔-罗宾间隙内也有游离FITC分布,双侧颈深淋巴结内均可见FITC-RBC和游离FITC分布。6h后血肿内开始出现含有黄色或黄绿色荧光颗粒的吞噬细胞,同时FITC-RBC和游离FITC逐渐减少。随时间延长,含有黄色荧光颗粒的吞噬细胞在各脑区内逐渐增多,淋巴结生发中心内可见成团分布的黄色荧光颗粒。对照组未见以上变化。结论血肿内红细胞通过"管涌现象"在脑出血后扩散范围比较局限,游离红细胞成分扩散范围比较广泛;"管涌现象"是血肿内有红细胞吸收途径之一。     

藻酸双酯钠对实验性脑缺血大鼠急性期的干预

目的 探讨不同给药时间藻酸双酯钠对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡的保护机制。方法 经大鼠颈内动脉将一线栓插入右侧大脑中动脉1．5h后再灌注24h制成局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。在再灌前30min或再灌注后5h经腹腔给予相同剂量的藻酸双酯钠。流式细胞术测定受损脑组织神经元细胞内钙离子浓度及凋亡率，同时观察大鼠的神经功能障碍评分。结果 藻酸双酯钠治疗组神经功能障碍较非治疗组明显减轻，相应的藻酸双酯钠治疗组细胞内钙离子浓度增高受抑制、细胞凋亡减少。不同给药时间点组间上述指标差异亦有显著性。结论 藻酸双酯钠可以减轻脑组织神经元再灌注损伤，抑制神经元凋亡。抑制受损神经元胞内钙离子浓度增高是其保护作用的可能机制。     

大鼠脑缺血再灌注区小胶质细胞反应及丹参的影响

目的　观察大鼠脑缺血再灌注不同时程脑组织小胶质细胞反应及丹参对它的影响。方法　 2 8只SD大鼠分3组 :假手术组、对照组及丹参组。在大脑中动脉缺血 2h再灌注 3、2 4、72h、7d及 14d后 ,分别进行缺血脑组织区抗CR3免疫组织化学HE染色。结果　小胶质细胞激活在脑缺血再灌注 2 4h开始出现 ,仅在皮层缺血区 ,明显迟于神经元损伤。其活化表现为染色加深及明显的细胞形态改变。随着再灌注时间的延长 ,脑缺血区CR3免疫反应强度及阳性细胞数量均逐渐增加 ,再灌注 7d达高峰 ,同时 ,其活化的相应区域出现显著神经元变性、坏死。在丹参组 ,缺血区CR3免疫阳性反应及神经元损伤明显低于对照组。结论　缺血区小胶质细胞激活可能继发于早期神经元的损伤并且进一步加重缺血后再灌注损伤 ,丹参能抑制缺血区小胶质细胞的活化 ,降低神经细胞的损伤     

弥漫性脑损伤大鼠的神经功能改变及Homer1a蛋白表达

目的 探讨弥漫性脑损伤(DBI)大鼠的神经功能及其皮层组织Homer1a蛋白表达改变及意义.方法 选择成年雄性SD大鼠45只,随机分为正常对照组5只、假手术组5只、DBI组35只.DBI组采用Marmarou等方法建立DBI模型,分别于伤后30 min,3、6、12、24、48、72 h断头取脑;假手术组仅切开头皮开天窗,不致伤;正常对照组不做任何处理.对三组大鼠进行后肢抓持反射试验、触须诱发前肢定位试验、侧向垫步试验,评价其神经功能;采用HE染色观察各组皮层神经元细胞形态变化,免疫组化法观察Homer1a蛋白表达情况.结果 与正常对照组、假手术组比较,DBI组大鼠神经功能评分降低,但其伤后3、24 h评分出现高峰(P均＜0.05).DBI组皮层神经元细胞出现变性、坏死和凋亡改变;DBI伤后30 min,Homer1a蛋白开始表达,持续至伤后72 h,以伤后3、24 h最多(P均＜0.01).结论 大鼠DBI后神经功能评分降低,损伤前后皮层Homer1a蛋白表达有显著变化,提示Homer1a蛋白参与神经元的损伤过程.     

钙离子-钙调磷酸酶对肺成纤维细胞表型转化的影响

目的探讨钙离子-钙调磷酸酶在大鼠肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞表型转化中的作用。方法体外分离培养大鼠肺成纤维细胞,免疫组织化学法检测波形蛋白鉴定细胞;以Fluo3-AM为钙离子荧光示踪剂,激光共聚焦显微镜检测细胞内基础Ca2＋水平以及给予转化生长因子β1（TGF-β1）刺激后细胞内钙离子水平变化;Westernblot检测各组细胞内α—sMA、P—Smad2的表达。结果①大鼠肺成纤维细胞波形蛋白胞浆表达呈阳性;②TGF-β1刺激后大鼠肺成纤维细胞胞内钙离子水平升高;③TGF—β1刺激组,α—SMA表达明显增加,加用环孢素A后不能抑制a-SMA的表达;TGF-β1与环孢素A共刺激1h、4h、24h各组与TGF-β1刺激组相比,p-Smad2水平均明显增加,且以环孢素A作用1h增加最为明显,而4h组和24h组比较差异无统计学意义。结论TGF-β1刺激后大鼠肺成纤维细胞胞内钙离子水平升高。钙调磷酸酶可能参与肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞表型转化。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP