涎腺腺样囊性癌组织中细胞周期相关蛋白cyclin D1与Ki-67的表达

目的:探讨涎腺腺样囊性癌组织中cyclin D1、Ki-67的表达及其与涎腺腺样囊性癌的发生发展及临床生物学行为特点的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测41例涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)、15例涎腺混合瘤(pleomorphic adeno-ma,PA)及12例正常涎腺组织(normal salivary gland,NSG)中cyclin D1、Ki-67蛋白的阳性表达率和标记指数(labeling index,LI)。结果:三组中的cyclin D1阳性表达率分别为0%、53.3%、68.3%,PA组与NSG组、SACC组与NSG组组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);三组的cyclin D1 LI分别为2.35、16.57、44.63,三组总体及组间比较均有统计学意义(P<0.05);Ki-67在NSG组、PA组、SACC组的阳性表达率分别为0.0%、0.0%和58.5%,SACC组与NSG组、SACC组与PA组组间差异有统计学意义(P<0.05)。三组的Ki-67 LI分别为0.00、3.44、20.22,在三组总体及组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);腺-管型和实性型SACC中Ki-67的阳性表达率分别为46.7%、90.9%,Ki-67 LI分别为4.64、51.85,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);cyclin D1与Ki-67在SACC中的表达存在正相关关系(rs=0.703,P<0.05)。结论:cyclin D1的高表达促进了细胞的异常增殖,在SACC的发生发展中发挥作用,检测Ki-67表达水平可用以辅助诊断腺样囊性癌的分型。     

Cyclin D3与Ki-67在涎腺腺泡细胞癌中的表达及意义

目的 研究cyclin D3和Ki-67在ACC中的表达情况及意义.方法 采用免疫组织化学法,分别检测cyclin D3和Ki-67蛋白在10例正常涎腺组织(NSG)及34例ACC组织标本中的表达情况.结果 Cyclin D3 LI在ACC组高于NSG组(P＜0.05).复发组的cyclin D3 LI高于无复发组(P＜0.05).Ki-67 LI在ACC组明显高于NSG组(P＜0.05).小涎腺组的Ki-67 LI低于腮腺组显著性(P＜0.05).Ki-67 LI在复发组高于无复发组(P＜0.05).在ACC中cyclin D3的表达与Ki-67的表达呈正相关(r=0.392,P＜0.05).结论 Cyclin D3的表达在ACC的发展过程中有一定作用,促进了细胞增殖.并可能与复发有关.Ki-67可能是一个重要的ACC预后因子.     

pin1基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及与Cyclin D1、Ki67的关系

目的 探讨卵巢恶性肿瘤组织中pin1、Cyclin D1、Ki67的表达水平以及三者相互关系.方法 应用免疫组织化学法检测53例卵巢肿瘤组织病理切片中pin1、Cyclin D1、Ki67的表达水平,其中卵巢恶性肿瘤组31例,对照组22例为卵巢良性肿瘤.收集研究对象的临床资料,应用logistic回归模型分析指标间的相关性.结果 卵巢恶性肿瘤组pin1高表达21例(67.74%),Ki67阳性表达27例(87.10%),Cyclin D1高表达19例(61.29%),对照组中pin1高表达1例(4.54%),Ki67阳性表达3例(13.64%),Cyclin D1高表达2例(9.10%),两组差异有统计学意义(均P<0.05).经统计学分析,卵巢恶性肿瘤不同临床分期及有无淋巴结转移之间pin1、Ki67、Cyclin D1的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05). pin1高表达分别与Ki67阳性表达及Cyclin D1高表达有相关性(均P<0.05).结论 pin1基因在卵巢恶性肿瘤组织中表达上调;pin1基因的表达与卵巢恶性肿瘤的临床分期和淋巴结转移无明显相关性;卵巢恶性肿瘤组织中pin1基因表达水平与Ki 67、Cyclin D1表达水平相关,提示pin1基因可能参与细胞周期、细胞增殖的调控.     

舌鳞癌组织中Cyclin D1的表达与临床病理相关性

目的: 探讨细胞周期素D1(Cyclin D1)在舌癌中的表达及临床病理相关性. 方法: 采用免疫组化ABC法检测42例舌鳞状细胞癌、19例良性肿瘤石蜡包埋标本的Cyclin D1表达. 结果: Cyclin D1在舌癌细胞核中呈阳性表达,阳性表达率55%,与组织学分级及淋巴结转移呈明显正相关(r=0.388, P<0.05). 生存分析资料显示Cyclin D1( )、(-)两组5 a相对复发危险度(RRR) u=1.959(P>0.05),Kaplan-Meier生存曲线示两组5 a累积无复发生存期(RFS)无显著差异(P>0.05). 结论: Cyclin D1在舌癌中异常表达,其表达可能与肿瘤分化及发展相关,Cyclin D1的表达与预后无关.     

乳腺浸润性导管癌中E-cadherin、cyclin D1、Ki-67的表达及其意义

目的:探讨乳腺浸润性导管癌中表皮钙粘蛋白E-cadherin(E-cad)、细胞周期素D1(cyclinD1)、Ki-67蛋白的表达及其临床病理意义. 方法:用免疫组织化学EnVision二步法分别检测63例乳腺浸润性导管癌(IDC)组织(IDC组)及15例乳腺纤维腺瘤及15例乳腺小叶增生症乳腺组织(对照组)中E-cad、cyclinD1、 Ki-67蛋白的表达情况,结果:E-cad在IDC组及对照组中表达阳性率分别为58.3%、80%;cyclinD1在IDC组及对照组中表达阳性率分别为68.25%、0;Ki-67在IDC组及对照组中表达阳性率分别为65.08%、0.2组间差异均有统计学意义(P<0.05).E-cadherin、 cyclinD1、 Ki-67的表达与患者年龄及肿块大小无关,E-cadherin、 cyclinD1的表达与组织学分级、淋巴结转移相关.结论: E-cad、 cyclinD1、Ki-67表达在乳腺癌发生、发展演进过程中是一个重要指标.联合检测E-cadherin、 cyclinD1、 Ki-67蛋白对预测乳腺癌发生、发展及淋巴结转移有重要意义.     

胃肠间质瘤Ki-67的表达特点及其临床意义

目的 探讨胃肠间质瘤中增殖细胞核抗原Ki-67的表达特点及其临床意义。方法 回顾性分析我院胃肠外科自2012年7月至2013年9月期间收治的97例胃肠间质瘤患者的临床特征、病理免疫组化结果、治疗和随访情况,分析Ki-67的表达特点及其临床意义。结果 原始病例数112,失访15例,97例具有完整的随访和临床病理资料。随访3~24个月（中位时间15个月）,复发或转移30例（30.9%）,其中4例死亡。在不同年龄、性别分布中,Ki-67表达差异无统计学意义（ P>0.05）;在肿瘤部位、肿瘤长径、美国国立卫生研究院（NIH）危险度分级和核分裂象中,Ki-67表达差异有统计学意义（ P均<0.05）,且肿瘤越大、NIH危险度级别越高、核分裂象数越多,Ki-67表达指数越高,呈正相关（ P<0.05）;Ki-67、核分裂象和复发转移有关（r分别为0.395,0.266, P<0.05）。Cox多因素分析示:Ki-67( P<0.001,相对危险度=0.387,95%可信区间:0.229~0.654)和核分裂象（ P=0.005,相对危险度=0.494,95%可信区间:0.304~0.805）是影响术后无复发生存的独立危险因素。生存分析示:Ki-67表达指数影响中高危患者的预后。结论 Ki-67与肿瘤长径、NIH危险度分级和核分裂象相关,并能辅助评估胃肠间质瘤患者的预后。     

Cyclin D1在急性白血病骨髓组织中的表达及临床意义

目的:探讨Cyclin D1在急性白血病骨髓组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化染色法,检测急性白血病组、对照组骨髓组织中Cyclin D1的表达情况。结果:急性白血病组骨髓组织中Cyclin D1阳性表达率与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);复发难治患者(8/13)骨髓组织中Cyclin D1的表达高于初发未治患者(9/29)。结论:Cyclin D1与急性白血病的发生、发展及预后存在一定关联。     

胃肠道间质瘤组织中Ki-67、Cyclin D1、ICAM-1、Livin及MMP-9蛋白表达与危险度分级

目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1( Cyclin D1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白( Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达...     

肝细胞癌抗原Ki-67表达与肝亚段动脉栓塞疗效的相关性

目的:探讨肝细胞癌抗原Ki-67(Kiel67antigen,Ki-67)表达水平与肝动脉化学栓塞疗效的关系。方法:以鼠抗人Ki-67单克隆抗体,应用免疫组化法检测31例肝细胞癌肝穿刺癌组织活检标本中的Ki-67标记指数(Ki-67labelingindex,Ki-67LI)。结果:Ki-67平均标记指数为53%,Ki-67LI随着Ed-mondson-Steiner分级的增加而增高;中位生存期Ki-67低表达组显著高于高表达组(P<0.05);Ki-67LI高分化肝细胞癌组织与无瘤肝组织比较差异无统计学意义。结论:Ki-67LI与肝细胞癌组织学特征显著相关,是反映肝亚段动脉化学栓塞术后的客观的预后指标。     

垂体腺瘤组织中ASPP2 mRNA和Ki-67蛋白的表达

目的:研究垂体腺瘤组织中ASPP2基因mRNA和Ki-67抗原的表达情况.方法:收集垂体腺瘤手术标本71例(其中侵袭性垂体腺瘤36例,非侵袭性垂体腺瘤35例; 病理分型包括生长激素腺瘤14例,泌乳素腺瘤13例,促肾上腺皮质激素腺瘤5例,促性腺腺瘤7例,无功能腺瘤10例,多激素腺瘤22例),采用RT-PCR方法检测垂体腺瘤标本中ASPP2基因mRNA的表达情况,采用免疫组织化学方法检测垂体腺瘤石蜡切片中Ki-67抗原的表达情况,并分析二者的相关性.结果:71例垂体腺瘤手术标本均有ASPP2基因mRNA和Ki-67表达,不同病理类型间ASPP2基因mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);但不同病理类型间Ki-67 LI差异有统计学意义(P<0.05).非侵袭垂体腺瘤和侵袭性垂体腺瘤组织中ASPP2 mRNA的表达和Ki-67 LI差异均有统计学意义(P<0.05);ASPP2基因表达水平与Ki-67 LI呈负相关(r＝-0.256,P<0.05).结论:人垂体腺瘤组织中ASPP2基因的表达与其细胞增殖活性和侵袭性行为有关,可以作为判断垂体腺瘤侵袭性和预测复发的有效临床检测指标.     

基于网络药理学探讨独活-羌活-细辛治疗膝骨关节炎的作用机制*

目的 基于网络药理学的方法分析和预测独活-羌活-细辛治疗膝骨关节炎可能的作用机制。方法 利用TCMSP数据库获取独活、羌活、细辛的活性成分及靶点,与CTD、NCBI等数据库获取的膝骨关节炎疾病基因靶点映射,构建药物-活性成分-疾病靶点网络。进行MCODE聚类分析,通过Omicshare云平台和DAVID数据库GO、KEGG通路富集分析。结果 从3味药中共筛选出了36个活性成分及205个靶点,主要有山柰酚、 β-谷甾醇、芝麻脂素、异紫花前胡苷等关键成分,AKT1、ESR1、JUN、CASP3等为关键靶点,核心基因有NOS3、ESR1、COX1、NR1I2,关键的生物进程和通路有类固醇激素反应性、活性氧代谢过程、AGE-RAGE通路和TNF通路。结论 独活-羌活-细辛可能通过多成分、多靶点网络来治疗膝骨关节炎。     

信号通路分子、乳头状甲状腺癌基因、锌指转录因子在不同宫颈疾病中的表达

目的：研究信号通路分子（SHH）、乳头状甲状腺癌基因（PTC1）、锌指转录因子（GLI1）在宫颈上皮内瘤变CIN1、CIN2、CIN3中的表达,探讨SHH、PTC1、GLI1在宫颈癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组织化学方法将150例患有宫颈疾病的患者分为正常宫颈上皮组、CIN1组、CIN2组、CIN3组及宫颈癌组,每组各30例。对以上5组进行PTC1、GLI1、SHH检测。结果：SHH主要表达于腺体细胞的胞浆内,在各组的阳性表达率分别为：正常宫颈上皮组13.3%、CIN1组40.0%、CIN2组63.3%、CIN3组83.3%及宫颈癌组93.3%,且强阳性率随阳性率增高而明显增高。PTC1、GLI1在胞质及胞膜上阳性染色多呈弥漫状分布。PTC1在各组的阳性表达率分别为：正常宫颈上皮组23.3%、CIN1组40.0%、CIN2组43.3%、CIN3组63.3%及宫颈癌组73.3%。GLI1在各组的阳性表达率分别为：正常宫颈上皮组10.0%、CIN1组16.7%、CIN2组26.7%、CIN3组50.0%及宫颈癌组56.7%。结论：SHH、PTC1、GLI1介导着多种死亡受体诱导的细胞凋亡信号传导通路,与宫颈癌的癌前病变过程密切相关。     

不同种植方法下红托竹荪产量与综合评价*

目的 在昭通小草坝通过比较贵州织金和福建古田红托竹荪菌种，使用同菌种，不同的种植方法和原料对红托竹荪的产量数值进行比较。方法 将荫棚分为22块试验地，其中1～10号及21号试验地为福建古田红托竹荪菌种，11～20号及22号试验地为贵州织金红托竹荪菌种，分别对不同的试验地采用不同的种植方法和原料。结果 贵州织金竹荪菌种产量占比为63%，福建古田竹荪菌种产量占比为37%。相同气候和菌种条件下，贵州织金种植方法产量占比为25.83%，菌棒覆土产量占比7.77%。贵州织金红托竹荪菌种在贵州织金种植方法下产量占比为29.20%，菌棒覆土产量占比为7.96%。结论 基于小草坝气候条件下，采用贵州织金红托竹荪菌种，使用贵州织金种植方法下产量最佳，收益最大。     

长链非编码RNA APTR、HEIH、FAS-ASA1、FAM83H-AS1、DICER1-AS1、PR-lncRNA在肺癌中的表达

  目的  探讨长链非编码RNA（Long non-coding RNA,IncRNA）APTR、HEIH、FAS-ASA1、FAM83H-AS1、DICER1-AS1、PR-lncRNA在肺癌患者中的表达。  方法  收集昆明医科大学第三附属医院肺癌手术患者的癌组织,癌旁正常组织及肺癌淋巴结转移组织,利用TRI z o l提取总 RNA,再用SYBR Green实时荧光定量 PCR检测每种基因的RNA相对表达量。  结果  APTR在淋巴组织中表达升高（P < 0.05）,HEIH在淋巴组织中表达下降（P < 0.05）,FAM83H-AS1和、PR-lncRNA在肺癌组织中表达升高（P < 0.05）。  结论  APTR在淋巴组织中高表达,可能有促进肺癌淋巴结转移的作用;FAM83H-AS1及PR-lncRNA癌组织中表达上调,可能会促进肺癌的发生发展。     

建立BioID-质谱联用技术筛选细胞内的蛋白互作

目的 通过BioID-质谱联用建立一种新的蛋白相互作用的筛选系统;通过免疫共沉淀-Western blot验证YAP1相互作用的蛋白。 方法 构建BirA*-YAP1融合表达质粒;将质粒转染进293T细胞后,在细胞培养液中加入生物素,继续培养24小时后,提取细胞总蛋白。利用YAP1特异抗体,通过Western Blot检测BirA*-YAP1融合蛋白的表达;通过HRP-亲和素,检测细胞内蛋白被生物素标记的水平;通过亲和素磁珠,对细胞内生物素化的蛋白进行亲和纯化,并多次洗涤亲和素磁珠上非特异性结合的蛋白后,对亲和素磁珠纯化的蛋白进行溶解。取40 μg总蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳,通过蛋白银染试剂盒对PAGE凝胶中的蛋白进行染色,确定亲和素磁珠对生物素化蛋白的纯化效果。通过Label-free质谱法对生物素化的蛋白进行鉴定。针对鉴定得到的蛋白,通过Western Blot对生物素化的SMAD3进行验证。通过YAP1的免疫共沉淀,确定SMAD3能与YAP1相互作用。 结果 成功构建BirA*-YAP1融合表达质粒,该质粒在293T细胞中能够高效表达融合蛋白;在生物素存在的情况下,BirA*-YAP1融合蛋白能够利用生物素标记细胞内与BirA*-YAP1融合蛋白相互靠近的蛋白。在细胞裂解后,这些在细胞内被生物素标记的蛋白,能够被偶联亲和素的磁珠纯化,经过多次洗涤,能够富集生物素标记的蛋白。通过质谱鉴定,我们能够获得在细胞内与YAP1在空间上相互靠近的蛋白类型。通过免疫共沉淀-Western Blot技术,我们证明SMAD3能够与YAP1相互作用。 结论 Bio-ID-质谱联用的方法是一种用于蛋白互作筛选的简单、高效的技术,与后续的免疫共沉淀-Western Blot联合使用,可以成为一种新的蛋白互作研究体系。     

肾上腺大结节样增生一例报道

库欣综合征（CS）中15%～20%是由肾上腺原因引起的,其中约10%的患者具有双侧肾上腺增生。肾上腺性CS中皮质醇分泌有时可受肾上腺异常膜受体（包括抑胃肽受体、精氨酸加压素受体、儿茶酚胺类受体、LH/hCG受体和5-羟色胺受体等）的调节。该文报道了1例促肾上腺皮质激素非依赖性大结节样肾上腺增生引起的CS患者,并通过体内试验证实了肾上腺异常膜受体的存在。     

电针风池穴对颈性高血压模型兔血清肾素-血管紧张素-醛固酮系统指标的影响

目的:探讨电针风池穴对颈性高血压模型兔血清肾素-血管紧张素-醛固酮系统( RAAS)指标影响,明确其作用机理。方法:建立颈性高血压模型,将造模成功的12只家兔按随机数字表法分为模型组和电针组,每组6只,另选取6只健康家兔作为正常组。对电针组实验兔给予电针风池穴治疗,模型组和正常组实验兔仅给予相同时间的固定。检测各组实验兔血清血管紧张素原(AGT)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、醛固酮(ALD)及去甲肾上腺素(NE)水平,检测并计算各组实验兔治疗前后平均动脉血压(MAP),进行统计分析。结果:(1)与正常组实验兔比较,模型组实验兔血清中AGT(126.82±43.95)、ALD(160.07±38.14)及NE(32.34±12.49)含量均明显高于正常组(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05),而模型组实验兔血清Ang II(118.67±45.62)水平与正常组比较无明显差异(P＞0.05);电针组实验兔血清中Ang Ⅱ(91.53±17.53)、AGT(95.12±26.18)、NE(23.89±8.71)及ALD(116.32±36.86)水平与正常组比较均无明显差异(P＞0.05);与模型组实验兔ALD(160.07±38.14)比较,电针组实验兔ALD(116.32±36.86)水平明显低于模型组。(2)治疗前各组实验兔MAP之间均无明显差异(P＞0.05);治疗结束后,与模型组实验兔MAP(91.50±6.86)比较,电针组实验兔MAP(81.40±4.04)出现明显降低(P＜0.05);与治疗前比较,电针组实验兔治疗后MAP(81.40±4.04)较治疗前MAP(89.40±6.19)明显降低(P＜0.05);而正常组、模型组MAP治疗后较治疗前MAP均无明显差异(P＞0.05)。结论:电针风池穴可有效改善颈性高血压模型兔血压,其降压作用可能与调控血清RAAS系统,降低实验兔血清中ALD含量,防止AGT、Ang II及NE过度分泌等存在关联。     

CNE1、CNE2、C666-1和Hone-1细胞的放射生物学特性测定

目的:测定人鼻咽癌细胞CNE1、CNE2、Hone-1及C666-1的放射牛物学特征参数.方法:采用平板集落形成法测定CNE1、CNE2、Hone-1及C666-14种鼻咽癌细胞在0、1、2、3、 4、 6、8、10 Gy照射后的存活分数;通过单击-多靶模型和线性-二次模型分别拟合细胞存活曲线;并计算Do、Dq、N、α、β、α/β值及2 Gy照射时的存活分数(SF2)等放射生物学参数值.结果:4种细胞在2种数学模型拟合的细胞存活曲线差异均有统计学意义(P均<0.05);其参数Do、Dq、N、α、β、α/β和SF2分别在1.818～2.379、0.192～0.880、1.276～2.388、0.085～0.392、0.026～0.036、2.36～15.08和0.416～0.733.结论:较大的放射敏感性差异可能存在于不同甚至相同分化程度的鼻咽癌细胞之间,提示临床鼻咽癌放疗剂量的个体化需求.     

HDAC1、DNMT1、RECK在宫颈癌中的研究进展

目的探讨HDAC1、DNMT1、RECK在宫颈癌中的表达及临床意义。方法采用论文回顾性调查,对国内外在HDAC1、DNMT1、RECK与宫颈癌方面的研究进行归纳、分析与整理。结果 HDAC1与DNMT1在宫颈癌组织中呈高表达,而RECK在宫颈癌组织中呈低表达。结论 HDAC1、DNMT1、RECK与宫颈癌的发生发展密切相关。