耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌mecA基因检测分析

目的:调查耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)耐药现状,分析其耐药表型与基因型的关系,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:收集临床分离的86株凝固酶阴性葡萄球菌,采用头孢西丁纸片法检测耐药表型、聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因,并将两种结果进行对比分析。结果:86株凝固酶阴性葡萄球菌中头孢西丁纸片法阳性64株,检出率为74.4%;mecA基因阳性58株,阳性率为67.4%;其中有1株头孢西丁纸片法阴性而mecA基因阳性,7株头孢西丁纸片法阳性而mecA基因阴性。结论:本地区耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药状况严重;头孢西丁纸片法与PCR检测mecA基因一致率90.7%;PCR检测mecA基因可快速准确判定耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌。     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

凝固酶阴性葡萄球菌qacA／B基因检测分析

目的了解凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）qacA／B耐消毒剂基因耐药基因存在状况,为临床提供CSN对消毒剂的潜在耐药信息。方法收集临床标本中分离出的CNS,并根据其对头孢西丁的敏感性分为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）两组,采用聚合酶链反应（PCR）检测qacA／B基因,并对组间检出率进行比较。结果38株CNS中qacA／B基因阳性13株（占34．2％）,其中MRCNS35．7％,MSCNS30．0％。结论CNS的qacA／B基因携带率较高,且MRCNS菌株与MSCNS菌株组间携带率无统计学意义。MSCNS携带qacA／B基因为国内首次报道。     

葡萄球菌临床分离株耐药性分析

目的 探讨葡萄球菌临床分离株耐药性现状,为临床医生合理使用抗生素提供科学依据. 方法 采用微量肉汤稀释法对216株葡萄球菌做药敏试验,同时用头孢眄丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus,MRS). 结果 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methieillin-resistant coagulase-negative staphylococci,MRCNS)的检出率分别为53.7%和91.9%;MRSA和MRCNS对临床常用抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible staphylococcus aureus,MSSA)和甲氧西林敏感凝固酶阴性筒萄球菌(methicillin-susceptible coagulase-negative staphylococci,MSCNS);绝大多数葡萄球菌对奎奴普丁/达福普丁敏感;未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的菌株. 结论 MRSA和MRCNS分离率上升,细菌耐药性持续增加,这都要求我们进一步加强MRS的检测和细菌耐药性监测,其对于正确合理选用抗菌药和控制细菌耐药性产生十分重要.     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药性及基因分型研究

目的 研究耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase negative staphylococcus,MRCNS)耐药性状况及感染的流行病学特征.方法 苯唑青霉素法筛选MRCNS株,K-B法测定其耐药性,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析MRCNS基因同源性.结果 39株...     

头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价

目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性.方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性.结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112).头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%.结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法.     

医院感染血浆凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析

目的了解医院感染血浆凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative staphylococci C0NS)β-内酰胺酶,粘质物产生等耐药性的情况.方法对临床分离CONS予以鉴定,琼脂纸片扩散法(K-B)检测药敏,Nitrocefin法检测β-内酰胺酶,刚果红平板法检测粘质物.结果临床分离CONS对青霉素、红霉素、复方新诺明、苯唑西林、环丙沙星、克林霉素的耐药率较高,分别为85.4%、81.0%、79.8%、67.7%、58.2%和55.1%,对氨苄西林/舒巴坦、利复平、美洛培南较敏感,耐药率分别为8.9%、17.1%和24.7%,未发现有耐万古霉素的菌株.β-内酰胺酶阳性率为72.8%,粘质物阳性率为8.9%.结论CONS耐药性增高与其产β-内酰胺酶、粘质物有关,同时还会导致耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase negative,staphylococci MRCONS)出现.     

医院感染患者凝固酶阴性葡萄球菌的药敏试验以及耐药基因研究

目的 分析2020年10月1日至2021年9月30日全院医院感染患者凝固酶阴性葡萄球菌的药敏情况并对相关耐药基因进行研究。方法 选择2020年10月1日至2021年9月30日全院临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌株共267株,通过Kirby-Bauer纸片扩散法与E-test法对菌株进行药敏试验,应用基因扩增技术测定耐药基因,并测序分析株种耐药相关基因。结果 凝固酶阴性葡萄球菌共267株,其中占比最大的菌种为表皮葡萄球菌共140株,占比52.43%;其次为人葡萄球菌共39例,占比14.61%。凝固酶阴性葡萄球菌共267株,其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)204株,占比76.40%,未发现万古霉素、利奈唑胺耐药株。凝固酶阴性葡萄球菌共267株,其中94.75%的菌株携带mecA耐药基因,74.15%携带ermA耐药基因,69.66%携带tetM耐药基因。分析患者年龄、性别、耐药基因对良好临床结局的影响,发现年龄、mecA基因耐药基因、qacA/B/C耐药基因为凝固酶阴性葡萄球菌良好临床结局的影响因素(P<0.05)。结论 感染凝固酶阴性葡萄球菌的患者可首选万古霉素、利奈唑胺...     

mecA、femA基因PCR联合扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 探讨mecA、femA基因PCR联合扩增快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的敏感性及特异性。方法 用纸片扩散法及mecA、femA基因PCR联合扩增检测178株葡萄球菌中的MRSA，并与琼脂稀释法的结果比较。结果 纸片扩散法筛检MRSA(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌，MRCNS)的敏感性、特异性分别为94．4％(89．5％)、92．4％(73．7％)。在金黄色葡萄球菌中若以mecA基因阳性为判定MRSA的指标，则敏感性、特异性分别为91．7％、95.5％。在178株葡萄球菌中若以mecA、femA基因阳性作为判定MRSA的指标，特异性提高到97．9％．结论 PCR mecA、femA基因联合扩增既可用于筛检MRSA，又可免去常规生化鉴定，具快速、特异性强的优点。     

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。     

头孢西丁替代苯唑西林检测"耐甲氧西林"的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌

目的探讨头孢西丁纸片扩散法替代苯唑西林检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的准确率。方法临床标本培养鉴定出的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌同时用苯唑西林和头孢西丁筛选(K-B法)耐药菌株,再用PBP2a胶乳法进一步检测耐药菌株的mecA基因。结果121株的葡萄球菌,对苯唑西林的耐药率为97.5%,其中金黄色葡萄球菌31株,表皮葡萄球菌67株,腐生葡萄球菌18株,溶血葡萄球菌5株,用PBP2a胶乳试剂和头孢西丁纸片检测金葡菌中MRSA发生率均为77.4%(24/31),凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS发生率96.6%(87/90)和94.4%(85/90)。头孢西丁纸片扩散法的符合率为99%(109/111)。结论苯唑西林纸片扩散法检测MRSA假阳性率较高,而头孢西丁纸片法(K-B法)与PBP2a胶乳凝集法检测MRSA和MRCNS的结果相近,适合实验室推广使用。     

耐甲氧西林葡萄球菌的多重PCR快速检测

目的 采用多重聚合酶链反应（PCR）检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），并对我院葡萄球菌的耐药率进行调查。方法 对262株葡萄球菌（金黄色葡萄球菌86株，凝固酶阴性葡萄球菌176株）进行多重PCR扩增，并与琼脂稀释法作比较。对我院葡萄球菌的耐药率进行统计分析。结果 以mecA基因阳性判断MRS，灵敏度为100％，特异度为96．6％，阴性预测值为1.0％，阳性预测值为99．0％；以mecA基因和femA基因阳性判断耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），灵敏度为100％，特异度为99．5％，阴性预测值为100％，阳性预测值为98．5％。我院葡萄球菌耐药率为78．6％，其中凝固酶阴性葡萄球菌耐药率为79．0％，金黄色葡萄球菌耐药率为78．0％。结论 多重PCR技术检测mecA基因能快速、敏感、准确地检测MRS，与femA基因联合检测能有效检测MRSA。MRS已成为日益严重的葡萄球菌感染问题。     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测及耐药性分析

目的:探讨不同方法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的敏感性,并对其耐药性进行分析.方法:应用PCR检测mecA基因、E-test、青霉素结合蛋白2a(PBP2a)乳胶凝集法、苯唑西林(OXA)琼脂筛选法和K-B法对临床分离的200株凝固酶阴性葡萄(CNS)球菌进行MRCNS检测,并用WHONET4软件进行耐药性分析.结果:各方法MRCNS检测阳性率分别为:OXA琼脂筛选法74%;OXAK-B法72%;E-test71%;PBP2a乳胶凝集法73.5%,mecA基因检测法70%,检测结果无显著性差异(χ2=1.5124,P＞0.05).MRCNS对青霉素(PEN)、庆大霉素(GEN)、复方磺胺(SXT)、环丙沙星(CIP)、四环素(TET)、克林霉素(CLI)、红霉素(ERY)等传统抗生素耐药率均在50%以上;甲氧西林敏感凝固酶阴性的葡萄球菌(MSC-NS)除PEN、ERY耐药率为80.4%和57.1%以外,其他抗生素均小于或在50%左右,CNS中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)达70%以上,未发现耐万古霉素(VAN)的CNS.结论:五种方法均能满足MRCNS的临床筛选,其中以乳胶凝集法最为简便、快速,临床值得推广;MRCNS对氨基甙类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、磺胺存在严重的交叉耐药现象,经验用药首选VAN,而MSCNS除VAN外,还可选用GEN、SXT、CIP、TET、CLI.     

斑点杂交法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA的临床研究

目的 探讨斑点杂交技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA的应用价值.方法 设计mecA基因特异性引物,用地高辛标记;制备mecA基因探针,运用斑点杂交方法、聚合酶链反应（PCR）法检测mecA基因.结果 100例临床分离的金黄色葡萄球菌中共检出mecA基因阳性32例,阳性率为32％; PCR方法检出阳性36例,阳性率为36％.结论 通过斑点杂交技术可以方便、特异地检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因.     

头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的可靠性和临床实用性.方法 临床收集的93株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),按法国生物学会(CASFM)推荐的头孢西丁和拉氧头孢30μg低密度菌落法检测MRCNS,并与mecA基因PCR扩增法进行比较.结果 以mecA基因PCR扩增法为金标准,其中MRCNS 56株(阳性率60.2%),低密度菌落法头孢西丁的敏感性和特异性分别为94.6%和100%,拉氧头孢的敏感性和特异性分别为100%和97.3%.结论 头孢西丁和拉氧头孢低密度菌落法是鉴定异质性MRCNS的良好方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌femA调控基因的研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA是否存在调控基因,以进一步揭示其耐药机制。方法用最低抑菌浓度法（MIC）筛选对苯唑西林高耐株、低耐株、敏感株;用头孢色芬纸片法（Nitrocephin）筛选出不产β-内酰胺酶菌株;用PCR筛选出含mecA的菌株。将含mecA不产酶的高耐株、低耐株、敏感株纳入进一步研究中;PCR扩增femA及femA5？上游基因;提取细菌总蛋白;生物素标记DNA探针;滞留电泳检测调控基因。结果滞留电泳检测对苯唑西林高度耐药不产β-内酰胺酶含mecA基因菌株均出现滞留条带。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA有调控基因存在。     

院内外环境分离金黄色葡萄球菌的耐药性及毒素基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）耐药基因及毒素基因,了解其分布情况。方法采用多重聚合酶链反应（multiplex polymeras chain reaction,PCR）技术分别检测耐药基因mecA、femA与毒素基因TSST、PVL。结果 83株金黄色葡萄球菌,仅3株（3.61%）菌检出mecA基因,22株菌（26.50%）检出femA基因,15株菌（18.07%）同时检出mecA与femA基因。医院样本检出12株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）,3株甲氧西林耐药凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant and coagulasenegative Staphylococcus aureus,MRCNS）。83株分离自医院及环境样本SA,2株分离自咽拭子的样本检出TSST基因,检出率4.54%（2/44）;1株分离自血液的样本检出PVL基因,检出率2.27%（1/44）,其余菌株未检出毒素基因。结论院内样本中,部分菌株携带mecA基因,环境样本未发现携带mecA菌株,两者存在差异。83株SA菌,毒素基因携带率较低。检测耐药、毒素基因携带率,为临床治疗及院内感染控制,食物中毒溯源提供依据。     

葡萄球菌耐药性分析

目的探讨临床送检标本的葡萄球菌耐药状况,指导临床合理用药.方法采用全自动细菌鉴定仪对临床送检标本进行细菌鉴定同时做K-B法药敏试验.结果 280株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌160株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）100株,占62.5%,凝固酶阳性的甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）60株,占37.5%;凝固酶阴性葡萄球菌120株,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）80株,占66.7%,凝固酶阴性的甲氧西林敏感葡萄球菌（MSCNS）40株,占33.3%;280株葡萄球菌对万古霉素耐药率为0,对利福平耐药率为0%～17.0%,对其他12种抗生素耐药性试验都显示出较高的耐药率.结论 MRSA和MRCNS具有多重耐药性,临床对葡萄球菌引发的感染应依据药敏试验结果合理选用抗菌药物,万古霉素是治疗葡萄球菌感染最敏感的抗生素.     

血标本分离的葡萄球菌耐药性分析

目的了解临床血标本中分离的145株葡萄球菌的耐药性。方法用Micro Scan Walk Away-40全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果145株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌占11.7%(17/145);凝固酶阴性葡萄球菌占88.3%(128/145);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为17.6%(3/17),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为69.5%(89/128)。多数抗菌药物对甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)作用良好,而对MRS作用差。未发现对万古霉素耐药菌株。结论血标本分离葡萄球菌中以凝固酶阴性葡萄球菌为主,MRCNS比例高,且耐药显著,应加强监测。     

应用双重PCR技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的：探讨双重聚合酶链反应(PCR)技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床价值。方法：临床分离得葡萄球菌，挑取单个菌落，用碱煮沸法制备DNA模板，进行双重PCR反应，即在同一反应管内同时扩增femA基因和mecA基因。结果：100株葡萄球菌中，38株凝固酶阳性的葡萄球菌，其femA基因均为阳性，而mecA基因阳性者为30株，占78．9％(30／38)，mecA基因阴性8株，占21．1％(8／38)。62株凝固酶阴性的葡萄球菌femA基因均为阴性，mecA基因阳性48株，占77．4％(48／62)，mecA基因阴性14株，占22．6％(14／62)。另外，药敏法中有4株临界水平MSSA经PCR法鉴定为MRSA。结论：应用双重PCR技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是一种敏感、快速、特异的实验诊断方法，可防止药敏法临界水平MRSA漏检为MSSA。