高脂饲料喂养与动脉内膜球囊损伤结合建立兔腹主动脉粥样硬化模型

背景：以往研究多采用单纯饲喂高脂饲料、正常或高脂血症动物动脉内膜损伤致动脉粥样硬化狭窄模型。 目的：拟采用喂养高脂饲料与动脉内膜球囊损伤相结合的方法建立腹主动脉粥样硬化的模型。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2007-01/03在解放军总医院动物实验中心完成。 材料：新西兰白兔20只,随机分为单纯饲喂高脂饲料组、高脂饲料与动脉内膜损伤结合组,每组10只。高脂饲料由普通颗粒饲料+4%胆固醇+10%猪油组成+10%蛋黄粉组成。 方法：单纯饲喂高脂饲料组单纯喂养高脂饲料,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组喂养高脂饲料4周后,行腹主动脉内膜球囊损伤术。 主要观察指标：12周后取主动脉行病理检查,计算机计算脂纹脂斑厚度,内、中膜厚度,内膜厚度比值,并进行血清总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的测定。 结果：12周后,两组兔血脂血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇均升高,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组升高更明显(P < 0.05)。喂养高脂饲料的两组动物均出现动脉粥样硬化斑块,横段面纤维斑块切片出现钙化。与单纯饲喂高脂饲料组比较,高脂饲料与动脉内膜损伤术结合组内膜明显增厚, 形成了明显的斑块及纤维帽结构,斑块厚度与内中膜厚度比值增加明显(P < 0.01)。 结论：所诱导产生的斑块与人类斑块成分具有一定相似性,包括斑块的纤维帽、钙化、脂核等,提示采用动脉内膜损伤与高脂饮食结合方式来制作动脉粥样硬化斑块的模型是可行的、实用的。     

补阳还五汤对脑卒中患者血脂及动脉粥样硬化的影响

目的 观察和评价补阳还五汤辅助治疗脑卒中对患者血脂和动脉粥样硬化情况的影响.方法 选取102例脑卒中患者为研究对象,随机分为观察组和对照组各51例,对照组给予常规西医治疗,观察组在此基础上加用补阳还五汤进行辅助治疗.对2组患者治疗前后血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平、颈动脉内膜中层厚度（IMT）和颈动脉血管阻力指数（RI）进行检测和记录.结果 2组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C治疗后均显著改善（P＜0.05）,2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组血清TC、TG、LDL-C水平显著低于对照组,HDL-C水平显著高于对照组;2组颈动脉IMT厚度均较治疗前有所下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;2组颈动脉RI均较治疗前显著下降（P＜0.05）,且观察组下降更为明显（P＜0.05）.结论 补阳还五汤对纠正脑卒中患者的脂代谢异常有积极作用,可在一定程度上改善患者动脉粥样硬化的症状,可作为脑卒中辅助治疗手段予以推广应用.     

1000/球囊损伤致腹主动脉狭窄过程中白介素-8水平表达对血管内皮功能的影响

目的：观察兔腹主动脉球囊扩张术后炎性因子白细胞介素-8（Interleukin-8,IL-8）,反映血管内皮功能指标一氧化氮(nitric oxide ,NO)、血管性假性血友病因子（von Willebrand factor, vWF）、内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）水平变化,以及球囊扩张术后腹主动脉病理形态学改变。方法：健康新西兰大白兔24只,雌雄不拘,随机分为两组：球囊损伤组(n=12)和对照组(n=12),分别于术前、术后4h、1d、3d、7d、14d取耳缘静脉血,采用酶联免疫吸附双抗夹心法测定 IL-8、vWF,放射免疫法测定ET-1,利用硝酸还原酶法测定NO,14d后复查造影及病理检查观察腹主动脉管腔、管壁变化情况。结果：①兔腹主动脉球囊损伤后炎性因子IL-8水平4h后即开始明显升高,24h后vWF、ET-1水平明显升高,NO水平明显降低,与术前以及对照组相比,差异具有显著性;②相关分析显示:IL-8水平表达与vWF、ET-1水平呈正相关,相关系数r=0.532,0.619（p＜0.05）, IL-8水平表达与NO水平呈负相关,相关系数r=-0.517（p＜0.05）;③球囊扩张拉伤后2周,实验组动物腹主动脉拉伤处与对照组比较管腔明显狭窄;④病理检查结果：对照组动脉内膜光滑,内皮下有少量结缔组织,无平滑肌细胞存在,中膜平滑肌细胞成梭形,环绕管腔排列。实验组动脉内膜、中膜增厚,管腔明显狭窄,内膜下平滑肌细胞明显增生,而且排列不规则,弹性纤维层结构不清,斑块隆起明显,内含泡沫细胞。结论：球囊扩张术后引起炎性反应明显增强,激发加重了内皮功能损伤,引起腹主动脉管腔狭窄。在此过程中,IL-8可能起到关键的调节作用。     

川芎嗪对兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的影响

目的研究川芎嗪对兔颈动脉球囊损伤后新生内膜及管腔狭窄度的影响，探讨其预防再狭窄的可能性。方法应用直径为3mm的球囊导管造成家兔左颈动脉去内皮损伤模型。术后14d和28d分别测量对照组和川芎嗪治疗组动脉新生内膜及中膜厚度、新生内膜面积和管腔狭窄度并应用Brdu和α-actin免疫组化方法观察新生内膜细胞的增殖指数。结果治疗组新生内膜及中膜厚度、新生内膜面积．管腔狭窄度和细胞增殖指数均明显低于对照组。结论川芎嗪具有明显抑制动脉损伤后新内膜的形成及降低管腔狭窄度的作用。     

动脉粥样硬化性脑梗死患者FT4,FT3,TSH水平与血管狭窄程度的相关性研究

目的 分析动脉粥样硬化性脑梗死患者游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、促甲状腺激素(TSH)水平与血管狭窄程度的相关性。方法 选取2018年6月-2019年6月本院收治的动脉粥样硬化性脑梗死患者80例作为动脉粥样硬化性脑梗死组,同期选取非动脉粥样硬化性脑梗死患者80例作为非动脉粥样硬化性脑梗死组,同期选取于本院行健康体检的健康志愿者80例作为健康对照组,测定FT4,FT3,TSH水平,分析FT4,FT3,TSH水平与有无斑块、血管狭窄程度的关系及三者相关性。结果 动脉粥样硬化性脑梗死组血清FT4,TSH水平高于健康对照组、非动脉粥样硬化性脑梗死组,FT3水平低于健康对照组、非动脉粥样硬化性脑梗死组(P<0.05); 非动脉粥样硬化性脑梗死组与健康对照组FT4,FT3,TSH水平比较无明显差异(P>0.05)。有斑块组血清FT4,TSH水平高于无斑块组,FT3水平低于无斑块组(P<0.05); 不稳定性斑块组血清FT4,TSH水平高于稳定性斑块组,FT3水平低于稳定性斑块组(P<0.05)。中度狭窄组、重度狭窄组血清FT4,TSH水平高于轻度狭窄组,FT3水平低于轻度狭窄组(P<0.05); 重度狭窄组血清FT4,TSH水平高于中度狭窄组,FT3水平低于中度狭窄组(P<0.05)。血清FT4与FT3水平呈负相关(r=-0.279,P=0.012),血清FT4与TSH水平呈正相关(r=0.439,P=0.001),血清FT3与TSH水平呈负相关(r=-0.291,P=0.009)。结论 FT4,TSH在动脉粥样硬化性脑梗死中高表达,FT3在动脉粥样硬化性脑梗死中低表达,且与患者有无斑块、血管狭窄程度相关,有斑块、血管越狭窄,则表达越增加。     

大鼠颈动脉粥样硬化性狭窄模型的建立

目的 建立一种经济实用、稳定、可靠的颈动脉粥样硬化动物模型.方法 SD大鼠分为3组,每组20只.采用球囊损伤法造成颈动脉内膜损伤后,分别给予普通饲料喂养,高脂饲料灌胃,同时给予腹腔注射维生素D,于第1,2,3,4周取出损伤侧血管,行HE染色,计算各组大鼠颈动脉狭窄率和内、中膜面积.结果 注射维生素D组大鼠颈动脉损伤处,第1周时内皮下即有泡沫细胞出现,随着时间延长逐渐出现内皮细胞脱落,内膜下泡沫细胞逐渐增多,血管平滑肌细胞增生,排列紊乱,至第4周时形成明显的动脉粥样斑块,管腔狭窄,较其他组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SD大鼠经球囊损伤颈动脉内膜后,结合高脂饲料及维生素D腹腔注射,可形成明显的颈动脉粥样硬化斑块,该方法时间短、操作简单、成功率高,可作为脑缺血性疾病研究的动物模型.     

川芎嗪对颈动脉球囊损伤后基质金属蛋白酶组织抑制物-1基因表达的影响

目的观察川芎嗪对兔颈动脉球囊损伤后新生内膜增生、管腔狭窄度和管壁基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,探讨其预防再狭窄的可能机制和作用。方法应用直径为3 mm的球囊导管制作家兔左颈动脉去内皮损伤模型,术后14 d测量对照组和川芎嗪治疗组动物新生内膜及中膜厚度、新生内膜面积和管腔狭窄度,并应用Brdu和α-actin免疫组化方法观察新生内膜细胞的增殖指数,同时应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法比较对照组和治疗组间管壁TIMP-1的基因表达。结果治疗组新生内膜及中膜厚度、新生内膜面积、管腔狭窄度和细胞增殖指数均低于对照组,而川芎嗪治疗组动脉壁TIMP-1mRNA的表达明显高于对照组。结论川芎嗪具有明显增加动脉损伤后管壁TIMP-1mRNA形成的作用,从而抑制新生内膜的形成和降低管腔狭窄度。     

蛋白酶体抑制剂MG132对动脉粥样硬化的影响

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对动脉粥样硬化的影响。方法将新西兰白兔30只随机分成高脂组、MG132(1)组和MG132(2)组。3组兔普通饲料喂养1w后行颈动脉球囊损伤术,术后高脂饲料(含1%胆固醇、3%猪油和15%蛋黄)喂养;MG132(1)组在术后高脂饲料喂养的同时血管局部应用蛋白酶体抑制剂MG132;MG132(2)组在术后高脂饲料喂养4w后血管局部应用蛋白酶体抑制剂MG132;3组均喂养8w后取颈总动脉血管制成病理切片行HE染色。结果高脂组兔的右颈总动脉管壁呈动脉粥样硬化改变。MG132(1)组兔右颈动脉血管组织结构基本正常。MG132(2)组兔的右颈总动脉管腔介于二者之间。结论局部应用蛋白酶体抑制剂MG132能够抑制血管内膜增生及动脉粥样形成,同时可能具有稳定斑块的作用。     

小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型的初步建立

目的探索建立适合于神经介入研究的动脉粥样硬化性颈动脉狭窄动物模型的方法。方法以12头广西巴马小型猪为实验对象,以高脂饲养和动脉球囊损伤为模型建立的主要手段。应用体外超声、数字减影血管造影(DSA)和血管内超声(IVUS)评价颈动脉狭窄的形成情况,并对颈动脉的病理改变特点进行评价,最后分析总结出创建动脉粥样硬化性颈动脉狭窄动物模型的理想方案。结果16周时的DSA发现：高脂饲养和动脉球囊损伤组平均狭窄率达33．32%±12．84%；病理检查证实有明显的粥样硬化斑块形成。结论高脂饲养加动脉球囊损伤,16周可以初步建立广西巴马小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型。     

颅内外动脉粥样硬化的影像学研究

颅内外动脉粥样硬化是缺血性脑卒中的重要病因。动脉粥样硬化一方面可造成原位管腔狭窄,阻碍血运,而具有溃疡、出血等特点的不稳定粥样硬化斑块更是脑栓塞的重要原因。动脉粥样硬化的诊断主要依赖于各种影像学手段,如数字减影血管造影（DSA）、超声、CT血管造影（CTA）、磁共振血管成像（MRA）等,它们各有其特点,对于管腔狭窄和不稳定斑块的检测有着不同的敏感性和特异性。临床医生应据实际情况选择不同的检测方式,提高动脉粥样硬化的诊断水平。     

经股动脉入路建立球囊损伤兔颈动脉狭窄模型

目的经股动脉入路制作一种实用、可靠且稳定的颈动脉狭窄模型,用于探讨颈动脉再狭窄的防治。方法新西兰大白兔20只,随机分为对照组、实验1周组、实验2周组和实验4周组,每组5只,常规喂养。所有动物采用经右侧股动脉入路置入HyperForm球囊,实验组行右颈总动脉定比扩张,对照组行单纯右颈动脉路图显示,术后以普通饮食喂养。实验1、2、4周组实验兔分别于手术后1周、2周和4周处死,并在第4周同时处死对照组兔。右颈动脉分叉近心端1～2cm节段取材送光镜和电镜检查,分别观察血管壁增生情况并计算血管内膜和中膜厚度。结果与对照组比,实验组新生内膜厚度呈持续性显著增加(P<0.01),实验2周组与实验1周组比较及实验4周组与实验2周组相比,内膜厚度均显著增加(P<0.01)。各组中膜厚度未见明显统计学差异(P>0.05)。结论经股动脉入路用Hyper Form球囊行颈动脉定比扩张能成功地制作一种稳定、简便可靠的颈动脉狭窄动物实验模型。血管平滑肌细胞的过度增生是造成PTA术后管腔再狭窄的主要因素。     

中药补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4表达的影响

目的探讨中药补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响。方法 55只雄性SD大鼠随机分为假手术组(5只)、脑出血模型组(25只)和补阳还五汤治疗组(25只)。采用自体血注入法制作右侧纹状体出血大鼠模型。假手术组不注入自体血。补阳还五汤治疗组于术前给予1 ml/100 g补阳还五汤浓缩液灌胃3 d,假手术组和脑出血模型组同期给予等量生理盐水替代。在相应时间点分别对大鼠进行神经功能缺损评分后处死大鼠。采用免疫组化法检测脑组织AQP4蛋白的表达,采用原位杂交法检测脑组织AQP4 mRNA的表达。结果补阳还五汤治疗组及脑出血模型组大鼠神经功能缺损评分明显高于假手术组(均P<0.05)。补阳还五汤治疗组大鼠术后3 d和7 d时神经功能缺损评分明显低于脑出血模型组(均P<0.05)。补阳还五汤治疗组及脑出血模型组大鼠脑组织AQP4蛋白和mRNA表达水平明显高于假手术组(均P<0.05)。补阳还五汤治疗组大鼠术后3 d和7 d时脑组织AQP4蛋白和mRNA表达水平明显低于脑出血模型组(均P<0.05)。各组大鼠均未见明显不良反应。结论补阳还五汤可抑制脑出血大鼠脑组织中AQP4的表达,并有助于其神经功能恢复。补阳还五汤治疗脑出血有效可能与其抑制AQP4的表达,减轻脑水肿有关。     

银杏黄酮苷元干预兔颈总动脉损伤后内膜增生及血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达

背景：银杏叶提取物中的黄酮苷元具有较强的抗氧化活性,课题组前期实验证实可抑制氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1。 目的：进一步探讨银杏黄酮苷元对兔颈总动脉内皮损伤后内膜增生和血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响。 方法：将雄性新西兰大白兔随机分为对照组、假手术组、模型组和治疗组。对照组予普通饲料,其余各组予高脂饮食,假手术组仅作颈外动脉结扎,模型组和治疗组均球囊损伤右颈总动脉,治疗组损伤后用银杏黄酮苷元灌胃。4周后检测各组血脂水平,观察各组右颈总动脉形态,用免疫组织化学法和RT-PCR检测血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达。 结果与结论：模型组术后4周内膜增生明显,有粥样斑块形成,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达明显增加(P < 0.05)。治疗组银杏黄酮苷元灌胃4周后内膜增生较轻,内膜面积,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1阳性细胞数和其基因表达水平均低于模型组(P < 0.05),但血脂与模型组比较无差异。提示银杏黄酮苷元可减轻新生内膜增生及动脉粥样硬化病粥样斑块的形成,这种作用可能与抑制兔颈总动脉内皮损伤后血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达有关。     

肉毒碱复合高脂饲料喂养兔血脂水平的变化

背景：肉毒碱是脂肪酸进入线粒体内进行氧化代谢的惟一转运载体，其在机体内水平对血脂代谢具有重要的影响作用。 目的：观察肉毒碱对高脂饲料喂养兔血脂水平变化的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-10/2007-05在解放军南京军区南京总医院检验科及比较医学科完成。 材料：普通级健康纯系雄性新西兰兔14只，体质量(1.98±0.22) kg，用于建立兔高脂血症模型。 方法：14只雄性新西兰兔随机抽签法分为对照组及实验组，每组7只。对照组仅用高脂饲料喂养，实验组用高脂饲料喂养的同时每天补充肉毒碱200 mg/kg 体质量。分别于实验开始后第0，2，3，4周称体质量并抽取耳动脉血，分离血清后测定血中总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及载脂蛋白B和血清游离肉毒碱水平。 主要观察指标：不同时间点各组动物体质量的变化以及血中总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及载脂蛋白B和血清游离肉毒碱水平。 结果：14只新西兰兔全部进入结果分析。4周内，实验组和对照组体质量差异无显著性意义(P > 0.05)。自第2周开始，实验组兔血清游离肉毒碱水平高于对照组(P < 0.01)；总胆固醇、载脂蛋白B水平明显低于对照组(P < 0.05或P < 0.01)；3周后，实验组血清三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平也低于对照组(P < 0.01)；两组高密度脂蛋白胆固醇水平差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：补充服用肉毒碱能够抑制高脂饮食导致的血中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇以及载脂蛋白B水平升高。     

渐变网格球扩支架治疗兔囊状动脉瘤

目的评估单纯使用新型渐变网格球扩支架治疗动脉瘤的可行性。方法取新西兰大白兔12只,分为实验组（n=6）和对照组（n=6）。采用弹性酶诱导方法,在右侧颈总动脉起始部制作动脉瘤模型,实验组载瘤动脉内植入渐变网格球扩支架,对照组不植入支架。观察3个月,复查造影并行统计学分析,并处死动物行病理检查。对实验组支架植入前后造影结果进行分析．拟合动脉瘤内时间－密度曲线。结果实验组载瘤动脉内均成功植入渐变网格球扩支架,其中1个动脉瘤植入后即刻和3个月造影未见动脉瘤显影,其余5个动脉瘤显影较淡;3个月时,DSA显示支架位置均良好,载瘤动脉通畅,无支架内狭窄;支架植人后时间－密度曲线与术前相比,对流相降低而弥散相增加。对照组1只动物造影前死于麻醉意外,其余5只观察3个月,动脉瘤大小无明显变化。病理显示：实验组1只不显影的动脉瘤血管内膜已完全覆盖支架,而另5只未愈合的动脉瘤颈部支架仍然裸露：对照组动脉瘤体厚薄不均匀。弹力层均消失。结论单纯使用渐变网格球扩支架可促进兔囊状动脉瘤愈合,且对载瘤动脉无明显影响。     

Buyang Huanwu decoction enhances cell membrane fluidity in rats with cerebral ischemia/reperfusion

After bilateral carotid artery occlusion for 30 minutes and reperfusion for 2 hours, distinct pathological changes presented in the cerebral cortex and cerebellum of rats. Compared with normal rats, nerve cell membrane fluidity significantly decreased in ischemia/reperfusion rats as detected by spin-labeling electron spin resonance, consistent with order parameter S and rotational correlation time τc measurements. Brain nerve cells from rats with ischemia/reperfusion injury were cultured with 1-100 mg/mL Buyang Huanwu decoction. Results showed that Buyang Huanwu decoction gradually increased membrane fluidity dose-dependently to normal levels, and eliminated hydroxide (OH˙) and superoxide (O2˙) free radicals dose-dependently. These findings suggest that Buyang Huanwu decoction can protect against cell membrane fluidity changes in rats with ischemia/ reperfusion injury by scavenging free radicals.     

补阳还五汤对脑出血大鼠PI3K/AKT信号通路的影响及其神经保护作用的机制

目的观察并探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路的影响及其神经保护作用的可能机制。方法 72只SD大鼠随机分为四组:假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组,每组18只。其中模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组采用Rosenberg法制作脑出血大鼠模型。Garcia法检测大鼠神经功能评分,电镜观察神经元线粒体超微结构,western blot法检测磷酸化蛋白激酶(p-AKT)蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡变化,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(bax)的表达,甲酰胺法检测血脑屏障(BBB)通透性,干湿重法检测脑组织含水量。结果与脑出血模型组相比,补阳还五汤治疗明显提高神经功能学评分(P0.05),降低BBB通透性,减少脑组织水含量(P0.05),上调p-AKT、bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,减轻线粒体损伤,抑制神经元凋亡。结论补阳还五汤抗脑出血引起脑损伤的作用机制可能与其激活PI3K/AKT信号途径,抑制神经元凋亡,降低BBB通透性,减轻脑水肿有关。