从细胞分子水平研究克山病的发病机理

在楚雄克山病综合考察提出“克山病是一种心肌线粒体病”和发现潜在型克山病患者红细胞骨架蛋白异常的基础上,进一步探讨克山病的发病机理及Se的作用。半合成饲料喂养的大鼠比较了加Se与不加Se组心肌线粒体结构与功能的变化,表明单纯     

克山病病区粮对~(75)Se在大鼠心肌分中分布的影响

克山病病区粮喂养的大鼠代谢实验观察已发现,病区粮及非病区粮喂养的大鼠各器官对~(75)Se 的摄取量有规律性差别,提示 Se可作为显示病区与非病区存在显著差异的因子。但是~(75)Se 在克山病病区粮喂养的动物心肌内化学组分中分布的改变仍未见报导。本文测定了克山病病区粮,病区粮加硒     

锰对豚鼠心室乳头肌细胞电位和有效不应期的影响

多年来,克山病病区流行病学调查和临床研究表明,病区水土粮和患者血清,头发中某些微量元素含量有别于非病区。克山病区处于低 Se 的地理环境,病区粮食中 Se 含量低于非病区,病区人群血 Se、发 Se 低于非病区的对照人群,而克山病病因又很难完全用低 Se 来解释。在低 Se 的背景上,一部分     

克山病致病因素对大鼠心肌线粒体α－磷酸甘油脱氢酶的影响

测定了克山病病区粮喂养大鼠心肌线粒体α－磷酸甘油脱氢酶（ａ－ＧＰＤ）活性，并观察了硒和维生素Ｅ对该酶的影响。结果表明，病区粮组大鼠心肌线粒体α－ＧＰＤ活力明显低于非病区粮组和常规．食组，并在补０．１μｇ／ｇ＋８００μｇ／ｇＶＥ后，α－ＧＰＤ活性升高与病区粮组比较有显著差异、本实验结果提示：１、饲克山病病区粮大鼠心肌线粒体α－ＧＰＤ活力的降低，此时的心肌可能处于甲状腺激素功能低下状态．２、硒（０．１μｇ／ｇ）＋维生素Ｅ（８００μｇ／ｇ）的补充可以升高该酶活性，改善甲状腺激素功能不足状态。     

克山病病区粮喂养大鼠心肌细胞膜流动性及膜结合酶活性的研究

本文对比观察了低硒的克山病病区粮和补硒的克山病病区粮喂养大鼠其心肌细胞膜流动性及膜结合酶Na~+—K~+—ATP酶、5′—核苷酸酶活性的变化。实验结果表明,克山病病区粮喂养的大鼠心肌细胞膜流动性及膜结合酶活性均降低;给病区粮补硒0.25ppm后可使上述心肌细胞膜的异常变化得到一定的恢复,据此认为细胞膜流动性异常可能是低硒对膜结合酶影响的中间环节。是低硒导致细胞膜功能障碍的基础。     

克山病心肌线粒体膜氧化损伤的实验研究及其发病学意义

经过多年研究证明克山病是一种以心肌线粒体膜损害为主要特征的地方性心肌病,这次通过用克山病区低硒粮模拟病区居民生活喂养幼豚鼠15周,结果发现血及心、肝等组织,线粒体、微粒体及上清中的硒水平及谷胱甘肽过氧化物酶活性下降,谷胱甘肽转硫酶活性未见升高,甚而降低。脂质过氧化物、氢过氧化物及荧光色脂增加,线粒体膜脂中的心磷脂减少,同时线粒体内膜结合酶的细胞色素氧化酶(CCO)活性下降,即出现了膜的氧化损伤和膜功能障碍。在向提纯的 CCO 中加心磷脂的重组复性试验中实现了 CCO 活性的明显增加,可见线粒体膜结构与功能的异常是克山病患者心肌能量代谢障碍乃至心肌坏死等病理改变的基础。     

克山病病区粮食对于动物心肌氧化酶的影响

动物实验证明,克山病病区粮养动物在给以亚硝酸盐等附加因素时,能引起动物心肌发生病理性损害。并且这些损害程度明显地异于非病区粮养动物。根据病区粮养动物心肌对于缺氧缺血性因素极为敏感的特点,以及功能代谢与形态变化的辩证关系,推测在心肌坏死发生之前可能先有一定的心肌代谢障碍过程。因此本文对于克     

过量锰对病区粮饲养大鼠心肌损伤作用的实验研究

大白鼠喂饲克山病区粮和非病区粮,并分别加 1000ppm 锰。实验分4组,A 组非病区粮,B 组病区粮,C 组非病区粮 锰,D 组病区粮 锰,喂8周后处死。结果表明,B 和 D 组大鼠全血、心肌和肝脏的 GSH—Px 活性均明显下降,心肌、肝脏和血清脂质过氧化物含量升高,该两组间比较无明显差异。而 C 组大鼠的 GSH—Px 活性和脂质过氧化物含量与 A 组比较也无明显差异,提示过量锰(1000ppm)对动物体的 GSH—Px 活性和脂质过氧化物水平无明显影响。加锰组(C 和 D)大鼠心肌的线粒体肿胀和空泡变明显,电镜细胞化学显示心肌线粒体的细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性降低,D 组降低更明显、提示过量锰引起心肌损伤的主要环节可能是损害线粒体的功能与结构。并使喂饲病区粮大鼠心肌损害加重。     

亚硝酸钠和克山病病区粮对大鼠心肌线粒体四种复合物活性的影响

本研究观察了亚硝酸钠和克山病病区粮对大白鼠心肌线粒体呼吸链四种复合物活性的影响。发现克山病病区粮可使复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ活性下降,而亚硝酸钠也可降低复合物Ⅰ和Ⅳ的活性。结果表明,亚硝酸盐和克山病病区粮在对心肌能量代谢影响方面的一致性很可能是它们在形态学上所呈现出来的协同作用的原因之一。本文还对亚硝酸盐影响线粒体复合物活性的机制进行了讨论。     

褪黑素对饲低硒粮大鼠微观结构的影响

目的观察褪黑素对克山病病区低硒粮喂养的大鼠微观结构的影响。方法将SD大鼠分为3个组，分别用克山病病区低硒饲料、低硒饲料加硒、低硒饲料加褪黑素灌胃饲养，12周时检查心肌及肝脏病理损伤情况。结果12周时低硒组大鼠光镜下见心肌局限性炎症，电镜下见心肌细胞线粒体明显损伤。加硒组与褪黑素组心肌形态学检查均未发现明显的病变。12周时低硒组大鼠光镜下肝脏病变检出率明显高于其他两组。结论褪黑素可以预防低硒引起的大鼠心肌及肝脏的微观结构损伤，其保护作用可能与抗氧化机制有关。     

硒和VE对克山病病区粮及低硒人工合成饲料喂养大鼠心肌胰岛素含量的影响

饲予低硒克山病病区粮引起大鼠心肌细胞摄取胰岛素能力明显下降；在病区粮内补充一定剂量硒或维生素Ｅ可明显增加心肌细胞对胰岛素的摄取量（Ｐ＜０．０５～０．０１）；在亚硝酸钠引起的一过性缺氧条件下，单纯补硒或维生素Ｅ对心肌细胞摄取胰岛素能力无明显影响（Ｐ＞０．０５），只有联合补硒和维生素Ｅ才表现出统计学意义（Ｐ＜０．０１）；在低硒人工半合成饲料中补硒或维生素Ｅ均可显著增加心肌细胞摄取胰岛素能力（Ｐ＜０．０１）。本研究结果提示，克山病病区粮中的致病因素可原发性损害心肌细胞摄取胰岛素功能，此改变可能是病区粮引起克山病心肌损害重要环节之一。     

克山病致病因素与心肌内甲状腺激素代谢改变及其机制和意义的探讨

用克山病病区粮饲养动物，观察心肌内甲状腺激素代谢的改变并探讨其对克山病心肌病变的意义。结果病区粮组：１．心肌Ｔ４５＇－脱单碘酶活性降低；２．心肌组织内源Ｔ３含量减少；３．心肌线粒体α－磷酸甘油脱氢酶（α－ＧＰＤ）活性下降；４．心肌内心钠素含量增加；５．心肌组织内自由基代谢紊乱。上述改变当补充Ｓｅ和／或ＶＥ后均可恢复至正常。表明：克山病病区粮饲料中的致病因素能够导致心肌甲状腺激素的代谢紊乱，并使心肌     

克山病病因实验病理学研究Ⅴ——从低硒豚鼠心肌的超微结构变化看硒缺乏在克山病发病中的作用

在克山病病因学研究中,克山病区水、土粮中硒含量,居民血硒,发硒含量均低于非病区;硒预防急型、亚急型克山病取得了肯定的效果。但对于硒缺乏参与克山病心肌损伤的作用环节及硒预防克山病的作用机制,还不清楚。在前低硒大鼠心肌的形态学研究的基础上,本实验对低硒豚鼠心肌进行了详细的组织学和超微结构研究,以期验证实验的结     

克山病病区粮所致心肌钙代谢的变化—缺氧时间对心肌钙含量的影响

克山病心肌病理学研究结果认为,其病变性质类似缺血、缺氧性的心肌坏死。实验病理学研究证明,亚硝酸盐中毒可以引起动物缺氧性心肌坏死,还发现用克山病病区粮饲养的动物,这种心肌坏死的检出率及坏死面积均较用非病区粮饲养者明显增加,两组间差     

膳食低钙在克山病心肌坏死发生中的作用——Ⅱ.病区粮偏食实验及补钙的保护作用

以玉米面为主组成单一的病区粮偏食,低硒低钙特别突出,再短暂降低血钙情况下,缺氧因素引起急剧心肌坏死,类似克山病的心肌坏死。补充钙明显改善动物生长状态并减轻心肌坏死程度,结合病区易感人群膳食低钙,进一步提示膳食低钙在心肌坏死中有重要作用。并说明克山病的发生不仅有环境地球化学因素,还有膳食组成上的因素。     

克山病病区粮喂养小鼠肝 Mg~(2 )—ATP 酶的组织化学观察

在克山病病因研究方面,微量元素硒已受到人们重视。陈念祖等在低硒克山病病区粮喂养的大鼠及仔猪上,用组织化学方法研究发现肝糖元下降,脂肪明显上升。李广元用生化方法发现克山病病区粮喂养的仔猪琥珀酸脱氢酶(SDH)活性下降。这些提示了克山病病区粮可以引起动物代谢的某些紊乱。克山病病区粮是否可引起动物 Mg~(2 )     

补充硒、钼对克山病病区粮所致大白鼠心肌细胞膜通透性改变的影响——用辣根过氧化物酶(HRP)作示踪物的研究

已有研究证实,口服亚硒酸钠能有效地预防克山病急性发病;用施钼肥的方法也可明显降低克山病病区人群发病率。但是有关硒和钼预防克山病发病的机制目前还不十分清楚。我们以前的研究证明,用克山病病区粮喂养的大白鼠心肌细胞膜通透性显著增大,表明病区粮中存在着可致心肌细胞膜损伤的因素。本研究的目的是观察克山病病区粮补充硒或钼对大白鼠心肌细胞膜通透性变化的影响,并藉以了解硒、钼与克山病发病之间的     

克山病病区粮喂饲大鼠组织维生素E和Se GSH—Px的测定分析

用克山病病区粮喂饲大鼠15周,其肝脏、心脏、胰腺、肾脏、脾脏及全血Se GSH-Px活性都明显低于非病区粮喂养的大鼠,骨骼肌Se GSH-Px活性亦有降低的趋势,但差异不显著。Vit.E测定的结果表明,用病区粮喂养的大鼠肝脏和血清中Vit.E的含量明显高于用非病区粮喂养的大鼠;肾脏、脾脏和胰腺中Vit.E的含量和非病区粮组大鼠相比,亦有增高的趋势,但没有统计学差异;唯独在心肌和骨骼肌中Vit.E的含量两组间基本相同,病区粮组无丝毫增多迹象。 病区粮喂养大鼠肝脏和血清中Vit.E含量明显增多是吸收增多的表现,是对体内低硒的代偿反应,说明病区粮喂养大鼠体内对Vit.E的需要量增加。Vit.E在体内变化不一致,说明各脏器对Vit.E的摄取能力存在着差异,由于心肌和骨骼肌摄入Vit.E的能力较弱,尤易发生Vit.E相对不足的现象,成为克山病病变之主要靶器官。因此应重视硒和Vit.E联合缺乏在克山病发病中的作用。     

硒铁对培养心肌细胞生物电活动的影响

克山病和大骨节病的发病与Se的缺乏密切相关,补Se在预防克山病和大骨节病的发病上取得了明显成效。但近年的研究发现,单纯缺Se地区并无克山病和大骨节病的发生。在克山病和大骨节病的高发区,除低Se外,还常伴有其它微量元素的异常,其中,Fe含量的异常可能是一个十分重要协同因素。为进一步揭示克山病心肌损害的机理,探讨Se、Fe在克山病心肌损害过程中的协同作用,本研究以细胞内微电极技术测定了不同Se、Fe浓度下培养的心肌细胞的生物电活动的变化,为阐明Se、Fe对心肌细胞的协同性影响提供实验依据。     

钼对缺硒大鼠心肌线粒体功能的影响

本文以克山病病区粮喂养大白鼠造成缺硒动物模型，以病区粮加钼作为处理因素，对大鼠心肌线粒体ＳＤＨ，ＣＣＯ活力及氧化磷酸化效率（Ｐ／Ｏ比值）做了测定。结果显示，钼对上述测定指标均有不同程度的改善，大剂量钼（４０ｍｇ／ｋｇ饲料）的作用优于小剂量钼（２．０ｍｇ／ｋｇ饲料），且与对照组相比有显著的统计学意义。此外，小剂量钼也能明显提高心肌线粒体ＳＤＨ活力。实验结果提示，改善心肌线粒体呼吸链功能及氧化磷酸化效